血管内皮生长因子水平与大鼠支气管哮喘模型发病机制关系的研究

目的 探讨大鼠支气管哮喘（简称哮喘）模型支气管肺泡灌洗液（BALF）中血管内皮生长因子（VEGF）水平与哮喘嗜酸粒细胞（EOS）炎症及气道血管通透性之间的关系,以及吸人性激素的作用.方法 SD大鼠18只,随机分为对照组,哮喘模型组和地塞米松干预组各6只.以腹腔注射1%卵蛋白致敏和2%卵蛋白雾化吸入激发复制哮喘模型,干预组在每次激发前给予地塞米松干预.检测大鼠气道反应性,BALF中EOS百分数,VEGF（酶联免疫吸附法）及气道血管渗透指数.结果 BALF中EOS百分数,VEGF水平,气道反应性及气道血管渗透指数哮喘组明显高于对照组（P〈0.05或P〈0.01）;经过6周吸人性激素治疗后,地塞米松组BALF中VEGF水平,EOS百分数,气道反应性及气道血管渗透指数较哮喘组明显降低（P〈0.05或P〈0.01）,与对照组比较差异无统计学意义.相关分析显示,BALF中VEGF水平与EOS百分数呈正相关（r=0.76,P〈0.01）;VEGF水平与气道血管渗透指数呈正相关（r=0.84,P〈0.01）;VEGF水平与PC50呈负相关（r=-0.68,P〈0.01）.结论 大鼠哮喘模型BALF中VEGF水平增高,并与气道EOS百分数,气道反应性和气道血管渗透指数密切相关.该结果提示VEGF可能在哮喘的发病机制中起着重要作用.     

穿心莲内酯对糖尿病大鼠血糖及胰腺胰岛素样表皮生长因子-1蛋白的影响

目的研究穿心莲内酯对糖尿病大鼠血糖及胰腺胰岛素样表皮生长因子-1（IGF-1）蛋白的影响。方法大鼠尾静脉注射链脲菌素建立1型糖尿病模型,将模型组大鼠分为糖尿病对照组、穿心莲内酯低剂量组[100mg／（kg·d）]、高剂量组[200mg／（kg·d）]3组,并设正常对照组。给药2周后,断尾采血检测各组大鼠血糖,HE染色观察大鼠胰腺形态学变化,免疫组织化学法检测各组大鼠胰腺胰岛素样表皮生长因子-1蛋白表达。结果与正常对照组比较,各组大鼠血糖明显升高（P〈0．05）,模型组大鼠胰腺组织胰岛明显减少,胰腺IGF-1蛋白表达比正常对照组明显减少。穿心莲内酯高、低剂量组与模型对照组比较,血糖随药物浓度升高而降低（P〈0．05）,胰腺组织病理损害减轻,随药物浓度升高胰腺IGF-1蛋白表达增加。结论穿心莲内酯可降低糖尿病大鼠血糖,显著改善糖尿病大鼠胰腺组织损伤,其作用机制可能与上调IGF-1蛋白表达有关。     

烟曲霉暴露对支气管哮喘大鼠气道黏蛋白MUC2表达的影响

目的研究烟曲霉暴露对支气管哮喘（简称哮喘）大鼠气道黏蛋白MUC2表达的影响。方法70只雄性Wistar大鼠随机数字表法分为7组（每组10只）：慢性哮喘（A）组、慢性哮喘＋烟曲霉孢子吸入1周（B）组、3周（C）组和5周（D）组、慢性哮喘＋生理盐水吸入（E）组、卵清白蛋白（0VA）致敏生理盐水激发（F）组和OVA致敏生理盐水激发＋烟曲霉孢子吸入（G）组。测定各组大鼠的基础气道阻力和气道阻力变化率,ELISA法测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中IL-13水平,RT—PCR法检测肺组织MUC2mRNA水平,免疫组织化学染色测定气道上皮细胞MUC2表达强度。结果D组大鼠基础气道阻力为（1．06±0．28）cmH20·ml^-1·S^-1、气道阻力变化率为（85．69±5．68）％、BALF中IL-13为（197±34）mg／L、肺组织MUC2mRNA／β-actinmRNA为（3．0±0．6）、气道上皮细胞MUC2表达强度（A值）为（871±70）均高于A组[（o．52±0．13）cmH20·ml^-1·S^-1、（31．62±3．62）oA、（54±9）mg／L、（1．8±0．4）、（202±36）]、B组[（O．54土0．14）cmH20·ml^-1·S^-1、（35．90±2．62）％、（96土16）mg／L、（1．9±0．3）、（258±48）]、C组[（o．89±0．22）cmH20·ml^-1·S^-1、（60．91±4．26）％、（136±22）mg／L、（2．3±0．5）、（546土54）]和E组[（60．91±4．26）C1TIH20·ml^-1·S^-1、（31．64±3．47）％、（37±8）mg／L、（1．7±0．4）、（188±39）]（P〈O．01或P〈O．05）;A组高于F组[（0．33±0．08）cmH20·ml^-1·S^-1、（16．85±3．62）％、（23±6）mg／L、（O．5±0．2）、（87±18）]和G组[（O．34±0．12）cmH20·ml^-1·S^-1、（16．52±3．34）％、（25±6）mg／L、（O．5±0．1）、（88±15）]（P〈0．01或P〈0．05）;大鼠肺组织MUC2mRNA／β-actinmRNA和气道上皮细胞MUC2表达强度（A值）均与BAI,F中IL-13水平正相关（r=0．648,P〈0．05;r=0．676,P〈i0．05）,与气道阻力变化率正相关（r=0．644,P〈0．05;r=0．584,P〈0．05）。结论慢性烟曲霉暴露可上调哮喘大鼠气道黏蛋白MUC2基因表达,气道黏液分泌增多,黏稠度和黏滞度增加,导致气道反应性增高。     

