微波预先辐照致γ射线对小鼠骨髓基质细胞毒性作用的改变

[目的]探讨微波预先辐照对γ射线致骨髓基质细胞凋亡、线粒体膜电位、胞内游离Ca^2＋浓度和Ca^2＋ Mg^2＋-ATP酶活性改变的影响。[方法]将原代培养的骨髓基质细胞随机分为正常对照组、单纯微波组、单纯γ射线组和联合组。12μW／cm。微波对单纯微波组和联合组连续辐照7d,每天1h,第8天对单纯丫射线组和联合组进行5Gy的γ射线照射。用钙离子依赖性磷脂结合蛋白．异硫氰酸荧光素及碘化丙啶（Annexin V-FITC及PI）双标记法检测细胞凋亡,流式细胞仪检测线粒体膜电位和胞内游离Ca^2＋浓度,试剂盒检测Ca^2＋ Mg^2＋-ATP酶活性。[结果]与正常对照组相比,各处理组细胞的凋亡率和线粒体膜电位未见明显改变。γ射线照射后24h,单纯微波组、联合组和单纯γ射线组细胞内游离Ca^2＋浓度明显升高（P〈0．05）,Ca^2＋ Mg^2＋-ATP酶活性明显降低（P〈0．05）.与单纯γ射线组相比,联合组细胞内游离Ca^2＋浓度明显降低（P〈0．05）,Ca^2＋ Mg^2＋-ATP酶活性明显升高（尸〈0．05o[结论]本实验条件下,900MHz,12μW／cm。的微波辐射和5Gvl,射线均不能引起细胞凋亡率、线粒体膜电位的明显变化,但能导致胞内游离Ca^2＋浓度明显上升和Ca^2＋ ATP酶活性明显降低。预先微波辐照能够明显减弱γ射线引起的胞内游离Ca^2＋浓度和Ca^2＋ Mg^2＋-ATP酶活性改变。     

低氧及跑台运动对大鼠心肌线粒体钙浓度的影响及机制探讨

目的探讨低氧及跑台运动对大鼠心肌线粒体钙及钠钾ATP酶和钙镁ATP酶活力的影响。方法大鼠分为常氧对照组、常氧运动组、低氧对照组和低氧运动组。用MPA-心功能分析系统记录血压和心率,用荧光分光光度法测心肌线粒体钙浓度,用化学比色法测心肌线粒体Na^＋-K^＋-ATPase和Ca^2＋Mg^2＋ATPase活力。结果①与常氧对照组比较,常氧运动组和低氧运动组心肌线粒体ca“浓度升高（P〈0．01,P〈0．05）,低氧对照组降低（P〈0．05）;与低氧对照组比较,常氧运动组和低氧运动组也升高（P〈0．01）。②与常氧对照组比较,常氧运动组和低氧运动组心肌线粒体Na^＋．K^＋．ATPase活力升高（P〈0．05,P〈0．01）,低氧对照组活力降低（P〈0．05）。③与常氧对照组比较,常氧运动组和低氧运动组心肌线粒体Ca^2＋Mg^2＋ATPase活力升高（P〈0．05,P〈0．01）,低氧对照组活力降低（P〈0．05）。结论单纯低氧对大鼠心肌线粒体钙浓度的影响与运动的影响相反,Na^＋-K^＋-ATPase和Ca^2＋Mg^2＋．ATPase活力的改变是原因之一。     

