横纹肌溶解致急性肾损伤一例

临床上横纹肌溶解症引起的急性肾损伤并不常见,其主要临床特征是血肌酸激酶（CK）升高,血和尿中肌红蛋白升高和肾功异常Ⅲ,现将我院收治1例患者情况报告如下。     

小檗碱对果糖诱导人肾小管细胞内质网应激PERK凋亡通路的影响

目的 探讨小檗碱对果糖诱导下肾小管上皮细胞凋亡的影响.方法 人肾小管上皮细胞株(HK-2细胞)于含10%胎牛血清的DMEM培养基中进行体外培养,然后随机分为正常组(C组)、果糖组(F组,含25mmol/L果糖培养液)、小檗碱组(B组,25mmol/L果糖+10μmol/L小檗碱)和TUDCA组(T组,25mmol/L果糖+2μmol/L TUDCA培养液).培养24h后收集细胞,Western blotting检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、CHOP蛋白表达水平及蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、真核启始因子2α(eIF2α)的磷酸化水平,流式细胞仪检测各组细胞周期情况,TUNEL法检测各组细胞凋亡率.结果 与C组比较,F组GRP78、CHOP蛋白表达水平上调,同时p-PERK、p-eIF2α水平明显上升(P<0.05);与F组比较,B组、T组GRP78、CHOP、p-PERK、p-eIF2α表达水平均明显下降(P<0.05);T组与B组GRP78、CHOP、p-PERK、p-eIF2α表达水平比较无明显差异.与C组比较,F组HK-2细胞活力明显降低,细胞凋亡指数明显升高(P<0.05);与F组比较,B组和T组肾小管上皮细胞活力明显增加,细胞凋亡指数明显下降(P<0.05);T组B组细胞活力指数、细胞凋亡率比较无明显差异.结论 持续采用果糖培养HK-2细胞可激活细胞内PERK通路,引起内质网应激的发生,小檗碱能够抑制果糖诱导的PERK和eIF2α的磷酸化,下调GRP78、CHOP表达,从而调控PERK通路缓解细胞周期阻滞现象,降低细胞凋亡率.     

左卡尼汀对大鼠横纹肌溶解急性肾损伤炎性反应因子表达的影响

 目的 探讨左卡尼汀对大鼠横纹肌溶解急性肾损伤的保护作用及其作用机制。方法 48只大鼠,随机分为空白组、模型组、盐水治疗组及左卡尼汀治疗组。肌内注射50%甘油建立横纹肌溶解急性肾损伤模型,盐水治疗组、左卡尼汀治疗组分别腹腔注射生理盐水和左卡尼汀。测血清肌酸激酶(creatine kinase,CK)、尿素氮(urea nitrogen,BUN)和肌酐(serum creatinine,Scr)水平,光镜下观察肾脏病理;RT-PCR和免疫组化分别检测肾脏TLR4、NF-kB;酶联免疫吸附法检测肾脏IL-6、TNF-α。结果 与空白组相比,模型组及盐水治疗组CK、BUN、Scr、TLR4、NF-kB、IL-6、TNF-α及急性肾小管坏死(acute tubular necrosis,ATN)评分均明显升高(F=9.12~211.77,q=5.40~20.3,P<0.05);与模型组相比,左卡尼汀治疗组CK、BUN、Scr、TLR4、NF-kB、IL-6、TNF-α及ATN评分水平明显降低(q=4.37~16.03,P<0.05)。结论 左卡尼汀缓解横纹肌溶解急性肾损伤的机制可能与其抗免疫炎性反应通路TLR4/NF-kB有关。     

