肾移植术后尿液DYZ-1检测的临床意义

背景:对移植受者尿液成分进行定期监测可以作为判断移植肾功能、状态的一种方法.目的:分析肾移植受者尿液中供者细胞出现与急性排斥反应的关系及临床意义.方法:选取60例供者为男性、受者为女性的肾移植受者,分为移植后早期检测组40例、急性排斥组10例、移植后功能稳定组10例.定期提取尿液中细胞DNA,利用PCR检测Y染色体上特异的基因片段DYZ-1.结果与结论:在手术第1日受者的尿液中可检测到供者细胞DNA,随着时间的延长,尿液中供者细胞DNA量逐渐减少,至术后1个月,有8例受者的尿液中供者细胞DNA消失,其中1例发生急性排斥反应;另外32例受者的尿液中仍有供者细胞DNA的出现,其中7例发生了急性排斥反应;存活3个月以上发生急性排斥反应10例患者,7例尿液标本中能检测到供者细胞DNA,对急性排斥者进行治疗后1个月,71.4%转为阴性;而在稳定期的10例肾功能良好受者,仅1例受者尿液中DYZ-1基因阳性.提示对肾移植受者尿中供者细胞DNA的进行定期检测,可以作为监测急性排斥反应发生及预后的一种手段.     

抗供者特异性抗体与肾移植后的急性排斥反应

目的:大部分肾移植失败的患者体内都存在抗HLA抗体.检测抗供者特异性HLA抗体在肾移植受者体内的表达,并分析其在预测排斥反应中的作用.方法:2006-10/2008-03郑州人民医院器官移植科采用酶联免疫吸附法检测179例肾移植受者血清中的抗供者特异性HLA抗体以及群体反应性抗体水平,群体反应性抗体>10%为阳性,群体反应性抗体阳性受者即致敏受者.检测移植后2个月内早期急性排斥反应的发生率,统计分析群体反应性抗体及抗供者特异性HLA抗体与移植后早期急性排斥反应的关系.结果:肾移植前血清抗供者特异性HLA抗体阳性50例受者的急性排斥反应率发生率为66%,移植前血清群体反应性抗体阳性56例受者的发生率为25%,两者比较差异具有显著性意义(P<0.01),抗供者特异性HLA抗体水平与急性排斥反应的发生具有更强的相关性.移植前血清抗供者特异性HLA抗体阳性受者的急性排斥反应发生率显著高于抗供者特异性HLA抗体阴性受者(66%,11%,P<0.01).体内含抗HLA-Ⅱ类抗体受者的急性排斥反应发生率显著高于含HLA-Ⅰ类抗体的受者(78.1%,43.8%,P<0.05).结论:抗供者特异性HLA抗体是肾移植前筛选致敏受者的重要指标,抗供者特异性HLA抗体阳性患者移植后更容易发生急性排斥反应.     

肾移植后急性体液排斥反应:5年同一机构296例随访

背景:肾移植后急性体液排斥反应虽然发生率不高,但对移植物功能恢复可造成严重影响,是移植物早期丢失的主要原因.目的:分析肾移植后急性体液排斥反应早期诊断和防治的意义.方法:选择接受肾移植后规律随访的受者296例,其中移植前群体反应性抗体阳性受者26例,阴性受者270例.酶联免疫吸附试验动态监测肾移植受后外周血中的群体反应性抗体和供者特异性抗体,免疫组织化学染色观察穿刺活检组织中C4d的沉积及浸润淋巴细胞表面分子标记,按Banff 2005标准结合临床相关指标诊断急性体液排斥反应.结果与结论:26例移植前群体反应性抗体阳性受者中6例(23%)移植后发生了急性体液排斥反应,270例阴性受者中19例(7%)发生了急性体液排斥反应,差异有显著性意义(P < 0.01).发生急性体液排斥反应的患者中22例(88%)外周血清中检测到供者特异性抗体,271例无急性体液排斥反应的患者中仅1例检出供者特异性抗体,差异具有显著性意义(P < 0.01).急性体液排斥反应受者中C4d阳性率为80%,未发生急性体液排斥反应的患者C4d阳性率仅为6.7%,差异具有显著性意义(P < 0.001).肾移植后早期监测群体反应性抗体和供者特异性抗体水平,通过穿刺活检观察移植肾组织中的C4d沉积情况,可及时诊断急性体液排斥反应,有效改善移植物功能并提高移植物存活率.     