灵芝对大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡率及线粒体跨膜电位的影响

目的探讨灵芝对大鼠脑缺血再灌注后神经细胞凋亡率及线粒体跨膜电位的影响。方法采用线栓阻断大脑中动脉闭塞法（MCAO）建立大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型。动物随机分为假手术组（Sham）、脑缺血再灌注组（I／R）、灵芝组（GA）;于再灌注后3h、12h、24h、48h处死动物取材,流式细胞仪检测脑细胞凋亡率和线粒体跨膜电位。结果（1）IR组和GA组与sham组比较,脑细胞凋亡率明显增高（P〈O．01）;再灌注3hGA组与IR组比较,脑细胞凋亡卒没有明显差异（P〉0．05）;再灌注12h、24h、48hGA组与IR组比较,脑细胞凋亡率降低,有明显差异（P〈0．01）。（2）IR组脑细胞线粒体跨膜电位在再灌注3h、12h、48h较sham组显著下降（P〈0．05）,其中3h值最低,其后逐渐升高,至48h又出现后续性降低;GA组细胞线粒体跨膜电位在再灌注3h较sham显著下降（P〈0．01）;GA组线粒体跨膜电位在再灌注12h、48h较IR组显著升高（P〈0．05）。结论急性局灶性脑缺血再灌注后大鼠脑细胞凋亡率升高,线粒体跨膜电位显著降低,灵芝具有降低凋亡发生率、改善脑组织细胞线粒体跨膜电位水平的作用。     

实验性2型糖尿病肾病大鼠模型的建立与评价

目的比较不同方法构建2型糖尿病肾病大鼠模型的区别并确定最佳的构建方案。方法30只Wister大鼠随机分为3组（A：对照组，B：高糖高脂＋STZ组，C：手术＋高糖高脂延长组），观察各组大鼠血糖、血胰岛素、血脂、肾功及24h尿蛋白的变化。结果B、C2组血糖、血胰岛素、血脂、肾功及24h尿蛋白均明显高于A~1t（P〈0．05），B、C2组差异无统计学意义（P〉0．05）。结论手术＋高糖高脂延长组能够构建出符合2型糖尿病肾病发病特点的大鼠模型。     

镍对大鼠肝细胞内离子和线粒体含量的影响

目的探讨镍对大鼠肝细胞内[Ca^2 ]、[M^2 ]、[Ni^2 ]、[N^ ]、[H^ ]和线粒体含量的影响。方法健康Wistar大鼠腹腔注射硫酸镍1．25，2．5，5mg/kg染毒，1次／d，连续21d。染毒结束次日激光扫描共聚焦显微术测定肝细胞内离子浓度和线粒体含量。结果染毒组动物肝细胞内[Ca^2 ]、[Ni^2 ]、[Na^ ]、[H^ ]均增加，[M^2 ]和线粒体含量下降。结论NiSO4染毒可造成肝细胞内离子浓度和线粒体含量的改变。     

铝对新生大鼠大脑皮层细胞内钙浓度的影响

目的 探讨铝对新生大鼠脑皮层神经元细胞内游离钙浓度（[Ca^2＋]i）的影响.方法采用体外实验的方法,将分离的新生Wistar大鼠大脑皮层脑细胞分别与终浓度为0、10、100、1 000μmol/L的Al3^＋一起孵育,应用钙离子荧光指示剂Fura-2/AM测定不同孵育时间（15、30、45 min）细胞内[Ca^2＋]i.结果 皮层脑细胞内的[Ca^2＋]i随着Al3^＋浓度增加和孵育时间延长而增加,当Al3^＋浓度为1 000μmol/L时和孵育时间为45 min时,神经细胞内[Ca^2＋]i较其他组明显增高（P＜0.05）.结论 铝可通过增加新生大鼠大脑皮层神经细胞内[Ca^2＋]i而发挥神经毒性作用.     

中药防治硫酸镍对Ca2+-ATP酶及钙调素活性抑制的实验研究

目的：扶正解毒汤（FJD）防治硫酸镍（NiSO4）对大鼠肝线粒体Ca^2 -ATP酶及钙调素（CaM）活性的抑制作用。方法：Wistar大鼠NiSO4腹腔染毒,FJD灌胃防治,14d后测定线粒体Ca^2 -ATP酶及CaM的活性进行评价。结果：NiSO4致肝脏Ca^2 -ATP酶及CaM活性降低,FJD各防治组均有明显恢复。结论：FJD具防治NiSO4致大鼠肝Ca^2 -ATP酶及CaM活性抑制的作用。     

