地黄多糖诱导骨髓间充质干细胞分化为神经细胞最佳浓度探索

目的探讨地黄多糖对骨髓间充质干细胞（MSCs）诱导分化为神经细胞的最佳浓度。方法利用贴壁法分离纯化MSCs，不同浓度地黄多糖诱导其向神经细胞分化，β-巯基乙醇诱导作为对照，光镜下观察细胞形态，采用免疫细胞化学方法计算神经元和胶质细胞阳性数。结果不同浓度地黄多糖诱导培养24h后均可表现为典型的神经细胞样形态，但以中浓度地黄多糖组神经细胞数最多，且神经元比例高于其他两组。结论地黄多糖诱导MSCs分化为神经元以中浓度最佳。     

怀地黄多糖免疫兴奋作用的实验研究

目的：研究怀地黄多糖的免疫兴奋作用。方法：采用环磷酰胺造模法制作免疫抑制小鼠模型，进而观察怀地黄多糖对其腹腔巨噬细胞吞噬功能、溶血素形成；溶血空斑形成、淋巴细胞转化的影响。结果：怀地黄多糖大小剂量均可使吞噬百分率、吞噬指数显著升高；可显著促进溶血素和溶血空斑形成；促进淋巴细胞的转化。结论：怀地多糖对低下的免疫功能有显著的兴奋作用。     

怀地黄多糖化学研究

采用ＤＥＡＥ－Ｃｅｌｕｌｏｓｅ及ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００柱层析,从怀地黄水提取物中分离出一多糖ＲＧ,醋酸纤维素薄膜电泳,高效凝胶渗透色谱证实,ＲＧ为单一组份,薄层层析和气相色谱分析表明,该多糖由葡萄糖、半乳糖、鼠李糖和甘露糖组成。     

地黄多糖对大鼠骨髓间充质干细胞向神经样细胞诱导分化作用的研究

目的:探讨地黄多糖体外对大鼠骨髓间充质干细胞( BMSCs)分化为神经样细胞的诱导作用.方法:以大鼠BMSCs为研究对象,采用流式细胞仪检测BMSCs表面标志,MTT法检测细胞生长曲线,当第3代细胞爬片达到80％以上汇合时,分为对照组、化学方法诱导组(5 mmol·L -1,β-mercap toethanol)、脑源性神经生长因子(10 μg·L-1,BDNF)组和地黄多糖组(200 mg·L-1)进行诱导,6h后应用免疫细胞化学染色法检测各实验组神经元巢蛋白(nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,RT-PCR检测nestin,NSE,βⅢ-微管蛋白(βⅢ-tubulin)和GFAP mRNA的表达情况.结果:经分离鉴定培养5代以内大鼠BMSCs增殖旺盛、具有较好的细胞活力;免疫细胞化学染色和RT-PCR检测结果显示,对照组不表达神经细胞标志物,各诱导组诱导后有特异性神经细胞标志物表达.其中地黄多糖组Nestin,NSE阳性细胞率分别为( 56.74±1.36)％,(73.37±1.27)％,高于化学诱导组(28.21±2.43)％,(2.31±2.72)％和神经生长因子组(31.3±1.61)％,(28.87±1.65)％,(P＜0.05);GFAP阳性细胞率(20.17±1.27)％低于化学诱导组和神经生长因子组,差异具有统计学意义(P＜0.05);化学诱导组Nestin,NSE和GFAP阳性细胞率与生长因子组比较,差异无统计学意义.结论:地黄多糖具有诱导BMSCs向神经样细胞分化的作用,主要向神经元样细胞方向诱导.     

地黄多糖的研究概况

对近年来的有关地黄多糖的研究文献进行了整理归纳。发现地黄多糖的研究较为广泛,涉及到提取分离、纯化、含量测定、结构分析以及药理学研究。     

（怀）地黄多糖对衰老模型小鼠免疫器官的影响

怀地黄多糖（Ｒｅｈｍａｎｎｉａｇｌｕｔｉｎｏｓａｐｏｌｙｓａｃｃｈ－ａｒｉｄｅ）为产于河南焦作的地黄之提取物。已报道（怀）地黄多糖有滋阴作用并有较好补血抗肿瘤作用,地黄不同制剂有一定免疫兴奋及抗衰老作用。本文报道地黄多糖对衰老小鼠免疫器官胸腺、脾脏的...     

