解郁方对抑郁模型小鼠脑内单胺类神经递质及单胺氧化酶含量的影响

目的 研究解郁方对利血平模型小鼠脑组织单胺类神经递质(monoamine neurotransmitte,MAN)和单胺氧化酶(monoamine oxidase,MAO)的影响.方法 采用ELISA测定小鼠脑组织单胺类神经递质含量,分光光度计法检测小鼠脑组织单胺氧化酶活性.结果 解郁方高剂量组均可显著升高小鼠脑组织去甲肾上腺素、5-羟色胺、多巴胺(P均＜0.05),并且可以降低MAO活性(P＜0.05).结论 解郁方的预防作用可能与降低MAO活性,升高单胺类神经递质含量有关.     

新型镇静催眠化合物B2对小鼠脑内单胺类神经递质水平的影响

目的研究新型镇静催眠化合物B2对小鼠脑内单胺类神经递质水平的影响。方法小鼠随机分为溶剂对照组和B2给药组（5mg／kg,ip）,采用高效液相色谱-电化学法（HPLC-ECD）检测B2对小鼠不同脑区中去甲肾上腺素（NE）、多巴胺（DA）和5-羟色胺（5-HT）等单胺类神经递质水平的影响;并用比色法测定化合物B2对小鼠下丘脑、纹状体及大脑皮质中单胺氧化酶（MAO）活性的影响。结果与对照组相比,B2（5mg／kg,ip）可使小鼠下丘脑中NE含量由（1.08±0．09）μg／g显著降低至（0．88±0．07）μg／g（P〈0．01）;纹状体中DA含量由（12．85±2．21）μg/g显著降低至（8．44±2．25）μg／g（P〈0．01）;下丘脑中5-HT含量由（1．12±0．12）μg／g显著降低至（0．56±0．18）μg／g（P〈0．01）。B2对小鼠不同脑区MAO的活性无显著影响。结论B2引起小鼠不同脑区中单胺类递质NE、DA和5-HT水平的下降可能是其发挥镇静催眠作用的机制之一。     

氟对大鼠水迷宫学习记忆及脑内单胺类神经递质浓度的影响

目的探讨氟对大鼠学习记忆及脑内单胺类神经递质浓度的影响。方法 40只SD大鼠随机分为对照组及低、中、高剂量染毒组,分别以0、5、10、20mg/kg的氟化钠(NaF)对SD大鼠染毒90d后,应用水迷宫测试其学习记忆能力,并采用ELISA法检测脑组织中多巴胺(DA)和5-羟色胺(5-HT)浓度。结果高剂量染毒组与对照组大鼠水迷宫实验中抵达终点的游泳时间差异有统计学意义(P<0.05),其它各组抵达终点的游泳时间差异均无统计学意义(P>0.05);与组对比,高剂量染毒组脑中DA含量明显下降,差别有统计学意义(P<0.05);其它各剂量组DA及5-HT含量与对照组相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论氟对大鼠学习记忆的影响可能与脑内单胺类神经递质含量变化有关。     

酸枣仁汤对抑郁模型大鼠行为学和脑组织单胺类神经递质的影响

目的:建立抑郁动物模型,观察酸枣仁汤对抑郁模型大鼠行为学和脑组织单胺类神经递质的影响,探讨其抗抑郁作用机理.方法:采用孤养结和慢性不可预见性温和刺激制备抑郁大鼠模型.通过体重增长变化、糖水消耗量和敞箱实验.评定酸枣仁汤对慢性应激抑郁模型大鼠的行为学改变,并用高效液相色谱法测定大鼠脑内单胺类神经递质的含量,运用统计学方法比较组间差异,说明酸枣仁汤对抑郁实验动物模型的影响.结果:模型大鼠出现了明显的行为学异常,脑内单胺类神经递质含量与正常组有显著差异,酸枣仁汤高剂量组可显著提高抑郁大鼠的糖水消耗量、敞箱实验评定、脑内单胺递质含量,其疗效与西药氯丙咪嗪相当.结论:孤养结合慢性不可预见性的温和刺激可制备比较理想的抑郁症模型,酸枣仁汤可显著改善抑郁模型大鼠的行为学异常,增加脑内单胺递质含量,且呈一定的量效关系.酸枣仁汤的抗抑郁作用可能与增加脑内单胺类神经递质含量有关.     