高功率微波辐射后下丘脑神经元凋亡和线粒体膜电位与Ca2+的变化

目的探讨高功率微波辐射后下丘脑神经元凋亡、线粒体膜电位与Ca^2＋的变化。方法以10与30mW／cm^2高功率微波辐射原代培养的下丘脑神经元，于辐射后6h采用倒置显微镜和流式细胞术检测细胞的凋亡、线粒体膜电位与胞浆钙离子的变化。结果辐射后6h，10与30mW／cm^2组凋亡率与假辐射组相比均明显增加；30mW／cm^2组辐射后坏死率与假辐射组比较亦明显升高，差异有统计学意义（P〈0．05）。辐射后6h，30mW／cm^2组Ca^2＋明显升高，膜电位性明显下降，差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论细胞凋亡是下丘脑神经元死亡的主要方式之一，胞浆内Ca^2＋超载及线粒体膜电位的下降参与其损伤过程。     

1，2－二氯乙烷对大鼠神经细胞内钙离子浓度的影响

[目的]用体外实验方法研究1,2-二氯乙烷（1,2-DCE）染毒后大鼠神经细胞内钙离子（Ca^2＋）浓度的变化。[方法]体外培养新生SD大乳鼠脑皮质细胞,分别用0．5、1．0、2．0mL/L1,2-DCE染毒,另设对照组,观察各组神经细胞形态学变化。同时应用激光共聚焦显微镜测定各组细胞内Ca^2＋浓度,探讨1,2-DCE对大鼠神经细胞内Ca^2＋浓度的影响。[结果]神经细胞染毒后,神经细胞形态发生明显改变：胞体肿胀崩解、胞核模糊不清、突触变短变粗、细胞间连接减少、细胞膜不完整;随着染毒剂量的增高,神经细胞损伤的严重程度呈上升趋势。各染毒组神经细胞活力较对照组有所下降,差异有统计学意义（P〈0．01）;染毒2h后随着染毒剂量的增加,各组神经细胞内Ca^2＋浓度呈上升趋势,各染毒组细胞与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01）;染毒24h后,低、中剂量组与对照组细胞内Ca^2＋浓度比较差异有统计学意义（P〈0．01）,高剂量组与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。[结论]1,2-DCE可以导致神经细胞水肿坏死,有剂量依赖关系,神经细胞内Ca^2＋浓度亦见升高,提示Ca^2＋可能与1,2-DCE致神经细胞中毒性脑水肿有关。     

拟除虫菊酯类农药对大鼠肝线粒体、微粒体Ca~（2＋）－ATP酶活力的影响

采用离体实验方法，观察了拟除虫菊酯类农药溴氰菊酯、氯氰菊酯对大鼠肝线粒体、微粒体Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶活力的影响。结果表明，加入溴氰菊酯、氯氰菊酯１５ｍｉｎ后，各剂量组线粒体、微粒体Ｃａ２＋ＡＴＰ酶均有明显的抑制作用，与对照组相比均具有显著性差异，（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１），且存在明显的剂量－效应关系。作用３０ｍｉｎ后各剂量组线粒体、微粒体Ｃａ２＋－ＡＴＰ酶仍继续下降，未见有恢复的趋势。     

灵芝制品中粗多糖含量测定影响因素的研究

目的对测定灵芝子实体及其制成品中粗多糖前处理条件影响因素进行研究。方法以葡聚糖计的粗多糖含量为评价指标,对灵芝子实体、灵芝破壁孢子粉、孢子粉和提取物的混合物(以下简称混合物)采用不同的提取方式,测定其中粗多糖含量。结果用苯酚硫酸法测定不同的灵芝子实体及其制成品时采取不同的前处理方式,在测定灵芝子实体时以沸水浴4 h,然后静置4 h为最佳,在此条件下粗多糖含量平均值为0.8%,相对标准偏差为1.90%;测定灵芝孢子粉、混合物样品中粗多糖时以沸水浴2 h,然后静置4 h为最佳,在此条件下粗多糖含量分别为1.41%和5.34%,相对标准偏差分别为1.09%和1.53%。结论本试验优化后的前处理方式具有准确性高、可重复性、稳定性强的特点,并能有效节约试剂使用量,在较短的时间内完成分析,具有实际应用价值。     