地黄多糖的化学和药理作用研究进展

临床上应用的含地黄方剂种类众多,地黄多糖是其发挥作用的有效成分之一。本文全面总结近20年地黄多糖的化学结构、药理作用的研究进展,为地黄多糖和含地黄方剂的进一步研究与开发提供参考。检索中国知网,万方,Pub Med,Springer Link,Science Direct等国内外数据库,收集地黄多糖在化学成分、药理作用方面的文献,对其进行归纳和总结,形成综述。目前为止,从地黄中已经分离鉴定得到了相对分子质量为103~105的7种地黄多糖,由鼠李糖、葡萄糖、半乳糖、甘露糖、木糖、阿拉伯糖等多种单糖组成。药理研究表明,地黄多糖对正常动物和病理动物都有较好的抗氧化能力,并进一步发挥抗衰老、抗肿瘤的活性;可通过多种途径降低病理模型动物的血糖和血脂水平;通过影响免疫器官、免疫细胞和细胞因子等增强正常动物和病理动物的免疫功能;促进正常动物和病理动物的骨髓造血作用;直接或间接发挥预防癌变和抗肿瘤的作用;保护脂肪间充质干细胞并促进其增殖;通过多种途径诱导骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化,且主要的方向为神经元样细胞,并与正常神经元高度相似;还有抗疲劳、抗焦虑的作用。今后,仍需要分析地黄多糖的化学结构,对地黄多糖进行深入的毒理和临床药理研究,明确其作用机制,为地黄多糖在临床的扩大应用和安全使用奠定基础。     

5种中药多糖及其含药血清对MSCs增殖的影响

目的：探讨当归多糖、何首乌多糖、熟地多糖、枸杞多糖、黄芪多糖及其含药血清对骨髓间充质干细胞（MSCs）增殖的影响。方法：分离、培养大鼠MSCs,各中药多糖及其含药血清,分别加入培养基诱导72h后,MTT法检测大鼠MSCs增殖情况。结果：1mg/mL黄芪多糖及其10%含药血清对大鼠MSCs增殖的影响,与相应浓度的空白组及空白血清组比较,差异有显著性意义（P〈0.05）。结论：黄芪多糖及其含药血清可促进大鼠MSCs增殖。     

道地产区地黄不同品种间多糖量的比较

目的比较道地产区不同品种地黄中多糖的量。方法苯酚-硫酸比色法,线性范围5.3～106.0μg/mL(r=0.999 7)。结果以葡萄糖计,北京1号、大红袍、红薯王、北京2号、9302、狮子头、金状元、85-5地黄中多糖质量分数分别为:12.73%、10.04%、8.32%、7.10%、4.87%、4.11%、2.48%、1.58%。结论不同品种地黄中多糖的量差异明显,其中以北京1号中多糖的量最高。     

地黄炮制前后总多糖含量的比较

采用硫酸—苯酚法测定生地黄及其炮制品中多糖的含量 ,结果表明 :生地黄中含多糖为 16.5 9% ,其炮制品熟地黄含多糖为 3.33%。     

地黄多糖的提取纯化及药理作用研究进展

地黄多糖是地黄Rehmannia glutinosa的主要活性成分之一,主要由葡萄糖、鼠李糖、甘露糖等单糖组成。地黄多糖的提取方法有很多种,不同的提取方法具有其独特的优势并且影响了地黄多糖的得率。纯化是获取地黄多糖不可或缺的步骤,经过除蛋白、色素等操作,可以保证地黄多糖的纯度,使其后续研究更加准确。地黄多糖及其衍生物具有免疫调节、神经调节、抗氧化、抗炎、抗肿瘤、治疗糖尿病等多种药理功能,具有潜在的药用价值。综述了地黄多糖的提取纯化方法、药理活性和载体新剂型等方面的研究进展,为地黄多糖及其衍生物的进一步研究提供了基础。     

地黄多糖对东莨菪碱诱导小鼠学习记忆能力障碍的改善作用及其机制

目的 研究地黄多糖对东莨菪碱诱导小鼠学习记忆能力障碍的改善作用及机制.方法 小鼠随机分为正常组,模型组、多奈哌齐组(3 mg/kg)及地黄多糖高、低剂量组(30、15 mg/kg),灌胃给药28 d,除正常组外其余各组在给药第24天时腹腔注射3 mg/kg氢溴酸东莨菪碱,连续5d.检测学习记忆能力,ChAT(乙酰胆碱转...     