重度低温诱导大鼠肾脏内质网应激通路活化研究

目的 观察轻度及重度低温条件下大鼠肾脏组织内质网应激 (endoplasmic reticulum stress ,ERS)通路相关分子表达及凋亡情况。方法 成年雄性SD大鼠,24只,随机分为3组,每组8只。分别为对照组（C组）,轻度低温组（MH组）和重度低温组（SH组）。利用低温水槽浸泡身体后将体温降低至目标体温后维持约60 min。术后复温12 h后,利用Western Blot实验观察各组的热休克蛋白70（heat?shock?protein 70,HSP70）,冷诱导RNA结合蛋白（Cold-inducible RNA-binding protein,CIRP）的表达变化及ERS通路相关分子蛋白激酶R样内质网激酶（PRKR-like endoplasmic reticulum kinase,PERK）、肌醇需求酶1α（serine/threonine-protein kinase/endoribonuclease inositol-requiring enzyme 1,IRE-1α）和免疫球蛋白重链结合蛋白（the immunoglobulin heavy chain binding protein,Bip）的活化情况,利用Western Blot和免疫组化方法观察ERS诱导凋亡分子C/EBP同源蛋白（the C/EBP Homologous Protein,CHOP）的表达以及分布。结果 和对照组比较,术后12 h,HSP70和CIRP均有不同程度上调。HSP70在MH组和SH组上调均较显著,CIRP蛋白在SH组上调更加显著。术后12 h,p-PERK和p-IRE-1均出现明显上调,Bip活化,提示ERS通路激活。重度低温组肾脏可观察到CHOP蛋白表达上调,进一步用免疫组化方法可以观察到CHOP主要表达在肾小管区域。结论 轻度及重度低温会诱导大鼠肾脏ERS通路活化,重度低温可诱导CHOP蛋白表达上调。     

训练相关性横纹肌溶解症所致急性肾衰竭

横纹肌溶解症（RM）是指各种原因引起的横纹肌细胞受损后,肌红蛋白（Mb）等细胞内容物释放入血液所引起的综合征,其病因可分为外伤性和非外伤性。非外伤性横纹肌溶解症多由于中毒、药物、感染等因素所致。由于大运动量训练所致的外伤性RM,多出现于部队训练中。若对此病认识不足,未及时诊治,会使病人并发急性肾衰竭（ARF）而危及生命。现就外伤性RM-ARF作一综述。     

横纹肌溶解综合征致急性肾功能衰竭1例

病例男,32岁,干部。因发热、头痛2 d,双小腿、腰部疼痛1 d,于2006年3月22日入院。患者缘于2 d前剧烈运动后出现头痛、发热,体温37.6℃,于入院前当日下午出现双小腿、腰部肌肉酸痛、乏力。自行口服去痛片后疼痛未见好转,来院就诊。入院查体:体温36.5℃,脉搏106次/min,律齐,呼吸18次/min,血压110/60 mmHg。双肾区叩击痛( ),双侧腓肠肌压痛明显,轻度肿胀,双下肢肌力、肌张力正常。肺部及腹部查体未见异常。辅助检查:心肌酶谱:谷草转氨酶500U/L,磷酸肌酸激酶14 224 U/L,乳酸脱氢酶1 186 U/L;肌钙蛋白Ⅰ三联检测:肌红蛋白(±),肌钙蛋白Ⅰ、肌…     

军营横纹肌溶解综合征12例分析

横纹肌溶解综合征(RM)是多种原因引起的临床重症,常因导致急性肾衰竭(AFR)或多脏器功能衰竭而危及生命,随着人们对RM认识的不断提高,临床相关报道日益增多,而军营RM发生因特殊环境及群体而具有特殊性,现将军营RM12例分析报告如下。1材料和方法1.1一般资料12例为我院1990年1月—     

低pH液复灌对兔缺血再灌注心肌内质网应激与细胞凋亡的影响研究

目的 探讨体外循环(CPB)下再灌注初短暂低pH液复灌对兔缺血再灌注(I/R)心肌内质网应激(ERS)与细胞凋亡的影响.方法 健康成年新西兰大白兔24只,雌雄不拘,体重2.5～3.0kg,随机分为4组(n=6).对照组(C组)不阻断主动脉,单纯转机3h;其余各组心脏停搏缺血40min,再灌注2h.pH7.4组与pH6....     

内质网应激在缺血性脑卒中中的作用及机制

内质网应激（ERS）是继细胞死亡受体通路、线粒体通路后的第三大细胞凋亡通路,主要由氧化应激、钙失衡及炎症反应所引起。适度的内质网应激能维持细胞稳态,但过强或长时间的应激,会导致细胞凋亡。研究表明,很多疾病与ERS有关,如动脉粥样硬化、肿瘤、神经系统退行性病变等。本文简要综述ERS在缺血性脑卒中中的作用及机制。     

内质网应激基因在牛健康和闭锁卵泡中的差异表达研究

为了初步探究内质网应激在牛卵泡闭锁过程中起到的作用,实验采用荧光定量PCR(qRT-PCR)方法对健康卵泡及闭锁卵泡中内质网应激相关基因的表达情况进行了研究.结果表明:闭锁卵泡颗粒细胞中内质网应激相关基因Atf4,Atf6,Grp78,Grp94,Xbp1,Chop,Caspase12的表达均显著高于健康卵泡.说明内质网应激参与了牛卵泡闭锁的发生,为研究牛卵泡闭锁及卵泡选择的分子机制提供了重要参考价值.     