山茱萸环烯醚萜苷对局灶性脑缺血大鼠血管内皮生长因子及其受体表达的影响

目的研究山茱萸环烯醚萜苷（CIG）对局灶性脑缺血大鼠神经功能和血管内皮细胞生长因子（VEGF）及其受体FLK-1表达的影响。方法取成年雄性SD大鼠115只,随机分为假手术组、模型组及CIG治疗组。治疗组又分为20、60和180mg／kg剂量组,每组23只大鼠。采用大脑中动脉线栓法制作大鼠局灶性脑缺血模型,造模后3h开始灌胃给药。造模后7、14和28d,采用改良神经功能缺损评分（mNSS）评价大鼠的神经功能,用免疫组化法和Western Blot法检测VEGF蛋白表达。用RT—PCR方法检测VEGF及其受体FLK-1的mRNA表达。结果①造模后7、14和28d,与模型组相比,CIG 60和180mg／kg组大鼠mNSS均显著降低（F=2．832,F=4．970,F=2．661,均P〈0．05）;②造模后7d,模型组大鼠大脑皮质VEGF蛋白与假手术组相比无明显变化,14和28d时,VEGF蛋白表达降低;与模型组相比,7、14和28d时,CIG 60和180mg／kg组VEGF蛋白表达显著增加（F=1．202,F=1．705,F=2．189,均P〈0．05）;③造模后28d,CIG 60和180mg／kg组大鼠VEGF阳性细胞染色面积显著增加（F=13．249,均P〈0．05）;④造模后7d,与模型组相比,CIG 60和180mg／kg组大鼠大脑皮质VEGF-mRNA表达亦显著增加（F=2．389,均P〈0．05）;CIG 60和180mg／kg组FLK-1 mRNA的表达也显著增加（F=3．657,均P〈0．05）。结论CIG能明显改善局灶性脑缺血大鼠的神经功能,其机制可能与CIG促进VEGF蛋白的表达有关。     

血管内皮生长因子及转化生长因子-β联合检测在老年结核性与恶性胸腔积液中的价值

目的 监测老年结核性胸腔积液和老年恶性胸腔积液中血管内皮生长因子（VEGF）和转化生长因子-β（TGF-β）在鉴别老年结核性和老年恶性胸腔积液中的价值。方法 老年结核性胸腔积液组31例，老年恶性胸腔积液组30例，分别行胸腔闭式引流术。采用酶联免疫吸附法（ELISA）法检测2组患者的胸液中VEGF及TGF-β的水平。结果 恶性胸腔积液中VEGF及TGF-β的水平呈正相关（r=0．438，P〈0．05）。恶性胸腔积液中VEGF及TGF-β水平[（269±62）ng／L，（125．5±12．0）mg／L]较结核性胸腔积液[（104±55）ng／L，（81±23）mg／L]升高，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论 VEGF及TGF-β在老年恶性胸腔积液的形成起重要作用，对恶性胸腔积液与结核性胸腔积液的鉴别具有重要价值。     

