错配修复系统的生物学效应和机理

在ＤＮＡ正常代谢中，碱基错配、插入或缺失可导致基因组ＤＮＡ复制错误。已证明在细菌、酵母及高等真核细胞中，都存在错配修复系统。这方面的研究已取得了一些进展，包括Ｅ．ｃｏｌｉ中的ＭｕｔＨＬＳ修复系统，酵母中的错配修复基因及其蛋白以及真核细胞中的错配修复基因及蛋白。这对消除ＤＮＡ生物合成错误，增加染色体复制的可信性，防止自由突变以及肿瘤的发生发展、诊断和治疗有着重要意义。     

DNA错配修复和临床肿瘤新进展

DNA复制是一个严谨有序的过程,细胞分裂时,碱基错配的概率约为1/1010～1/109.错配修复系统(MMR)是一个从细菌到真核细胞皆保守的DNA修复途径,它负责修复DNA中错配的碱基,或者DNA聚合酶的校对功能失调而引起的复制错误,插入,遗失碱基,使DNA整体复制的保真度增加50～1000倍.MMR系统失控会导致DN...     

DNA错配修复蛋白多功能性的研究进展

DNA错配修复(mismatch repair,MMR)系统是DNA损伤修复的多种途径之一,存在于从细菌、酵母到人体的所有生物体,由一组高保守性酶蛋白组成.其通过校正DNA复制及重组中产生的碱基错配与插入/缺失环,维持所有生物基因组稳定性的功能已研究比较清楚.越来越多的研究还揭示了错配修复蛋白的其他功能:参与调控DNA损伤应答,同源重组,减数分裂的染色体配对和分离,抗体多样性产生及三核苷酸重复序列扩增等过程.本文将对错配修复蛋白多功能性的研究进展作一综述.     

DNA错配修复与肿瘤的发生及治疗

DNA错配修复系统能够识别和纠正错配的DNA碱基对,确保DNA复制过程的保真性.若是错配修复系统存在缺陷将导致基因突变或基因组不稳定性,最终会导致肿瘤的产生.错配修复系统不仅可以通过修复在DNA复制和重组过程中产生的碱基错配来维持基因组的稳定性,还可以通过识别DNA损伤介导细胞的凋亡,所以细胞的错配修复功能与化疗疗效也有密切相关性.错配修复系统对肿瘤诊断、治疗及预后的重要价值决定了它在肿瘤研究中的重要性.     

DNA复制错误与肿瘤

对ＤＮＡ复制过程中形成的碱基错配进行修复是生物界普遍存在的一种保持遗传忠实性、调节遗传多样性的基本功能。ＤＮＡ错配修复（ｍｉｓｍａｔｃｈｒｅｐａｉｒ，ＭＭＲ）基因是细胞内负责对碱基错配进行修复的基因，它们的缺陷可导致细胞突变频率的增加而形成突变子表型...     

酿酒酵母Msh2蛋白和含有错配DNA碱基对和插入的双链寡核苷酸的特异性结合

【英」／AlaniE·‘·／／GenesandDavelop．－1995，9．－234～247在酿酒酵14中，编码了4种蛋白：MShl，M8hZ，MSh3，＊。M，它们的氨基酸序列和MSG相似，MS6是细菌MutllLS错配修复系统（mismatchrepairsys－te；；。）的中心成分。＊uG已证明在体外能识别＊＊A碱基对错配。以前的研究提示MShZ在酵母中是主要的错配识别蛋白。本实验作者描述了MShZ基因产物的提纯和特征。作者构建了GAL10－－MShZ过度表达质粒，这种质粒通过常规的层析法，可进行MShZ多肽链的提纯。他们用免疫荧光实验显示了过度表达的M8hZ蛋白在核内，这和…     

基因组不稳定性与肿瘤

基因组结构的相对稳定是生物种系得以维持和延续的基本前提和重要保证，细胞内逐渐形成了一整套有效的机制以保证遗传信息稳定而真实地代代相传。对DNA复制过程中形成的碱基错配进行修复是生物界普遍存在的一种保持遗传忠实性、调节遗传多样性的基本功能。错配修复基因是细胞内负责对减基错配进行修复的基因，它们的缺陷可导致细胞突变频率的增加而形成突变子表型，最为常见的突变子表型为微随体DNA的复制错误，而后者可导致基因组不稳定性．最近．通过对遗传性非息肉性结直肠癌（HNPCC）的分子发病机理的研究，人们已克隆出与HNPCC发病有关的错配修复基因hMSH2、hMLH1、hPMS1和hPMS2、，它们的缺陷分别在50～60％、30％、5％和5％的HNNPCC中起作用。通过对错配修复基因的研究，人们有可能确定某些肿瘤发病的危险性，从而采取相应的措施以达到降低死亡率、提高生存率的目的。     

