以天冬氨酸和丙氨酸为起始原料合成2-甲基-3-羟基吡啶

目的 获得2-甲基-3-羟基吡啶合成方法,降低2-甲基-3-羟基吡啶的合成成本,为常山酮等药物的合成提供了廉价原料。方法 分别以天冬氨酸和丙氨酸为起始原料,经过噁唑中间体,利用Diels-Alder反应,最后脱羧获得2-甲基-3-羟基吡啶,总收率7.4%和30.3%。结果 提供了1种合成2-甲基-3-羟基吡啶的方法,丙氨酸为原料的方法更适合工业化生产,且合成方法简单、原料价格低廉,极大降低了2-甲基-3-羟基吡啶的合成成本,为常山酮等药物的合成提供了廉价原料。     

新型降压利尿药——托拉塞米的合成研究

以4-羟基吡啶为起始原料，通过磺化、氯代、氯磺酰胺化、吡啶环上的4位氯原子被3-甲基苯胺取代、与异丙基异氰酸酯缩合等5个步骤合成了N-异丙基-[4-(3-甲基)苯胺基吡啶-3-磺酰胺基]甲酰胺（商品名：Torasemide，托拉塞米）。此合成路线操作步骤简单、反应时间短、收率高、适宜工业化生产。     

烟酸生产情况介绍

烟酸(及烟酰胺)具有抗癞皮病的作用,并关系到人体的代谢。烟酰胺列为复合维生素B的组份之一。另又供作急救药物尼可刹米及心血管药物如烟酸肌醇酯等的原料,因而需用量日增。国外近年来并大量用作食品及饲料添加剂,无论是所用原料及合成工艺均有较大的发展,今分述如下: 一、制造烟酸的原料:主要有2-甲基5-乙基吡啶、3-甲基吡啶及喹啉三种。 (1) 2-甲基5-乙基吡啶(简称MEP) 系由三聚乙醛与氨合成。国外广用于合成树脂,其产量很大,价格较廉。国内上海第五制药厂在合成4-甲基吡啶的高沸物中含有MEP,1974年该厂采用液相高压管道法合成MEP,情况良好。     

新型抗肿瘤组蛋白去乙酰化酶抑制剂西达本胺的合成

目的:合成西达本胺{N-(2-氨基-5-氟苯基)4-[N-(吡啶-3-丙烯酰)氨甲基]苯甲酰胺}.方法:以吡啶甲醛为起始原料,通过Knoevenagel反应,制得吡啶丙烯酸,然后以N,N′-碳酰二咪唑(CDI)为催化剂,通过2步酰化反应,合成目标产物.结果:目标产物的产率为29%.结论:本法条件温和,操作简便,适合工业化生产.     

基于多芳环多吡啶配体的单功能铂配合物DNA结合研究

目的验证配体2,4,6-三[二(2-吡啶甲基)-氨甲基苯基]-1,3,5-三嗪(L4)配合物的DNA结合能力。方法合成一个多芳环多吡啶配体2,4,6-三[二(2-吡啶甲基)-氨甲基苯基]-1,3,5-三嗪(L4)。配体(L4)与Pt(DMSO)2Cl2反应得到配合物4,表征配合物,通过紫外、荧光和凝胶电泳的方法研究了配合物4的DNA结合能力。结果紫外和荧光实验表明该配合物均可与DNA嵌入结合,结合常数分别为2.1×104M-1、2.78×107M-1。凝胶电泳实验表明配合物可使DNA超螺旋形式完全解旋,有效扰乱DNA的二级结构。结论配体2,4,6-三[二(2-吡啶甲基)-氨甲基苯基]-1,3,5-三嗪(L4)配合物与DNA具有较强的结合能力,可以缓慢结合形成DNA的加合物,并且能够有效扰乱DNA构象。     

吡嘧司特钾的合成

以氰乙酸乙酯为原料，与叠氮化钠环合得到四唑-5-乙酸乙酯，再与2-氨基-3-甲基吡啶缩合得到3-(3-甲基-2-吡啶氨基)-2-(1H-四唑-5-基)丙烯酸乙酯，之后经环合成盐得到吡嘧司特钾，总收率48％。     

卢帕他定中间体5-甲基吡啶-3-羧酸的合成工艺改进

目的:改进5-甲基吡啶-3-羧酸的合成工艺。方法:以3,5-二甲基吡啶为原料,经KMnO4氧化得卢帕他定中间体5-甲基吡啶-3-羧酸,经正交试验,优化工艺。结果:得出较佳的工艺条件,提高了产率,收率可达51％。结论:该方法易于工业化生产。     