小鼠脑组织中单胺类神经递质含量测定方法的建立与比较

目的 比较高效液相色谱(HPLC)-紫外光(UV)、HPIC-荧光(FLD)和HPLC-质谱(MS)3种检测方法测定小鼠不同脑组织中单胺类神经递质含量的优劣性,并应用最优方法测定血管性抑郁小鼠不同脑组织中单胺类神经递质的含量.方法 分别采用HPLC仪器搭配UV、FLD和MS检测器建立小鼠不同脑组织中多巴胺(DA)、去甲肾上腺素(NE)和5-羟色胺(5-HT)的含量测定方法,并进行系统的方法学验证,采用HPLC-FLD法对血管性抑郁小鼠不同脑组织中单胺类神经递质DA、NE和5-HT含量进行测定.结果 HPLC-UV法的定量限分别为DA 103.5 ng/mL、NE 107.5 ng/mL、5-HT 93.6 ng/mL;HPLC-FLD法的定量限分别为DA 10.35 ng/mL、NE 10.75 ng/mL、5-HT9.36 ng/mL;HPLC-MS法的定量限分别为DA 10.35 ng/mL、NE 32.25 ng/mL、5-HT 9.36 ng/mL.HPLC-FLD和HPLC-MS法对DA和5-HT的测定优于HPLC-UV法,HPLC-FLD法对于NE的测定优于HPLC-MS法,而HPLC-MS法存在较强的基质效应.HPLC-FLD法检测结果示血管性抑郁小鼠海马组织中DA含量最低,大脑皮质中5-HT含量最低,而不同脑组织中NE含量没有明显差别.结论 与HPLC-UV法和HPLC-MS法相比,HPLC-FLD法更适用于小鼠脑组织中单胺类神经递质(DA、NE、5-HT)的含量测定.DA和5-HT可以用作血管性抑郁症疾病的诊断标志物.     

高效液相色谱-电化学检测法测定生物样品中单胺类神经递质及其代谢产物

[目的]建立一种简单、快速、灵敏的测定生物样品中单胺类神经递质及其代谢产物的高效液相色谱方法。[方法]色谱柱采用WatersC18反相色谱柱(3.9mm×150mm,5μm),流动相为水相(每500mL中含辛烷磺酸钠1.25g,磷酸二氢钾6.8g,乙二胺四乙酸18mg,pH值3.3)∶甲醇∶乙腈=78∶19∶3,流速为0.8mL/min,柱温35℃;电化学检测器工作电极为玻璃碳电极,参比电极为银/氯化银(Ag/AgCl)电极,工作电压为0.7V。[结果]5种物质保留时间分别为:去甲肾上腺素3.6min,5-羟吲哚乙酸4.5min,高香草酸5.2min,多巴胺6.2min,5-羟色胺11.9min;线性范围均为20～1000μg/L,最低检测限为4～8μg/L。[结论]此方法测定生物样品中的单胺类神经递质及其代谢产物,简便,快速且灵敏度高。     

中药酸枣仁、龙齿、石菖蒲对小鼠脑组织单胺类神经递质及其代谢物的影响

应用高效液相色谱－电化学检测器观察中药酸枣仁、龙齿、石菖蒲对小鼠脑组织中单胺类神经递质及其代谢物含量的影响。结果显示：酸枣仁可降低多巴胺和３，４－二羟基苯乙酸的含量，龙齿降低多巴胺和高香草酸水平。开窍中药石菖蒲能降低５－羟吲哚乙酸及上述三种神经递质。乙醇组则明显升高３，４－二羟基苯乙酸和５－羟吲哚乙酸的水平。从上述结果说明安神、开窍单味中药可能是通过降低单胺类神经递质起到使中枢神经镇静的作用。     