血管内皮生长因子在支气管哮喘小鼠气道中表达变化及其对气道重构的影响

目的研究血管内皮生长因子（VEGF）在支气管哮喘（哮喘）小鼠气道中表达变化及其对气道重构的影响。方法将40只雌性BALB/c小鼠随机分为4组（每组10只）：生理盐水对照组（A组）;哮喘组（B组）;VEGF受体抑制剂干预组（C组）;地塞米松干预组（D组）。用鸡卵白蛋白致敏和雾化激发建立慢性哮喘小鼠模型。收集小鼠的支气管肺泡灌洗液（BALF）,行白细胞和嗜酸粒细胞（EOS）计数;ELISA法检测BALF和血清中VEGF的水平;用SABC免疫组化法检测VEGF在肺组织的表达水平并行抗Ⅷ因子免疫组化染色在显微镜下计数气管黏膜固有层、黏膜下层血管密度;用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测VEGF mRNA的表达变化;采用医学图像分析软件测定支气管管壁厚度（WAt/Pbm）及肺组织切片中的血管数。结果B组BALF中白细胞总数、EOS百分比、VEGF浓度及血清中VEGF浓度明显高于A组,差异有统计学意义（P〈0.01）;C、D两组与B组比较差异均有统计学意义（P〈0.01）,C组与D组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。抗Ⅷ因子免疫组化染色及图像分析结果显示：B组气管血管密度、WAt/Pbm及肺组织切片中的血管数明显高于A组（P〈0.01）,C、D两组与B组比较均显著减少（P〈0.01）,C组与D组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。免疫组化及RT-PCR检测结果显示：B组小鼠肺组织中的VEGF表达较A组显著增加（P〈0.01）,C、D两组小鼠肺组织中VEGF的表达与B组比较均显著减少（P〈0.01）,C组与D组比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论VEGF在小鼠哮喘模型气道及肺组织内过度表达,参与了哮喘的发病和气道重构的过程,VEGF受体抑制剂可以降低哮喘模型的气道炎症,减轻气道重构的程度。     

血管内皮生长因子水平与大鼠支气管哮喘模型发病机制关系的研究

目的 探讨大鼠支气管哮喘(简称哮喘)模型支气管肺泡灌洗液(BALF)中血管内皮生长因子(VEGF)水平与哮喘嗜酸粒细胞(EOS)炎症及气道血管通透性之间的关系,以及吸入性激素的作用.方法 SD大鼠18只,随机分为对照组,哮喘模型组和地塞米松干预组各6只.以腹腔注射1%卵蛋白致敏和2%卵蛋白雾化吸入激发复制哮喘模型,干预组在每次激发前给予地塞米松干预.检测大鼠气道反应性,BALF中EOS百分数,VEGF(酶联免疫吸附法)及气道血管渗透指数.结果 BALF中EOS百分数,VEGF水平,气道反应性及气道血管渗透指数哮喘组明显高于对照组(P<0.05或P<0.01);经过6周吸入性激素治疗后,地塞米松组BALF中VEGF水平,EOS百分数,气道反应性及气道血管渗透指数较哮喘组明显降低(P<0.05或P<0.01),与对照组比较差异无统计学意义.相关分析显示,BALF中VEGF水平与EOS百分数呈正相关(r=0.76,P<0.01);VEGF水平与气道血管渗透指数呈正相关(r=0.84,P<0.01);VEGF水平与PC50呈负相关(r=-0.68,P<0.01).结论 大鼠哮喘模型BALF中VEGF水平增高,并与气道EOS百分数,气道反应性和气道血管渗透指数密切相关.该结果提示VEGF可能在哮喘的发病机制中起着重要作用.     

