亚急性重型肝炎患者TNF-α和IL-1表达及IL-4对其的调控

目的：分析ＩＬ－４对亚急性重型肝炎（亚重肝）患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣＳ）ＴＮＦ－α和ＩＬ－１的调控作用,评价ＩＬ－４在亚重肝治疗中的潜在价值。方法：应用细胞生物学、免疫组化和ＲＴ－ＰＣＲ等方面测定ＰＢＭＣＳ ＴＮＦ－α、ＩＬ－１的表达。结果：亚重肝患者ＰＢＭＣＳ ＴＮＦ－α、ＩＬ－１表达水平均较正常人显著增高血糖素含量和虽然ＩＬ－４ ＭＲＮＡ及蛋白质的表达与正常人比较一差异无但ＩＬ－４ ＭＲ     

慢性胃炎患者血清TNF-α和IL-8水平观察

据文献报道[1 ] ,慢性胃炎病人多伴有幽门螺杆菌感染而导致胃粘膜大量炎症细胞浸润及免疫反应、细胞因子增多。白细胞介素 - 8(ＩＬ - 8)和肿瘤坏死因子 -α(ＴＮＦ -α)均是具有介导炎症反应、参与免疫及内分泌调节等生物学作用的细胞因子。本文报道慢性胃炎病人血清ＴＮＦ -α和ＩＬ - 8水平 ,以探讨其致病机制。对象和方法一、对象 :(一 )正常人 :35人 (男 2 0 ,女 1 5)。均为我院预防保健科体检合格的健康人。无心、肝、肺、肾等重要脏器疾患。肝、肾功能试验正常。年龄 2 0～ 41岁 ,平均 35 6岁。胃镜组织学检查正常。ＨＰ阴性。(二 )…     

过敏性紫癜患儿血清TNF-α,IL-6和IL-8变化的意义

ＴＮＦα,ＩＬ６和ＩＬ８是具有多种生物学活性的细胞因子,也是重要的炎症因子,可参与许多变态反应性疾病和自身免疫性疾病的发病机制。我们对６８例过敏性紫癜(ＨＳＰ)患儿血清ＴＮＦα,ＩＬ６和ＩＬ８水平的变化及相关性进行了研究,旨在探讨它们在ＨＳＰ的毛细血管炎和过敏性紫癜性肾炎(ＨＳＰＮ)形成中的作用。１材料和方法１．１材料按１９９０年,美国风湿病协会制定的诊断标准〔１〕,选择１９９７-０６～１９９９-０１,我院确诊为ＨＳＰ的住院患儿共６８例,男３９例,女２９例,年龄５～１４岁。其中单纯型１３例,关节型和／或腹型１７例…     

银屑病患者血TNF-α,IL-6,IL-8水平观察

近年的研究表明 ,免疫调节功能异常在银屑病的发病中起着十分重要的作用 ,特别是细胞免疫抑制 ,体液免疫亢进 ,产生过量的抗原抗体复合物 ,继发免疫反应 ,造成细胞免疫调节异常[1] 。本文报道银屑病患者治疗前后血ＴＮＦ -α、ＩＬ -6、ＩＬ - 8水平检测结果。对象和方法一、对象 :(一 )正常人 :30人。均为我院预防保健科体检合格的健康人 ,无心、肝、肺、肾重要脏器疾患 ,肝、肾功能试验正常 ,均无皮肤病疾患。(二 )病人组 :33人。均为我院皮肤科明确诊断的银屑病患者 ,病程 1个月～ 15年 ,其中进行期 2 0例、静止期 13例 ,均排除高血压、…     

恶性肿瘤患者血清中TNF-α和IL-2的含量测定

细胞因子是机体发生免疫效应的基础 ,其水平的变化涉及恶性肿瘤的发生与转归。我们用放射免疫法测定了一组恶性肿瘤患者血清中肿瘤坏死因子α(ＴＮＦ -α)和白细胞介素2 (ＩＬ - 2 )的含量 ,现报道如下。材料和方法一、对象 :4 2例 (男 2 9,女 13)恶性肿瘤患者 ,中位年龄 39(6～ 6 9)岁。其中实体瘤 2 0例 ,包括肺癌 8例、鼻咽癌 7例以及宫颈癌、乳腺癌、睾丸癌、肝癌及大肠癌各一例 ,均经病理学确诊。急性白血病 2 2例 ,其中急性淋巴细胞性白血病 12例 ,急性髓性白血病 10例 ,均符合白血病诊断及疗效标准[1] 。所有患者分别为初治、复发或…     