缬沙坦抑制内质网应激对糖尿病肾损害大鼠足细胞的保护作用

 目的 探讨缬沙坦对糖尿病肾损害大鼠肾脏足细胞凋亡及内质网应激标志性蛋白GRP78、caspase12表达的影响。方法 将雄性SD大鼠随机分为正常对照组和实验组。实验组大鼠给予腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病模型,然后随机将其分为模型组和缬沙坦组,正常对照组和模型组1次/d给予反渗水灌胃,缬沙坦组1次/d给予缬沙坦(8 mg/kg)灌胃,时间为6周。对nephrin、GRP78、caspase12表达水平进行分析,同时观察血糖、血尿素氮、肌酐、24 h尿蛋白定量等指标。结果 建模第6周,模型组大鼠肾脏较正常对照组凋亡细胞数明显增多,模型组GRP78(6.75±0.65)及caspase12(11.51±0.32)表达较正常对照组GRP78(1.57±0.39)、caspase12(2.66±0.57)增强(P＜0.05),模型组nephrin(2.29±0.15)较正常对照组(5.71±0.53)表达减少(P＜0.05)。缬沙坦组较模型组凋亡细胞数减少,GRP78(3.14±1.00)、caspase12(8.08±2.48)表达减弱(P＜0.05),nephrin(3.35±0.40)表达减少较轻(P＜0.05)。结论 缬沙坦通过减缓内质网应激并可能通过抑制内质网特有的caspase12凋亡途径,减少足细胞的凋亡,从而发挥对糖尿病肾病的保护作用。
     

运动和饮食调整对内质网应激介导非酒精性脂肪肝大鼠模型肝细胞凋亡的影响

目的:探讨运动和饮食调整对内质网应激介导非酒精性脂肪肝大鼠模型肝细胞凋亡的影响及其机制。方法:70只雄性SD大鼠中随机抽取20只为对照组,其余50只为模型组,对照组予普通饲料喂养,模型组予高脂饲料喂养。实验第8周,对照组和模型组各取10只做肝脏病理切片。确定NAFLD模型成功后,模型组随机分为4组:模型组(M组)、运动组(EM组)、饮食调整组(FM组)和运动结合饮食调整组(EFM组),每组各10只,对照组剩余10只大鼠编为C组。C组继续普通饲料喂养,M组和EM组继续高脂饲料喂养,FM组和EFM组由高脂饲料改为普通饲料喂养;EM组、EFM组给予有氧游泳运动干预,每周运动6 d,每天1次,每次60 min,连续8周,直至第16周实验结束。油红O染色观察肝脏病理形态变化,TUNEL法测肝细胞凋亡,western blot检测C/EBP同源蛋白(CHOP)、C-Jun氨基末端激酶(JNK)和Caspase12蛋白表达,免疫组化检测CHOP、JNK和Caspase12蛋白阳性表达。结果:(1)M组肝细胞脂滴数量显著高于C组,各干预组脂滴数量介于C组和M组之间;(2)M组肝细胞凋亡指数高于C组,CHOP、Caspase12、JNK蛋白表达及阳性表达较C组高;各干预组肝细胞凋亡指数低于M组,CHOP、Caspase12、JNK蛋白表达及阳性表达较M组低;(3)M组、EM组、FM组、EFM组4组双因素方差结果示:运动和饮食对CHOP、Caspase12、JNK蛋白表达具有主效应,且二者具有叠加交互效应。结论:内质网应激介导细胞凋亡参与NAFLD的发展,运动和饮食调整可延缓NAFLD的发展,且二者联合作用效果更佳,其机制与运动和饮食调整降低内质网应激介导细胞凋亡蛋白CHOP、JNK和Caspase12在肝细胞的表达,抑制肝细胞凋亡有关。     

