HPLC法鉴定不同产地黄连饮片中含生物碱的研究

目的:探究高效液相色谱(HPLC)法鉴定不同产地黄连饮片中所含生物碱情况。方法:采用HPLC法鉴定不同产地黄连饮片中的生物碱种类及对应含量,流动相为50:50的乙腈-0.1%磷酸溶液,加入十二烷基磺酸钠0.1g/100ml,柱温为30℃,检测波长为345nm,流速为1.0ml/min。结果:盐酸小檗碱在0.2405~1.6841μg内线性良好,平均回收率为97.5%。黄连中含有的生物种类有小檗碱、黄连碱、表小檗碱和巴马汀,不同产地的黄连饮片中各种生物碱含量及生物碱总含量存在显著差异,其中以四川洪雅县高庙镇产的生物碱含量最高,最低为云南德钦县产黄连。结论:HPLC法鉴定不同产地黄连饮片中生物碱类型及含量,操作简便,重现性好,准确率高,对黄连的质量鉴定具有重要的参考价值。     

不同栽培模式下黄连质量评价

目的：评价4种不同栽培模式下黄连的质量。方法：连续2年选取简易棚下、柳杉林下、白马桑林下、厚朴林下4种栽培模式下的黄连样品,采用紫外-可见分光光度法、高效液相色谱法分别测定其总生物碱和盐酸小檗碱的含量。结果：4种栽培模式下黄连总生物碱含量和盐酸小檗碱含量均无明显差异,总生物碱的含量变化幅度在13.88%～17.41%,盐酸小檗碱在6.95%～9.47%,均显著高于药典1990年版对黄连中总生物碱的含量的规定(7.0%)和药典2005年版对黄连中盐酸小檗碱含量的规定(3.6%)。结论：4种栽培模式下的黄连根均可作为黄连药材入药,且质量较好。     

5种小檗属药用植物总生物碱及小檗碱的含量测定

目的:对5种小檗属植物(拟豪猪刺、川鄂小檗、芒齿小檗、湖北小檗、汉源小檗,均为药材三颗针来源)根和茎中活性物质总生物碱和小檗碱进行研究,比较5种植物根和茎的总生物碱和小檗碱的含量,为三颗针药材的资源与质量评价提供参考。方法:分别通过酸性染料比色法和高效液相色谱法进行总生物碱及小檗碱含量测定研究。结果:5种植物根和茎的总生物碱含量范围分别为1.60%~4.72%和0.76%~2.70%,小檗碱的含量范围分别为0.70%~2.92%和0.23%~1.07%。湖北小檗、汉源小檗和拟豪猪刺根的总生物碱及小檗碱的含量均较高,是优质的三颗针药材来源,其茎中的总生物碱和小檗碱的含量也较高。结论:所建立的总生物碱和小檗碱的含量测定方法准确、可行,为该药材的质量评价提供了可靠方法。     

黄连属植物根茎,根及叶生物碱的研究

本文对10种黄连的不同药用部位进行了薄层定性比较,并采用薄层紫外分光光度法测定其小檗碱和总碱含量。结果表明,本届植物的根茎、须根和叶均含有小檗碱、黄连碱、药根碱和巴马亭等生物碱。小檗碱含量:根茎3.8～6.7%、须根0.9～1.8%、叶0.2～1.2%。总碱含量:根茎6.6～9.5%、根2.3～5.5%、叶1.1～3.6%。     

湖北利川黄连不同生长龄期主要生物碱的分布及变化

目的:研究湖北利川黄连不同生长龄期主要生物碱的累积变化过程,为标准化种植提供科学依据.方法:采用紫外分光光度法和HPLC测定黄连有效成分.结果:随着生长龄期的增长,黄连叶片数、根茎干重都在不断的增加;黄连不同部位中总生物碱含量的由大到小的顺序依次是根茎＞须根＞叶片;在黄连2～3龄阶段为黄连生长最旺盛的时期,酪氨酸、总生物碱、小檗碱、黄连碱、巴马汀和小檗碱的含量增长速度最快;在5龄阶段,这4种生物碱含量的大小顺序依次是小檗碱、黄连碱、表小檗碱、巴马汀,且这4种生物碱含量之和占总生物碱含量的比例在不断增加.结论:为黄连的种植管理提供了参考.     