肺癌患者血清中IL-2,TNF-α测定的临床意义

白细胞介素 - 2 (ＩＬ - 2 )和肿瘤坏死因子 (ＴＮＦ -α)是一组分子量介于 17～ 2 4ＫＤ的细胞因子 ,是机体一系列病理生理过程的重要介质 ,在机体免疫应答、免疫调节和抗肿瘤免疫中具有重要作用。我们测定了 4 7例肺癌患者血清中ＩＬ -2、ＴＮＦ -α的含量 ,并对其临床意义进行了探讨 ,现报道如下。材料和方法一、对象 :(一 )正常组 :4 0例 (男 2 8,女 12 ) ,系我院正常体检人员 ,经临床和实验室检查结果均正常。年龄 2 8～ 76岁 ,平均5 5 4岁。(二 )肺癌组 :4 7例 (男 35 ,女 12 ) ,均为我院住院病例 ,并经临床、病理或细胞学检查证实为…     

糖尿病患者血浆中IL-6、TNF-α测定的意义

为了观察细胞因子白细胞介素 -６（ＩＬ -６）和肿瘤坏死因子 -α（ＴＮＦ -α）在糖尿病（ＤＭ）患者发病过程中的变化 ,我们自１９９９年２月～２０００年３月应用放射免疫分析（ＲＩＡ）对２００例ＤＭ患者血浆中的ＩＬ -６和ＴＮＦ-α进行了检测 ,现将结果报告如下。对象和方法一、对象 :（一）患者组 :２００例（男１１４ ,女８６） ,均为我院门诊或／和住院的糖尿病患者 ,按１９９７年ＷＨＯ糖尿病诊断标准确诊与分型［１］。年龄３９～６７岁 ,平均４８．９岁 ;病程（４．８±３．９年） ;１型糖尿病者（ＤＭ１组）４２例 ,２型糖尿…     

急性胰腺炎患者血清IL-6、IL-8、TNF-α和CRP含量的观察

C反应蛋白(CRP)是一种急性时相蛋白,在急性炎症期CRP能与T细胞特异结合,影响这些细胞的功能.当炎症存在或组织损伤时,CRP浓度变化幅度大,可高达千倍,所以CRP较血沉测定是更为可靠和灵敏的急性期反应指标.白介素-6(IL-6)、白介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)介导炎症的发生,造成组织损伤,是机体炎症、免疫反应重要的调节因子.本文对27例急性胰腺炎患者进行了CRP、II-6、II-8、TNF-α水平的动态变化观察,为临床判断预后、考核疗效提供实验室指标.     

TNFα、IL-6、IL-4、IL-2对IFNγ抗弓形虫感染作用的影响

目的 探讨ＴＮＦα、ＩＬ－６、ＩＬ－４、ＩＬ－２对ＩＦＮγ衣导的小鼠腹腔巨噬细胞（ｍｏｕｓｅ ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ ｍａｒｅｒｏｐｈａｇｅ,ＭＰＭ）抗弓形虫（ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ ｇｏｎｄｉｉ,ＴＧ）效应的机制。方法 应用＾Ｈ－Ｕ标记的ＴＧＨ在ＭＰＭ内的增殖实验及＾１２６Ｉ－ＵｄＲ标记的细胞毒实验。结果和结论（１）高浓度Ｔα只能诱导ＭＰＭ轻微的抗ＴＧ效应,而与亚刺激量ＩＮＦγ结合几科可以安全抑制Ｔ     

TNF-α对小鼠腹腔渗出细胞抗真菌活性的影响

目的：研究TNF—α对小鼠腹腔渗出细胞的激活和杀菌活性的效应。方法：以IL-12、IL-18、IFN—γ、TNF-α及抗体诱导小鼠腹腔渗出细胞和巨噬细胞，应用ELISA法测定细胞因子变化，Griess反应法测定培养上清液中NO的含量，检测巨噬细胞内新型隐球菌菌落数。结果：IL-12和IL-18联合应用协同诱导腹腔渗出细胞产生TNF—α，且能被IFN—γ抗体所抑制。IFN—γ、TNF-α协同诱导巨噬细胞产生NO和增强其杀伤新型隐球菌活性。结论：TNF—α在细胞因子相互调节诱导增强巨噬细胞杀真菌活性中起重要作用。     

