缺血预处理对鼠肝不同时限缺血再灌注损伤影响的实验研究

目的：通过实验了解缺血预处理对肝组织的保护作用。并探讨缺血预处理后肝组织耐受较安全缺血的时限。方法：42只SD大鼠分为假手术组（S0组）、缺血再灌注组（IR组）和预处理＋缺血再灌注组（IPC＋IR组）3个大组，IR组及IPC＋IR组根据肝缺血时间40、50、60min时限不同又各分为IR10、IR50、IR60组及IPC＋IR10、IPC＋IR50、IPC＋IR60组，再灌注时间均为60min。各组均为6只。观察指标为超氧化物歧化酶（SOD）、肿瘤坏死因子（TNF-α）的含量，并行肝组织光镜、电镜观察。结果：再灌注60min后，IPC＋IR各组SOD与IR组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。IPC＋IR舶组TNF—α与IR舶组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。形态学上，病理切片及透射电镜结果与实验结果相符合。结论：缺血预处理可以明显减轻肝组织缺血再灌注所致肝损伤，延长阻断时间，本实验的研究结果提示预处理后肝门阻断50min可能是SD大鼠肝组织能够耐受缺血的较安全时限。     

FK506对大鼠缺血再灌注肾TNF-α,p38MAPK蛋白表达的影响

【目的】探讨FK506对肾缺血再灌注不同时间TNF-α,P^38MAPK蛋白表达的影响。【方法】SD大鼠90只,随机分为三组：假手术（sham）组,缺血再灌注（IR）组,FK506＋缺血再灌注（FK506A-IR）组。FK506＋IR组于缺血前6h经尾静脉注射FK506（0．3mg／kg,用生理盐水稀释至0．1ml）;IR组于缺血前6h经尾静脉注射等量生理盐水;sham组仅开腹、分离肾动脉,不阻断血流。采用HE染色分析肾组织病理损伤程度,免疫组化二步法检测TNF-α,P^38MAPK蛋白表达的变化。【结果】TNF-α蛋白以在近端小管上皮细胞表达为著,缺血45min,再灌注2h有少量表达,再灌注6h,12h及24h呈阳性表达,12h达高峰,FK506A-IR组肾组织TNF-α蛋白水平显著低于IR组（P〈0．05）。P^38MAPK蛋白主要在远端小管上皮细胞表达,缺血45min,再灌注2h有少量表达,再灌注6h,12h及24h呈阳性表达,6h达高峰,FK506A-IR组肾组织p^38MAPK蛋白水平显著低于IR组（P〈0．01）。HE染色可见IR组肾小管上皮细胞有不同程度的片状坏死灶和炎性细胞浸润,FK506A-IR组肾组织损伤明显减轻。【结论】FK506可能通过下调TNF-α,P^38MAPK蛋白表达水平,减轻肾缺血再灌注损伤。     

PI3K/PKB信号途径在远程肢体缺血后处理减轻 脑缺血再灌注损伤中的作用

目的：通过观察肢体缺血后处理（LIP）后p-Akt、Caspase-9 及Bcl-2 蛋白的表达,探讨PI3K/PKB信号途 径在远程LIP 减轻脑缺血再灌注损伤中的作用。方法：42 只大鼠随机分成对照组、缺血再灌注（IR）组和LIP 组各14 只,后2 组采用线栓法制备局灶性脑缺血再灌注模型,LIP 组在缺血2 h 后再灌注前实施3 个循环健 侧股动脉缺血5 min再灌注5 min的LIP。采用TTC染色测定脑梗死体积,免疫组化法检测p-Akt、Caspase-9、 Bcl-2蛋白的表达。结果：LIP组大鼠脑梗死体积较IR组明显减小（P＜0.05）。LIP组p-Akt、Bcl-2蛋白表达较 IR 组明显增高（P＜0.05）,LIP 组Caspase-9 蛋白表达较IR 组明显降低（P＜0.05）。结论：LIP 可上调p-Akt、 Bcl-2表达,下调Caspase-9表达,并减轻脑梗死体积,PI3K/PKB信号通路在LIP减轻脑缺血再灌注损伤中可能 发挥重要保护作用。     