一测多评法测定黄连中小檗碱、巴马汀、黄连碱、表小檗碱、药根碱含量

 目的在建立黄连中的5个主要生物碱同步测定方法的基础上,建立一测多评法的方法学考察模式,验证该方法在黄连中应用的可行性和技术适应性。方法以黄连药材为研究对象,以药材中5个典型生物碱为指标,建立小檗碱与巴马汀、黄连碱、表小檗碱、药根碱的相对校正因子,并用该校正因子进行巴马汀、黄连碱、表小檗碱、药根碱的含量计算(计算法),实现一测多评;同时采用外标法测定药材中该5种生物碱的含量(实测法),并比较计算值与实测值的差异,以验证一测多评法的准确性和可行性。结果28批黄连药材和饮片中5个生物碱的含量可以用一测多评法进行测定,其计算值与实测值间无显著差异(RSD<5%)。结论以小檗碱、巴马汀、黄连碱、表小檗碱、药根碱同步测定的一测多评法控制黄连药材和饮片的质量是可行的、准确的。     

黄连有效成分积累动态的研究

目的研究黄连(味连)有效成分积累的动态规律,为确定黄连最佳采收期提供依据。方法定期定点采集2～5年生黄连样品,分析黄连根茎中盐酸小檗碱和总生物碱的含量,分别用高效液相色谱(HPLC)法和UV法测定。结果黄连根茎中有效成分动态积累有一定规律,盐酸小檗碱含量每年4月(开花结实期)几乎均为全年最低,4～5年生黄连以10～11月黄连根茎中的小檗碱含量达到全年最高值,而以5年生黄连的盐酸小檗碱含量为最高;总生物碱含量呈上升趋势,每年在10～11月含量达到全年最高,而以5年生黄连的总生物碱含量最高。结论根据黄连有效成分的积累动态规律,黄连的最佳采收期为10～11月的5年生黄连根茎。     

雅连炮制工艺研究及不同炮制品中7个生物碱的含量测定＊

目的 建立雅连不同炮制品的炮制工艺，测定炮制前后7个生物碱的含量，构建雅连科学的质量控制方法，以提升雅连药材、饮片、精制饮片的质量控制水平。方法 通过四因素三水平的正交实验，以生物碱总含量为指标，筛选了酒雅连、姜雅连、萸雅连的最佳炮制工艺；采用高效液相色谱法测定雅连不同炮制品总生物碱以及7个生物碱（小檗碱、黄连碱、巴马汀、药根碱、表小檗碱、非洲防己碱、格陵兰黄连碱）含量。经方法学验证，该方法精密度、重现性、稳定性均符合要求。结果 确定了雅连各炮制品的最佳炮制工艺；含量测定结果表明，萸黄连炮制后总生物碱含量最高，姜黄连次之，皆高于生品，7个生物碱含量，因炮制方法不同差别较大。结论 雅连各炮制品最佳炮制工艺的确定结合多指标成分定量，可以有效控制雅连药材的质量，为2020年版《中华人民共和国药典》黄连药材质量标准的完善与提高提供参考。     

黄连-厚朴不同配伍对生物碱成分溶出的影响

目的 探讨黄连-厚朴酸碱药对不同配伍剂量对小檗碱类生物碱成分煎出率的影响.方法 采用高效液相色谱法测定黄连-厚朴药对煎煮液中盐酸小檗碱的含量.结果 小檗碱和总生物碱的煎出率随着药对中黄连配伍剂量增大而升高,并且当黄连配伍剂量开始大于厚朴剂量时,生物碱煎出率升高趋势减缓.结论 黄连-厚朴配伍时,黄连:厚朴≥1:1时有利于黄连生物碱成分的溶出.     

黄连须根总生物碱及单体的联产工艺研究

目的 研究从黄连须根中分离纯化黄连生物碱单体和总碱的联产工艺.方法 用0.3%硫酸水加热回流提取黄连须中总生物碱,用石灰乳调节提取液pH为5～6,过滤;滤液用JG-101树脂吸附,用不同洗脱剂分步洗脱;重结晶获得药根碱和小檗碱单体,盐析获得黄连总生物碱;用HPLC分析黄连生物碱及总碱含量.结果 用2%氢氧化钠洗脱,酸中和后重结晶得药根碱单体;再用70%酸性甲醇(1% H2SO4)溶液洗脱总生物碱;洗脱液中加入2%NaCl沉淀并重结晶得小糪碱单体;上清液加20%NaCl沉淀获得余下总生物碱.结论 用JG-101树脂能够很好吸附黄连总生物碱,药根碱和小檗碱单体的纯度均达到95%以上,总生物碱(小檗碱、黄连碱、巴马汀和药根碱之和)的含量为90%左右.     