重组人IL-18在大肠杆菌中的表达及其抗肿瘤作用

目的：获取rhIL-18原核表达产物并研究其活性。方法：用本室构建的含基因重组表达载体PBV220-IL-18的大肠杆菌DHSot，经42℃热诱导表达和包涵体提取纯化后获取rhIL-18蛋白；采用ELISA试剂盒检测rhIL-18刺激PBMC分泌IFN-γ的活性及MTT法检测其对NK细胞杀伤K562细胞自然杀伤活性；同时用荷瘤小鼠模型检测其体内抗瘤功能。结果：诱导含重组表达载体PBV220-IL-18的大肠杆菌D145ct后，蛋白电泳显示出一条相对分子量（Mτ）为18000的蛋白条带；10μg rhIL-18蛋白体外刺激PBMC后，其分泌IFN-γ的能力与对照组相比提高了8倍，细胞毒性提高3倍；同时rhIL-18蛋白能明显抑制肿瘤生长和延长荷瘤鼠生存期。结论：获得了有免疫调节功能和抗肿瘤活性的rhIL-18蛋白。为今后IL-18重组产物的研制和开展肿瘤的生物治疗提供了实验依据。     

Attenuated production of intracellular IL-10 and IL-12 in monocytes from patients with severe asthma

Interleukin (IL)-10 and IL-12 production is decreased in peripheral blood mononuclear cells of patients with mild asthma. Using whole blood culture and flow cytometry we examined whether monocyte heterogeneity influenced IL-10 and IL-12 production in subjects with severe asthma. We demonstrated that IL-10 release in LPS-stimulated whole blood culture was decreased in patients with severe persistent asthma compared to those with mild asthma and controls (P = 0.04 and P < 0.001, respectively). In asthmatic patients, the percentage of CD14(+)CD16(+) cells was higher than that from normal subjects (P = 0.04). Severe asthmatics showed significantly less positive staining for IL-10 and IL-12 (P < 0.001 and P = 0.02, respectively) after stimulation in monocytes, compared to mild asthmatics and controls in both CD14(+)CD16(+) and CD14(+)CD16(minus sign) cells. These results suggest that IL-10 synthesis is attenuated in severe persistent asthma compared to mild asthma and that this cannot be explained by the increase in the CD14(+)CD16(+) monocytes in asthma.     

Suppressive effect of Chinese medicinal herb, Acanthopanax gracilistylus, extract on human lymphocytes in vitro.

We studied the effect of a Chinese medicinal herb, Acanthopanax gracilistylus, extract (AGE), on human lymphocytes in vitro. AGE markedly suppressed the proliferative responses of human peripheral blood lymphocytes stimulated with mitogens concanavalin A (Con A) and Staphylococcus aureus Cowan I (SAC). Both T cell and B cell activities-production of interferon-gamma and immunoglobulin-were suppressed by AGE. The mechanism of AGE-induced suppression of lymphocytes is to arrest the cell cycle at the G0/G1 stage without a direct cytotoxic effect. AGE also suppressed the alloantigen-specific cytotoxic T lymphocyte response. However, natural killer cell activity was less sensitive to the suppressive activity of AGE. In contrast, AGE markedly enhanced monocyte function to produce cytokines. These activities of AGE were associated with a 60-kD protein which was sensitive to treatment with pronase E, but not with NaIO4. These results suggest that AGE has an immunomodulating activity on human lymphocytes and its properties could be clinically applied in the treatment of several diseases such as autoimmune and allergic diseases.     