库仑电化学法快速测定单胺类神经递质的方法学研究

目的建立库仑阵列电化学高效液相色谱法快速测定大鼠脑组织中的单胺类神经递质的含量。方法采用库仑阵列电化学检测器检测去甲肾上腺素（NE）、多巴胺（DA）、5-羟色胺（5-HT）、5-羟吲哚乙酸（5-HIAA）,采用Phenomenex C18反相色谱柱（150mm×4.60mm,5μm）,流动相为缓冲液-乙腈（体积比87∶13）,流速为1mL.min^-1,柱温为35℃。结果 4种单胺类神经递质的最低检测限为0.01515～0.01815ng,回收率为85.3%～100.5%。结论该法具有快速、准确、灵敏、样品制备简便等优点,可用于大鼠脑组织中单胺类神经递质的分离检测。     

亚慢性砷暴露对雄性小鼠脑组织性基因Ddx3y和Uty表达的影响

[目的]观察亚慢性砷暴露对雄性小鼠脑组织性基因Ddx3y和Uty表达的影响。[方法]SPF级雄性小鼠30只,按体重将小鼠随机分为对照组、低剂量染砷组(1 mg/LAs2O3)和高剂量染砷组(4 mg/LAs2O3),每组10只。自然饮水使小鼠染砷,连续染毒60 d后取脑。RT-PCR法检测雄性小鼠脑组织性基因Ddx3y和Uty的mRNA表达变化。[结果]与对照组比较,染砷组小鼠大脑髓质和小脑组织Ddx3y和Uty mRNA表达量明显增多,差异有显著性意义(P<0.05)。而大脑皮质性基因Ddx3y和Uty mRNA表达量明显减少,差异有显著性意义(P<0.05),尤其高剂量染砷组mRNA表达变化更明显。[结论]亚慢性砷暴露可下调雄性小鼠脑皮质性基因Ddx3y和Uty的mR-NA表达,同时上调髓质和小脑性基因Ddx3y和Uty的mRNA表达。     

亚慢性砷暴露对小鼠小脑组织甲状腺激素受体表达的影响

目的：了解砷对小鼠小脑组织甲状腺激素受体（ thyroid hormone receptor ,TR）相关基因和蛋白表达影响,为阐明砷的神经毒作用机制提供靶标依据。方法昆明小鼠40只,按体重随机分为对照组、1 mg/L、2 mg/L和4 mg/L三氧化二砷（ As2 O3）染砷组,每组10只。以自由饮水方式,连续染毒60 d。行为学跳台实验测试砷暴露对小鼠学习记忆能力影响,差异表达基因谱芯片筛查砷暴露小鼠小脑组织TR相关基因的差异表达,Real-time RT-PCR和Western blot技术从基因和蛋白水平进行验证。结果跳台实验中,随砷暴露剂量增加,小鼠发生错误次数增加,从平台跳下的潜伏期缩短,呈剂量-反应关系;基因芯片筛选出砷暴露小鼠小脑组织TRβ基因表达较对照组显著下调（P＜0．05）;Real-time RT-PCR发现,砷暴露小鼠小脑组织TRβmRNA表达显著下降（P＜0．05）,且呈剂量-反应关系;Western blot发现,砷暴露小鼠小脑组织TRβ1蛋白表达下降,2 mg/L、4 mg/L剂量染砷组与对照组比较,差异显著（P＜0．05）。结论砷暴露导致小鼠学习记忆功能下降,其机制可能与抑制TR的功能性受体TRβ1表达,进而损伤长时程记忆（ LTM）有关。     

