放烧复合伤小鼠骨髓细胞IL-3R与造血调控的研究

目的　研究放烧复合伤小鼠骨髓有核细胞 (BMNC)IL 3R的蛋白表达及功能的变化 ,探讨放烧复合伤后IL 3R在造血调控中的作用。方法　小鼠随机分为正常 (N)、放射损伤 (R)、烧伤(B)及放烧复合伤 (C)共 4组 ,分别于伤后 1、3、7和 14d观察BMNCIL 3Rα阳性率、平均含量及功能的变化 ,及其与BMNC计数的相关性。结果　①R、C组IL 3Rα阳性率及功能明显降低 ,伤后 14d无明显恢复。②R、C组IL 3Rα的平均含量明显降低 ,伤后 14d开始回升 ,且与BMNC计数间存在明显正相关。③B组IL 3Rα阳性率、平均含量及功能无显著改变。结论　①IL 3Rα表达量在放烧复合伤小鼠造血损伤及造血恢复中起一定作用。②IL 3R的功能在放烧复合伤小鼠造血损伤中起一定作用 ,但其恢复晚于表达量的恢复。③ 15 %Ⅲ度烧伤对IL 3R的作用不明显 ;放烧复合伤基本上表现出放射损伤的特点。     

放射损伤和放烧复合伤影响小鼠脾脏T细胞IFN-γ和IL-4基因表达的实验研究

目的 阐明机体免疫功能的放烧复合效应，为放烧复合伤免疫功能障碍的调控提供依据。方法 于不同时相点测定放烧复合伤小鼠（5Gy γ射线照射合并12％Ⅱ度烧伤）的脾体比，脾脏组织学观察，分离脾脏T细胞，RT－PCR检测其IFN－γ和IL－4的基因表达水平。结果 ①伤后放烧组的脾脏指数和组织结构的恢复明显快于单放组；②放射损伤后T细胞IFN－γ和IL－4的基因表达均受到抑制，但与IL－4比较，IFN－γ表达量的降幅小、恢复快；③放射损伤后脾脏指数和T细胞IL－4的基因表达呈双向变化；④放烧组IFN－γ表达量明显高于单放组，而两伤组IL－4表达量无区别。结论 ①放射损伤是放烧复合伤的主导损伤因素；②IL－4的辐射敏感性高于IFN－γ；③烧伤因素能促进放烧复合伤后脾脏淋巴细胞的增殖及IFN－γ的表达，不能促进IL－4的表达；④受照机体内仍然存在着促进IL－4表达恢复的有效机理。     

小鼠巨噬细胞数量与形态及其IL-12基因表达放烧复合效应的实验研究

目的 探讨放烧复合伤小鼠腹腔巨噬细胞数量、形态及其IL－12基因表达变化的复合效应。方法 于单纯放射损伤（5Gy)或放烧复合伤（5Gy合并12％Ⅱ度烧伤）后不同时相点分离、计数小鼠腹腔巨噬细胞，观察其形态学变化，RT－PCR方法检测其IL－12、p35和p40的基因表达水平。结果 ①同放射损伤组相比，放烧复合伤组早期巨噬细胞数量减少速度更快，减少程度更大，但后期恢复速度明显加快；②同放射损伤组相比，放烧复合伤组伤后早期溶解坏死的巨噬细胞较多，但在形态上更接近正常；③两伤组p35和p40伤后表达的变化趋势一致，但放烧复合伤组伤后各时相点两基因的表达量明显高于放射损伤组。结论 放烧复合伤在免疫细胞数量、形态和功能上具有“早期加重，后期减轻”的复合效应特点，提示“早期救治”在放烧复合伤救治中的重要性。     

放烧复合伤对小鼠骨髓基质祖细胞体外集落生成能力的 …

目的 观察放烧复合伤对小鼠骨髓基质细胞集落形成能力（ＣＦＵ－Ｆ）的影响。方法 采用Ｄｅｘｔｅｒ型方法,检测经５．０Ｇｙγ射线放射损伤,１５％Ⅲ度体表面烧伤和放烧复合伤小鼠于伤后不同时间骨髓基质细胞集落形成能力。结果 单放组和复合伤组于伤后各时相点均显著低于正常组和单烧组;单烧组除伤后第３天低于正常组外（Ｐ〈０．０５）,至伤后第１４天与正常组差异无显著性。单放组骨髓基质细胞在伤后３天和７天经２１天培     

