神经营养因子对大鼠损伤脊髓神经元的影响

探讨神经营养因子防止成鼠脊髓轴突损伤后引起神经元萎缩的作用。方法采用发言奶的Ａｌｌｅｎ’ｓ打击法致伤大鼠脊髓,将实验动物分为５组,Ａ组：单损伤组;Ｂ组合 ：损伤＋ＮＧＦ组;Ｃ组：损伤＋ＣＮＴＦ组;Ｄ组：损伤＋ＮＴ－３组;Ｅ组：损伤＋ＢＤＮＦ组。     

大鼠脊髓损伤后神经生长因子对内皮素含量的影响

目的　探讨神经生长因子对大鼠脊髓损伤保护作用的机理。方法　采用改良Allen’s法 10g× 2 5cm致伤大鼠第 12胸椎脊髓 ,经蛛网膜下腔导管分别于术后即刻、1、4、8、2 4、72h各注入神经生长因子溶液 ,并与生理盐水组和正常对照组作对照。采用放射免疫方法测定内皮素含量。结果　与正常组相比较内皮素含量在伤后均显著升高 (P <0 0 1) ,神经生长因子治疗组与生理盐水组相比较 ,在伤后 4、8、2 4、72h ,内皮素含量明显下降 (P <0 0 1)。结论　神经生长因子通过抑制脊髓损伤后继发作用 ,抑制了内皮素导致的恶性循环 ,从而保护了神经组织     

褪黑素对大鼠急性脊髓损伤的保护作用

急性脊髓损伤（spinal cord injury，SCI）是创伤导致死亡和致残的最为常见的原因之一。其病理过程尚未完全阐明，自由基诱导的脂质过氧化被认为是致残的最主要的因素之一。褪黑素（5-甲氧基-N-乙酰色胺，melatonin，MT）主要是由松果体分泌的激素，能直接清除自由基，减轻细胞的过氧化损害。诱导型一氧化氮合酶（iNOS）参与了急性脊髓损伤后继发性损害的发病过程，并在其中发挥重要的作用。笔者通过在脊髓损伤模型中应用褪黑素后iNOS表达水平的测量来讨论褪黑素对急性脊髓损伤的保护作用。     

低温预处理对大鼠脊髓内牵拉后脊髓神经细胞凋亡及神经功能的影响

目的 探讨局部低温预处理对大鼠脊髓内牵拉型脊髓损伤病理形态学改变、神经细胞凋亡和神经功能的影响。方法 将80只4个月龄SD大鼠随机分为低温预处理组（A组）和对照组（B组），建立大鼠脊髓内牵拉型脊髓损伤模型，于损伤后2，4，8，24，48，72h和7d评估脊髓损伤后大鼠运动功能，用HE染色观察损伤脊髓组织病理变化，原位末端标记（TUNEL）法标记凋亡细胞。结果 HE染色镜检显示A组脊髓组织病理学改变明显轻于B组。A、B两组运动功能评分和神经细胞凋亡指数比较，差异有统计学意义（P〈0．05或0．01）。结论 低温预处理可明显减轻大鼠脊髓内牵拉型脊髓损伤早期病理形态学损伤，抑制细胞凋亡，有助于神经功能的恢复。     

23例急性脊髓损伤的MRI表现

MRI是脊髓损伤最有效的影像学检查手段 ,它不仅可以观察脊髓创伤的形态改变 ,而且可以通过其内部信号改变和椎管内其他结构的创伤情况来判断脊髓损伤的程度。笔者收集本院 5 2例脊柱外伤患者的MRI资料 ,对其中 2 3例合并脊髓损伤患者的MRI表现进行回顾性分析。1　临床资料2 3例中男 16例 ,女 7例 ;年龄 2 2～78岁 ,平均 4 7.7岁。其中 2 2～ 4 0岁 10例 ,4 4～ 6 0岁 8例 ,6 2～ 6 8岁 5例。外伤至MRI检查时间为 5h～ 8d ,其中 5～ 12h 2例 ,1～ 3d 18例 ,4～ 8d 3例。2 3例中颈段 14例 ,胸段 4例 ,腰段 3例 ,胸腰段 2例。脊髓损伤的神…     