血管内皮生长因子、血小板源性生长因子-BB与2型糖尿病患者血糖波动及微血管病变的关系

目的观察糖化血红蛋白（HbAlC）〈7．0％的2型糖尿病患者血糖波动与糖尿病微血管病变（视网膜病变、糖尿病肾病）及血清血管内皮生长因子（VEGF）、血小板源性生长因子-BB（PDGF—BB）水平之间的关系，探讨其在HbAlC达标患者中的相互影响机制。方法选取2010年10月至2012年8月在黑龙江省医院内分泌科就诊的2型糖尿病患者100例，其中男52例、女48例，年龄40～66岁。根据是否合并糖尿病微血管病变分为单纯2型糖尿病组[A组，n=30，男14例，女16例，年龄（50±11）岁]，糖尿病肾病组[B组，n=38，男20例，女18例，年龄（52±10）岁]和糖尿病视网膜病变组[C组，n=32，男18例，女14例，年龄（53±13）岁]。另以同期于黑龙江省医院进行体检的25名健康者为正常对照组[Con组，n=25，男12例，女13例，年龄（48±9）岁]。人院前糖尿病患者均使用药物治疗。所有参试者均测定空腹血糖浓度（FPG）、总胆固醇（TC）、甘油i酯（TG）、低密度脂蛋白胆同醇（LDL—C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL—C）、餐后2h血糖浓度（2hPG）、24h尿微量白蛋白（24h尿ALB）和HbAlc。应用动态血糖监测系统连续监测血糖3d，计算平均血糖（MBG）、平均血糖标准差（SDBG）、平均血糖波动幅度（MAGE）、日内最大血糖波动幅度（LAGE）、日间血糖平均绝对差（MODD）和曲线下面积（AUC）。采用酶联免疫吸附法分别检测血清中VEGF和PDGF—BB水平。计量资料组间比较采用t检验，多组间比较采用单因素方差分析，糖尿病微血管并发症的影响因素采用logistic回归分析，PDGF．BB、VEGF相关因素采用多元线性回归分析。结果（1）B组PDGF—BB水平高于A组和Con组[分别为（53±12）、（31±6）、（26±4）μg／ml，F=9．56，P〈0．05]；C组VEGF水平高于A组和Con组[分别为（217±57）、（105±12）、（74±10）μg／ml，F=8．13，P〈0．05]。（2）动态血糖监测指标B组与A组比较，SDBG、LAGF、MAGE、MODD、AUC明显升高（t=2．57、3．46、5．75、3．59、4．28，均P〈0．05），C组与A组比较，SDBG、LAGF、MAGE、MODD、AUC明显升高（t=3．29、3．77、5．38、4．54、3．16，均P〈0．05），而MBG在3组间的差异无统计学意义，均P〉0．05。（3）logistic回归分析显示PDGF-BB、VEGF及血糖波动是糖尿病微血管并发症独立危险因素。分别以PDGF-BB、VEGF为因变量，以血糖波动指标SDBG、LAGF、MAGE、MODD、AUC及2hPG为自变量，采用多元线性回归分析可能影响PDGF-BB、VEGF的相关因素，结果显示，MAGE、SDBG和2hPG对PDGF-BB、VEGF影响最大。结论2型糖尿病患者微血管病变的发生发展与血糖波动具有明显相关性，血糖波动可导致血清血管内皮生长因子和血小板源性生长因子-BB水平增高，从而参与糖尿病视网膜病变、糖尿病肾病等微血管病变的进展。     

血管内皮生长因子与慢性支气管炎合并肺气肿大鼠早期肺动脉重构关系的研究

目的研究血管内皮生长因子（VEGF）在慢性支气管炎合并肺气肿早期（非低氧血症期）肺动脉重构中的作用及N-乙酰半胱氨酸（NAC）的抗氧化作用对其的影响。方法24只健康雄性Wistar大鼠随机分为4组,每组6只：假吸烟组（A组）、慢性支气管炎合并肺气肿组（B组）、NAC预防组（C组）、NAC治疗组（D组）,B、C及D组采用两次气管内注入脂多糖（LPS）及烟熏4周法制备慢性支气管炎合并肺气肿大鼠模型,C组在烟熏及气管内注入LPS前每天给予NAC（50mg／只）灌胃,D组在第15～28天烟熏前每天给子NAC（50mg／只）灌胃。各组作血气分析、对肺组织进行苏木精-伊红染色、维多利亚蓝＋VG（Van—Gieson）染色观察气道炎症、肺泡面积改变、肺血管改变及采用免疫组化法观察VEGF的表达情况。结果与A组比较,B组各大鼠小气道出现组织细胞损伤、管壁炎症细胞浸润及平均肺泡面积增大（P〈0.05）,符合慢性支气管炎合并肺气肿的病理改变;B组动脉氧分压、氧饱和度及二氧化碳均在正常范围。与A组比较,B组肺血管管壁增厚、管腔缩小（P〈0．01）,且肌化动脉、部分肌化动脉比率增加（P〈0．01）,VEGF在肺动脉周围表达增多（P〈0.01）。而C组及D组经NAC抗氧化干预后肺血管管壁增厚及管腔缩小减轻（P〈0．05）,并且肌化动脉、部分肌化动脉比率减少（P〈0．01）,肺动脉周围VEGF表达比B组减少（P〈0．01）。结论由吸烟及LPS诱导的大鼠慢性支气管炎合并肺气肿早期（非低氧皿症期）VEGF表达增多参与了肺动脉重构,NAC可抑制肺动脉重构与其通过抗氧化作用降低VEGF表达有关。     