γδT细胞对系统性红斑狼疮患者外周血单核细胞活化和凋亡的影响

目的：探讨γδT细胞在系统性红斑狼疮疾病中的免疫保护作用。方法：检测17例正常人群和44例系统性红斑狼疮患者外周血γδT细胞及亚群的表达情况。以TCRγδ单克隆抗体固相法体外选择性扩增获得17例活动期系统性红斑狼疮患者和10例正常人群外周血TCRγδ细胞系。测定γδT细胞毒活性。用正常人群γδT细胞系与异体活动期SLE患者外周血单核细胞（PMBC）以1：5、1：10比例共同培养48小时，活动期SLE患者PMBC作对照孔，观察γδT细胞系对活动期SLE患者PMBC活化和凋亡、细胞因子分泌的影响。结果：SLE患者的γδT细胞及亚群数量明显减少（P〈0．05）。IL-2可显著增强γδT细胞的细胞毒作用。正常人γδT细胞系与异体SLE活动期患者PMBC细胞共同培养，共同培养二组SLE患者PMBC的CD69表达和凋亡率均较对照组明显下降（P〈0．01）。共同培养二组培养上清IL-10水平较对照组明显升高，具有明显差异（P〈0．05）。结论：SLE患者γδT细胞数及亚群较正常人群明显下降，γδT细胞对SLE外周血淋巴细胞的凋亡和活化具有抑制性作用，并使IL-10分泌水平升高，表明γδT细胞在SLE发病中具有保护性的免疫调节作用。     

Increased IL-12 release by monocytes in nephrotic patients.

The pathogenesis of minimal-change nephrotic syndrome (MCNS) is obscure. It has been postulated that this glomerular disease may be a systemic disorder of cell-mediated immunity. IL-12 is a heterodimeric cytokine that is produced primarily by antigen-presenting cells and plays a primary role in the induction of cell-mediated immunity. To gain insight into the involvement of this cytokine, in vitro IL-12 levels were assessed in patients with MCNS and IgA nephropathy (IgAN) who were in either a stable or active clinical condition. The levels were compared with values in healthy controls. Significantly increased spontaneous and lipopolysaccharide (LPS)-stimulated release of IL-12 was detected in peripheral blood monocyte (PBM) cultures of MCNS and IgAN patients with the nephrotic syndrome (NS) compared with those of normal controls. Moreover, when individual MCNS patients were followed through their clinical illness, IL-12 levels were increased during the active phase and normalized as the patients went into remission. The amounts of IL-12 are significantly correlated with the levels of vascular permeability factor (VPF) in MCNS patients. This study describes a correlation between in vitro IL-12 release by PBM from two types of nephrotic patients and their disease activity, as well as a correlation with release of VPF by the same cultures. The study contributes to the understanding of this class of diseases and the observations may have a prognostic/diagnostic value.     

Dectin-1介导香菇多糖诱导人单核细胞系THP-1细胞产生IL-12的研究

目的探讨香菇多糖能否依赖Dectin-1介导而诱导人单核细胞系THP-1细胞产生IL-12。方法香菇多糖作用THP-1细胞后,实时荧光定量RT-PCR检测Dectin-1、IL-12p35和IL-12p40的mRNA表达水平;ELISA法检测THP-1细胞分泌IL-12的含量;以Dectin-1抑制剂昆布多糖预处理THP-1细胞,比较香菇多糖诱导产生IL-12的变化。结果香菇多糖可上调THP-1细胞表达Dectin-1的mRNA水平;能上调THP-1细胞IL-12p35和IL-12p40的mRNA表达和IL-12分泌;昆布多糖可明显抑制香菇多糖诱导THP-1细胞分泌IL-12。结论 Dectin-1能介导香菇多糖诱导人单核细胞系THP-1细胞产生IL-12。     

共表达不同水平的IL-12对于HBV DNA疫苗质粒免疫原性的影响

目的 在HBsAg DNA疫苗质粒中共表达IL-12佐剂分子,研究IL-12的表达水平对于HBV DNA疫苗质粒免疫原性的影响.方法 构建携带来源于中国地区C型HBV参照序列CHN-HBV07-C经密码子优化的preS2-S基因的DNA疫苗质粒pHBV,并将3个不同IL-12表达水平的佐剂分子表达盒序列分别克隆入该疫苗质粒中,通过瞬时转染293T细胞以检测重组质粒IL-12分子及乙肝表面抗原的表达情况.将不同IL-12表达水平的疫苗质粒免疫BALB/c雌性小鼠,IFN-γ的ELISPOT方法检测HBsAg抗原特异性的细胞免疫应答,化学发光定量ELISA法检测HBsAg特异的抗体水平.结果 成功构建3个不同IL-12表达水平的HBV DNA疫苗质粒,293T细胞转染结果显示:不携带IL-12分子表达盒的对照疫苗质粒pHBV的HBsAg表达水平可达70 ng/ml;低表达IL-12的疫苗质粒pHBV-12l的HBsAg表达水平为18 ng/ml;而高表达IL-12的重组疫苗质粒pHBV-12h的HBsAg表达水平仅为6 ng/ml.BALB/c小鼠的免疫结果表明:高表达IL-12分子的疫苗质粒pHBV-12h所诱导的细胞免疫及体液免疫水平相对于对照疫苗质粒pHBV均显著降低了.低表达IL-12分子的疫苗质粒pHBV-12l所诱导的抗体水平也显著降低了,但其细胞免疫应答水平却显著提高了.结论 在同一疫苗质粒中,高表达IL-12分子的质粒可能会影响到抗原蛋白的表达,而低表达IL-12分子的疫苗质粒却能增强细胞免疫应答.因此,平衡好佐剂分子及抗原蛋白的表达水平对于诱导高水平的免疫应答是个重要的因素.     