高压氧对脊髓损伤大鼠脊髓组织内源性阿片肽含量的影响

为探讨高压氧（HBO）治疗脊髓损伤（SCI）的机制，复制SCI模型，观察HBO对SCI大鼠脊髓组织中内源性阿片肽（β－EP及Dyn A）含量的影响。结果显示，损伤后大鼠脊髓组织中Dyn A和β－EP含量均明显升高；0．25MPa HBO治疗后Dyn A及β－EP含量均下降，以Dyn A为著。提示内源性阿片肽参与了SCI的继发性损伤机制，且以Dyn A的作用为主；HBO可抑制SCI后内源性阿片肽的释放，恢复脊髓组织的功能。     

低压低氧对急性脊髓损伤的综合影响

高海拔或高空环境大气压力降低对人体主要有两方面的影响：大气氧气分压降低所引起的缺氧及低气压的影响。两种影响同时发生,但低氧是影响人体生理功能的主要威胁。低氧分压使氧的弥散速度减慢,以致供应的氧不足,干扰机体的氧化反应,造成细胞代谢和功能紊乱,导致部分人群出现以缺氧为主的一系列临床综合征。     

虎杖苷对急性脊髓损伤大鼠氧化应激反应和炎症反应影响

目的探讨虎杖苷对急性脊髓损伤大鼠氧化应激反应和炎症反应的影响。方法将54只雄性Sprague-dawley大鼠随机分入3组,每组18只:假手术对照组(Sham组),仅行单纯T10椎板摘除;急性脊髓损伤组(SCI组),行单纯T10椎板摘除后,以改良Allen's法制备大鼠急性脊髓损伤模型;虎杖苷治疗组(P组),同SCI组制备大鼠急性脊髓损伤模型后,于术后即刻和术后第1、3、5、7天给予大鼠腹腔注射虎杖苷(20 mg/kg)。比较3组大鼠术后第1、3、7、14天的BBB运动功能评分和斜板实验评分;术后第7天,行苏木素-伊红(HE)染色,观察3组大鼠术后脊髓形态学改变;术后第7天,Western blot法检测3组大鼠脊髓沉默调节蛋白1(SIRT1)、诱导型一氧化氮合酶(i NOS)、环氧化酶-2(COX-2)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达水平。结果术后第1、3、7、14天,SCI组的BBB运动功能评分和斜板实验评分均显著低于Sham组,差异有统计学意义(P<0.05);与SCI组比较,P组的BBB运动功能评分和斜板实验评分均显著高于SCI组,差异有统计学意义(P<0.05)。HE染色结果显示,与Sham组比较,SCI组大鼠脊髓中神经元数量和突起锐减,细胞核肿胀且核膜明显,可见明显间质水肿和中性粒细胞浸润;与SCI组比较,P组大鼠脊髓神经元数量和突起明显增多,间质水肿和中性粒细胞浸润明显减轻。与Sham组比较,SCI组大鼠脊髓SIRT1蛋白表达水平显著降低,i NOS、COX-2、IL-6及TNF-α蛋白表达水平明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);与SCI组比较,P组大鼠脊髓SIRT1蛋白表达水平显著升高,i NOS、COX-2、IL-6及TNF-α蛋白表达水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论虎杖苷可改善急性脊髓损伤并促进运动功能恢复,其机制可能与抑制脊髓氧化应激反应和炎症反应有关。     

高压氧对脊髓损伤大鼠脊髓组织中兴奋性氨基酸的影响

通过复制脊髓损伤（SCD模型，用常氧，高压氧（HBO），氮氧混合气，激素等分别处理各组大鼠后，取脊髓组织测兴奋性氨基酸（EAA，包括天冬氨酸Asp及谷氨酸Glu)含量，以探讨HBO治疗SCI的机制。结果显示，损伤后，大鼠脊髓组织中EAA（Glu)含量明显升高，经不同处理后，除氮氧混合气组外，Glu含量均有所下降，以0.25MPa HBO组和0.25MPa HOB 激素组下降最明显，与损伤组比较有显著性差异（P＜0．01），与正常对照组比较则无显著性差异；0.25MPa HBO组与0.1MPa HBO组比较及0.25MPaHBO激素组与激素组比较，均有显著性差异（P＜0．01）。提示HBO能通过减少组织中的EAA减轻SCI后的继发性损伤，恢复脊髓组织的功能，其中以0 .25MPa HBO和0.25MPa HBO并用激素治疗效果较佳。     