支气管扩张新药Bambuterol

Bambuterol(KWD-2183)是瑞典Astra 公司研制的新的支气管扩张剂。合成在热吡啶中,3,5-二羟基乙酰苯(Ⅰ)与N,N-二甲基氨甲酰氯反应生应3,5-双(N,N-二甲基氨甲酸基)乙酰苯(Ⅲ)。Ⅲ在二氧六环中溴化得3,5-双(N,N二甲基氨甲酸基)苯甲酰溴甲烷(Ⅳ),Ⅳ与N-苄基特     

7-氨基-3-(1-吡啶甲基)头孢烯酸(7-APCA)卤化物的合成路线

7-氨基-3-(1-吡啶甲基)头孢烯酸(7-APCA)卤化物是头孢他啶合成的重要中间体,笔者在查阅了大量的文献资料的基础上,综述了7-氨基-3-(1-吡啶甲基)头孢烯酸(7-APCA)卤化物合成方法的优点、缺点,同时阐述了笔者试验结果,以7-ACA为原料制备7-APCA卤化物的合成路线。     

1，4-二氢-2,6-二甲基-4-（3-硝基苯基）-3,5-吡啶-1羧酸单甲酯的制备

1，4-二氢-2,6-二甲基-4-（3-硝基苯基）-3,5-吡啶二羧酸单甲酯（1）是二氢吡啶类降压药的重要中间体。主要合成方法如下：（1）1,4．二氢-2,6-二甲基-4-（3-硝基苯基）-3，5-吡啶二羧酸甲基氰乙基酯经碱性水解制得，收率60％，但原料不易得；（2）1-乙氧甲基-1，4-二氢-2,6-二甲基-4-（3-硝基苯基）-3，5-吡啶羧酸二甲酯在金属钠和二甲胺基异丙醇存在下水解、酸化制得，收率47．4％，操作繁琐，后处理困难；     

Observations on the substrate specificity of amine oxidases

A number of compounds have been tested as substrates of, first, the amine oxidases of rabbit and guinea-pig liver and of goat, pig, horse, and dog plasma and, second, the “diamine oxidase” of pig kidney. Of the three xylylenediamines [di(aminomethyl)benzenes]tested, m-xylylenediamine was found to be a substrate of the liver oxidase. All the plasma oxidases tested acted on both m- and o-xylylenediamine. Both 3- and 4-picolylamine (3- and 4-aminomethylpyridine) were readily oxidized by the liver enzymes; all the plasma oxidases tested oxidized 2-, 3-, and 4-picolylamine. 4-Picolylamine was more rapidly oxidized by horse and dog plasma than any other substrate hitherto examined.     

Alkylamino derivatives of 4-aminomethylpyridine as inhibitors of copper-containing amine oxidases

The first substratelike, reversible inhibitors of different copper amine oxidases (CAOs) with IC50 (M) as low as 2.0 x 10(-8) corresponding to derivatives of 4-aminomethylpyridine with alkoxy (1a-d), alkylthio (2a,b), and alkylamino (3a-e, 4a-j) groups in the positions 3 and 5 have been prepared and studied. The inhibitors 1a-d are active on benzylamine oxidase and semicarbazide-sensitive amine oxidase and are very selective with respect to diamine oxidase, lysyl oxidase, and monoamine oxidases. The inhibitors 2a,b are selective for benzylamine oxidase whereas 2a is also a new type of good substrate of diamine oxidase. The inhibitors 3a-e and 4a-j are substratelike, reversible, nonselective inhibitors of various CAOs including pea seedling amine oxidase and Hansenula polymorpha amine oxidase, whose enzymatic sites are known from X-ray structure determinations. The inhibitors 3b,c and 4b,c are excellent substratelike tools for studies correlating CAOs that afford crystals suitable for X-ray structure determinations with CAOs from mammals.     

Synthesis of fatty acid Schiff base esters as potential antimicrobial and chemotherapeutic agents

Schiff base {4-[(pyridine-3-ylmethylimino)-methyl] phenol} was prepared by reacting 4-hydroxybenzaldehyde with 3-aminomethylpyridine in ethanol for 6 h (85 % yield) followed by their esterification via reaction with fatty acids of varying chain lengths. The structure of these Schiff base esters were elucidated using chromatographic and spectroscopic techniques like GC–MS, ¹H NMR, ¹³C NMR, and ESI–MS. Schiff base esters with shorter chain heptanoic (2a) and decanoic acid (2c) showed good activity against all the tested bacterial and fungal strains. The synthesized esters were also studied for cytotoxicity toward different human tumor cell lines like HeLa, HepG2, A549, MDA-MB-231, and MCF 7 and Neuro2a; however, Schiff base esters with shorter chain (2a, 2b) and medium chain fatty acids (2d, 2i) exhibited good anticancer activity and selectively toward MDA-MB-231 and MCF 7, while long chain fatty acid (2g) Schiff base ester exhibited good anticancer activity selectively toward MDA-MB-231 as compared to the parent molecule, Schiff base (1).     