灵芝孢子油免疫调节作用的研究

目的:研究灵芝孢子油对小鼠免疫功能的调节作用。方法:分别以183、367、1100 mg/kg b.wt.剂量的灵芝孢子油对小鼠连续灌胃30 d后,测定各项免疫指标。结果:灵芝孢子油能促进小鼠的脾淋巴细胞增殖转化作用及小鼠的迟发性变态反应,提高小鼠的抗体生成细胞和血清溶血素水平,增强小鼠巨噬细胞吞噬能力。结论:灵芝孢子油具有增强小鼠免疫功能的作用。     

灵芝孢子粉抗突变和抑制肿瘤作用实验研究

目的：对灵芝孢子粉的抗突变和抗肿瘤作用进行研究，为开发灵芝的保健作用提供依据。方法：以小鼠骨髓细胞微核实验和睾丸染色体畸变实验观察灵芝孢子粉的抗突变作用，以S－180瘤细胞和H－22瘤细胞移植性肿瘤观察灵芝孢子粉的抗肿瘤效果。结果：灵芝孢子粉对环磷酰胺诱发的小鼠骨髓细胞微核发生和丝裂霉素诱发的小鼠睾丸细胞染色体畸变均有明显的抑制效果。对S－180和H－22肿瘤细胞小鼠移植性肿瘤生长也有明显的抑制作用。结论：灵芝孢子粉对体细胞和生殖细胞的DNA损伤均有保护作用，对肿瘤也有一定的预防效果。     

灵芝发酵液抗衰老作用的实验研究

以灵芝发酵液和过氧化油给小鼠灌胃，观察对小鼠脂质过氧化、脑和心脂褐质、血清超氧化歧化酶（SOD）及脑单胺氧化酶（MAO）活性的影响。结果表明，灵芝发酵液可提高小鼠SOD活性，减少血清丙二醛（MDA）生成，抑制心、脑脂褐质生成及降低脑MAO活性，提示该灵芝发酵液具有一定的抗衰老的作用     

三七和灵芝孢子粉提取物对高血脂模型大鼠降血脂作用的实验研究

目的 探讨三七和灵芝孢子粉提取物对高血脂模型大鼠血脂的调节作用.方法 采用高脂饲料喂养建立高血脂大鼠模型,以低、中、高三个剂量三七和灵芝孢子粉提取物灌胃,试验结束时测血清总胆固醇、甘油三酯和高密度胆固醇脂蛋白胆固醇.结果 中、高剂量组的三七和灵芝孢子粉提取物能使大鼠血清中总胆固醇明显降低;高剂量组的三七和灵芝孢子粉提取物均能使大鼠血清中甘油三酯降低;对血清高密度胆固醇脂蛋白胆固醇无明显影响.结论 三七和灵芝孢子粉提取物具有调节血脂作用.     

灵芝牛初乳复合胶囊增强小鼠免疫功能的研究

目的：探讨灵芝牛初乳复合胶囊对小鼠免疫功能的影响。方法：200只雌性ICR小鼠随机分为4组,即低、中、高剂量组和溶剂对照组,分别给予75mg／kg、150mg／kg、450mg／kg的灵芝牛初乳复合胶囊,溶剂对照组给予蒸馏水,连续灌胃30d后,分别检测以下指标,脏器／体重比值、24h足跖肿胀度、脾淋巴细胞增殖能力,溶血空斑数、半数溶血值,碳廓清能力、鸡红细胞吞噬率与吞噬指数及NK细胞活性。结果：灵芝牛初乳复合胶囊可增强DNFB引起的小鼠迟发性变态反应和小鼠淋巴细胞增殖能力,提高小鼠B细胞抗体生成和血清溶血素能力,还可增强小鼠NK细胞活性;各剂量组灵芝牛初乳复合胶囊对小鼠体重、免疫器官／体重比值、小鼠碳廓清能力和小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力均无明显影响（P〉0．05）。结论：灵芝牛初乳复合胶囊对正常小鼠免疫功能具有明显增强作用。     

