瑞芬太尼对树突状细胞免疫功能的影响

目的观察镇痛和麻醉浓度瑞芬太尼对树突状细胞(DCs)的影响。方法取健康献血者静脉血制备DCs,分别在含有瑞芬太尼0 ng/ml、1 ng/ml、6 ng/ml和9 ng/ml的培养基中培养10 d。未加入rh TNF-α培养的为未成熟DCs,加入rh TNF-α培养的为成熟DCs。应用流式细胞仪检测DCs的表面标志CD1a、CD14、CD80、CD86和HAL-DR的表达。结果与对照组比较,三种浓度瑞芬太尼对未成熟DCs的CD1a、CD14和CD80的表达基本呈抑制状态,CD86的表达增强(P<0.01),抑制或增强与药物浓度无固定关系。与对照组比较,三种浓度瑞芬太尼对成熟DCs的CD1a、CD80、CD86表达显著增强,CD14的表达抑制(P<0.05),同样,增强或抑制与药物浓度无固定关系。除个别浓度外,相同浓度,未成熟和成熟DCs的大部分标志物之间有差别(P<0.01)。不管DCs是成熟形式还是未成熟形式或瑞芬太尼浓度如何HLA-DR的表达差异不显著(P>0.05)。结论瑞芬太尼可能具有调节和改善DCs的免疫功能的作用,有利于术后免疫抑制恢复。     

树突状细胞体外成熟及免疫功能的18F-FDG评价

背景：既往研究表明,不同剂量的电离辐射对树突状细胞的成熟、免疫功能等也可能有一定的影响。目的：分析不同浓度的18 F-FDG对体外培养的人外周血单个核细胞源性树突状细胞的成熟及免疫功能的影响。方法：人外周血单个核细胞源性树突状细胞诱导成熟后,分为5组,分别加入含PBS及92.5×104,185×104,370×104,740×104 Bq/mL浓度的18 F-FDG培养基,作用24 h后收集细胞,检测树突状细胞的凋亡率、细胞表型(CD1α、CD80、CD83、CD86、HLA-DR)表达、同种混合淋巴细胞反应及细胞培养上清液中的巨噬细胞炎性蛋白1α和单核细胞趋化因子1表达。结果与结论：740×104 Bq/mL浓度的18F-FDG可以引起树突状细胞的凋亡、CD86的表达下调,同种T细胞抗原提呈能力下降,单核细胞趋化因子1的分泌下降;其余浓度的18F-FDG对树突状细胞的成熟及免疫功能无明显影响。结果表明较低浓度的18F-FDG对树突状细胞的凋亡、成熟、抗原提呈、迁移能力等影响较小,可以在选择合适浓度的前提下作为一种树突状细胞细胞的体外标记物。     

细菌脂多糖对人树突状细胞分化成熟及表达PD-L1的影响及意义

目的:探讨细菌脂多糖(LPS)对树突状细胞分化、成熟及表达PD-L1的影响。方法:获取人外周血单核细胞来源的树突状细胞(DC),加入不同浓度LPS,流式细胞仪分析CD11c、CD80、CD86及PD-L1表达变化,MTT法测定其刺激T细胞增殖能力,ELISA测定培养上清液IL-12的水平。结果:DC表达CD80/CD86在刺激浓度为10μg/mL时达高峰,后逐渐下降;PD-L1的表达与CD80/CD86一致;而在持续刺激组CD11c、CD80、CD86和PD-L1均呈低水平表达。短期刺激浓度为1.0μg/mL时,DC刺激T细胞增殖能力最强,高于或低于此浓度刺激能力均下降。持续刺激组刺激T细胞增殖的能力最弱。培养上清液中IL-12的水平与T细胞增殖能力一致。结论:高浓度LPS可抑制DC成熟,一定浓度持续刺激可抑制单核细胞向DC分化;PD-L1分子随着DC成熟表达增高,提示PD-L1表达有助于维持适度而有效的免疫应答。     

高血糖对红细胞理化性质及免疫功能影响的研究进展

由于红细胞没有线粒体,其能量供应完全依赖于葡萄糖酵解,但高血糖状态可使血红蛋白糖化,产生氧化应激对细胞组分造成损伤。本文系统回顾糖尿病状态下红细胞的变化,分析糖尿病对红细胞理化性质及免疫功能的影响,以期为糖尿病患者的临床治疗提供参考。     

TLR7刺激对Balb/c小鼠树突状细胞免疫功能影响的体外研究

树突状细胞是迄今所知的功能最强的抗原提呈细胞,是连接固有免疫和适应性免疫的桥梁。未成熟的DC主要发挥抗原摄取作用,摄取抗原后DC成熟并由非淋巴器官到归巢到淋巴结,活化机体初始性淋巴细胞,介导了细胞免疫和体液免疫。     