3H-adrenaline release from rabbit isolated aorta by electrical-field stimulation

The aim of the present work was to study the release of 3H-adrenaline (3H-A) from rabbit isolated aorta. This release was compared with that of 3H-noradrenaline (3H-NA). The stimulation-evoked 3H-overflow from aorta preloaded with 3H-A decreased with repeated stimulation (S1-S3). In contrast, prestimulation enhanced subsequent stimulation-evoked 3H-overflows. For both 3H-amines, the 3H-overflow increased concomitantly to the same degree with the number of pulses (30-1000) at 3 Hz. The time course of 3H-overflows with either 3H-A or 3H-NA was compared. In the case of 3H-A, the 3H-overflow increased with time, while for 3H-NA the 3H-overflow remained unchanged both at 3 and 10 Hz. The stimulation-evoked 3H-overflow from rings preloaded with either 3H-amine was the same at frequencies from 1 to 10 Hz, whereas at 30 Hz the 3H-overflow derived from 3H-A was higher than that using 3H-NA. An analysis of the quantitative aspects of individual stimulation-evoked 3H-overflows showed that the fractional profile did not differ using either amine. In both cases, at least 96% of the 3H-overflow evoked by stimulation at 3 or 10 Hz was contained in the initial four 2-min. fractions. The ratio between stimulation-evoked 3H-overflow and spontaneous 3H-outflow was the same for both amines at 3 Hz, while the ratio was higher for 3H-NA at 10 Hz. Rauwolscine (10(-6) M) enhanced the 3H-overflow 6-fold, while (-)-propranolol (10(-7) M) had no effect at 3 Hz.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)     

携带LMO3基因逆转录病毒载体的构建及其在NIH/3 T3细胞中的表达

目的：构建单纯LIM蛋白3（LMO3）的逆转录表达载体,并观察其在 NIH/3T3细胞中的表达情况。方法重组载体pLXSN-LMO3经酶切及测序鉴定后,脂质体法转染到pA317包装细胞,G418筛选稳定的病毒产生细胞株。重组逆转录病毒体外感染NIH/3T3,并对其进行病毒滴度检测,NIH/3T3细胞分为3组：以pLXSN-LMO3转染为实验组,以pLXSN转染为阴性对照组,正常细胞为空白对照组。采用免疫荧光组化染色和蛋白印迹（ Western blot）法鉴定NIH/3T3细胞中LMO3的表达。结果重组逆转录病毒载体pLXSN-LMO3经酶切及测序鉴定构建正确,其病毒滴度平均可达4.04×106 cfu/ml,各组NIH/3T3细胞免疫荧光组化染色及Western blot检测均有LMO3蛋白表达,其中实验组高表达LMO3,与阴性对照组、空白对照组比较差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论成功构建了携带LMO3基因逆转录病毒载体,并能在NIH/3T3细胞中高表达LMO3蛋白,为下一步开展基因治疗奠定了基础。     

电鳐乙酰胆碱酯酶单链抗体基因的克隆及表达(英文)

目的　欲用计算机模拟及分子对接技术揭示抗乙酰胆碱酯酶单克隆抗体 3F3抑酶的分子基础 ,但 3F3分子远大于乙酰胆碱酯酶 (AChE) ,难以操作 ,故拟用其单链抗体为工具进行研究。本研究旨在设计、克隆并表达抗AChE单链抗体Sc3F3基因 ,推演重组单链抗体的氨基酸顺序 ,并证明纯化的重组单链抗体有抑制AChE的作用。方法　使用分泌抗电鳐AChE单克隆抗体 3F3(3F3Ab)的杂交瘤细胞提取总RNA。用RT PCR技术扩增重链可变区 (VH)cDNA及轻链可变区 (VL)cDNA基因 ,通过连接肽(Gly4 Ser) 3 基因将VH 基因和VL 基因连接 ,制成单链抗体基因 (ScFv)。将ScFv基因插入载体pCANTAB 5E用于表达。在大肠杆菌中表达的 3F3单链抗体(Sc3F3)用SephadexG75凝胶过滤和QAE SephadexA 5 0离子交换层析纯化。AChE与抗体的免疫反应性用ELISA法测定。AChE活性用微量羟胺比色法测定。结果　测序结果证明所克隆的ScFv基因是功能重排基因 ,长度为 72 3bp。重、轻链基因长度分别为 35 7bp和 32 1bp。ScFv基因 (含连接肽基因 )所编码的纯化的重组Sc3F3的分子量为 31.6ku。Sc3F3与AChE反应良好 ,但对AChE活性的抑制明显弱于 3F3Ab。Sc3F3的抑制效力约为 3F3Ab的 1/10。结论　在计算机模拟及分子对接研究中使用本研究设计的单链抗体Sc3F3应是可靠的     