放烧复合伤对小鼠骨髓基质祖细胞体外集落生成能力的影响

目的观察放烧复合伤对小鼠骨髓基质细胞集落形成能力（ＣＦＵＦ）的影响。方法采用Ｄｅｘｔｅｒ型方法,检测经５０Ｇｙγ射线放射损伤、１５％Ⅲ度体表面积烧伤和放烧复合伤小鼠于伤后不同时间骨髓基质细胞集落形成能力。结果单放组和复合伤组于伤后各时相点均显著低于正常组和单烧组;单烧组除伤后第３天低于正常组外（Ｐ＜０．０５）,至伤后第１４天与正常组差异无显著性。单放组骨髓基质细胞在伤后３天和７天经２１天培养时呈小团片状生长,至培养第２８天时仍未长满培养皿底。结论单放组和复合伤组骨髓基质细胞受损后恢复缓慢;放烧复合伤对骨髓基质细胞的损伤具有放射损伤为主的特点     

放烧复合伤后白细胞介素-3基因的表达

为了进一步探讨放射损伤和放烧复合伤引起造血功能障碍的机理，研究了作为造血调控的重要细胞因子——白细胞介素－３（ＩＬ－３）基因在放射损伤、烧伤、放烧复合伤后不同时相点基因表达的变化。方法ｍＲＮＡ抽提、分子杂交、细胞培养、ＩＬ－３生物活性测定、３Ｈ－ＴｄＲ参与实验等生物技术方法。结果放射损伤后ＩＬ－３基因的表达受到明显抑制，照射后第３，１４天表达的ＩＬ－３ｍＲＮＡ减少了７７％，２１％；ＩＬ－３蛋白减少了８３％，３６％。烧伤对ＩＬ－３基因表达的影响呈双相性，烧伤后第３天ＩＬ－３表达受到抑制；烧伤后第１４天ＩＬ－３的表达增强；放烧复合伤后ＩＬ－３的表达受到抑制，其抑制程度介于放射损伤与烧伤之间，各观察组ＩＬ－３基因表达的变化与骨髓有核细胞数的变化呈平行关系。结论放射损伤、放烧复合伤后ＩＬ－３基因表达被抑制可能是急性放射病引起造血功能障碍的原因之一。     

放烧复合伤诱导小鼠骨髓红细胞微核率的研究

探讨放烧复合伤条件下，小鼠骨髓嗜多染红细胞ＭＮ率（ｆＭＰＣＥ）用于估算辐射剂量的可能性。方法以ｆＭＰＣＥ为指标，实验分为单纯烧伤组（１０％，２０％），单纯放射组（１，３，５Ｇｙ），放烧复合伤组（１０％＋１，３，５Ｇｙ，２０％＋１，３，５Ｇｙ），研究ｆＭＰＣＥ在２４小时的量效关系。结果单纯烧伤组与空白对照组相比，ｆＭＰＣＥ均无明显增加，放烧复合伤各剂量组明显低于单放组，烧伤面积２０％放烧复合伤组又明显低于１０％放烧复合伤组。结论小鼠放射损伤复合烧伤后其骨髓ｆＭＰＣＥ呈降低趋势，研究还发现烧伤后小鼠骨髓新生红细胞（ＰＣＥ）比例有一定升高，这可能是造成放烧复合伤时ｆＭＰＣＥ降低的原因。     