慢性阻塞性肺疾病大鼠模型气道重塑及生长因子的研究

目的 观察慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠模型气道重塑的特点及在肺功能损害中的作用,探讨转化生长因子β1（TGF－β1）、表皮生长因子（EGF）及碱性成纤维细胞生长因子（b-FGF)与气道重塑的关系及不同药物干预的影响。方法 两次气管内注入脂多糖（LPS）及每日熏香烟的复合刺激法建立大鼠COPD模型（模型组）12只,TGF－β1单抗组6只于制作模型后第6、19d经尾静脉注射TGF－β1单抗各0．5mg。其它各药物干预组于制作模型第8d起分别雾化吸入布地奈德（布地奈德组,12只）、溴化异丙托品（溴化异丙托品组,12只）和肝素（肝素组,6只）溶液。4周后检测小支气管平滑肌及胶原厚度,用免疫组化法及原位杂交法观察各生长因子在支气管肺内的表达,用放免法检测血清和BALF中细胞外基质（ECM）成分Ⅲ型前胶原（PCⅢ）、层粘连蛋白（Ln)及透明质酸（HA）。结果 模型组小支气管平滑肌及胶原纤维较对照组增厚,其厚度均与通气功能指标0．3秒用力呼气容积（FEV0．3）呈显著负相关;模型组与TGF－β1单抗组比较,小支气管及小动脉胶原增生明显,与肝素组比较,小支气管平滑肌厚度增加。大鼠模型组血清、BALF中PCⅢ,Ln及HA均较对照组有不同程度增高;TGF－β1、EGF及b-FGF在支气管粘膜上皮等组织表达显著增强。各药物干预组PⅢ,Ln及HA在不同程度上低于模型组。结论 模型组小支气管平滑肌及胶原纤维显著增厚,构成气道重塑的主要病理基础;ECM过度沉积是COPD的显著特点,TGF－β1、EGF及b-FGF在气道重塑及肺小动脉重建中可能起重要作用,针对TGF－β1等生长因子进行干预、长期雾吸肝素,有可能为COPD气道重塑的防治提供线索。     

热休克因子1在支气管哮喘中的表达

目的观察支气管哮喘（简称哮喘）小鼠肺组织中热休克因子1（heatshockfactor-1,HSF-1）的表达及其在哮喘中的作用。方法32只SPF级BALB／c小鼠随机分为正常对照组（N组）、急性哮喘组I（A组）、急性哮喘组Ⅱ（B组）、慢性哮喘组（C组）4组,每组8只。用10％鸡卵白蛋白（ovalbumin,OVA）致敏和1％OVA激发小鼠建立哮喘模型。HE染色鉴定模型;免疫组织化学、Western-blot法分析各组小鼠肺组织中HSF-I的表达和定位情况。结果支气管肺泡灌洗液（bronchoalvcolarlavagefluid,BALF）分析提示哮喘组嗜酸粒细胞绝对计数及分类计数较N组皆有显著增高（Pd0．05）;HE染色提示哮喘组与N组相比出现嗜酸粒细胞浸润增多、纤毛脱失、黏液栓形成等改变;免疫组织化学结果显示HSF-1在哮喘模型各组小鼠表达呈阳性结果,主要定位在支气管上皮细胞、部分肺泡上皮细胞和炎症细胞中,B组表达阳性信号最强,而在N组中表达较弱;Westernblot检测发现HSF-1在哮喘模型组表达量较对照组为高,灰度值通过单因素方差分析,差异具有统计学意义（P〈0．05）,其中B组的表达量较A组高,差异具有统计学意义（Pd0．05）。结论HSF-1在哮喘小鼠肺组织中主要表达于小鼠的支气管上皮细胞,部分肺泡上皮细胞和炎症细胞;HSF-1在哮喘中表达增高,且表达量与炎症的严重程度相关。     