联合治疗方案对晚期非小细胞肺癌患者预后及免疫功能的影响

目的 探讨树突状细胞-细胞因子诱导杀伤细胞(DC-CIK)过继免疫治疗及多西他赛联合顺铂(DP)化疗方案对晚期非小细胞肺癌患者预后及免疫功能的影响.方法 选取60例晚期非小细胞肺癌患者为研究对象,随机分为DP化疗组(化疗组,n = 30)及DC-CIK细胞过继免疫治疗联合DP化疗组(联合组,n=30).2个疗程后,评估...     

胸腺肽联合化疗治疗非小细胞肺癌的疗效及对免疫功能的影响

目的探讨胸腺肽联合化疗治疗非小细胞肺癌的疗效及对免疫功能的影响。方法选取非小细胞肺癌患者200例,随机分成2组。2组患者化疗均采用基于顺铂的联合治疗方案,分别为长春瑞滨加顺铂(NP)、紫杉醇加顺铂(DP)方案和吉西他滨加顺铂(GP)方案。观察组患者在此基础上采用胸腺肽治疗。分别在化疗前、化疗后7 d以及化疗后28 d观察2组患者的T淋巴细胞亚群和NK细胞的变化,观察化疗过程中骨髓抑制、胃肠道反应等毒性反应。结果在化疗后7、28 d后,2组患者的T淋巴细胞亚群和NK细胞水平有显著差异(P0.05)。观察组患者骨髓抑制的发生率为29%,显著低于对照组的53%(P0.05)。观察组患者胃肠道反应的发生率为63%,显著低于对照组的98%(P0.05)。结论化疗联合胸腺肽可以显著提升非小细胞肺癌患者的免疫能力,减少抗癌药物毒性反应。     

烫伤后高迁移率族蛋白B1对树突状细胞分泌细胞因子的影响

目的观察烫伤后大鼠高迁移率族蛋白B1（HMGBl）对树突状细胞（DC）分泌肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白细胞介素-12（IL-12）的影响及意义。方法将104只大鼠随机分为正常对照组（n=8）、假烫伤组（n=32）、烫伤组（n=32）和丙酮酸乙酯（EP）干预组（n=32），后3组实验动物按观察时间再分为4个亚组，分别于烫伤后1、3、5和7d分别处死各组动物留取脾脏。分离DC后培养24h，收集孵育液，采用酶联免疫吸附试验检测TNF-α和IL-12水平；采用荧光定量聚合酶链反应（PCR）方法检测脾脏组织TNF-α、IL-12和HMGBl的基因表达。结果与相同时间点假烫伤组比较，伤后不同时间点烫伤组HMGBl mRNA表达显著升高（P均〈0．01），DC孵育液中TNF-α产生减少、IL-12的产生变化不明显，脾脏TNF-α mRNA于伤后1d显著升高，5～7d迅速降至假烫伤组水平，IL-12mRNA表达在伤后1d和3d显著下调，5d和7d则迅速增强（P〈0．05或P〈O．01）；与烫伤组比较，EP干预组HMGBl mRNA表达均明显受抑，脾脏DC分泌TNF-α和IL-12的能力以及脾脏IL-12mRNA表达均显著增强（P均〈O．01）。结论严重烫伤后HMGBl的表达异常升高，可导致脾脏DC分泌TNF-α和IL-12的能力下降，从而介导机体的免疫功能抑制。     

孕期规范化管理联合膳食干预对妊娠期糖尿病高危产妇母婴结局及免疫功能的影响

目的:探讨孕期规范化管理联合膳食干预对妊娠期糖尿病高危产妇母婴结局及免疫功能的影响。方法:选取2017年1月至2018年12月中山市博爱医院收治的妊娠期糖尿病产妇86例,按照数字表法将其随机分为两组,对照组进行常规膳食干预,研究组应用孕期规范化管理联合膳食干预,分析两组产妇母婴结局以及对产妇免疫功能的影响。结果:研究组...     