放射损伤,烧伤与放烧复合伤早期心功能变化的离体实验研究

目的：探讨放射损伤复合烧伤心功能抑制加重的机理．方法：采用离体心脏灌流法，测定伤后６小时离体心脏固有收缩功能的变化及伤后血清对正常离体心功能的影响．结果：（１）放烧复合伤后离体心功能收缩与舒张功能的抑制轻于烧伤，与复合伤后在体心功能抑制重于烧伤的复合效应不一致；（２）伤后补液可在一定程度上缓解心脏固有收缩功能降低的程度；（３）伤后加维拉帕米对烧伤与复合伤后心肌固有收缩功能的影响不一致；（４）复合伤血清对正常离体心功能的抑制强于单一伤血清，且强于烧伤血清及放射伤血清混合的作用．结论：放烧复合伤对在体心功能抑制加重的复合效应与复合伤后血容量丧失更重及血清成分对心功能抑制强于单一伤有关，而与伤后心肌固有收缩功能的影响关系不大．     

放射损伤、烧伤和放烧复合伤早期心室乳头肌细胞内K+浓度及动作电位的变化

采用Ｋ＋选择微电极（Ｋ＋－ＩＳＭＥ）和普通电极，测定正常大鼠及大鼠放射损伤、烧伤和放烧复合伤后第１，３，８和２４小时心室乳头肌细胞内Ｋ＋浓度（〔Ｋ＋〕ｉ）及跨膜电位的变化。结果显示：①伤后２４小时内，心肌〔Ｋ＋〕ｉ在放射损伤组（Ｒ组）无显著变化，在烧伤组（Ｂ组）和放烧复合伤组（ＲＢ组）均下降，以Ｂ组为甚；②三种损伤２４小时内跨膜电位参数ＲＰ、ＡＰＡ和Ｖｍａｘ均降低。ＡＰＤ５０和ＡＰＤ９０在Ｂ组均缩短，在Ｒ组和ＲＢ组均延长，以Ｒ组为甚。提示：①放射损伤抑制心肌细胞Ｎａ＋内流和Ｋ＋外流；②烧伤抑制Ｎａ＋内流促进Ｋ＋外流；③复合伤并非放射损伤和烧伤的简单叠加。     

放烧复合伤小鼠骨髓基质细胞体外培养生长的特点

用Ｄｅｘｔｅｒ法检测经５．０Ｇｙγ射线照射致１５％Ⅲ度烧伤和放射复合伤小鼠伤后不同的时间骨髓基质细胞集落形成能力。结果表明,单放组和复合务组于伤后各时相点均显著低于正常组和单烧组;单烧组烧伤后第３天低于正常组外（Ｐ〈０．０５）,至伤后第１４天与正常组比较,差异无显著性意义（Ｐ〉０．０５）。伤后３、７天的单放组骨髓基质细胞经２１天培养后呈小团片状生长,培养至第２８天仍示长满培养皿底。提示：单放组和复     

白细胞介素－3对放烧复合伤小鼠造血功能的影响

作者研究了ＩＬ－３对放烧复合伤动物骨髓造血功能的影响。发现３Ｔ３－ＩＬ－３细胞培养上清液中含有很高活性的ＩＬ－３。用它给放射损伤或放烧复合伤动物预防加治疗应用，对造血的刺激作用显著优于单独预防或单独治疗。对造血的这种良好作用既表现在造血实质细胞，也表现在造血基质细胞；在实质细胞中粒系祖细胞、红系早期和晚期祖细胞都有作用。ＩＬ－３对造血功能未表现抑制的烧伤动物未显示出对造血的刺激作用。     

白细胞介素-3对放烧复合伤小鼠造血功能的影响

作者研究了ＩＬ－３对放烧复合伤动物骨髓造血功能的影响。发现３Ｔ３－ＩＬ－３细胞培养上清液中含有很高活性的ＩＬ－３。用它给放射损伤或放烧复合烧动物预防加治疗应用，对造血的刺激作用显著优于单独预防或单独治疗。对造血的这种良好作用既表现在造血实质细胞，也表现在造血基质细胞；在实质细胞中粒系祖细胞、红系早期和晚期祖细胞都有作用。ＩＬ－３对造血功能未表现抑制的烧伤动物未显示出对造血的刺激作用。     