地黄多糖对H_2O_2诱导乳鼠心肌细胞损伤的保护作用及其机制研究

目的:研究地黄多糖(rehmannia polysaccharide)对H_2O_2诱导乳鼠心肌细胞损伤的保护作用及其机制研究。方法:无菌环境下分离并培养SD大鼠乳鼠心肌细胞72h后随机分为:空白对照组、H_2O_2干预组、地黄多糖(10、20和40μg/ml)+H_2O_2干预组和舒血宁注射液(SXN,100μg/ml)+H_2O_2干预组(阳性对照组),每组设10个复孔。各组细胞经药物干预6h后,通过光学纤维镜观察细胞形态并采用MTT法检测细胞存活率;检测培养液中心肌酶:谷草转氨酶(AST)、磷酸肌酸激酶(CPK)、乳酸脱氢酶(LDH)活性;测定细胞中抗氧化酶:超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量;通过酶联免疫(ELISA)法测定培养液中炎症因子:肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-6(IL-6)含量水平;通过Flow Cytometry检测细胞凋亡状况并计算凋亡率,通过RT-PCR检测细胞中AKT mRNA、bcl-2 mRNA、Bax mRNA表达并计算bcl-2/Bax表达比值。结果:较H_2O_2干预组,地黄多糖(20、40μg/ml)+H_2O_2干预组乳鼠心肌细胞形态明显好转,细胞存活率显著升高,培养液中AST、CPK、LDH活性显著降低,细胞中SOD、CAT活性显著升高且MDA含量显著降低,培养液中TNF-α、IL-1、IL-6含量显著降低,细胞凋亡状况明显改善、凋亡率显著降低,bcl-2 mRNA表达显著上调且Bax mRNA表达显著下调、bcl-2/Bax表达比值显著升高,其中地黄多糖40μg/ml+H_2O_2干预组AKT mRNA表达显著上调。结论:地黄多糖能够有效改善H_2O_2诱导损伤的乳鼠心肌细胞生存状态、提高细胞存活率、降低细胞凋亡率,提示地黄多糖对H_2O_2诱导损伤的乳鼠心肌细胞具有保护作用;其作用机制可能与地黄多糖能够有效改善抗氧化酶活性、抑制氧化应激损伤,调节凋亡相关基因表达,抑制炎症反应相关。     

地黄饮子的实验研究进展

地黄饮子为古代经典方剂。近年来临床和实验研究表明,地黄饮子在防治阿尔茨海默病、血管性痴呆、中风及后遗症等疾病方面有一定疗效,并且对神经系统具有较好的保护作用,本文就近年来的实验研究进行论述。     

地黄明目片的质量标准研究

地黄明目片系我院的协定处方。收载于《湖北省医院制剂标准》,是由地黄、枸杞子、女贞子、当归、五味子、川芎等制成的片剂,具滋肝健脾补肾、益气养血通络、祛障明目之功效。用于治疗视物变形,肝虚内障,缓解视疲劳和青盲的后期治疗。由于原标准中鉴别项目比较简单,不能较完全反应药品的内在质量。     

人参多糖和当归多糖诱导人内皮细胞表达造血生长因子的实验研究

目的：研究和论证人参和当归促进血细胞生成及“补气生血”的现代生物学机理。方法：采用造血生长因子生物活性检测与免疫细胞化学等技术，研究经人参多糖（GPS）和当归多糖（APS）诱导的人脐静脉内皮细胞株（Ecv304)上清液（HEcCM)中造血生长因子的活性及粒单系集落刺激因子（GM－CSF）、IL－3和IL－6在内皮细胞的表达。结果：GPS和APS体外诱导制备的HFcCM能显著促进粒单系造血祖细胞（CFU－GM）和多向性造血祖细胞（CFU－Mix)的增殖；同时，GPS和APS能不同程度地促进内皮细胞GM－CSF、IL－3和IL－6蛋白表达。结论：GPS和APS能上调造血微环境中的内皮细胞分泌造血生长因子来调节血细胞的生成。     