血管内皮生长因子受体抑制剂对小鼠支气管哮喘模型气道炎症和气道重塑的影响

目的研究血管内皮生长因子(VEGF)受体抑制剂对变应性气道炎症和气道重塑的影响,阐明VEGF与支气管哮喘(简称哮喘)以及气道重塑的关系。方法BALB/c小鼠按随机数字表法分为正常对照组(A组)、哮喘模型组(B组)、VEGF受体抑制剂治疗组(C组),每组各10只。用酶联免疫吸附测定(ELISA)法对各组小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)和血清中VEGF进行定量分析;用免疫组化法检测VEGF在小鼠肺组织内的表达水平。采用医学图像分析软件测定支气管管壁厚度(WAt/P i)、支气管平滑肌厚度(WAm/P i)、支气管平滑肌细胞计数(N/P i)及肺组织切片中的血管计数、血管壁平滑肌厚度、血管壁平滑肌细胞计数。结果BALF中细胞总数和嗜酸粒细胞比值B组分别为(142±63)×107/L、98.0±46.9,A组分别为(30±14)×107/L、0.7±1.1,C组分别为(41±17)×107/L、4.9±3.5,A组和C组BALF中细胞总数和嗜酸粒细胞比值分别与B组比较差异有统计学意义(P均<0.01)。B组BALF中上清液和血清中VEGF水平分别为(55±26)pg/m l、(72±26)pg/m l,A组分别为(37±9)pg/m l、(49±18)pg/m l,C组分别为(34±3)pg/m l、(43±19)pg/m l,A组与B组、C组与B组间比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。免疫组化结果显示,B组大部分支气管平滑肌、黏膜上皮细胞、肺泡上皮细胞和血管周围VEGF均呈阳性表达,而A组和C组几乎没有VEGF的表达。图像分析显示,B组WAt/P i、WAm/P i、N/P i分别为(17±5)μm2/μm、(6.3±2.2)μm2/μm、(0.050±0.020)个/μm,A组分别为(8±3)μm2/μm、(3.2±0.8)μm2/μm、(0.027±0.017)个/μm,A组与B组比较差异有统计学意义(P分别<0.01、0.05)。B组和A组血管计数分别为(19±3)个、(10±5)个,A组与B组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。经抑制剂治疗后C组WAm/P i、血管计数分别为(4.5±1.3)μm2/μm、(11±3)个,C组与B组比较差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论VEGF在小鼠哮喘模型气道及肺内过度表达,并参与了哮喘的发病和气道重塑过程。VEGF受体抑制剂可明显改善哮喘小鼠的变应性气道炎症和气道重塑的病理生理过程。     

睾酮抑制高盐喂养下雄性大鼠血管内皮生长因子的表达和释放

目的探讨不同水平睾酮对高盐饮食下雄性大鼠血管内皮生长因子的影响。方法雄性Wistar大鼠32只随机分为4组：假手术组（Sham组）,去势组（Cas组）,去势后补充睾酮组（TC组）,去势后补充睾酮和氟他胺组（FTC组）。每组8只。各组大鼠均以8%氯化钠高盐颗粒饲料喂养;Sham组施以假手术,Cas、TC及FTC组均施以去势手术。TC组及FTC组予丙酸睾酮2mg/kg、隔日1次皮下注射,FTC组同时予氟他胺1mg/kg、每日1次灌胃,持续8周。8周后采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定各组血清中睾酮、血管内皮生长因子（VEGF）的浓度,实时定量PCR（RT-PCR）测定血管内皮中VEGF mRNA的表达水平。结果（1）Cas组睾酮浓度[（0.26±0.02）μg/L]与Sham组[（3.15±0.54）μg/L]相比明显下降,而FTC组[（5.47±1.29）μg/L]、TC组[（2.80±0.30）ng/L]则明显升高（均P＜0.01）;（2）与Sham组的血清VEGF浓度[（20.837±13.823）ng/L]相比,Cas组[（47.246±19.733）ng/L, P＜0.01]和FTC组[（46.043±22.607）ng/L,P＜0.05]明显升高,TC组[（22.870±12.057）ng/L]则无明显差异（P＞0.05）;（3）与Sham组相比,Cas组和FTC组血管内皮细胞VEGF mRNA表达水平均显著降低（均P＜0.01）,而TC组无显著差异（P＞0.05）。结论高盐饮食下,睾酮水平增高抑制血管内皮生长因子的表达和释放。     

冬虫夏草对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞色素上皮衍生因子和血管内皮生长因子表达的影响