小鼠骨髓来源树突状细胞吲哚胺2,3-过氧化酶表达对T细胞增殖的影响

目的:诱导树突状细胞产生吲哚胺2,3-过氧化酶,从而调节T细胞反应,可能是诱导器官移植免疫耐受的理想途径.观察小鼠骨髓来源的树突状细胞本身及其在多种因素刺激活化状态下吲哚胺2,3-过氧化酶的表达变化,分析其对T细胞增殖的影响.方法:实验于2005-01/08在解放军第二军医大学免疫研究所完成,动物实验方法符合动物伦理学要求.①培养C57BL/6小鼠骨髓来源的树突状细胞,并分别利用脂多糖80 μg/L、CD40L500 μg/L、γ-干扰素50 μg/L及三者联合作用于培养7 d的上述细胞,利用反转录聚合酶链反应检测各组树突状细胞中吲哚胺2,3-过氧化酶mRNA的表达.②培养BALB/C小鼠脾脏来源的T淋巴细胞做为静息T淋巴细胞,并采用抗CD3单抗及抗CD28单抗各1 mg/L刺激T淋巴细胞作为活化T淋巴细胞.将树突状细胞及γ–干扰素作用下的树突状细胞与静息T淋巴细胞及活化T淋巴细胞共同培养,利用混合淋巴细胞反应法测定其刺激T细胞增殖的能力.结果:①培养7 d的树突状细胞及在脂多糖、CD40L刺激下的树突状细胞均未见吲哚胺2,3-过氧化酶mRNA的表达,而γ–干扰素及γ–干扰素 脂多糖 CD40L三者联合刺激下的树突状细胞可检测到吲哚胺2,3-过氧化酶 mRNA的表达.②与树突状细胞相比,γ–干扰素活化的树突状细胞可明显抑制T细胞增殖(P < 0.01),加入色氨酸可使对T细胞增殖的抑制作用有所恢复,同树突状细胞比较差异亦具有显著性意义(P < 0.01).结论:活化的树突状细胞可以产生吲哚胺2,3-过氧化酶,通过降解色氨酸发挥抑制T细胞增殖的作用,可能在移植排斥反应中发挥效应.     

HBcAg和HBeAg对人树突状细胞成熟和功能的影响

目的观察乙型肝炎核心抗原(hepatitis B core antigen,HBcAg)和乙型肝炎e抗原(hepatits B e antigen,HBeAg)对人树突状细胞的影响。方法分离20例健康者外周抗凝血淋巴细胞,将贴壁细胞加重组人白细胞介素4和重组人粒-巨噬细胞集落刺激因子培养至第7天,将树突状细胞分为HBcAg组、HBeAg组和树突状细胞对照组,分别加入HBcAg、HBeAg对树突状细胞刺激培养至第10天,检测刺激培养后细胞表型与分泌的细胞因子及其对树突状细胞体外诱导的淋巴细胞增殖效应和淋巴细胞毒活性的影响。结果 HBcAg组、HBeAg组树突状细胞表面分子(CD83,CD86,HLA-ABC)水平和分泌干扰素-γ、白细胞介素-12p70水平、体外诱导淋巴细胞增殖效应及淋巴细胞毒活性与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);HBcAg组增强树突状细胞的分子表达、分泌白细胞介素-12p70及体外诱导淋巴细胞毒活性与HBeAg组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论 HBcAg和HBeAg可增加人树突状细胞表达成熟活化的分子、分泌细胞因子,增强树突状细胞体外诱导淋巴细胞增殖效应及淋巴细胞毒活性。     

雷公藤内酯醇对原发免疫性血小板减少症患者浆细胞样树突细胞功能及成熟的影响

目的 探讨雷公藤内酯醇对原发免疫性血小板减少症(ITP)患者浆细胞样树突细胞(pDC)功能及成熟的影响.方法 取22例初治ITP患者(初治组)、22例精皮质激素治疗后完全缓解(CR)ITP患者(CR组)及22名健康志愿者(正常对照组)外周静脉血,分离单个核细胞,用流式细胞术分选pDC,分别加入0、5、10、30μg/L的雷公藤内酯醇共孵育.24 h后收集上清液,用ELISA法检测IFN-α、IL-6、TNF-α水平;5d后收集细胞,用流式细胞术检测髓样树突细胞(mDC)CD11c、CD80、CD86表达,光镜下观察mDC的形态,电镜观察mDC的超微结构.结果 加入10μg/L雷公藤内酯醇后初治组IFN-α、IL-6、TNF-α水平分别为(451.32±85.77)、(105.68±23.85)、(135.78±30.62)ng/L,CR组分别为(391.71±72.49)、(84.73±17.77)、(108.16±23.21)ng/L,正常对照组分别为(335.51±67.54)、(73.62±21.82)、(95.58±32.85)ng/L,初治组及CR组高于正常对照组(P<0.05),初治组高于CR组(P<0.05),并呈雷公藤内酯醇浓度依赖性(P<0.05);初治组及CR组mDC表型CD11c、CD80、CD86阳性率高于正常对照组(P<0.05),初治组高于CR组(P<0.05),加入雷公藤内酯醇后mDC表型阳性率呈浓度依赖性降低(P<0.05).加入雷公藤内酯醇后mDC较对照组突起变少、变短,形态上不成熟.结论 雷公藤内酯醇能够减弱ITP患者pDC的功能,并抑制其向mDC的分化和成熟.     