军事训练致横纹肌溶解症23例临床分析

目的探讨军事训练导致的横纹肌溶解症的临床防治。方法 2012年1月至2016年1月,解放军210医院403临床部收治了23例因军事训练导致的横纹肌溶解症住院的患者,回顾性分析其病因、临床表现、并发症及临床救治情况,分析横纹肌溶解症发病与运动量的相关性。结果横纹肌溶解症发病与运动量大小具有相关性。23例患者中,13例发生于5 km长跑,7例发生于30 km体能训练。大运动量训练超过体能极限时,横纹肌功能耗竭严重。结论横纹肌溶解症是一种罕见的军事训练伤,可导致急性肾衰竭,致残率高,临床上应早诊断、早治疗。     

内质网应激和Ca2+超载在热打击诱导的肺微血管内皮细胞损伤中的作用与机制

目的 研究内质网应激和Ca2+超载在热打击诱导的肺微血管内皮细胞(PMVECs)损伤中的作用及其可能的机制.方法 建立PMVECs温度梯度热打击模型.对照组细胞始终置于标准37℃、5%CO2细胞培养箱孵育,热打击组细胞分别置于39、41、43℃细胞培养箱中热打击2h,热打击后继续在37℃、5%CO2细胞培养箱孵育6h;另取细胞在43℃热打击前分别以20μmol/L钙离子抑制剂BAPTA-AM和50μmol/L环孢霉素A(CsA)预处理,后续处理同43℃热打击组细胞.Western blotting检测磷酸化的蛋白激酶样内质网激酶(p-PERK)、磷酸化的真核生物翻译起始因子2α(p-eIF2α)、活性转录因子4(ATF4)以及葡萄糖调节蛋白78(GRP78)蛋白表达;流式检测细胞内Ca2+、线粒体膜电位以及线粒体通透性转换孔的变化;Caspase活性试剂盒检测caspase-3变化以反映细胞凋亡情况;Millicell-ERS细胞电阻仪测定细胞的跨上皮细胞电阻(TER)以了解细胞通透性的改变.结果 随着热打击温度的增高(41~43℃),PMVECs内p-PERK、p-eIF2α以及ATF4、GRP78蛋白表达增强,细胞内Ca2+水平增高,线粒体通透性转换孔开放,线粒体膜电位下降,细胞通透性增加,凋亡增多,且在43℃热打击组最为明显,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).使用Ca2+抑制剂预处理细胞可以促使PMVECs线粒体通透性转换孔、膜电位以及细胞通透性恢复,减少凋亡的发生;使用线粒体保护剂预处理细胞并不能减轻PMVECs的Ca2+释放,但可促进细胞通透性恢复以及减少凋亡发生.结论 热打击可激活PMVECs的内质网应激反应,并诱导细胞内Ca2+超载介导的细胞和线粒体损伤,这可能是中暑导致内皮细胞损伤的重要机制之一.     

FVB小鼠急性缺血再灌注肾损伤中CHOP蛋白作用的探讨

目的通过对比ICR、FVB两种小鼠肾脏急性缺血再灌注后的差异,探索导致肾脏急性缺血再灌注损伤的关键致病分子,并探讨其可能机制。方法将ICR、FVB两种小鼠(雄性、8~10周龄)各随机分为模型组和正常对照组(n=12),两种小鼠的模型组采用相同的方法建立肾脏急性缺血再灌注模型(先切除右肾再夹闭左肾肾蒂45 min),再灌注24 h后收集模型组小鼠的心脏血、肾脏,检测各小鼠血浆BUN浓度,观察小鼠肾组织病理损伤的程度,Western-blot检测肾组织CHOP蛋白的表达,对照组检测同样的指标。结果(1)肾组织PAS染色可见:ICR、FVB小鼠模型组肾小管上皮细胞损伤明显重于对照组,差异有统计学意义(P<0.01),ICR小鼠模型组肾小管上皮细胞损伤又明显重于FVB小鼠模型组(P<0.01);(2)血浆BUN浓度:ICR、FVB小鼠模型组高于对照组(P<0.01),ICR小鼠模型组高于FVB小鼠模型组(P<0.01);(3)Western-blot:[CR、FVB小鼠模型组CHOP蛋白的表达量高于对照组(P<0.01),ICR小鼠模型组CHOP蛋白的表达量高于FVB小鼠模型组(P<0.05)。结论在急性肾缺血再灌注损伤模型中ICR小鼠肾小管上皮细胞损伤程度明显重于FVB小鼠,内质网应激相关蛋白CHOP表达也明显上调,提示CHOP在急性肾缺血再灌注损伤中发挥了重要的作用,FVB小鼠对急性肾缺血再灌注损伤存在抗性,机制可能与CHOP蛋白的表达有关。     

