L5前根切断大鼠模型中背根神经节P2X3受体表达

目的：探讨L5前根切断（L5VRT）大鼠神经病理性疼痛模型背根神经节（DRG）P2X,受体表达。方法：雄性SD大鼠30只,随机分为5组（n=6）,A组（UVRT术后3d）、B组（L5VRT术后7d）、C组（L5VRT术后14d）、D组（UVRT术后21d）模型组和E组（假手术组）,E组仅行半椎板切除术暴露左侧脊髓,分别在各自的时间点灌注取材L5背根神经节,用免疫荧光染色方法观察P2X3受体表达的变化。结果：（1）L5前根切断手术后,大鼠从次日开始即能产生双足明显的机械痛敏,与E组相比差异有统计学意义（P〈0．05）,这种痛敏情况持续至少4周;（2）免疫荧光染色发现B组、C组及D组模型组同侧15DRG的P2X3受体的表达明显增加（P〈0．01）,B组、C组及D组模型组对侧L5DRG的P2X3受体的表达与E组相比变化不明显（P〉0．05）;A组模型组的双侧L5DRG的P2X3受体的表达与E组相比无明显变化（P〉0．05）。结论：（1）L5前根切断疼痛模型能产生双足明显的机械痛敏;（2）该模型背根神经节P2X3受体的表达变化可能参与其机械痛敏的机制。     

P2X2/3受体在大鼠眶下神经慢性压迫性损伤中表达水平的动态变化

目的探讨P2X2/3受体在三叉神经痛(TN)模型大鼠三叉神经节(TG)神经元内表达的动态变化及其作用。方法采用行为学观察、HE染色评价慢性压迫性损伤大鼠眶下神经模型造模结果,免疫组化方法测定每组TG神经元不同时期P2X2/3的表达情况。结果正常对照组P2X2/3在中、小直径神经元中有阳性表达;P2X2/3的表达量在手术侧组各时间段均明显高于正常对照组(P<0.05);假手术组术后早期,P2X2/3表达量明显高于对照组(P<0.05),晚期两者无明显差异;手术对侧组与假手术组相比,P2X2/3表达量在术后早期无明显差异,术后晚期明显增多(P<0.05)。结论TG神经元中P2X2/3参与了TN的诱发、痛觉传递过程,其中P2X2主要参与急性痛或炎性痛,而P2X3对急性痛及痛疼的维持都起重要作用;手术侧的痛觉神经传导对对侧TG产生了影响。     

P2X4受体结构及其参与神经病理性痛机制的研究进展

神经病理性痛是神经系统炎症或损伤后引发的一种慢性疼痛,其发病机制复杂,目前仍缺乏有效的治疗药物。近年来针对P2X4受体的蛋白结构及配体结合相关的重要部位开展了大量研究,发现表达于脊髓背角小胶质细胞的P2X4受体在神经病理性痛的发生和发展过程中具有重要的作用,提示其可能参与了神经病理性痛的发病。本文就P2X4受体的结构及其参与神经病理性痛的可能机制作一综述,试图为靶向P2X4受体研发新型抗神经病理性痛药物提供新的线索。     

川芎嗪对P2X3受体介导的神经病理痛的作用研究

目的 探讨川芎嗪（tetramethylpyrazine，TMP）对P2X3受体介导的神经病理痛的作用。方法 建立大鼠坐骨神经慢性压迫性损伤（CCl）神经病理痛模型，应用von Frey细丝法和热辐射法测定机械缩足反射阈值（mechanical withdrawal threshold，MWT）和热缩足反射潜伏期（thermal withdrawallatency，TWL），观察川芎嗪对CCl大鼠MWT和TWL的影响。结合免疫组织化学方法观察大鼠L4／L5段脊髓P2X，受体的表达变化。结果术后14d，V组（CCl模型组）和Ⅰ组（生理盐水对照组）、Ⅱ组（TMP对照组）、Ⅲ组（假手术组）、Ⅳ组（CCl模型＋TMP治疗组）相比较大鼠后爪的机械和热痛敏阈值明显降低（P〈0．05），大鼠脊髓P2X，受体表达明显升高（P〈0．05）；Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组之间相比大鼠后爪的机械和热痛敏阈值差异没有显著性（P〉0．05），大鼠脊髓P2X，受体表达差异没有显著性（P〉0.05）；Ⅳ组脊髓P2X，受体的表达较Ⅴ组低（P〈0．05）。结论 川芎嗪对P2X，受体介导的神经病理痛有抑制作用。     