1,25（OH）2维生素D3对人树突状细胞成熟及其介导免疫耐受的影响

本研究旨在探讨1,25(OH)2维生素D3〔1,25(OH)2Vit D3〕对人树突状细胞(DC)分化、成熟及功能的影响及其机制。在体外将人外周血单个核细胞诱导分化成DC,实验组加入1,25(OH)2Vit D31 nmol/L培养9 d,对照组加入等量无水乙醇,流式细胞仪检测DC表面共刺激因子表达水平。混合淋巴细胞培养后,用MTT法评估DC刺激同种异体T细胞增殖的能力。Western blot检测DC吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)蛋白表达。结果表明,与对照组相比,实验组DC表面标志CD80、CD83、CD86表达率低于对照组(P<0.05),CD1a高于对照组(P<0.05);CD80、CD83、CD86、CD1a表达率分别为(40.43±9.83)%、(20.04±4.73)%、(14.45±5.38)%,(58.48±10.72)%;对照组CD80、CD83、CD86、CD1a表达率分别为(29.36±13.34)%、(35.91±10.19)%、(27.15±11.64)、(72.20±12.79)%。实验组DC刺激同种异体T细胞增殖的能力受到抑制;DC表达IDO蛋白上调。结论:1,25(OH)2Vit D3抑制DC的成熟,通过上调DC的IDO蛋白表达抑制DC刺激同种异体T淋巴细胞增殖及介导免疫耐受。     

抑制VEGF表达对白血病来源树突状细胞免疫功能的影响

目的：探讨抑制血管内皮生长因子（VEGF）对白血病来源树突状细胞（Dc）免疫功能的影响。方法：利用反义寡核苷酸下调K562白血病细胞VEGF表达，K562细胞经细胞因子作用诱生白血病DC。利用MTT法检测DC刺激正常外周血T细胞增殖的能力及DC激发的细胞毒T淋巴细胞（CTL）杀伤活性；ELISA法检测DC培养上清液中IL-12及DC与外周血单个核细胞（PBMNC）共同培养液中IFN-γ的含量。结果：K562细胞经5μmol／LVEGF反义寡核苷酸处理24h后VEGF蛋白分泌下降59％，其诱生的DC与正常K562来源的DC相比，实验组DC刺激T淋巴细胞增殖能力、CTL杀伤活性以及DC分泌IL-12和协同刺激外周血单个核细胞分泌TNF-γ的能力明显增强。结论：抑制VEGF表达可促进白血病来源DC免疫功能的成熟。     

Interleukin 1 enhances T-dependent immune responses by amplifying the function of dendritic cells

The function of exogenous murine recombinant IL-1 alpha as a T lymphocyte-activating molecule was examined. IL-1 did not induce IL-2 release or responsiveness in purified T cells regardless of their state of activation: unprimed lymphocytes, freshly sensitized lymphocytes, or memory cells derived from the blasts. Nor did IL-1 synergize with mitogens, or with antigens, to stimulate proliferation. For example the combinations of IL-1 plus Ia+ peritoneal macrophages, or IL-1 plus Con A, were less than 5% as effective in triggering T cell growth as a low dose (1%) of dendritic cells. However, when IL-1 was added at the onset of culture, the response to limiting doses of dendritic cells was increased 3- to 10-fold in several systems: the syngeneic and allogeneic MLR, Con A- and periodate-induced polyclonal mitogenesis, and T-dependent antibody formation against foreign red cells. The amplifying effect of IL-1 could be obtained if the dendritic cells but not the responding lymphocytes were exposed to IL-1 before use as accessory cells. Optimal activation of dendritic cells required a dose of 5 U/ml (50 pM) and 18 h of exposure, and was not due to carryover of IL-1 into the lymphocyte culture. IL-2, IL-3, and cachectin/TNF did not amplify dendritic cell function, while IFN-gamma diminished it. The enhanced function of IL-1-treated dendritic cells was due to an enhanced clustering with helper T lymphocytes in the first day of the MLR response. Therefore IL-1 does not seem to act as an activating factor for most peripheral T lymphocytes. Instead, IL-1 enhances the function of accessory dendritic cells and represents the first molecule that has been shown to enhance the immune response at this critical level.     