供者特异性活化T细胞频度预测肾移植急性排斥反应

背景:提高移植后排斥反应风险预报的准确性,可为移植后个体化使用免疫抑制剂提供参考。目的:寻找一种能定量分析供受者间免疫反应强度的方法来预测急性排斥反应。方法:对同种异体尸肾移植的患者115例采用前瞻性分析,用ELISPOT法检测移植前分泌γ-干扰素的供者特异性活化T细胞的频度,观察随访期内有无急性排斥及肺部感染,并观察HLA错配与急性排斥的关系。结果与结论:115例群体反应性抗体阴性肾移植受者中有25例发生急性排斥反应,发生急性排斥反应患者的供者特异性活化T细胞频度高于未发生急性排斥反应者(P<0.01),而HLA-I、II及总的错配数比较,差异均无显著性意义(P>0.05)。提示,通过移植前对产生γ-干扰素的供者特异性活化T细胞频度的检测,可预测急性排斥反应,对潜在供者进行选择。     

提高致敏受者肾移植成功率的临床研究--附82例报告

目的观察致敏受者经严格的人类白细胞抗原(human leukocyte antigen,HLA)配型和交叉反应组(cross reactive groups,CREG)配型后行肾移植的效果,寻找提高致敏受者肾移植成功率的措施.方法对82例致敏受者按照美国联合器官调配网络(unitednetwork for organ sharing,UNOS)制定的CREG配型原则进行供、受者配型筛选,按常规方法进行肾移植及预防排斥反应,酌情使用血浆置换和静脉滴注免疫球蛋白.结果移植成功率为90%(74/82),病死率为1%(1/82),超急性排斥、加速排斥和急性排斥反应及移植肾功能延迟恢复分别为3例、5例和23例(28%)及17例(21%).成功病例术后随访12个月～58个月,未再发生急性排斥反应.按HLA配型原则,供、受者0～1、2位点错配分别为8例(10%)、20例(24%),少于CREG配型的相应位点错配38例(46%)、26例(32%),均为P＜0.05而3～4位点错配则HLA配型高于CREG配型,分别为54例(69%)、26例(32%),P＜0.05.中、重度致敏受者术后超急性排斥和加速排斥发生率明显高于轻度致敏受者组及HLA Ⅰ类抗体阳性受者,术后急性排斥发生率亦明显高于HLAⅡ类抗体阳性受者组(P＜0.05).结论严格按照HLA配型及CREG配型进行供、受者筛选,酌情应用血浆置换和静脉滴注免疫球蛋白,提高肾移植成功率有重要意义,但对重度致敏的受者行肾移植时需慎重对待.     

供者特异性活化T细胞频度预测肾移植急性排斥反应

背景：提高移植后排斥反应风险预报的准确性,可为移植后个体化使用免疫抑制剂提供参考。目的：寻找一种能定量分析供受者间免疫反应强度的方法来预测急性排斥反应。方法：对同种异体尸肾移植的患者115例采用前瞻性分析,用ELISPOT法检测移植前分泌γ-干扰素的供者特异性活化T细胞的频度,观察随访期内有无急性排斥及肺部感染,并观察HLA错配与急性排斥的关系。结果与结论：115例群体反应性抗体阴性肾移植受者中有25例发生急性排斥反应,发生急性排斥反应患者的供者特异性活化T细胞频度高于未发生急性排斥反应者（P〈0.01）,而HLA-I、II及总的错配数比较,差异均无显著性意义（P〉0.05）。提示,通过移植前对产生γ-干扰素的供者特异性活化T细胞频度的检测,可预测急性排斥反应,对潜在供者进行选择。     