硫化氢预处理延迟相对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

【目的】探讨硫化氢预处理延迟相对大鼠心肌缺血再灌注（IR）损伤的保护作用。【方法】将30只健康成年Sprague-Dawley雄性大鼠随机分成3组：假手术组（S组）、缺血再灌注组（IR组）和硫化氢组（H组）。S组仅开胸并分离左冠状动脉前降支;IR组行左冠状动脉前降支阻断30rain,再灌注120min;H组予以静脉注射硫氢化钠（NaHS）0．05mg／kg,给药后24h同IR组处理。各组分别于缺血前10min（T1）、缺血30min（T2）、再灌注60min（T3）、120min（T4）四个时点记录血流动力学变化。再灌注结束后测心梗面积。【结果】与IR组比,H组血流动力学改善,心肌梗死面积减少（P〈0．05）。【结论】硫化氢预处理延迟相对大鼠缺血再灌注心肌具有保护作用。     

三氯化钆对大鼠肝脏缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

【目的】探讨枯否细胞抑制荆三氯化钆对大鼠肝脏热缺血再灌注损伤的影响，并分析其可能机制。【方法】将64只成年雄性SD大鼠随机分为3组：三氯化钆预处理＋缺血再灌柱组（GD组，n=24），生理盐水预处理＋缺血再灌注组（NS组，n=24），假手术组（Sham组，n=16）。按Pringle＇s法建立肝脏95％缺血模型：选择性阻断肝门静脉左支及肝动脉30min，再灌注120min。各组经下腔静脉取血测定血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）、肿瘤坏死因子（TNF-α）浓度；各组分别于再灌注120min后经尾静脉注射印度墨汁，断尾取血测量0D5 min and OD15 min值以计算枯否细胞吞噬系数；取左叶肝组织行病理切片检查。【结果】①缺血30min及再灌注120min后GD组ALT、AST、TNF-α浓度低于NS组（P〈0．05）。②再灌注120min后GD组枯否细胞吞噬系数较NS组及Sham组降低（P〈0.05）。③GD组再灌注120min后肝组织形态学改变均较NS组轻。【结论】三氯化钆能减少枯否细胞释放细胞因子（主要是肿瘤坏死因子）从而减轻肝脏热缺血再灌注损伤。     

齐墩果酸预处理对大鼠肝脏缺血再灌注损伤中细胞凋亡的影响

目的：观察齐墩果酸（OA）预处理对肝脏缺血再灌注损伤中细胞凋亡的影响,探讨齐墩果酸预处理对肝脏保护作用的机制。方法雄性 SD 大鼠40只,随机分为假手术组（SH 组）、缺血再灌注组（IR 组）、0．5％羧甲基纤维素钠组（CM 组）和齐墩果酸预处理组（齐墩果酸组）,齐墩果酸组以100 mg/kg 的齐墩果酸混悬液,SH 和 IR 组以相同容积的水,CM 组以相同容积的0．5％CMC-Na 分别每日灌胃1次,连续7 d。第8天建立70％肝脏缺血再灌注模型,肝脏缺血60 min 后行再灌注3 h。检测大鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）和LDH 水平;检测肝组织内丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）水平变化;通过 HE 染色观察肝组织形态,利用 Tunel 染色检测肝组织凋亡状态;Western blot 检测肝脏组织 caspase3和 p53蛋白表达水平。结果与 IR 组相比齐墩果酸组血清肝酶水平及肝组织中 MDA 水平显著降低,而 SOD 和 GSH 活性则显著升高;与 IR组相比齐墩果酸组肝组织病理形态学损伤明显减轻;缺血再灌注后可见明显的肝实质细胞凋亡现象,齐墩果酸组凋亡细胞较 IR 组显著下降,且 caspase3和 p53蛋白表达亦减少。结论齐墩果酸预处理可减轻肝脏缺血再灌注损伤,可能与抑制 caspase3和 p53蛋白表达从而抑制细胞凋亡有关。     

补阳还五汤预处理减轻脑缺血再灌注损伤的实验研究

【目的】探讨补阳还五汤预处理减轻SD大鼠脑缺血再灌注损伤的机制。【方法】采用钳夹双侧颈总动脉建立SD大鼠脑缺血模型,将130只SD大鼠随机分为假手术组,脑缺血再灌注损伤组(IR组)、脑缺血预处理组(IPC组)、补阳还五汤预处理组(NPC组),根据再灌注不同时间(24 h、48 h、72 h和7 d)。将IR组、IPC组、NPC组各分4个亚组(n=10)。观察各时相大鼠血清腺苷含量和血清NO含量的变化。【结果】①IPC组、NPC组与IR组同期比较,血清腺苷含量以及第24 h、48 h血清NO含量明显升高(P<0.05 或P<0.01);②各组不同时相比较:随着再灌注时间延长,血清腺苷含量呈上升趋势,且三组腺苷含量均于再灌注后第7 d达最高,血清NO含量逐渐下降,至第7 d达到最低;③药物预处理组与缺血预处理组比较:血清腺苷含量以及第24 h、48 h血清NO含量差异有显著性意义(P<0.05)。【结论】补阳还五汤预处理保护作用与内源性腺苷以及NO增加有一定相关性。     