Inosine 5'-monophosphate dehydrogenase inhibition by mycophenolic acid impairs maturation and function of dendritic cells

BACKGROUND: The mechanism of action of mycophenolic acid (MPA) has been described as a blockade of inosine 5'-monophosphate dehydrogenase (IMPDH) and is thought to selectively influence T- and B-lymphocytes due to their strong dependency on guanine nucleotides synthesized via the de novo purine synthesis pathway. Recent evidence suggests MPA to affect antigen-presenting cells. METHODS: Using CD14+ derived human dendritic cells (DC) we have investigated the effects of MPA on differentiation, maturation and function and studied intracellular nucleotide content and IMPDH activity. RESULTS: GTP content and IMPDH activities of DC were strongly and dose-dependently decreased when MPA was present during the entire culture period or was added after the fifth (immature DC) or the seventh (mature DC) day of culture. Concurrent to low GTP levels, a dose-dependent reduction in the expression of CD80, CD86, CD40, CD54 and CD83 was seen which was accompanied by a decreased capacity of DC to stimulate T-cells. Our data for the first time shows a direct effect of MPA on the maturation and function of human CD14+ derived DC, indicates a role of IMPDH and a dependency on the de novo purine synthesis pathway.     

血液储存时间对红细胞免疫功能的影响与临床安全输血的研究

目的探讨血液离体后在4℃保存过程中红细胞免疫功能的变化及对临床安全输血的影响。方法随机抽取50份常规CPD保养液充分混匀的全血,从细管小辫端取少量血样作为新鲜血样供当天检测,其余热合封闭成5段小样4℃保存备用(与血液相同条件保存);每次各取1个小样测定,分别于1、2、3、4和5周,对上述标本分别做红细胞C3b受体(RBC-C3b)和红细胞免疫复合物(RBC-IC)检测,同时在d0、d14和d28任取其中25份标本检测RBC超氧化物歧化酶(RBC-SOD)水平和酵母菌激活全血细胞免疫反应产生白细胞介素8(IL-8)的含量。结果血液保存时间在2周以内红细胞免疫功能有所下降,但不明显,随着保存时间的延长,RBC-C3b、RBC-SOD明显降低,d0、d14和d21 RBC-C3b RBC-SOD分别为18.84±2.23、16.54±2.42、14.28±2.15;为16222±4322、14111±4213、10459±389;而RBC-IC、IL-8则增高,在d0、d14和d28 RBC-IC分别为5.15±1.56、5.97±1.19、6.72±1.37;IL-8则为65.51±46.32、80.34±39.25、109.67±26.89。结论血液离体后在4℃保存过程中,随时间的延长,红细胞膜有所受损,表现为红细胞(部分)免疫功能降低。在大手术、老年人、严重的心脑血管疾病及因补体系统导致溶血性贫血等患者需要输血治疗时,尽可能输注较年轻(<14d)的血液有利于输血安全。     

Effects of pentoxifylline on differentiation, maturation, and function of human CD14+ monocyte-derived dendritic cells

Pentoxifylline (PTX) is a nonspecific phosphodiesterase inhibitor which has potent immunoregulatory and antiinflammatory effects. Although its immunomodulation property has been recognized, it is not clear whether PTX could affect dendritic cells (DCs), the most efficient antigen-presenting cells. The purpose of this study was to determine whether PTX could suppress DC differentiation, maturation, and its associated functions. Immature DCs (iDCs) were generated from human peripheral blood mononuclear cell CD14+ monocytes cultured with granulocyte macrophage colony stimulating factor and interleukin-4 for 5 days. PTX concentration-dependently suppressed the expression of iDC differentiation markers including CD54, CD80, CD86, and human leukocyte antigen-DR. In addition, PTX also inhibited DC maturation marker CD83 expression after stimulating DCs with lipopolysaccharide. Furthermore, PTX inhibited the antigen-uptake ability of DCs when tested by fluorescein isothiocyanate-dextran endocytosis assay. PTX significantly reduced the production of TNF-alpha and IFN-gamma in mature DCs (mDCs). Consequently, PTX-treated mDCs showed a reduced activity of mDC-induced T-cell allostimulation and proliferation by mixed-lymphocyte reaction (MLR) assay. Therefore, PTX significantly inhibits CD14+ monocyte-derived DC differentiation, maturation, antigen-uptake ability of iDCs, and antigen-presentation ability of mDCs possibly due to the suppression of TNF-alpha and IFN-gamma production. These results suggested that inhibitory effects of PTX on DCs may contribute its antiinflammatory and immunoregulatory functions.