L5前根切断大鼠模型中背根神经节P2X_3受体表达

目的:探讨L5前根切断(L5 VRT)大鼠神经病理性疼痛模型背根神经节(DRG)P2X3受体表达.方法:雄性SD大鼠30只,随机分为5组(n=6).A组(L5 VRT术后3 d)、B组(L5 VRT术后7 d)、C组(L5 VRT术后14 d)、D组(L5 VRT术后21 d)模型组和E组(假手术组),E组仅行半椎板切除术暴露左侧脊髓,分别在各自的时间点灌注取材L5背根神经节,用免疫荧光染色方法观察P2X3受体表达的变化.结果:(1)L5前根切断手术后,大鼠从次日开始即能产生双足明显的机械痛敏,与E组相比差异有统计学意义(P<0.05),这种痛敏情况持续至少4周;(2)免疫荧光染色发现B组、C组及D组模型组同侧L5 DRG的P2X3受体的表达明显增加(P<0.01),B组、C组及D组模型组对侧L5 DRG的P2X3受体的表达与E组相比变化不明显(P>0.05);A组模型组的双侧L5 DRG的P2X3受体的表达与E组相比无明显变化(P>0.05).结论:(1)L5前根切断疼痛模型能产生双足明显的机械痛敏;(2)该模型背根神经节P2X3受体的表达变化可能参与其机械痛敏的机制.     

Sigma-1受体在神经病理性疼痛大鼠内质网应激中的作用

目的 探讨sigma-1受体（sig-1R）对神经病理性疼痛（NP）大鼠内质网应激的作用。方法 将鞘内置管成功的SPF级雄性SD大鼠24只按随机数字表法分为假手术组（S组）、NP模型组（C组）、sig-1R抑制剂BD1047干预组（B组）,每组8只。C组和B组采用坐骨神经慢性挤压性损伤法建立NP模型。术后第4、5、6天,S组和C组鞘内注射生理盐水20μL,B组鞘内注射BD1047(120μmol/L)20μL,1次/d。于术前1 d及术后第1、3、5、7天检测术侧足机械缩足反应阈（MWT）。采用Westen blot和免疫荧光染色法检测背根神经元（DRG）sig-1R、免疫球蛋白重链结合蛋白（BIP）、转录活化因子4(ATF4)、C/EBP同源蛋白（CHOP）的表达情况;采用HE染色法观察DRG形态大小及病理改变;采用透射电镜观察DRG内质网改变。结果 与S组比较,C组大鼠术后各时间点术侧足MWT明显下降,DRG病理损伤和内质网破坏明显加重,sig-1R、BIP、ATF4、CHOP表达均上调（P<0.05）;与C组比较,B组大鼠术后第5、7天MWT升高,DRG病理损伤和内质网破坏...     

川芎嗪对P2X_3受体介导的神经病理痛的作用研究

目的探讨川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)对P2X3受体介导的神经病理痛的作用。方法建立大鼠坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)神经病理痛模型,应用vonFrey细丝法和热辐射法测定机械缩足反射阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)和热缩足反射潜伏期(thermal withdrawal latency,TWL),观察川芎嗪对CCI大鼠MWT和TWL的影响。结合免疫组织化学方法观察大鼠L4/L5段脊髓P2X3受体的表达变化。结果术后14d,Ⅴ组(CCI模型组)和Ⅰ组(生理盐水对照组)、Ⅱ组(TMP对照组)、Ⅲ组(假手术组)、Ⅳ组(CCI模型+TMP治疗组)相比较大鼠后爪的机械和热痛敏阈值明显降低(P<0.05),大鼠脊髓P2X3受体表达明显升高(P<0.05);Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组之间相比大鼠后爪的机械和热痛敏阈值差异没有显著性(P>0.05),大鼠脊髓P2X3受体表达差异没有显著性(P>0.05);Ⅳ组脊髓P2X3受体的表达较Ⅴ组低(P<0.05)。结论川芎嗪对P2X3受体介导的神经病理痛有抑制作用。     