目的观察冬虫夏草对高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞色素上皮衍生因子（PEDF）和血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响,探讨其肾脏保护的作用机制。方法35只8周龄清洁级雄性sD大鼠,体重260～280g,根据体重按随机数字表法分为正常血清组（n=18）、低剂量虫草提取液喂养组（5g·kg^-1·d^-1,n=8）和高剂量虫草提取液喂养组（10g·kg^-1·d^-1,n=9）,采用生理盐水及不同剂量虫草提取液灌胃8d后,分离静脉血提取对照血清及不同浓度的冬虫夏草含中药血清。体外培养HBZY-1大鼠肾小球系膜细胞,之后分别加入正常血糖正常血清[正常血糖组（NC组）：5．6mmol／L葡萄糖＋10％胎牛血清（FBS）＋1％正常大鼠血清]、高血糖正常血清[高血糖组（HG组）：30．0mmol／L葡萄糖＋10％FBS＋1％正常大鼠血清]、低剂量虫草含药血清[低药组（LD）：30．0mmol／L葡萄糖＋10％FBS＋1％低剂量虫草含药血清]和高剂量虫草含药血清[高药组（HD）：30．0mmol／L葡萄糖＋10％FBS＋1％高剂量虫草含药血清]进行培养,采用逆转录．聚合酶链反应（RT—PCR）测定各组细胞PEDF及VEGFmRNA的表达,酶联免疫吸附试验（ELISA）测定各组细胞上清液中PEDF及VEGF的水平。组间资料比较采用单因素方差分析,样本间资料比较采用t检验。结果与NC组相比,HG组PEDFmRNA表达明显下降（24h：0．375±0．011比0．507±0．008,t=16．828,P〈0．0l;72h：0．376±0．014比0．515±0．010,t=14．034,P〈0．01）,VEGFmRNA表达明显上升（24h：1．005±0．011比0．864±0．012,t=14．963,P〈0．01;72h：1．168±0．012比0．873±0．011,t=31．417,P〈0．01）;LD组和HD组PEDFmRNA表达较HG组显著上调（24h：0．505±0．018、0．639±0．012比0．375±0．011,F=354．719,P〈0．01;72h：0．612±0．023、0．700±0．019比0．376±0．014,F=97．82,P〈0．01）,VEGFmRNA表达明显下降（24h：0．838±0．014、0．767±0．017比1．005±0．011．F=79．55,P〈0．01：72h：0．923±0．016、0．784±0．012比1．168±0．012,F=244．28,P〈0．01）,且HD组疗效更明显。经对照血清及CS血清培养24、72h后,与NC组相比,HG组PDEF水平明显降低[24h：（267±8）比（303±10）ng／L,t=6．493,P〈0．01;72h：（265±27）比（338±42）ng／L,t=3．259,P〈0．01],VEGF明显升高[24h：（128±3）比（113±8）ng／L,t=3．737,P〈0．01;72h：（144±7）比（125±7）ng／L,t=4．215,P〈0．01;与HG组相比,LD组和HD组PEDF明显升高[24h：（297±12）、（296±26）比（267±8）ng／E,F=5．427,P〈0．01;72h：（323±20）、（332±33）比（265±27）ng／L,F=5．690,P〈0．01],VEGF明显降低[24h：（106±6）、（109±11）比（128±3）ng／L,F=5．738,P〈0．01;72h：（124±9）、（125±7）比（144±7）ng／L,F=7．878,P〈0．01]。结论冬虫夏草可能通过降低肾小球系膜细胞VEGF的表达,升高PEDF的表达,对肾脏起到保护作用。     

卡介苗对支气管哮喘大鼠气道炎症的预防治疗作用及机制研究

目的 探讨卡介苗（BCG）对支气管哮喘气道炎症发生的预防治疗作用及机制.方法 Wistar雄性大鼠40只随机分为对照组、哮喘组、卡介苗治疗组（BCG组）、地塞米松治疗组（地米组）、卡介苗接种组（BCG接种组）,每组8只.除对照组外余各组每只大鼠于实验第1、8天腹腔注射10％卵白蛋白抗原混悬液致敏,第15天始超声雾化吸入1％卵白蛋白,20 min/d,共2周,制备哮喘气道炎症模型,各治疗组每次雾化前0.5h分别给予BCG、地米;卡介苗接种组在OVA致敏前7、3、1d,每只大鼠分别皮内注射BCG,余治疗同对照组用蒸馏水替代.各组于末次激发24 h后收集标本,检测大鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）细胞总数及嗜酸性粒细胞（EOS）计数;HE染色观察气道重塑情况,计算机图像分析气道形态学参数,衡量气道重塑程度;ELISA法检测肺泡灌洗液及血清中转化生长因子-β1（TGF-β1）含量;免疫组织化学（SABC）法检测E钙黏蛋白（E-cadherin）、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、纤维连接蛋白（Fibronectin）的表达.结果 哮喘大鼠支气管肺泡灌洗液细胞总数及嗜酸性粒细胞计数明显增多;HE染色光镜下可见哮喘组支气管管壁变厚、气道变窄,气道上皮受损肿胀,部分可见脱落;哮喘组BALF及血清中TGF-β1含量增加,上皮标志物E-cadherin表达下降,间质的标志物Fibronectin、α-SMA表达增加;BCG和地米治疗组及BCG接种组,BALF细胞总数、EOS计数及气道改变程度等较哮喘组明显减轻,BALF及血清TGF-β1含量较哮喘组下降,E-cadherin表达升高,Fibronectin、α-SMA的表达下降,与哮喘组、对照组相比差异均有统计学意义（P＜0.01）.结论 ①变应原刺激导致TGF-β1分泌增加,进而引起上皮细胞损伤间质转化是导致哮喘性气道炎症形成的重要机制之一;②卡介苗通过免疫调节作用减轻TGF-β1所致的气道上皮细胞损伤及间质转化对哮喘性气道炎症和气道阻?     