CX43在应激性溃疡发生发展过程中的表达与细胞凋亡、增殖的关系

探讨细胞间隙连接蛋白43（CX43）在胃粘膜遭受应激损伤的变化及与细胞凋亡，增殖发生的关系。制作大鼠水浸－束缚应激（WRS）模型，采用原位末端标记（TUNEL）法检测WRS结束前后不同的时间点细胞凋亡的发生；免疫组化ABC法原位检测增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白的表达，原位杂交检测CS43 mRNA表达变化。结果发现，正常大鼠胃粘膜上皮散在TUNEL－细胞，PCNA蛋白主要在胃腺颈部近胃小凹处呈中等阳性表达，CX43 mRNA在胃腺区呈中等阳性表达，WRS 2h-WRS后5h TUNEL-细胞较对照组明显增多，并逐步达高峰，PCNA蛋白和CX43 mRNA的表达明显低于对照组；WRS后8－12h TUNEL-细胞逐渐减少，而PCNA表达高峰，CX43 mRNA表达恢复并明显增加，WRS后24hTUNEL－细胞仍高于正常水平，PCNA及CX43表达基本恢复至正常水平，相关分析，CX43 mRNA表达与PCNA蛋白表达呈显著正相关，结果提示，CX43 mRNA的表达可能与胃粘膜腺细胞区细胞稳定，增殖和分化有关，并影响上皮细胞凋亡发生。     

内质网应激在尿毒症血清致内皮细胞功能异常中的作用

目的探讨内质网应激(ERS)在尿毒症血清致内皮细胞功能异常中的作用。方法采集尿毒症患者和正常健康人的静脉血血清。以不同浓度的尿毒症血清或正常血清(2.5%、5%、10%、15%、20%)刺激人脐静脉内皮细胞(hUVEC)24h后,采用MTT比色法检测细胞活力的变化,流式细胞术检测细胞周期,Hoechst33342染色观察细胞凋亡,荧光定量RT-PCR法检测单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和葡萄糖调节蛋白78(GRP78)mRNA表达的变化。结果当浓度小于10%时,尿毒症血清对hUVEC细胞增殖率和S期百分比的影响随浓度增加而增大。当浓度大于10%时,hUVEC细胞增殖率和S期百分比逐渐下降,且细胞凋亡率逐渐增高。与正常血清组比较,10%尿毒症血清刺激后hUVEC GRP78和MCP-1 mRNA表达均显著升高(P<0.05)。应用分子伴侣4-苯基丁酸(4-PBA)干预,可显著抑制尿毒症血清诱导的GRP78 mRNA和MCP-1 mRNA表达(P<0.05),降低hUVEC的增殖率和S期百分比(P<0.05)。结论内质网应激可能是尿毒症血清诱导内皮细胞功能异常的重要细胞内机制。     

细胞凋亡和氧化应激在大鼠创伤性脑损伤后应激性肝损伤中的作用

目的 探讨细胞凋亡和氧化应激在大鼠创伤性脑损伤(TBI)后应激性肝损伤中的作用.方法 改良Allen法建立TBI模型.40只雄性Wistar大鼠按随机数字表法分为5组:正常对照组、TBI后6,12,24,48 h组.测定血清肝酶、肝组织超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛,流式细胞仪检测肝细胞凋亡率.光镜及电镜观察肝组织学变化.结果 TBI后血清ALIT和AST显著进行性升高,肝组织SOD减少,丙二醛增加;TBI早期即6 h,电镜下可见凋亡细胞,细胞凋亡率显著增加且达峰值;病理显示TBI后肝组织进行性损伤.结论 TBI后出现应激性肝损伤,细胞凋亡和氧化应激可能参与其发病过程.