高龄亲属活体供肾移植7例中长期效果:同一机构2年资料回顾分析

背景:随着肾移植中肾供体的短缺,"边缘"供肾提供了一条缓解途径.目的:观察高龄亲属活体供肾移植的安全性和中长期临床效果.方法:回顾性分析随访36～64个月的7例≥65岁亲属活体供肾移植的供者和受者的临床资料.结果与结论:供、受者移植后均恢复顺利,无严重并发症.受者1周内移植肾功能正常、供者肾功能较术前略有增高、但均在正常范围内.无排斥反应发生.5例人/肾正常存活36～64个月;2例移植后≥1年死亡.供者均正常存活,无蛋白尿、高血压,肾功能正常.提示≥65岁高龄亲属活体供肾应经过严格筛选,部分可为临床扩大供肾来源.     

群体反应性抗体检测对肾移植患者的临床意义

目的:了解肾移植受者的HLA体液致敏状态,筛选合适供者及通过PRA变化早期诊断急性排斥。方法:通过微量补体依赖淋巴细胞毒试验检测269例患者的群体反应性抗体(PRA)。结果:肾移植受者中PRA阳性受者移植后排斥反应发生率明显高于非致敏受者(P<0.001),移植后PRA水平升高组的排斥发生率显著高于PRA无变化组(P<0.001)。结论:PRA是预测受者致敏状态的一个敏感指标,对临床筛选合适供者,减少排斥反应,提高移植物存活率及早期诊断排斥具有重要意义。     

肾移植受者血清中抗供者特异性抗体检测及预测排斥反应的意义

目的 研究肾移植受者体内的HLA致敏状态以及抗供者特异性抗体在预测排斥反应中的作用。方法 提取供者的HLA特异抗原,用ELISA法检测受者血清中抗供者特异性抗体（DSA）,结合群体反应性抗体（PRA）检测结果及临床急性排斥反应的发生进行统计分析。结果 肾移植前血清DSA阳性的受者,急性排斥反应发生率（63．2％）远高于DSA阴性的受者（14．7％）（P〈0．01）;术后DSA阳性的受者排斥反应的发生率也升高;DSA随着PRA水平的升高阳性率也增加（P〈0．01）。结论 抗供者特异性抗体对临床筛选供体、预测术后排斥反应及提高移植物的存活率有重要意义。     

交叉反应组配型在高致敏受者肾移植术中的临床意义

目的研究HLA特异性抗体检测及交叉反应组配型(CREGs)在高致敏受者肾移植术中的临床意义.方法在传统HLA配型以及淋巴毒试验的基础上,对21例高致敏受者(PRA＞40%)进行严格的HLA特异性抗体分析以及交叉反应组配型分析.在有限肾源的情况下,优化供受者组合,手术方式为经典髂窝移植.结果21例高致敏受者中无一例出现超急性排斥反应(HAR),2例出现急性排斥反应(AR),4例出现肾功能延迟恢复(DGF),经治疗均在1个月内恢复,随访至今仅1例死于肺部感染,与同期40例对照组(PRA阴性)相比,差异无显著性(P＞0.05).结论在传统HLA配型的基础上进行严格HLA特异性抗体分析及CREGs配型,为临床发现潜在供者,提高肾移植成功率提供了指导意义.     

Presence of donor- and recipient-derived DNA in cell-free urine samples of renal transplantation recipients: urinary DNA chimerism.