高压氧对大鼠急性脊髓损伤炎症因子表达的影响

目的 观察大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)后早期高压氧(HBO)治疗对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-10(IL-10)mRNA表达的影响.方法 将36只SD大鼠随机分为2组:SCI组(18只)和HBO组(18只).2组均采用改良的Allen打击法建造大鼠脊髓损伤模型.模型建造成功后,HBO组于损伤2 h后开始行HBO治疗,1次/d.2组分别于损伤后6、12、24、72、120、168 h各取3只大鼠,取损伤部位脊髓组织采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定其中TNF-α、IL-10 mRNA表达的变化.结果 SCI组大鼠脊髓组织中TNF-α mRNA表达逐渐升高,在伤后12h表达明显上调,至24h达高峰,高表达持续至损伤后72 h;HBO组大鼠脊髓组织中TNF-α mRNA表达变化趋势与SCI组一致,但升高幅度降低(P＜0.05);SCI组大鼠IL-10 mRNA表达在损伤后12 h开始升高,并随时间的推移逐渐升高,至168 h达高峰;HBO组表达变化趋势较一致,IL-10 mRNA升高幅度更明显(P＜0.05).结论 HBO能够减少前炎性细胞因子的释放,增加抗炎性细胞因子的表达,从而减少脊髓组织的继发损伤,保护受损的神经细胞,达到促进恢复的作用.

Abstract：

Objective To investigate the effects of early HBO therapy on the expressions of pro inflammatory cytokine mRNA including tumor necrosis factor-α (TNF-α ) and interleukin-10 (IL-10) following spinal cord injury (SCI) in rats. Methods Forty SD rats were randomly divided into 3 groups:the sham operation group (n=4) , the SCI group (n = 18) , and the hyperbaric oxygen group (n = 18). Spinal cord injury model was developed by using the modified Allen impact. Then, the SCI group and the HBO group received HBO therapy 2 hours after injury, once a day. And 3 rats were randomly selected at 6, 12, 24, 72, 120 and 168 h following injury to take samples of injured spinal cord tissue and measure dynamic changes in the expressions of TNF-α, IL-10 mRNA by semi-quantitative RT-PCR method. Results Faint expression of the cytokine mRNA could be noticed in the sham group. The expression of TNF-α mRNA in the injured spinal cord tissue in the SCI group elevated gradually, increased obviously at 12 h after injury and reached peak at 24 h, and its high expression maintained till 72 h after injury. The tendency in the expression of TNF-α mRNA in the HBO group was identical to that of the SCI group, however, the amplitude in the increase of TNF-α mRNA decreased (P＜0. 05). The expression of IL-10 mRNA in the SCI group began to increase at 12 h after injury and increased gradually over time and reached peak at 168 h. The expressions of both TNF-α and IL-10 mRNA were more consistent in the HBO group, with more obvious increase in the expressions of IL-10 mRNA. Conclusions HBO could reduce the release of pro-inflammatory cytokines and increase the expression of anti-inflammatory cytokines,resulting in reduction of secondary spinal cord injury,protection of the damaged nerve cells and promotion of recovery.     

黄芪多糖对大鼠急性颈脊髓损伤后肺水肿的影响

目的 探讨黄芪多糖对大鼠急性颈脊髓损伤后肺水肿的影响. 方法 成年Wistar大鼠200只,体重240～ 250 g,雌雄不限.大鼠按随机数字表法分为五组:黄芪多糖组、低浓度黄芪多糖组、等渗盐水组、空白对照组、假手术组,每组40只.采用C7段颈脊髓改良Allen打击法制作大鼠颈脊髓损伤模型,打击力度为10 ×2.5 g·cm;假手术组仅暴露C7段颈脊髓.各组按取材时间不同又分为造模后24h、3d、1周、2周共4个时相点,每个时相点10只大鼠.在不同时相点处死大鼠,通过光学显微镜观察肺组织的病理学变化,并测量各时相点每组大鼠肺湿重与干重(W/D)比值及血清和肺泡灌洗液蛋白浓度,计算肺W/D及肺通透性指数(LPI). 结果 同一时相点低浓度黄芪多糖组和黄芪多糖组肺W/D比值及LPI均较空白对照组及等渗盐水组低,黄芪多糖组伤后3d时最低(P＜0.05). 结论 大鼠急性颈脊髓损伤可造成肺组织水肿,伤后早期使用黄芪多糖可有效减轻颈脊髓损伤后肺水肿的程度.     