环孢素A抑制大鼠轴索损伤后血清IL-1β的表达

目的 观察大鼠轴索损伤后血清IL-1β的表达规律,以及环孢素A(CsA)对其表达的影响,探讨CsA的神经保护机制.方法 75只健康雄性SD大鼠随机分为3组:正常对照组(A组)5只、单纯视神经牵拉伤组(B组)35只、CsA处理组(C组)35只,B、C组又分为牵拉伤后或CsA治疗后1,3,6,12 h、1,3,7 d共7个观察时相点,不同时相点各5只大鼠.光镜下观察视网膜神经节细胞(RGCs)和轴索形态学变化,并采用放射免疫方法(平衡法)检测大鼠血清中IL-1β的含量.结果 (1)B组大鼠右侧视神经牵拉伤后3 d,RGCs明显稀疏;伤后7 d,神经纤维排列紊乱,分布稀疏.C组相应的病理变化明显减轻.(2)B组大鼠伤后3,6,12 h、1 d血清中IL-1β浓度明显高于A组,6 h达到高峰,随后逐渐下降,3 d后降至A组水平.C组大鼠血清IL-1β浓度变化规律与B组相似,3,6,12 h、l d血清中IL-1β浓度明显低于B组,但6,12 h、1 d仍高于A组.结论 IL-1β长时间过度表达可能参与了轴索损伤后的继发性病理变化;CsA可能通过减轻轴索损伤后的炎症反应对轴索损伤起保护作用.     

颅脑损伤患者血清可溶性白细胞介素-2受体和肿瘤坏死因子-α的变化

目的研究颅脑损伤患者可溶性白细胞介素－２受体和肿瘤坏死因子－α在创伤感染发生机制中的作用。方法本组５３例分为ＧＣＳ＞８分组（２５例）和ＧＣＳ≤８分组（２８例）及创伤组（３３例）和创伤感染组（２０例）。于入院后第１,３,７和１４天抽取血样,运用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法测定ｓＩＬ－２Ｒ和ＴＮＦ－α含量。结果（１）ＧＣＳ≤８分组伤后第１天ｓＩＬ－２Ｒ及ＴＮＦ－α水平皆高于ＧＣＳ＞８分组和正常对照组;（２）创伤感染组ｓＩＬ－２Ｒ水平持续升高,３～７天最为显著,伤后１４天仍未降至正常水平,而创伤组无此改变;（３）创伤组和创伤感染组均见ＴＮＦ－α短暂升高。结论重型颅脑损伤后,ｓＩＬ－２Ｒ在细胞免疫功能紊乱及创伤感染的发生机制中起重要作用,而ＴＮＦ－α参与了早期病理过程。     

Effects of peritoneal lavage fluid from radiation or/and burn injured rats on the growth of hematopoietic progenitor cells

PURPOSE: To evaluate the effects of peritoneal lavage fluids from radiation injury, burn injury and combined radiation-burn injury on the growth of hematopoietic progenitor cells (HPC). MATERIALS AND METHODS: Rats were divided into four groups: A radiation group (RG), a burn group (BG), a combined radiation-burn group (CRBG) and normal control group (NG). RG and CRBG rats were irradiated with 12 Gy, and burns of 30% total body surface area were generated in group BG and group CRBG. Peritoneal lavage fluids were collected and tested for their effects on the growth of erythrocyte progenitor cells or granulocyte-macrophage progenitor cells of BALB/c mice in vitro. RESULTS: The numbers of colony forming units-erythroid (CFU-E), burst forming units-erythroid (BFU-E) and colony-forming units-granulocyte-macrophage (CFU-GM) formed after treatment with lavage fluids from BG or CRBG were significantly higher than those from NG. However, fewer CFU-E, BFU-E or CFU-GM colonies were found after treatment with lavage fluid from the RG. In lavage fluid from BG and CRBG, the concentration of interleukin-6 (IL-6), interleukin-8 (IL-8) and tumor necrosis factor alpha (TNFalpha) was increased in comparison to NG and RG. Treatment with these cytokines had similar promoting effects on the growth of hematopoietic colonies and neutralizing antibodies inhibited these effects significantly. CONCLUSIONS: Burns increase the responsiveness of the system and help the proliferation of hematipoietic progenitor cells, while radiation decreases all these responses relative to both the controls and the burn plus radiation group.     