血卟啉衍生物与胃癌单抗交联物在荷瘤裸鼠体内的药动学

在荷瘤裸鼠体内观察了胃癌单抗和血卟啉衍生物(~3H-HPD)交联物3H11-~3H-HPD与游离~3H-HPD的药代动力学。血药浓度曲线符合三室模型,交联物的T1/2明显长于~3H-HPD,消除速率常数也以交联物的参数较高,表观分布容积则交联物组参数低于游离~3H-HPD。结果显示了交联物大分子的药动学特点。经测定3H11-~3H-HPD和~3H-HPD在瘤、肝、皮、肌中的含量表明,肿瘤中交联物的含量和瘤/肝比值均高于~3H-HPD组,表明交联物对靶细胞的导向作用。交联物在皮肤和肌肉中的含量低于~3H-HPD,预示采用交联物进行光敏导向治疗时会减轻皮肤光敏反应。     

20(S)-人参皂苷Rg3对前列腺癌PC-3M细胞的诱导凋亡作用

目的研究20(S)-人参皂苷Rg3(SPG-Rg3)对人前列腺癌PC-3M细胞诱导凋亡的作用,并探讨其可能机制。方法采用MTT法观察SPG-Rg3对PC-3M细胞生长的抑制作用,计算IC50;用流式细胞术测定PC-3M细胞周期的变化;AO/EB双染观察SPG-Rg3对PC-3M细胞凋亡的形态学变化;利用免疫细胞化学染色和RT-PCR技术探讨SPG-Rg3对PC-3M细胞的诱导凋亡作用及与其相关基因caspase-8的关系。结果SPG-Rg3可明显抑制PC-3M细胞的生长,IC50为(248.5±0.58)mg.L-1;PC-3M细胞的生长周期中S期细胞数增加,G2/M期细胞数则明显减少,且在G1峰前出现明显的凋亡峰;SPG-Rg3作用后PC-3M细胞呈现明显的凋亡改变,且细胞caspase-8mRNA含量增加、表达明显增强。结论SPG-Rg3能诱导前列腺癌PC-3M细胞发生凋亡,其机制可能与其活化caspase-8作用有关。     

肺癌靶向血栓蛋白hu3D3V_H-tTF的表达及活性鉴定

目的制备一种用于肺癌血管靶向栓塞治疗的融合蛋白hu3D3VH-tTF,并鉴定其生物学活性。方法利用重叠PCR技术构建tTF与hu3D3VH的融合基因,克隆至表达载体pET22 b(+),在E.coliBL21(DE3)中表达,镍亲和色谱柱纯化目的蛋白。ELISA检测融合蛋白hu3D3VH组分与肺腺癌细胞A549选择性结合活性,凝血实验和FⅩ活化实验鉴定融合蛋白tTF组分的促凝血活性。结果获得序列正确的hu3D3VH/tTF/pET22 b(+)重组子,融合蛋白在E.coliBL21(DE3)中高效表达。纯化后的融合蛋白与肺腺癌细胞A549具有选择性结合活性,并能活化FⅩ、有效促发血液凝固。结论成功构建hu3D3VH/tTF/pET22 b(+)重组子,hu3D3VH/tTF融合蛋白具有hu3D3VH的选择性结合能力同时具有TF的促凝血活性,为开展选择性肺肿瘤血管血栓性栓塞研究奠定了基础。     

(2S,3R)-1-二甲氨基-3-(3-甲氧基苯基)-2-甲基戊-3-醇的合成工艺研究

目的 对(2S,3R)- 1-二甲氨基-3-(3-甲氧基苯基)-2-甲基戊-3-醇合成工艺进行研究.方法 以3-戊酮为起始原料,经Mannich反应、手性拆分、Grignard反应等步骤合成(2S,3R)-1-二甲氨基-3-(3-甲氧基苯基)-2-甲基戊-3-醇,并对化学拆分进行工艺优化.结果 合成(2S,3R)-1...