脊髓损伤动物模型的制备及神经功能评价

脊髓损伤（spinal cord injury,SCI）是医学界面临的难题和研究热点之一。脊髓损伤动物模型的制备对脊髓损伤相关基础研究具有重要意义。笔者现就目前国内外常用的脊髓损伤动物模型的制备及神经功能评价的方法综述如下。     

低热损伤对大鼠坐骨神经血神经屏障功能的影响

【摘要】 目的 探讨低热损伤对大鼠坐骨神经血神经屏障功能的影响。方法 选取 24 只 SPF 级雄性 Wistar 大鼠适应性饲养 1 周后按照随机数表法随机分为热损伤后 1 d 组、热损伤后 3 d 组和热损伤后 5 d 组, 每组 8 只。所有大鼠均建立右侧坐骨神经低热 (47 ℃ ) 损伤模型, 而左侧坐骨神经作为正常对照; 模型建立后, 热损伤后 1 d 组、热损伤后 3 d 组、热损伤后 5 d组大鼠分别于室温下饲养 23、71、119 h, 而后经尾静脉注射伊文思蓝溶液, 采用比色法对比观察 3 组大鼠两侧坐骨神经内伊文思蓝浓度、甲苯胺蓝染色后光学显微镜下观察伊文思蓝分布情况、醋酸铀-枸橼酸铅染色后透射电子显微镜下观察坐骨神经病理变化情况? 结果 热损伤后 1 d 组大鼠两侧 坐骨神经内伊文思蓝浓度均明显高于热损伤后 3 d 组和热损伤后 5 d 组 (F = 30.880、8.213, P < 0.001、P =0.002), 且热损伤后 1 d 组和热损伤后 3 d 组大鼠热损伤侧坐骨神经内伊文思蓝浓度均明显高于对照侧 ( t =3.926、3.736, P = 0.001、0.002), 而热损伤后 5 d 组大鼠两侧坐骨神经内伊文思蓝浓度无明显差异 ( t = 0.701, P = 0.494)。 3 组大鼠热损伤侧坐骨神经内膜均可见弥漫性红色荧光, 而对照侧伊文思蓝红色荧光仅局限于神经内膜血管腔内, 未渗漏至血管外? 3组大鼠热损伤侧坐骨神经有髓纤维可见雪旺细胞胞浆内空泡形成、髓鞘松散、髓鞘球形成, 轴索空化、内部微丝溶解;神经内膜血管内可见部分紧密连接消失, 红细胞聚集, 内皮细胞出现凋亡; 无髓纤维基本正常? 3 组大鼠对照侧坐骨神经有髓纤维可见少量髓鞘松散,无髓纤维与神经内膜血管基本正常? 结论 47 ℃低热损伤可破坏坐骨神经的血神经屏障功能, 引起神经内膜水肿, 且低热损伤可选择性损伤有髓纤维, 而对无髓纤维损伤极轻。     

高压氧对大鼠急性脊髓损伤炎症因子表达的影响

Objective To investigate the effects of early HBO therapy on the expressions of pro inflammatory cytokine mRNA including tumor necrosis factor-α (TNF-α ) and interleukin-10 (IL-10) following spinal cord injury (SCI) in rats. Methods Forty SD rats were randomly divided into 3 groups:the sham operation group (n=4) , the SCI group (n = 18) , and the hyperbaric oxygen group (n = 18). Spinal cord injury model was developed by using the modified Allen impact. Then, the SCI group and the HBO group received HBO therapy 2 hours after injury, once a day. And 3 rats were randomly selected at 6, 12, 24, 72, 120 and 168 h following injury to take samples of injured spinal cord tissue and measure dynamic changes in the expressions of TNF-α, IL-10 mRNA by semi-quantitative RT-PCR method. Results Faint expression of the cytokine mRNA could be noticed in the sham group. The expression of TNF-α mRNA in the injured spinal cord tissue in the SCI group elevated gradually, increased obviously at 12 h after injury and reached peak at 24 h, and its high expression maintained till 72 h after injury. The tendency in the expression of TNF-α mRNA in the HBO group was identical to that of the SCI group, however, the amplitude in the increase of TNF-α mRNA decreased (P＜0. 05). The expression of IL-10 mRNA in the SCI group began to increase at 12 h after injury and increased gradually over time and reached peak at 168 h. The expressions of both TNF-α and IL-10 mRNA were more consistent in the HBO group, with more obvious increase in the expressions of IL-10 mRNA. Conclusions HBO could reduce the release of pro-inflammatory cytokines and increase the expression of anti-inflammatory cytokines,resulting in reduction of secondary spinal cord injury,protection of the damaged nerve cells and promotion of recovery.     