大孔吸附树脂纯化黄连中4种生物碱的含量测定

目的:建立反相高效液相色谱法同时测定大孔吸附树脂富集纯化后的黄连提取物中4种生物碱含量的方法。方法:以X-5型大孔吸附树脂对黄连提取物中总生物碱进行富集纯化,采用高效液相色谱法同时测定其中表小檗碱、黄连碱、巴马汀和小檗碱的含量。结果:黄连提取物经大孔吸附树脂纯化后,表小檗碱、黄连碱、巴马汀和小檗碱的平均含量分别为1.45%、2.62%、7.03%和17.95%,未经纯化的黄连提取物中的平均含量分别为0.67%、1.05%、1.86%和8.54%。结论:X-5型大孔吸附树脂可有效富集纯化黄连中的生物碱类成分。     

峨眉野连不同部位总生物碱和盐酸小檗碱的含量测定

目的确定峨眉野连不同器官的总生物碱和小檗碱含量。方法采用紫外分光光度法测定总生物碱含量,高效液相色谱方法测定盐酸小檗碱含量。结果峨眉野连根茎、须根、叶片和叶柄中,均含有生物碱和小檗碱。结论野连地上器官含有较高的总生物碱和小檗碱,对濒危植物的组织培养及保护提供理论指导。     

多种统计方法比较黄连姜制工序中影响生物碱含量的因素

目的：测定黄连不同姜制品中6种生物碱的含量,采用多种统计方法对数据进行分析,找出姜制工序中影响姜黄连质量的因素。方法：采用高效液相色谱法测定黄连不同姜制品中药根碱、非洲防己碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀及小檗碱的含量。运用主成分分析、聚类分析、LSD（Least-Significant Difference）检验、独立t检验对结果进行分析。结果：黄连经姜炙后,表小檗碱、黄连碱含量略有上升,药根碱、非洲防己碱、巴马汀、小檗碱含量略有下降,传统姜炙品中各成分含量均高于烘制品。聚类分析发现榨汁组和煮汁组可以聚为一类;烘法和炙法具有明显不同的聚类,对黄连姜制品中的6种生物碱之和进行LSD检验,亦表明烘法与炙法具有显著性差异。对榨汁组进行独立t 检验,结果表明姜汁与黄连饮片拌匀或闷润至透心在6种生物碱上无显著性差异,LSD与独立t 检验的结果与聚类分析的结果一致。结论：采用同一批次黄连炮制所得的姜制品中,姜的来源、不同方法制备的姜汁及闷润过程对6种生物碱影响不大,加热方式可能是影响姜黄连质量的因素。考虑到润至透心需加入大量水稀释姜汁,炒干所需工时较长,故辅料姜汁与黄连饮片拌匀吸尽即可。     

川黄连多指标成分定量及特征图谱建立研究＊

目的 测定川黄连（味连、雅连、凤尾连）中7个生物碱（小檗碱、黄连碱、巴马汀、药根碱、表小檗碱、非洲防己碱、格陵兰黄连碱）的含量并建立3种川黄连的特征图谱，构建川黄连科学的质量控制方法，以提升川黄连药材、饮片及其中成药制剂的质量控制水平，保障临床用药安全有效。方法 建立了同时测定7个黄连生物碱成分的HPLC含量测定方法，经方法学验证该方法准确性、重现性、精密度、稳定性、线性均符合要求。测定6批味连、6批雅连、3批凤尾连的7个生物碱的含量以及总生物碱的含量；建立了黄连药材HPLC特征图谱测定方法，经方法学验证，该方法精密度、重现性、稳定性均符合要求。结果 味连的总生物碱含量最高，7个生物碱在味连、雅连、凤尾连中含量各不相同，差异较大；通过对15批黄连的特征图谱相似度的分析，找出共有特征峰15个，与黄连生物碱对照品比对后，指认了8个峰，均为黄连生物碱成分。结论 川黄连多指标成分定量结合特征图谱，可以有效控制川黄连药材的质量，为2020年版《中华人民共和国药典》黄连药材质量标准的完善与提高提供参考。     