BACKGROUND: Previous studies have indicated that microchimerism is present in body tissues, peripheral blood, and plasma of recipients after organ transplantation. We hypothesize that donor-derived DNA may also be present in cell-free urine of renal transplant recipients and that the concentrations of urine DNA may be correlated with graft rejection. METHODS: Thirty-one female patients who had renal transplantation were enrolled in the study. In women with male organ donors, the SRY gene on the Y chromosome was used as a marker for donor-derived DNA. Real-time quantitative PCR for the SRY and beta-globin genes was carried out on cell-free urinary DNA from these patients. Serial urine samples from a female renal transplant recipient undergoing an acute rejection episode were also collected and analyzed with the beta-globin quantitative PCR system. RESULTS: SRY sequences were detected in the urine of 14 of 17 female patients with male organ donors. None of the 14 patients with female organ donors had detectable SRY sequences in urinary DNA. The median fractional concentration of donor-derived DNA was 8.7% (interquartile range, 1.9-26.4%). During the acute rejection episode, urinary concentrations of the beta-globin gene were markedly increased, with the concentrations returning rapidly to normal following antirejection treatment. CONCLUSIONS: Our results demonstrate that urinary DNA chimerism is present following renal transplantation. The measurement of urinary DNA using quantitative PCR may be useful for the diagnosis and monitoring of graft rejection.     

肾移植急性排斥反应时B7-2/CD28信号通路的表达

背景:以往动物研究表明,在器官移植急性排斥反应时共刺激分子的表达与急性排斥反应密切相关.目的:观察急性排斥反应时患者移植肾脏组织和外周血中B7-2/CD28信号通路的表达.方法:对53例同种异体肾移植患者于移植前1 d、移植后1,3,7,14,21,28 d分别取外周血以及在临床诊断急性排斥反应当天和抗排斥治疗1周后额外采血,用流式细胞仪检测共刺激分子B7-2/CD28在外周血淋巴细胞中的表达;同时,行经皮肾穿刺活检供肾修整结束时、移植后7 d、1个月、6个月、1年或以上获取活检肾脏组织,用免疫组织化学方法检测活检组织中B7-2/CD28的表达情况.结果与结论:移植后1,3 d内所有患者外周血中CD28+,CD4+/CD28+,CD8+/CD28+细胞比率均有显著下降(P < 0.05),一二周后恢复到术前水平;移植后7 d未发生急性排斥反应的患者肾脏组织B7-2阳性表达率显著上升(P < 0.05),1个月后下降至移植前水平(P > 0.05).移植后发生急性排斥反应的患者外周血CD28+,CD4+/CD28+,CD8+/CD28+细胞比率及肾脏组织B7-2阳性表达率明显上升(P < 0.05),经抗排斥治疗1周后均好转.结果证实,在肾移植后出现急性排斥反应时,肾脏组织以及外周血中共刺激分子B7-2/CD28的表达上调与急性排斥反应的发生密切相关.     

Urinary N-acetyl-beta-D-glucosaminidase and aminopeptidase N in the diagnosis of graft rejection after live donor renal transplantation

An evaluation of the usefulness of urinary N-acetyl-beta-D-glucosaminidase (NAG) and aminopeptidase N (AAP) measurements in the diagnosis and prediction of acute and chronic renal allograft rejection was made. Enzyme activities were measured in 2,745 morning spot urine samples from 53 consecutive live donor renal allograft recipients up to 180 days after transplantation. Reference ranges of urinary enzyme activities in 14 recipients with normal graft function were higher than those established in a carefully selected group of healthy controls. 89 and 91% of 76 clinically diagnosed acute rejection episodes (ARE) in the remaining 39 graft recipients were accompanied by sharp increase over baseline of NAG and AAP respectively. All rejection episodes occurring in the early period after transplantation were characterised by high enzymuria. AAP was more sensitive than NAG as the magnitude of its increase over baseline was more, while NAG was more specific with less number of false positive elevations. Both enzymes were found to be equally good prognostic indices of graft loss and chronic graft deterioration. Regular monitoring of urinary NAG and AAP activities throughout the post transplant period would thus be valuable in (a) diagnosis and prediction of ARE in the early as well as late post operative period and (b) prediction of eventual graft outcome.     