人神经干细胞移植对脊髓损伤大鼠后肢运动功能恢复的影响

目的:探讨人神经干细胞(hNSCs)移植对脊髓损伤大鼠后肢运动功能恢复的影响及可能机制。方法:取2～3个月流产胎儿海马区组织,体外培养神经干细胞;采用通用型脊髓打击器将24只成年SD大鼠制成脊髓损伤模型,伤后第8天随机分为移植组和对照组,于损伤中心分别注入CM-DiI标记的hNSCs悬液和DMEM/F12培养液。分别于hNSCs移植后当天及1、2、3、4、6、8周采用Basso,Beattie,Bresnahan(BBB)行为功能评定量表评估大鼠后肢运动功能恢复情况。移植后第4、8周取损伤部位脊髓,行病理切片,免疫组化方法观察移植细胞的存活和迁移,并检测损伤脊髓处胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、神经元核心抗原(NeuN)、2,3-环核苷酸磷酸二酯酶(CNPase)、神经巢蛋白(Nestin)等抗原的表达。结果:移植组后肢运动功能评分随时间延长而逐渐升高,移植1周时后肢运动功能有所改善,与对照组无明显差异(6.4±0.99 vs 6.0±0.93,P>0.05);移植4周时后肢运动功能比1周时有明显恢复,BBB评分明显高于对照组(9.7±1.04 vs 7.4±0.95,P<0.05);移植的hNSCs可在损伤脊髓处长时间存活(至少8周),并分化为神经元、少突胶质细胞和星形胶质细胞。结论:人神经干细胞可在损伤脊髓处向神经元和神经胶质细胞分化,并能促进脊髓损伤大鼠后肢运动功能的部分恢复。     

大鼠脊髓急性损伤后神经细胞的凋亡

目的 研究脊髓急性损伤后神经细胞的凋亡及其分布特点。方法 44只大鼠分为对照组（4只）和损伤组（40只）。损伤组脊髓（T8．9）经中度压迫致伤后,分别在伤后30min、2,4,8,24,48,72h和7,14,21d处死取材（每时相点鼠数＝4只）。应用HE、尼氏染色及凋亡细胞原位末端标记法对脊髓组织进行细胞检测。结果 伤后4h,损伤段及邻近段可见末端标记阳性神经细胞;伤后8h,损伤段灰质中阳性细胞数达高峰;伤后24h,白质中阳性胶质细胞数达高峰;伤后72h,相邻节段阳性细胞数达高峰。阳性细胞以白质中胶质细胞为主,主要分布于相邻手段。结论 脊髓损伤后神经细胞凋亡是继发损伤期的重要病理变化。     

急性中心性颈脊髓损伤综合症（5例报告）

我院于1984．2．-1985．6．收治5例急性中心性颈脊髓损伤综合症，其中一例合并第6、7颅神经麻痹，现报道如下。     

少突胶质前体细胞移植对大鼠脊髓损伤神经功能恢复的影响

目的 研究少突胶质前体细胞移植对大鼠脊髓损伤神经功能恢复的影响.方法 采用Allen's打击法制作大鼠脊髓损伤(T10)模型.96只SD大鼠随机分为移植组、对照组、单纯损伤组及假手术组,每组24只.脊髓损伤后第7天时移植组进行少突胶质前体细胞移植治疗,对照组给予等量生理盐水,单纯损伤组未予任何治疗.通过运动功能评分及运动诱发电位、体感诱发电位检测评价少突胶质前体细胞移植对神经功能恢复的影响.结果 脊髓损伤后大鼠脊神经功能明显障碍,运动功能评分、运动诱发电位及体感诱发电位检测结果明显低于假手术组.随伤后时间延长,脊髓损伤大鼠神经功能均有不同程度的恢复,但运动功能评分、运动诱发电位及体感诱发电位检测结果显示,少突胶质前体细胞移植治疗组大鼠的神经功能恢复情况明显优于对照组.结论 少突胶质前体细胞移植治疗能够促进大鼠脊髓损伤神经功能的恢复.