基于传统煎药工艺的黄连饮片标准汤剂质量研究

为研究黄连饮片标准汤剂的质量评价方法,该实验以标准化工艺制备得到15批黄连饮片标准汤剂。选用性状、p H、指标性成分含量、指纹图谱相似度、成分转移率及干膏得率等作为黄连饮片标准汤剂质量评价参数。对标准汤剂HPLC指纹图谱进行相似度评价和聚类分析,并应用数学模型研究标准汤剂中干膏得率、小檗碱含量、小檗碱转移率与饮片中小檗碱含量之间的相关性。结果表明15批黄连饮片标准汤剂指纹图谱相似度均大于0. 99,聚类分析将4个产地的黄连饮片标准汤剂归为3类,与含量测定结果一致,说明不同产地的黄连饮片存在质量差异;建立的3个线性回归数学模型R2均大于0. 9,具有极显著性差异,且通过3批数据的验证发现模型具有较好的准确性,因此该模型可预测不同黄连饮片制备所得标准汤剂的质量。该实验建立的黄连饮片标准汤剂制备工艺极大限度地保存了传统工艺的完整性,建立的质量评价方法可较为全面考察标准汤剂的质量,可为含黄连饮片的水提制剂的相关研究提供示范。     

味连及副产物有效成分和氨基酸含量的研究

目的:测定味连根茎及副产物叶、花的小檗碱、总生物碱和氨基酸含量.方法:用HPLC法测定小檗碱,紫外分光光度法测定总生物碱,氨基酸自动分析仪测定氨基酸.结果:味连根茎含小檗碱5.42%、总生物碱10.12%、氨基酸5.82%,叶含小檗碱1.76%、总生物碱2.94%、氨基酸12.18%,花含总生物碱2.02%、小檗碱1.16%、氨基酸20.63%.结论:副产物含有效成分丰富,氨基酸种类齐全,可供黄连副产物综合利用提供参考.     

吴茱萸汁制对黄连中四种生物碱含量的影响

目的 :探讨吴茱萸汁制对黄连中盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱含量的影响。方法 :运用HPLC法分别测定黄连和萸黄连中盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱的含量,然后对炮制前后四种生物碱的含量做统计分析。结果 :吴茱萸汁制后黄连中盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱的含量都有极显著降低。结论 :吴茱萸汁对于盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱的含量有显著降低作用。而研究发现黄连苦寒之性的物质基础主要为生物碱,据此推测吴茱萸汁可能通过降低生物碱含量,进而抑制黄连的苦寒之性。     

栀子、黄连、地骨皮合煎对生物碱和栀子苷含量的影响

目的：研究含有黄连、栀子、地骨皮三味药合煎和分煎对煎液中总生物碱、小檗碱、栀子苷含量影响。方法：采用高效液相色谱法测定。结果：小檗碱、总生物碱含量以黄连单煎为最高，栀子苷含量以栀子单煎最高。结论：在黄连、栀子、地骨皮三药共存时，不宜采用合煎的方法。     

黄连解毒汤中生物碱含量的拆方研究

目的：研究黄连解毒汤及拆方中生物碱的含量和溶出率的变化。方法：采用HPLC法对黄连解毒汤及折方中4种生物碱：小檗碱、药根碱、黄连碱、巴马汀的含量进行了测定。结果：传统汤剂生物碱的溶出率较低，黄连和黄柏合煎生物碱呈现加和性，加入黄芩、栀子后生物碱含量显著下降：结论：有效控制黄连解毒汤中生物碱类有效成分，应采用黄连的特有成分黄连碱的含量和4种生物碱的比例作为质量控制指标。为制定合理的质控标准提供了依据。     

“两步法”探索黄连饮片等级的划分标准

目的:结合黄连外在质量和内在品质,为黄连饮片的等级划分提供方法依据。方法:以18批味连饮片为分析对象,第一步测量各批味连片的水分、总灰分、浸出物、含量(表小檗碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱),剔除不合格者,采用SPSS聚类分析软件分类,定部分统货,第二步测大小(长度、宽度、厚度和质量)、颜色(外部颜色、内部颜色),综合分类结果确定优级和统货。结果:所有在《中国药典》2010年版黄连项下合格的饮片分为优级和统货两个等级。结论:该方法为黄连饮片的等级划分提供可操作性。