血管内皮细胞生长因子在急性肺损伤大鼠中的表达及意义

目的探讨血管内皮细胞生长因子(VEGF)在脂多糖所致急性肺损伤大鼠中的表达及意义,为临床防治急性肺损伤提供参考依据。方法将40只SD大鼠随机分为LPS(脂多糖)组和NS(生理盐水)组,麻醉后气管插管,LPS组吸入LPS(3 mg/kg),NS组吸入等量NS。0h、2h、4h、6h时每组分别处死5只大鼠,抽血行血气分析,同时进行血浆VEGF水平、肺泡灌洗液(BALF)蛋白定量和VEGF水平、肺组织病理学、免疫组化以及VEGF mRNA表达水平检测。结果 LPS组2h、4h、6h时间点p H和Pa O2均明显低于NS组相应时间点,Pa CO2和肺损伤评分均明显高于NS组相应时间点(P0.05)。LPS组2h、4h、6h时间点BALF蛋白定量均明显高于NS组相应时间点(P0.05),LPS组2h、4h、6h时间点BALF和血浆VEGF定量均明显高于NS组相应时间点(P0.05)。LPS组BALF和血浆中VEGF水平与肺损伤评分均呈正相关(r=0.682和r=0.613,P0.001),BALF中VEGF水平与蛋白定量呈正相关(r=0.715,P0.001)。LPS组2h、4h、6h时间点肺组织中VEGF mRNA的表达均明显高于NS组相应时间点表达(P0.05)。结论 ALI大鼠血浆、BALF和肺组织中VEGF水平明显升高,血浆和BALF中VEGF水平与肺损伤程度呈正相关,BALF中VEGF水平与蛋白定量呈正相关,提示VEGF可能通过增加呼吸膜的通透性参与急性肺损伤发生过程。     

白三烯受体拮抗剂对致敏大鼠血管内皮生长因子及其受体表达的影响

目的 研究白三烯受体拮抗剂(孟鲁司特)对支气管哮喘(简称哮喘)气道炎症和气道重塑的影响,揭示白三烯受体拮抗剂对血管内皮生长因子(VEGF)及其受体的调控作用.方法 将24只清洁级雄性SD大鼠按随机数字表法分为对照组、哮喘组和干预组,每组8只.对照组采用生理盐水致敏和激发,哮喘组采用卵清白蛋白致敏和激发,干预组在采用卵清白蛋白致敏和激发前给予孟鲁司特灌胃.采用肺功能检测各组大鼠气道呼气阻力;采用酶联免疫吸附法(ELISA)对各组大鼠血清中VEGF和白三烯D<4>(LTD4)进行定量分析;用免疫组织化学方法检测VEGF、VEGF受体1(VEGFR1)及VEGFR:在大鼠肺组织内的表达水平.采用图像分析软件测定肺组织切片中的血管计数、血管平滑肌厚度.结果 (1)肺功能检测显示哮喘组平均呼气阻力显著升高;(2)对照组血清中VEGF和LTD4的水平分别为(17±5)ng/L和(6.1±0.7)ng/L,哮喘组分别为(31±6)ng/L和(10.7±3.5)ng/L,干预组分别为(15±4)ng/L和(9.8±1.6)ng/L,对照组和干预组分别与哮喘组比较差异有统计学意义(F值分别为63.78和39.56,均P<0.01);(3)免疫组织化学结果显示哮喘组VEGF及受体均大量表达,而对照组和干预组有较少表达.(4)图像分析显示,对照组、哮喘组和干预组的血管计数分别为14±2、22±2和16±4.(5)直线相关分析显示,血管计数与血清中VEGF的水平正相关(r=0.705,P<0.05).结论 VEGF及其受体在哮喘气道及肺内过度表达,参与了气道炎症和气道血管重塑的过程.孟鲁司特可能通过影响VEGF及其受体的表达影响气道炎症和气道血管重塑的病理生理过程.