亚低温缺氧对大鼠脑单胺类递质和血清电解质含量的影响

目的　研究亚低温低压缺氧对大鼠脑单胺类神经递质含量和血清电解质水平的影响。方法　采用4 8只健康成熟雄性Wistar大鼠 ,分别在 10℃和 2 0℃环境条件下 ,地面和模拟上升至 3.0km和 5 .0km高度停留 1h ,然后以 30m s速度降至地面 ,立即取大鼠脑组织制成匀浆测定 5 羟色胺 (5 HT)、去甲肾上腺素(NE)和多巴胺 (DA)的含量 ;取大鼠血清检测钠 (Na )、钾 (K )和钙 (Ca2 )含量的变化。结果　在 10℃环境5 .0km组的血清Na 、K 及脑组织匀浆中 5 HT含量均低于相应的地面组 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,但脑组织匀浆NE含量显著升高 (P <0 .0 5 ) ;在 10、2 0℃环境中 3.0km组脑组织匀浆 5 HT含量均低于相应的地面组(P <0 .0 5 )。结论　亚低温环境中 ,高空缺氧可引起血清Na 、脑组织 5 HT含量降低 ,NE含量升高     

高效液相色谱-荧光法测定小鼠脑组织中单胺递质及其相关物质

建立高效液相色谱-荧光分析方法,研究小鼠脑皮层、海马、纹状体、丘脑等不同部位的单胺类神经递质及其相关物质。脑组织样本经高氯酸沉淀蛋白后进行色谱分析,采用Lichrospher C₁₈柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为pH 3.06缓冲液(含1 mmol/L庚烷磺酸钠;30 mmol/L磷酸二氢钠-磷酸溶液)-甲醇(85∶15);流速：1.0 mL/min;柱温：35 ℃。荧光检测：激发波长为280 nm,发射波长为315 nm。采用建立的方法,鉴别出小鼠脑中存在去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)、酪氨酸、色氨酸、3,4-二羟苯乙酸和5-羟吲哚乙酸等物质;对NE、DA和5-HT进行定量研究,确定它们的线性范围分别为2.4～471.0 ng/mL(r=0.999 6),2.6～519.5 ng/mL(r=0.999 4),2.4～469.3 ng/mL(r=0.999 1),日内、日间RSD均小于9.0%,准确度达到限度要求,提取回收率大于90%。本法专属性好,准确度高,可以反映不同鼠脑区域单胺类神经递质及相关物质含量上的差异。     

老年性痴呆患者认知功能与单胺类神经递质的关系

目的:探讨老年性痴呆(SD)患者认知功能与单胺类神经递质的关系.方法:对50例SD患者和48例正常人(对照组)分别进行事件相关电位(ERP)、探究性眼动分析(EEM)和血浆单胺类神经递质(去甲肾上腺素、多巴胺和5-羟色胺)水平的测定.结果:SD组ERP异常率为96%(48/50).与对照组比较,SD组ERP中N2、P3潜伏期延长,P3波幅降低(t分别为3.453、4.972和6.544,P均＜0.001);EEM测定巾的凝视点(NEF)及反应探索评分(RSS)值减少,D值增加(t分别为8.072、6.724和7.953,P均＜0.001);血浆去甲肾上腺素、多巴胺和5-羟色胺水平降低(t分别为4.587、3.971和3.534,P均＜0.001).相关分析显示SD组P3潜伏期、D值与去甲肾上腺素、多巴胺和5-羟色胺血浆水平呈负相关(r=-0.46～-0.33,P均＜0.05),而P3波幅、NEF、RSS与其呈正相关(r=0.32～0.48,P均＜0.05).结论:SD患者认知障碍和血浆单胺类神经递质水平下降间存在相关性.     