背根神经节嘌呤受体亚型P2X3R介导小鼠术后急—慢痛转化北大核心CSCD

目的探讨不同部位不同嘌呤受体亚型在小鼠切口术后痛转化中的作用差异。方法足底切口恢复后注射PGE_(2)构建术后痛转化模型。第一部分:C57BL/6小鼠随机分为对照(Con)组、假敏化(sHP)组、敏化(HP)组,检测机械痛阈、自发痛评分和焦虑样行为;Western blot检测患侧L 3-5背根神经节(DRG)和脊髓背角(SCDH)中P2X3R和P2X7R蛋白表达变化。第二部分:C57BL/6小鼠随机分为Con组、HP+生理盐水组、HP+P2X3R拮抗剂组或HP+P2X7R拮抗剂组,观察拮抗不同亚型嘌呤受体对小鼠机械痛阈的影响。结果与正常小鼠相比,切口痛小鼠注射PGE_(2)后机械痛阈明显下降,自发痛评分明显增加(P<0.05),未表现出焦虑样行为(P>0.05),且P2X3R蛋白在DRG中表达明显增多(P<0.05),在SCDH中未检出,而P2X7R蛋白在DRG和SCDH各组中表达均无差异(P>0.05)。拮抗P2X3R能阻断术后痛转化的产生,而拮抗P2X7R无明显影响。结论切口痛小鼠经PGE_(2)诱导可出现急慢性痛的转化,不伴发焦虑样情绪,DRG中P2X3R可能是参与术后痛转化的关键受体之一。     

P2X7受体参与疼痛调节机制的研究进展

ATP门控离子通道受体P2X7受体近年来被广泛关注。P2X7受体受ATP及其衍生物激活后,诱导一系列反应如PANX1的激活和IL-1β的释放。阐明P2X7受体在疼痛中的作用及机制,为新型高效镇痛药物的研发提供思路。该文从炎性痛、神经病理痛、癌痛和吗啡镇痛耐受等方面阐述P2X7受体在疼痛中的研究进展,并探讨P2X7受体参与疼痛调节过程的可能机制。     

Subsensitivity of P2X but not vanilloid 1 receptors in dorsal root ganglia of rats caused by cyclophosphamide cystitis

The application of cyclophosphamide to rats was used to induce interstitial cystitis. Behavioural studies indicated a strong pain reaction that developed within 2 h and levelled off thereafter causing a constant pain during the following 18 h. Neurons prepared from L6/S1 dorsal root ganglia innervating the urinary bladder responded to the application of capsaicin or alpha,beta-methylene ATP (alpha,beta-meATP) with an increase of intracellular Ca2+ ([Ca2+]i). The [Ca2+]i responses to capsaicin were identical in the dorsal root ganglion cells of cyclophosphamide- and saline-treated rats, whereas alpha,beta-meATP induced less increase in [Ca2+]i in the cyclophosphamide-treated animals than in their saline-treated counterparts. Hence, alpha,beta-meATP-sensitive P2X3 and/or P2X2/3 receptors of L6/S1 dorsal root ganglion neurons were functionally downregulated during subacute pain caused by experimental cystitis. In contrast, capsaicin-sensitive vanilloid 1 receptors did not react to the same procedure. Thoracal dorsal root ganglia, not innervating the urinary bladder, were also unaltered in their responsiveness to alpha,beta-meATP by cyclophosphamide treatment.     