地黄饮子对D-半乳糖所致脑衰老小鼠学习记忆行为的影响

实验采用D -半乳糖 (D -gal) 80mg·kg 1·d 1小鼠颈部皮下注射 ,造成拟脑老化模型 ,并以古方地黄饮子煎汁灌胃 5 0天 ,观察该方对小鼠生命活动状态 (外观特征 )和学习记忆能力 (跳台法 )的影响作用。实验结果表明 ,地黄饮子可以改善D -gal所致脑衰老小鼠的学习记忆能力。     

地黄多糖对局灶性脑缺血小鼠线粒体过氧化损伤的影响

目的:研究地黄多糖对小鼠局灶性脑缺血的保护作用及脑缺血后小鼠线粒体过氧化损伤的影响。方法:采用线栓法复制小鼠局灶性大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,将小鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组,地黄多糖5、10、20mg/kg组;各组于造模后立即腹腔注射给药,考察各组小鼠神经功能评分,感觉功能评价,脑梗死体积,脑含水量,测定MCAO小鼠大脑缺血区细胞线粒体内超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)及Na+-K+-ATPase及Ca2+-Mg2+-ATPase的活性。结果:与假手术比较,模型组极显著增高MCAO小鼠神经功能评分、前肢踩空次数、脑含水量、脑指数及脑缺血体积;极显著降低缺血区线粒体内SOD、Na+-K+-ATPase和Ca2+-Mg2+-ATPase的活性;极显著增加缺血区线粒体内MDA的含量。与模型组比较,地黄多糖5、10、20mg/kg组,均能不同程度降低MCAO小鼠神经功能评分、前肢踩空试验脑含水量、脑指数及脑缺血体积,以20mg/kg作用极显著;地黄多糖20mg/kg能极显著增强缺血区线粒体内SOD、Na+-K+-ATPase和Ca2+-Mg2+-ATPase的活性,极显著降低缺血区线粒体内MDA的含量。结论:地黄多糖能明显改善脑缺血后细胞能量代谢障碍、增强脑细胞抗氧化能力,对局灶性脑缺血小鼠具有明显保护作用。     

地黄饮子治疗阿尔茨海默病的实验研究进展

地黄饮子出自《黄帝内经·素问·宣明论方》,其中君药肉苁蓉、巴戟天、熟地黄、山茱萸,温壮肾阳、滋补肾阴、填精益髓;臣药附子、肉桂、麦冬、石斛、五味子,保养真元、滋阴敛液;佐药远志、石菖蒲、茯苓,豁痰开窍;使药薄荷、生姜、大枣和其营卫。阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)是神经退行性疾病,在中医学中属于呆病的范畴。AD发病机制复杂,涉及多个病理环节,且因其发病隐匿,进程不可逆,危害大、致死致残率高。基于中医理论的中药复方在治疗AD中具有独特优势。近年研究表明,地黄饮子临床治疗AD具有明确疗效,其药理作用机制包括保护线粒体结构与功能、改善能量代谢、抗氧化、调节β淀粉样蛋白前体蛋白(beta amyloid precursor protein,APP)加工和β淀粉样蛋白(amyloidβprotein,Aβ)代谢、抗神经元凋亡、调节神经递质、保护突触结构与功能及抗炎作用等多个方面。本文总结近年来地黄饮子治疗AD作用机制的实验研究进展做一综述。     

黄芪多糖抗流感病毒的实验研究

目的：观察黄芪多糖抗流感病毒的作用。方法：观察黄芪多糖对流感病毒性肺炎小鼠肺指数及肺指数抑制率的作用以及对小鼠体内流感病毒增殖的影响。结果：黄芪多糖溶液100g/L浓度，小白鼠滴鼻给药，对流感病毒引起的小白鼠肺炎实变有明显的抑制作用，200g/L,100g/L浓度组能抑制流感病毒增殖（与病毒对照组比较P＜0．05或P＜0．01），200g/L浓度组能延工流感病毒感染的小鼠生存时间。结论：黄芪多糖有明显的抗流感作用。