DNA聚合酶β可能参与了更广泛的细胞反应并引起遗传不稳定

近年来有关真核细胞中ＤＮＡ聚合酶的研究迅速增多。 1985年前 ,确认的ＤＮＡ聚合酶只有 3种 :聚合酶α、β以及线粒体聚合酶γ。时至今日已至少发现了 14种ＤＮＡ聚合酶 ,包括聚合酶α、β、γ、δ、ε、ζ、η、θ、ι、κ、λ、μ、ＲＥＶ1及ＭＵＳ30 8,在真核细胞ＤＮＡ的复制、修复、跨损伤合成、ＤＮＡ重组以及细胞周期调控等多种重要的生物代谢过程中发挥重要作用[1] 。在一定程度上 ,细胞内的各种聚合酶均有其独特的功能和作用领域。如具有引物酶活性的聚合酶α的作用是启动ＤＮＡ复制并合成ＲＮＡ -ＤＮＡ引物 ;聚合酶δ和ε是主要…     

人类DNA错配修复系统与肿瘤

人类ＤＮＡ错配修复系统与肿瘤李明发何友吉苏占海遗传物质的突变是导致人类许多疾病（包括肿瘤）的主要原因，而引起遗传物质突变的直接诱因是不同类型的ＤＮＡ损伤。其中多种原因造成的ＤＮＡ双链分子的碱基错配是导致突变的主要ＤＮＡ损伤类型之一［１］。大量研究表明...     

错配修复蛋白在DNA双链断裂修复中的作用

DNA双链断裂(DSBs)是最严重的DNA损伤之一,近年来受到人们广泛的关注.错配修复(MMR)系统广泛存在于生物体中,是细胞复制后的一种修复方式,通过矫正在DNA复制和重组过程中产生的碱基对错配和小的核苷酸插入或缺失而保持基因组的稳定性.研究发现MMR系统在DSBs修复中起着重要的作用,MMR蛋白通过与同源重组(HR)和非同源末端连接(NHEJ)修复相互作用参与DSBs修复.本文重点关注MMR通路几种关键蛋白在DSBs修复中的作用.     

组蛋白乙酰化及其与肿瘤的关系

真核细胞中染色质的基本单位核小体 ,由核心组蛋白(Ｈ2Ａ、Ｈ2Ｂ、Ｈ3和Ｈ4 )、Ｈ1及ＤＮＡ组成。核小体组装过程中 ,(Ｈ3/Ｈ4 ) 2 四聚体首先与ＤＮＡ结合 ,随后两个Ｈ2Ａ/Ｈ2Ｂ异二聚体 ,结合到 (Ｈ3/Ｈ4 ) 2 结合处的 5′和 3′ＤＮＡ上形成核小体。核小体结构修饰是ＤＮＡ复制、转录、修复过程中的关键步骤。早在 30多年前 ,Ａｌｌｆｒｅｙ等已发现核心组蛋白Ｎ 端乙酰化能调节多种反式作用因子与核小体结合 ,从而影响基因转录。此后研究不断深入 ,发现组蛋白可有多种修饰方式 :泛素化、磷酸化[1] 、乙酰化[2 ] 、甲基化等 ,它们单独 (…     

人错配修复基因hMLH1研究的新进展

人错配修复基因(mismatch repair,MMR)的主要功能是对DNA链中因某些原因造成的错误配对进行修复.目前已知MMR主要有hMLH1、hMSH2、hMSH6、hPMS2等.它们能够识别和修复在DNA复制过程中因插入、缺失或单核苷酸突变形成的错配,从而大大减低基因组微卫星不稳定性(MSI),维持基因组的稳定性.     

甲基硝基亚硝胍诱发的遗传不稳定Vero细胞中错配结合蛋白 …

应用凝胶阻滞技术（ｇｅｌｒｅｔａｒｄａｔｉｏｎ），在甲基硝基亚硝胍（ＭＮＮＧ）诱发的遗传不稳定的Ｖｅｒｏ细胞（非洲绿猴肾细胞）抽提物中，发现存在特异性针对Ｇ．Ｔ错配结合蛋白（ｍｉｓｍａｔｃｈｂｉｎｄｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ），能选择性识别ＤＮＡ中的Ｇ．Ｔ错配，并与之结合，经与正常Ｖｅｒｏ细胞相比较，证实其功能并无缺陷，从而排除了ＭＮＮＧ通过对错配合结合蛋白功能的损伤而诱发细胞遗传不稳定的可能机制。     