恩他卡朋对异动症大鼠行为学及其纹状体区 DARPP-32 磷酸化表达的影响

目的：通过观察肢体缺血后处理（LIP）后p-Akt、Caspase-9 及Bcl-2 蛋白的表达,探讨PI3K/PKB信号途 径在远程LIP 减轻脑缺血再灌注损伤中的作用。方法：42 只大鼠随机分成对照组、缺血再灌注（IR）组和LIP 组各14 只,后2 组采用线栓法制备局灶性脑缺血再灌注模型,LIP 组在缺血2 h 后再灌注前实施3 个循环健 侧股动脉缺血5 min再灌注5 min的LIP。采用TTC染色测定脑梗死体积,免疫组化法检测p-Akt、Caspase-9、 Bcl-2蛋白的表达。结果：LIP组大鼠脑梗死体积较IR组明显减小（P＜0.05）。LIP组p-Akt、Bcl-2蛋白表达较 IR 组明显增高（P＜0.05）,LIP 组Caspase-9 蛋白表达较IR 组明显降低（P＜0.05）。结论：LIP 可上调p-Akt、 Bcl-2表达,下调Caspase-9表达,并减轻脑梗死体积,PI3K/PKB信号通路在LIP减轻脑缺血再灌注损伤中可能 发挥重要保护作用。     

缺血预处理预防肝细胞分离过程中的缺血再灌注损伤

背景：缺血预处理能否减轻肝细胞分离过程中的缺血再灌注损伤及改善供体残留肝脏功能？经检索国内外罕见这方面的研究。目的：探讨缺血预处理对分离肝细胞及供鼠残肝缺血再灌注损伤的防治作用。方法：12只SD大鼠随机分为2组：单纯肝部分切除组和缺血预处理组,各6只。采用改良四步胶原酶灌注法分离上述切除肝脏肝细胞,同时收集术前和术后1d大鼠的血清。结果与结论：缺血预处理组切除肝脏分离肝细胞成活率、增殖活性及白蛋白合成、超氧化物歧化酶水平显著高于单纯肝部分切除组（P〈0.05）,而乳酸脱氢酶、谷丙转氨酶、丙二醛水平显著减少（P〈0.05）;与单纯肝部分切除组比较,缺血预处理组大鼠血清白蛋白、乳酸脱氢酶、谷丙转氨酶、超氧化物歧化酶、丙二醛水平差异无显著性意义（P均〉0.05）。结果表明缺血预处理能减轻肝细胞分离过程中的缺血再灌注损伤,其机制可能与其自身缺血性预适应、抗氧化、清除氧自由基的能力相关,但对供鼠肝部分切除后残肝功能的影响不明显。     

阻断p38MAPK信号通路对大鼠肾脏缺血再灌注损伤的影响

【目的】探讨阻断p38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）信号通路对大鼠急性肾缺血再灌注损伤（IRI）的影响。【方法】sD大鼠24只,随机分为3组,每组8只。对照组（S组）：仅结扎右侧肾蒂,左肾蒂游离;缺血再灌注组（IR组）：结扎右侧肾蒂,夹闭左侧肾蒂60min后,开放灌注24h;p38MAPK抑制剂组（SB组）：静脉注射p38MAPK特异抑制剂SB203580（10mg／kg）,余同IR组。检测三组血清尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、肿瘤坏死因子（TNF）-α、白介素（IL）-I水平和p38MAPK蛋白表达、组织病理评分并比较。【结果】与S组比较,IR组血BUN、Cr、TNF—α、IL-1水平、p38MAPK蛋白表达量及组织病理评分均显著增加（P〈0．05）;上述指标SB组较IR组显著下降（P〈0．05）。【结论】SB203580能阻断p38MAPK信号通路,减少p38MAPK表达,抑制炎症细胞因子的释放,减轻肾缺血再灌注损伤。     