砷对小鼠小脑神经递质传递相关基因表达影响的基因芯片研究

[目的]应用基因芯片技术观察砷对小鼠小脑神经递质传递相关基因表达谱的影响,为探讨砷的神经毒性机制提供分子毒理学依据。[方法]昆明种小鼠30只,随机分为3组,即饮用水对照组、低剂量染砷组（1 mg/LAs2O3）和高剂量染砷组（4 mg/L As2O3）,连续染毒60 d,断头法处死小鼠,利用基因芯片技术检测小脑组织神经递质的分泌、转运及膜受体相关基因表达谱的变化。[结果]基因芯片筛选结果显示,与对照组比较,染砷组小脑组织中差异表达2倍及以上的神经递质传递相关基因有17条。其中,表达下调的基因有10条,包括Tph2、Gria2、Grin1、Gabrb2、Camk4、Nrxn1、Lin7c、Nrxn3、Syt1及Cpix2;表达上调的基因有7条,包括Slc6a2、Slc6a5、Slc6a11、SLc18a2、Slc18a3、Htr2c和Lin7b。[结论]慢性砷暴露可影响小鼠小脑神经递质传递相关基因的表达。     

草问荆总生物碱对大鼠脑内单胺类神经递质含量的影响

目的 研究草问荆总生物碱(TAEP)抑制中枢神经系统的作用机制。方法 采用高效液相色谱—电化学检测法(HPLC—EC)及HPLC—UV法测定大鼠脑内单胺类神经递质含量。结果 TAEP对大鼠纹状体的单胺类神经递质的含量具有显著的降低作用，同时升高纹状体单胺类递质中性及酸性代谢产物的含量；对大鼠前脑边缘区的单胺类递质具有显著的降低作用，同时显著升高边缘区单胺代谢物5—羟吲哚乙酸(5—HIAA)，高香草酸(HVA)的含量。但对于3，4—二羟基苯乙醇(DHPG)的升高作用无统计学意义。结论 TAEP具有与利血平相似的单胺排空作用，是TAEP对中枢神经系统镇静安定的作用机制。     

三氧化二砷对小鼠脑神经元DNA损伤作用

[目的]为探讨砷的中枢神经系统毒性作用机制提供实验依据.[方法]昆明种小鼠40只,随机分为4组:1、2、4 ppm三氧化二砷染毒组和生理盐水组.连续染毒60d,取大脑,用免疫组化方法观察脑皮质神经细胞8-羟基-2'-脱氧鸟嘌呤核苷(8-OH-dG)的表达,并用单细胞凝胶电泳试验检测脑神经元的单链DNA断裂程度.[结果]各染砷组小鼠脑皮质神经细胞出现肿胀、胞质内有空泡变性、核固缩、碎裂等病理学变化,神经组织中8-OH-dG呈现明显的高表达,而且神经细胞可见明显的彗尾、且随砷暴露剂量增高其彗尾变长.[结论]慢性低剂量砷暴露可诱发小鼠神经元的DNA损伤,脑皮质神经元可能是砷神经毒性作用的主要靶细胞.     

一测多评法测定小鼠脑内单胺类递质及其相关物质的含量

目的 建立并优化一种简单、灵敏、高选择性的高效液相色谱荧光检测法,通过一测多评法测定小鼠脑内单胺类递质及其相关物质.方法 采用Thermo Scientific Syncronis aQ C18色谱柱,流动相为0.1mol/L NaAe溶液(内含0.05mol/L EDTA,用HAc调pH值4.70):甲醇(体积比95:5),流速为1.0 mL/min,激发波长为280 nm,发射波长为330 nm.以多巴胺盐酸盐(DA)对照品为内参物,建立其与去甲肾上腺素(NE)、盐酸肾上腺素(E)、酪氨酸(Tyr)、3,4-二羟苯乙酸(DOPAC)、3-甲氧基-4-羟基苯乙二醇半哌嗪盐(MHPG)、5-羟色胺盐酸盐(5-HT)、色氨酸(Trp)、5-羟吲哚乙酸(5-HIAA)、高香草酸(HVA)的相对校正因子,并进行了方法学研究.结果 采用校正因子法和外标法分别计算小鼠脑内该10种成分的质量浓度,两法计算所得各成分平均质量浓度之间差异均无统计学意义(P＞0.01).结论 本方法操作简便、快速,测定结果准确度较高,可用于小鼠脑内10种单胺类递质及其相关物质的测定.