灵芝和黄芪对噪声暴露小鼠肝脏核酸含量的影响

目的观察灵芝和黄芪对噪声暴露小鼠肝脏核酸含量的影响。方法采用昆明种小鼠150只,分为4组,对照组不接触噪声,用自来水灌胃,噪声组、噪声+灵芝组、噪声+黄芪组分别又分3个亚组,分别用2.0、3.0、3.5kHz的噪声处理,2h/d,连续10d。同时,噪声组、噪声+灵芝组、噪声+黄芪组除噪声处理外还分别用自来水、灵芝液、黄芪液灌胃,均为1次/d,0.5ml/(次·只)。采用二苯胺法和地衣酚法测定小鼠肝脏核酸含量。结果噪声+灵芝组(2.0、3.0和3.5kHz)与噪声+黄芪组(2.0、3.0和3.5kHz)小鼠暴露于噪声每天2h,10d后,其肝细胞核DNA含量、肝细胞核RNA含量及肝细胞质RNA含量较正常值有所下降,而噪声组(2.0、3.0和3.5kHz)降低更显著,两者比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论灵芝和黄芪对噪声所致肝脏DNA、RNA含量降低可能有一定的拮抗作用。     

Telomerase-associated apoptotic events by mushroom ganoderma lucidum on premalignant human urothelial cells

The chemopreventive effects of Ganoderma lucidum was tested, using a tumorigenic transformable human urothelial cell (HUC-PC) model. These in vitro data show that G. lucidum can inhibit the viability and growth of HUC-PC. This could be explained by a concomitant induction of apoptosis and inhibition of telomerase activity. Significant exteriorization of phosphatidylserine was detected by Annexin-V on cell surface, and the cells subsequently lost membrane integrity for uptake of 7-amino-actinomycin D dye. Additionally, the levels of hydrogen peroxide and 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine (8-OHdG) production of the apoptotic cells were significantly increased. The induction of apoptosis and suppression of telomerase activity help to explain the anti-HUC-PC growth properties; however, the induction of oxidative stress requires further study. This study strongly suggests that G. lucidum is a potential source of chemopreventive agents for bladder cancer based on its effectiveness in controlling the premalignant urothelial cell growth and carcinogen-induced transformation.     

Ganoderma lucidum polysaccharide fractions accelerate healing of acetic acid-induced ulcers in rats

The polysaccharide (PS) fractions from several medicinal herbs have been reported to have anti-ulcer effects against experimental ulcers in the rat. The water-soluble PS fractions from Ganoderma lucidum (Reishi mushroom) have been shown to inhibit indomethacin-induced gastric mucosal lesions in rats. This study aimed to investigate the effect of the PS fraction from G. lucidum on the healing of gastric ulcers induced by acetic acid in the rat and to elucidate the underlying mechanisms involved. The abdomen of rats was incised, and the stomach was treated with 10 M acetic acid (100 microL) for 1 minute, and then treated with G. lucidum PS (0.1, 0.5, or 1.0 g/kg) intragastrically, once a day for 14 consecutive days. The results indicated that the oral administration of G. lucidum PS at 0.5 and 1.0 g/kg for 2 weeks caused a significant acceleration of ulcer healing by 40.1% and 55.9%, respectively. In the mechanistic studies, additional rats were treated with 10 M acetic acid to induce acute ulcers, and then treated with G. lucidum PS (1.0 g/kg) for 3, 7, 10, or 14 days. Exposure of the rat stomach to acetic acid led to decreased mucus and increased prostaglandin levels. Treatment with G. lucidum PS at 1.0 g/kg significantly (P < .05) suppressed or restored the decreased gastric mucus levels and increased gastric prostaglandin concentrations compared with the control group. These results indicates that G. lucidum PS is an active component with healing efficacy on acetic acid-induced ulcers in the rat, which may represent a useful herbal preparation for the prevention and treatment of peptic ulcers.