肝硬化肠黏膜屏障损伤患者血浆D-乳酸、二胺氧化酶及内毒素的变化

目的探讨D-乳酸、二胺氧化酶（DAO）及内毒素在肝硬化患者血浆中的变化与临床意义。方法40例健康体检者（对照组）和58例肝硬化患者（试验组）,分别采用改良基质偶氮显色法、分光光度法和邻联茴香胺试剂法,检测血中D-乳酸、DAO及内毒素的水平。结果试验组治疗前后D-乳酸活性均明显高于对照组（P〈0.01）,且试验组A、B、C3级间均依次增高（P〈0.01或〈0.05）;试验组3级治疗后D-乳酸活性均明显低于治疗前（P〈0.01或〈0.05）。试验组治疗前后DAO活性均明显高于对照组（P〈0.01）,试验组3级治疗前DAO活性先升高后降低（P〈0.01或〈0.05）,而治疗后B、C级均高于A级（P〈0.01）,但B、C级之间差异无统计学意义;试验组3级治疗后,A、B级DAO活性均低于治疗前（P〈0.05或〈0.01）,而C级则高于治疗前（P〈0.05）。试验组B、C级治疗前后内毒素活动均高于对照组和试验组A级（P〈0.01或〈0.05）,而试验组A级与对照组差异无统计学意义;试验组治疗后仅C级内毒素活性明显低于治疗前（P〈0.01）。结论血浆D-乳酸、DAO水平是肠黏膜损伤早期诊断的敏感指标,内毒素血症是肝硬化患者病情加重的重要因素。     

奥曲肽对兔肝缺血再灌后小肠超微结构、细胞因子、氧自由基的影响

[目的]探讨兔肝缺血再灌后小肠超微结构、细胞因子、氧自由基的变化及奥曲肽的保护作用.[方法]采用Pring's兔肝脏再灌注模型,将24只新西兰大白兔随机分为三组:A组(假手术组)、B组(肝脏缺血再灌注生理盐水组)、C组(奥曲肽预适应组).三组动物再灌240 min试验结束时取小肠组织行电镜检查超微结构的改变,同时取小肠...     

七氟醚预处理延迟相对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

[目的]探讨七氟醚预处理延迟相对大鼠心肌缺血再灌注(IR)损伤的保护作用.[方法]将18只健康成年雄性大鼠随机分成3组:假手术组(C组)、缺血再灌注组(IR组)和七氟醚组(S组).C组仅开胸并分离冠状动脉左前降支,但不阻断血流150 min;IR组行冠状动脉左前降支阻断30 min,再灌注120 min; S组予以吸入...     

远隔缺血时处理对体外循环瓣膜置换术患者肾损伤的影响

【目的】观察远隔缺血时处理对体外循环（CPB）瓣膜置换术患者尿中性粒细胞明胶酶相关性脂质运载蛋白（NGAL）和肾损伤分子l（KIM-1）的影响。【方法】择期CPB下瓣膜置换术患者60例,随机分为两组（n=30）：远隔缺血时处理组（R组）和对照组（c组）。R组在主动脉阻断同时对患者右下肢实施3周期5min缺血／5min再灌注处理;C组不进行该处理。分别于术前（T0）、CPB结束后2h（T1）、6h（T2）、12h（T3）、24h（T4）和48h（T5）6个时间点检测尿NGAL、KIM-1和血肌酐（SCr）的水平,记录各时间段尿量。【结果】与C组相比,R组尿NGAL在T1,T2、T3、T4较低,KIM-1在T2、T3、T4较低,尿量在T1～2,T2～3时间段较多（P〈0．05）;与T0相比,两组患者尿NGAL在T1～T4明显升高,KIM-1在T2～T5明显升高,SCr在T5明显升高（P〈0．05）。【结论】远隔缺血时处理可降低瓣膜置换术患者尿NGAL和KIM1的水平,对CPB后肾损伤有一定的保护作用。     