胸腺五肽治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎的实验研究

目的 应用胸腺五肽(thymopentin,TP-5)干预实验性自身免疫性脑脊髓炎(experiment autoimmue encephalomyelitis,EAE)大鼠,探讨该药物对EAE的治疗作用及其机制.方法 以豚鼠全脊髓匀浆(guinea pig spinal cord homogenate,GPSCH)与完全弗氏佐剂(CFA)为抗原免疫Wistar大鼠建立EAE模型.Wistar大鼠随机分为正常对照组、EAE组、地塞米松(dexamethasone,DXM)组、TP-5小剂量组、TP-5大剂量组.采用双抗体夹心ELISA法检测Wistar大鼠免疫后7、14、21 d不同时间点血清中IL-12、IL-10的含量.结果 与EAE组和TP-5大剂量组比较,TP-5小剂量组和DXM组大鼠的发病率和临床评分显著性降低(P＜0.01);DXM组大鼠的发病率和临床评分低于TP-5小剂量组(P＜0.01).各个时间点EAE组、DXM组、TP-5小剂量组、TP-5大剂量组IL-12含量均较正常对照组明显升高(P＜0.01),免疫后14、21 d DXM组和TP-5小剂量组IL-12水平比EAE组低(P＜0.01);免疫后14、21 dDXM组、TP-5小剂量组IL-10水平与其余3组比较明显升高(P＜0.01).结论 TP-5对EAE有保护作用,其作用机制可能与上调IL-10水平以及下调IL-12水平有关,通过双向调节作用逆转TH1/TH2失衡.     

抗CD28单抗和IL-15对CIK增殖和杀肿瘤作用的研究

CIK是肿瘤过继性细胞免疫治疗中的免疫效应细胞。为使CIK在实验室里能被更有效地诱导增殖并赋予其更强的杀肿瘤效应,我们在CIK常规培养环境中加入抗CD28单抗和IL-15,探讨抗CD28单抗和IL-15对CIK增殖和杀肿瘤效应。取人外周血单个核细胞(PBMC),预先以常规方法诱导CIK,然后加入抗CD28单抗和IL-15与CIK共培养。用全自动五分类血液分析仪计数CIK增殖率;用流式细胞术测定CIK中粒酶B、穿孔素和CD107a等分子的表达率;用ELISA方法检测CIK分泌IL-10、IL-12、INF-γ和TNF-α水平;用乳酸脱氢酶释放法测定CIK对人肺癌细胞株(A549)、乳腺腺癌细胞株(MFC-7)和人黑素瘤细胞株(HME1)的杀伤活性。PBMC经常规CIK诱导培养以后再加入抗CD28单抗和IL-15与对照组比较,前者细胞增殖率明显增强(P<0.05);在CIK培养体系中加入抗CD28单抗和IL-15可促进颗粒酶B、穿孔素和CD107a等分子的表达率进一步增强(P<0.05);加入抗CD28单抗和IL-15,培养8d后CIK对A549、MFC-7和HME1细胞杀伤活性分别为82.2%、59.3%和70.6%,与对照组(分别为60.9%、49.6%和48.4%)相比差异有统计学意义(P<0.05);在培养体系中加入抗CD28单抗和IL-15,培养8d后其细胞因子IFN-γ、TNF-α分泌水平显著高于对照组(P<0.05),组间IL-10和IL-12的分泌量未见显著差异(P>0.05)。实验说明在CIK培养体系中加入抗CD28单抗和IL-15可增加CIK增殖率并提高其抗肿瘤效应。