Res配型在致敏受者肾移植中的应用

目的：探讨致敏受者经HLA-氨基酸残基配型（Res 配型）后行肾移植的效果。方法：对13例移植前群体反应性抗体(PRA)水平较高的患者按照美国 UCLA组织配型中心所确定的中国汉族人Res 配型标准进行供、受者筛选,以常规方法进行肾移植，术前未行血浆置换。结果：13例患者, 无1例发生超急排斥反应；9例术后5天内移植肾功能恢复正常；3例术后1月内各出现一次移植肾急性排斥反应（发生率23.1%），1例经M.P., 2例经OKT3治疗后逆转；1例发生急性肾小管坏死，经血液透析过渡后，于术后3周肾功能逐渐正常。按Res配型原则，供、受者0、1、2和3个位点错配分别为1例(7.7%)、3例(23.1%)、7例(53.8%)和2例(15.4%)，明显高于传统HLA六抗原配型结果。结论: Res配型可以显著提高供受者相配率，对缩短等肾时间，减少移植肾的排斥反应，提高移植肾的存活率具有重要意义。     

移植肾穿刺活检83例临床病理分析

目的研究移植肾在术后出现合并症时穿刺活检的病理结果,探讨其对临床的指导意义。方法对83例移植肾进行活组织检查,并进行病理学诊断与分类,结合移植后情况进行分析。结果移植肾慢性排斥反应42例（50.6%）,急性排斥反应14例（16.9%）,肾小球肾炎12例（14.5%）,肾小管药物中毒4例（4.8%）,血管性排斥反应2例（2.4%）,IgA肾病2例（2.4%）,急性肾小管损伤1例,间质纤维化1例,移植肾肾梗死1例,未见排斥反应4例。急性排斥反应14例中有6例肾小管周毛细血管C4d（＋）,阳性率达42.8%。结论移植肾活检安全可靠,是诊断术后多种合并症的有效手段;常规活检有助于及早发现不良因素。     

配偶供肾移植后微嵌合体发生与急性排斥反应

背景:微嵌合作为移植物与受者之间的双相细胞移动的标志,在移植免疫耐受中的作用日益受到重视。目的:探讨夫妻生活与嵌合体的发生,与肾移植后急性排斥反应及其他相关性的研究。方法:将接受肾脏移植的女性受者(有过生育史的女性除外)分为丈夫活体供肾组、无关男性尸体供肾组,并设立接受妻子活体供肾的对照组。STR方法检测女性受者体内男性供者来源的Y染色体反映微嵌合体的存在,与急性排斥反应发生的关系,并比较配偶间供肾效果的差异。结果与结论:尽管配偶间供肾移植存在供者年龄偏大以及人类白细胞抗原错配率较高的因素,但与接受无关男性尸肾移植的女性受者相比,接受丈夫活体供肾移植的女性更易检测出微嵌合体,而且肾移植后恢复情况好,急性排斥反应发生率低。而与接受妻子供肾的丈夫相比,接受丈夫供肾的妻子肾移植效果好。说明夫妻间长期相处导致女性接受丈夫体液的机会多,由此产生免疫耐受对于肾移植后人/肾的相容性好,急性排斥反应小。     

Aminoaciduria as a marker of acute renal transplant rejection--a patient study

Over 12 months, urine samples were systematically collected from 40 children who underwent renal transplantation for the treatment of end-stage renal disease. Sequential determinations of the excretion of individual amino acids relative to that of creatinine were carried out on 15 subjects. Nine of these (including three who sustained episodes of acute rejection) retained a native kidney in-situ, while in six patients (including three who underwent an episode of acute rejection) both native kidneys had been removed. In both subgroups, the amino acid/creatinine ratios of early morning urine samples were higher shortly before clinical manifestations of acute rejection became evident than in patients who, following renal transplantation, had stable kidney function, chronic graft rejection, or acute tubular necrosis, with one exception: a patient with one native kidney in-situ in whom acute tubular necrosis developed immediately after transplantation. The amino acids showing the greatest increase included Thr, Ser, Gly, and Ala. These values fell dramatically immediately prior to the clinical episode of acute rejection, with Thr, Ala, and Phe showing the most consistent changes. These alterations in urinary amino acid excretion occurred several days before changes in urinary protein excretion or the serum concentrations of urea and creatinine, and may have a role to play in the monitoring of renal transplant recipients.     