Effects of peritoneal lavage fluid from radiation or/and burn injured rats on the growth of hematopoietic progenitor cells

Purpose:?To evaluate the effects of peritoneal lavage fluids from radiation injury, burn injury and combined radiation-burn injury on the growth of hematopoietic progenitor cells (HPC).

Materials and methods:?Rats were divided into four groups: A radiation group (RG), a burn group (BG), a combined radiation-burn group (CRBG) and normal control group (NG). RG and CRBG rats were irradiated with 12 Gy, and burns of 30% total body surface area were generated in group BG and group CRBG. Peritoneal lavage fluids were collected and tested for their effects on the growth of erythrocyte progenitor cells or granulocyte-macrophage progenitor cells of BALB/c mice in vitro.

Results:?The numbers of colony forming units-erythroid (CFU-E), burst forming units-erythroid (BFU-E) and colony-forming units-granulocyte-macrophage (CFU-GM) formed after treatment with lavage fluids from BG or CRBG were significantly higher than those from NG. However, fewer CFU-E, BFU-E or CFU-GM colonies were found after treatment with lavage fluid from the RG. In lavage fluid from BG and CRBG, the concentration of interleukin-6 (IL-6), interleukin-8 (IL-8) and tumor necrosis factor α (TNFα) was increased in comparison to NG and RG. Treatment with these cytokines had similar promoting effects on the growth of hematopoietic colonies and neutralizing antibodies inhibited these effects significantly.

Conclusions:?Burns increase the responsiveness of the system and help the proliferation of hematipoietic progenitor cells, while radiation decreases all these responses relative to both the controls and the burn plus radiation group.     

乌司他丁对重症中暑急性肺损伤的作用及机制研究

目的 观察乌司他丁对重症中暑急性肺损伤的临床疗效.方法 30例重症中暑患者按随机数字表法分为常规治疗组和乌司他丁组,每组15例,另设健康对照组(n=8).比较两组中暑患者人院时的年龄、性别、发病至接受治疗的时间以及APACHEⅡ评分等基线情况的差异,以及人院后第0、3、5天外周血白细胞计数,Murray评分和氧合指数的差别,并通过酶联免疫吸附法(ELISA)测定支气管肺泡灌洗液(BALF)与肺泡巨噬细胞培养上清炎症介质的浓度,采用免疫印迹法和实时定量PCR法检测肺泡巨噬细胞髓样细胞触发受体-1(TREM-1)表达情况.观察并比较两组患者的机械通气时间、ICU住院时间和28d病死率.结果 两组患者人院时的年龄、性别、发病至接受治疗的时间以及APACHEⅡ评分差异无统计学意义(P＞0.05).治疗后第3、5天,乌司他丁组外周血白细胞计数、Murray评分均低于常规治疗组(P＜0.05或P＜0.01),而氧合指数高于常规治疗组(P＜0.05);BALF及肺泡巨噬细胞培养上清中的TNF-α和IL-6浓度均低于常规治疗组(P＜0.05或P＜0.01),肺泡巨噬细胞TREM-1 mRNA和蛋白表达水平明显低于常规治疗组(P＜0.01或P＜0.05).乌司他丁组重症中暑患者的机械通气时间和ICU住院时间明显低于常规治疗组(P＜0.01或P＜0.05),但28d病死率两组比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 乌司他丁对重症中暑急性肺损伤具有良好的临床疗效,有利于减轻肺组织炎症反应程度,其机制可能与乌司他丁调控重症中暑肺泡巨噬细胞的炎症分泌活性及TREM-1表达有关.     

乳铁蛋白通过调节HMGB1/TLR4炎症反应改善放射性肺损伤

目的:研究乳铁蛋白对放射性肺损伤的防护作用。方法:将15只C57BL/6 J小鼠按随机数表法分为健康对照组、15 Gy照射组(单纯照射组)和乳铁蛋白联合15 Gy照射组(联合组),每组5只。联合组全程饮用10 mg/ml乳铁蛋白水溶液,3 d后单纯照射组和联合组给予单次15 Gy X射线全胸照射。于照后14 d处死,苏...