两种不同后处理措施对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨缺血后处理联合肢体缺血后处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响.方法 将80只SD大鼠随机分为5组：假手术组（Ⅰ组）、缺血再灌注组（Ⅱ组）、近端缺血后处理组（Ⅲ组）、肢体远隔缺血后处理组（Ⅳ组）、联合处理组（Ⅴ组）.采用线栓法制作局灶性脑缺血再灌注损伤模型.再灌注24h后测定各组大鼠神经行为学评分、脑梗死体积、丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性及肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平.结果 各组大鼠脑梗死体积比值为0、（55.29±16.34）％、（36.07±14.76）％、（37.23±15.13）％和（21.15±10.92）％;与Ⅰ组相比,其余四组大鼠神经行为学评分、TNF-α水平及MDA含量均明显增高,SOD活性明显降低（均P＜0.01）;Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组SOD活性高于Ⅱ组,其余指标均低于Ⅱ组（均P＜0.05）;Ⅲ、Ⅳ组SOD活性低于Ⅴ组,其余指标均高于Ⅴ组（均P＜0.05）;Ⅲ组与Ⅳ组间各指标差异无统计学意义（均P＞0.05）.结论 缺血后处理联合肢体缺血后处理能减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤,其效果优于单独一种方法.     

吗啡延迟预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤细胞色素C氧化酶的影响

[目的]探讨吗啡延迟预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护机制.[方法]40只大鼠随机分成4组：假手术组（C组）、缺血再灌注组（I/R组）、吗啡预处理组（M组）,吗啡预处理＋阿片类受体阻断剂组（N组）,每组10只.C组仅行左冠脉套线而不阻断150 min;I/R组行左冠脉阻断30 min,再灌注120 min;M组静注吗啡0.3mg/kg,24 h后处理同I/R组;N组在静注吗啡前10 min,静注阿片类受体阻断剂纳洛酮6mg/kg,其余处理同I/R组.再灌注120min后,免疫印记法测心肌细胞色素C氧化酶（cytochrome c oxidase,CcO）表达水平,同时测心梗面积.[结果]与C组相比,I/R组、M组和N组CcO表达水平均降低;与I/R组比,M组CcO表达水平增高,心肌梗死面积减少,且差异有显著性（P＜0.05）.[结论]吗啡延迟预处理对心肌缺血再灌注损伤的保护作用可能与促进心肌CcO表达有关.     

依达拉奉对大鼠肝缺血再灌注过程中TNF-α表达的影响

[目的]通过检测TNF-α的表达变化,研究依达拉奉对肝缺血再灌注(I/R)损伤的逆转作用.[方法]将80只Wistar大鼠随机分为实验组和对照组,建立常温下部分肝缺血再灌注损伤动物模型.在肝缺血再灌注损伤开始前1h和开始时对实验组大鼠给予依达拉奉注射液,对照组给予同等容量的生理盐水.再灌注0、1、2、4h测定肝脏过氧化...     

七氟烷预处理对脑缺血-再灌注损伤大鼠脑组织热休克蛋白70和27表达的影响

【目的】观察七氟烷对大鼠局灶性脑缺血-再灌注时脑组织热休克蛋白（HSP）70和27表达的影响,以探讨其脑保护的机制。【方法】采用大脑中动脉线栓法建立大鼠局灶性脑缺血-再灌注模型。30只雄性SD大鼠,随机分为假手术组（Sham组）、缺血-再灌注组（I-R组）和七氟烷组（S组）,每组10只。大鼠脑缺血60min,然后进行再灌注。S组在脑缺血前30min吸入氧气＋2．4％七氟烷60rain。Sham组和I-R组吸入氧气。缺血60min,再灌注24h后处死大鼠,取缺血侧顶叶皮层脑组织,采用Western-blot法检测HSP_70和HSP-27蛋白的表达水平。【结果】局灶性脑缺血再灌注后,HSP-70和HSP-27蛋白的表达增加（P〈o．01）,应用七氟烷预处理能显著地促进脑缺血-再灌注后脑组织中HSP-70和HSP-27蛋白的表达（P〈0．01）。【结论】七氟炕能上调大鼠局灶性脑缺血-再灌注时HSP70和HsPL27的表达,这可能是其脑保护作用的部分机制。     

己酮可可碱对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的影响

目的:探讨TNF-α抑制剂己酮可可碱对大鼠肝脏缺血再灌注损伤(HIRI)的影响.方法:持续阻断肝固有动脉1 h后再灌注1 h,建立SD大鼠HIRI模型.24只雄性SD大鼠随机分成4组:生理盐水腹腔预处理假手术组(A)、己酮可可碱腹腔预处理假手术组(B)、生理盐水腹腔预处理HIRI组(C)、己酮可可碱腹腔预处理HIRI组...