尿单核细胞趋化蛋白1与肾移植后急性排斥反应:有相关性吗?

背景:同前移植肾急性排斥反应依然是导致慢性排斥反应和移植物功能损伤的危险因素,如何无创、快速、准确地进行诊断并及时治疗尤为重要.目的:通过检测尿液中单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)水平变化,并结合部分肾组织活检病例,探讨尿MCP-1在肾移植后急性排斥反应早期诊断及治疗后的表达.方法:选择2008 10/2009-02在郑州人民医院肾病移植科住院治疗的慢性肾哀竭患者62例,均接受同种异体肾移植,肾功能稳定组为肾移植后肾功能稳定的42例患者,急性排斥组为肾移植后发牛急性排斥反应的20例患者,以同期在郑州人民医院体检中心检查肾功能正常且自愿留取尿样的10例健康人作为对照组.所用肾移植患者均给予常规免疫抑制方案,另外急性排斥组给予抗淋巴细胞免疫球蛋白或甲基强的松龙强化冲击治疗.应用双抗体夹心酶联免疫吸附试验检测尿MCP-1质量浓度变化.结果与结论:与对照组比较,肾功能稳定组尿MCP-1质量浓度无明显变化(P>0.05),急性排斥组尿MCP-1质量浓度显著升高(P<0.01).与治疗前比较,急性排斥组20例患者经强化治疗后尿MCP-1质量浓度均显著降低(P<0.01),其中17例临床症状缓解、辅助检查恢复正常,尿MCP-1质量浓度接近对照组,3例无效,尿MCP-1质量浓度高于对照组.肾穿刺活检8例,肾脏病理提示均为移植肾急性排斥反应,与急性排斥组治疗前尿MCP-1质量浓度基本相似(P>0.05).提示尿液中MCP-1水平可早期无创性诊断肾移植后急性排斥反应,可无创性临测治疗效果,其与肾移植后急性排斥反应时肾脏病理损伤可能存在相关性.     

Non-invasive detection of acute renal allograft rejection by measurement of vascular endothelial growth factor in urine

Urinary vascular endothelial growth factor (VEGF) was determined by enzyme-linked immunosorbent assay in 199 renal allograft recipients and 80 healthy controls. Urinary VEGF level did not change significantly during the first 8 weeks after transplantation in 119 patients with stable renal function and there were no abnormal histological findings (No-AR). In 67 patients with acute rejection, urinary VEGF was significantly higher (28.57 +/- 6.21 pg/micromol creatinine) than in the No-AR patients (3.05 +/- 0.45 pg/micromol creatinine) and healthy controls (2.87 +/- 0.35 pg/micromol creatinine). At a cut-off point of 3.26 pg/micromol creatinine, sensitivity and specificity for diagnosis of acute rejection were 86.6 and 71.4%, respectively. The 13 patients with subclinical rejection excreted urinary VEGF (16.14 +/- 4.09 pg/micromol creatinine) at a significantly higher level than No-AR patients (3.05 +/- 0.45 pg/micromol creatinine). At a cut-off point of 4.69 pg/micromol creatinine, sensitivity and specificity for diagnosis of subclinical rejection were 84.6 and 79.8%, respectively. In conclusion, monitoring VEGF in urine might offer a new non-invasive way to detect acute and subclinical rejection in renal transplant recipients.