大黄素对P2X_(2/3)受体介导的三叉神经痛的作用研究

目的探究大黄素(emodin)对P2X2/3受体介导的三叉神经痛的作用影响。方法慢性压迫性损伤大鼠眶下神经(CCI-ION)建立大鼠三叉神经痛动物模型,应用von Frey细丝法测试机械痛敏阈值,观察大黄素对三叉神经痛(TN)大鼠机械痛敏阈值的影响。结合原位杂交、PT-PCR、免疫组织化学、免疫荧光、蛋白印迹等方法观察大鼠三叉神经节(TG)中P2X2/3受体的表达变化。结果术后14 d,Ⅲ组(TN模型组)和Ⅰ组(生理盐水对照组)、Ⅱ组(假手术组)、Ⅳ组(TN模型+大黄素干预组)相比较,大鼠手术侧眶下神经面部感觉区域机械痛敏阈值明显降低(P<0.01),大鼠TG中P2X2/3受体表达明显升高(P<0.01);Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ组之间相比,大鼠手术侧眶下神经面部感觉区域机械痛敏阈值差异没有显著性(P>0.05);Ⅳ组TG中P2X2/3受体的表达较Ⅲ组低(P<0.01)。结论 P2X2/3受体涉及到三叉神经痛,大黄素对P2X2/3受体介导的三叉神经痛有一定抑制作用。     

神经病理痛动物模型及其在P2X受体介导痛觉研究中的应用

神经病理痛是临床上常见病症,对人身心健康危害较大,其发病机制尚不清楚,目前无有效的治疗手段,加之慢性神经病理痛持续时间长,其研究成为疼痛领域的热点和重点。该文综述的多种神经病理痛的动物模型,复制了人类神经病理痛的各种症状,是研究神经病理痛的有效手段。三磷酸腺苷(ATP)是一种重要的疼痛信号物质,ATP可作用于P2X受体产生效应。应用神经病理痛动物模型,观察到P2X受体在神经病理痛的痛觉形成、传导和调节中有着重要作用,有望成为神经病理痛治疗的新作用位点。     

Eugenol Inhibits ATP-induced P2X Currents in Trigeminal Ganglion Neurons

Eugenol is widely used in dentistry to relieve pain. We have recently demonstrated voltage-gated Na⁺ and Ca²⁺ channels as molecular targets for its analgesic effects, and hypothesized that eugenol acts on P2X₃, another pain receptor expressed in trigeminal ganglion (TG), and tested the effects of eugenol by whole-cell patch clamp and Ca²⁺ imaging techniques. In the present study, we investigated whether eugenol would modulate 5''-triphosphate (ATP)-induced currents in rat TG neurons and P2X₃-expressing human embryonic kidney (HEK) 293 cells. ATP-induced currents in TG neurons exhibited electrophysiological properties similar to those in HEK293 cells, and both ATP- and α ,β-meATP-induced currents in TG neurons were effectively blocked by TNP-ATP, suggesting that P2X₃ mediates the majority of ATP-induced currents in TG neurons. Eugenol inhibited ATP-induced currents in both capsaicin-sensitive and capsaicin-insensitive TG neurons with similar extent, and most ATP-responsive neurons were IB4-positive. Eugenol inhibited not only Ca²⁺ transients evoked by α ,β-meATP, the selective P2X₃ agonist, in capsaicin-insensitive TG neurons, but also ATP-induced currents in P2X₃-expressing HEK293 cells without co-expression of transient receptor potential vanilloid 1 (TRPV1). We suggest, therefore, that eugenol inhibits P2X₃ currents in a TRPV1-independent manner, which contributes to its analgesic effect.     

肝X受体在糖尿病大鼠肾损伤模型中的作用及意义

目的：观察肝X受体（LXR）在链脲佐菌素（STZ）诱导的不同时间段糖尿病大鼠肾脏中的表达情况。方法雄性Wistar大鼠40只,数字法随机分为对照组10只和实验组30只。实验组用链脲佐菌素（STZ）60 mg/kg一次性腹腔注射,分别于4、8、12周将实验组与对照组大鼠测定体质量、血糖、血肌酐、尿蛋白定量（24 h）;实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）、蛋白印迹法测定4、8、12周LXR mRNA和蛋白的表达情况。结果RT-PCR结果提示,从实验第4周开始,LXR表达量开始提高,12周达到最高（P＜0．05）;蛋白印迹法结果可见4周开始增加,12周表达达到高峰。8周高于4周,12周高于8周（P＜0．05）。结论实验组肾小管上皮细胞LXR的表达下调在糖尿病大鼠的肾损伤中起了促进的作用。