用RNA／DNA嵌合寡核苷酸进行单碱基突变修正

以含有单个错配碱基的ＲＮＡ／ＤＮＡ嵌合寡核苷酸为载体，通过含ＲＮＡ残基链与靶序列的同源配对反应，启动靶细胞内源的错配修复机制，可在特定位点引入或修正单个核苷酸突变，并使修复后的基因表达仍处于原基因调控元件之下。     

错配修复基因hMSH2研究的新进展

错配修复基因是最近在遗传性非息肉性大肠癌（HNPPC）中分离到一组遗传易感基因，该系统中任一基因突变，都会导致细胞错配修复功能缺陷，结果产生遗传不稳定，表现为复制错误或微卫星不稳定，因而容易发生肿瘤，近年来对错配修复基因的研究取得了很大的进展，其与HNPPC之间的研究已有报道，但该家族中错配修复基因hMSH2的研究则刚刚开展，本就hMSH2基因的分子生物学特性，作用机制，与肿瘤关系的研究及其存在的问题等方面的新进展作一简要综述。     

真核细胞DNA聚合酶

近年来,其核细胞DNA体外复制模型的建立及蛋白纯化技术的提高,DNA聚合酶基因的克隆,真核细胞DNA聚合酶研究取得了很大进展。迄今为止,已发现α、β、γ、δ、ε、ζ等6类真核细胞DNA聚合酶,分别在DNA复制和修复等事件中起到重要作用。     

正义和反义表达grp75基因的哺乳动物细胞克隆的建立

为了进一步研究葡萄糖调节蛋白基因及其产物的生理功能和它在疾病发生发展过程中的作用，以ｐｃＤＮＡ３为载体构建了正义和反义的ｇｒｐ７５ｃＤＮＡ真核细胞表达载体系统，并对转染哺乳动物细胞后所筛选得到的阳性克隆进行免疫印迹分析；结果表明转染了正向ｇｒｐ７５ｃＤＮＡ表达系统的细胞克隆在原有ＧＲＰ７５表达的基础上表达量显著增加；     

血小板生成素糖基化与其体内生物学活性关系的研究

为探讨血小板生成素（ＴＰＯ）糖基化与其体内生物学活性的关系，给血小板缺乏症小鼠模型腹腔分别注射相同活性单位酵母系统表达的人ＴＰＯ成熟肽或大肠杆菌表达的人ＴＰＯＮ－端结构域蛋白，连续给药５ｄ，每天一次，末次给药后３ｄ，比较两种ＴＰＯ组动物外周血血小板数量、骨髓巨核细胞培养单位（ＣＦＵ－Ｍｅｇ）、骨髓有核细胞ＤＮＡ含量。结果高、中、低剂量的ＴＰＯ成熟肽组动物的血小板数、巨核细胞集落数和骨髓ＤＮＡ含量均明显高于ＴＰＯＮ－端结构域蛋白的相应组（Ｐ＜０．０１）。显示酵母系统表达的ＴＰＯ成熟肽比大肠杆菌表达的ＴＰＯＮ－端结构域有明显的生物学活性，这可能与它们的糖基化程度及半衰期有关。     

酵母蛋白质组氨酸激酶在昆虫细胞中的表达

以ＤＮＡ聚合酶链式反应从酵母基因组ＤＮＡ中钓取编码酵母组氨酸激酶活性区的ＤＮＡ，将此ＤＮＡ克隆入Ｂａｃｕｌｏｖｉｒｕｓ转递质粒。然后用Ｂａｃｕｌｏ Ｇｏｌｄ ＤＮＡ与重组质粒ｐＶＬ１３９３共转染昆虫细胞（ＳＦ９），在感染了重组Ｂａｃｕｌｏｖｉｒｕｓ的ＳＦ９细胞中表达了ＹＨＫ活性蛋白，该蛋白在体外组氨酸激酶试验中表现出自身组氨酸残基磷酸化的活性。     

错配修复基因hMSH2研究的新进展

错配修复基因是最近在遗传性非息肉性大肠癌 (HNPPC)中分离到一组遗传易感基因 ,该系统中任一基因突变 ,都会导致细胞错配修复功能缺陷 ,结果产生遗传不稳定 ,表现为复制错误或微卫星不稳定 ,因而容易发生肿瘤。近年来对错配修复基因的研究取得了很大的进展 ,其与 HNPPC之间的研究己有报道 ;但该家族中错配修复基因 h MSH2的研究则刚刚开展 ,本文就 h MSH2基因的分子生物学特性、作用机制、与肿瘤关系的研究及其存在的问题等方面的新进展作一简要综述