延胡索有效部位提取工艺研究

目的：改进延胡索总生物碱的提取方法,寻找延胡索总碱最佳提取工艺。方法：采用正交优选法,以延胡索乙素为检测指标,采用高效液相色谱法测定延胡索乙素含量。结果：酸碱度对延胡索乙素的得率有极显著的影响。结论：采用碱性甲醇提取最佳。     

胡芦巴碱超声提取工艺研究

目的 研究胡芦巴碱最佳超声提取工艺。方法 采用超声提取法，以胡芦巴碱的提取率为指标，采用正交试验考察各因素对其提取率的影响，优选出胡芦巴碱最佳超声提取工艺。结果 胡芦巴碱最佳超声提取工艺为70%乙醇提取30 min、提取功率500 W，胡芦巴碱提取率最高，平均提取率为0.588%。结论 本实验确定的超声提取工艺可用于胡芦巴碱的提取。     

正交试验法优选疏毛吴茱萸提取工艺

目的 优选疏毛吴茱萸的提取工艺。方法 以柠檬苦素、吴茱萸碱和吴茱萸次碱为定量指标成分,采用HPLC法测定,以浸膏得率和指标成分平均提取率为指标,选择乙醇体积分数、提取时间、提取次数和粒度为考察因素,选用L₉(3⁴) 正交表安排试验。结果 疏毛吴茱萸最佳提取工艺为原药材以10倍量80%乙醇回流提取3次,每次1 h。结论 优选的疏毛吴茱萸提取工艺合理可行,为实际生产提供参考。     

SFE等方法提取延胡索中延胡索乙素的研究

目的 确定延胡索中延胡索乙素的提取工艺条件。方法 以延胡索乙素的提取率及提取液的含固量为指标，考察不同提取方法对提取效果的影响。结果 SFE法不仅溶剂用量较少，提取率高，而且含固量低。结论 SFE法作为延胡索中延胡索乙素的提取工艺是切实可行的。     

正交试验优选人参多糖的提取工艺

目的 优选人参多糖的最佳提取工艺。方法 以多糖提取率、糖醛酸提取率和相对分子质量为指标,比较3种不同提取方法（水提、酸提和碱提）的提取效果,并采用正交试验优选最佳提取工艺。结果 人参多糖的最佳提取工艺为15倍量水,100 ℃水浴提取3次,每次3 h。结论 该工艺操作简单、稳定性好,可用于产业化生产。     

超声法提取延胡索有效部分的工艺研究

目的减少常规水煮温度对延胡索乙素的破坏,提高延胡索有效部分的利用率.方法以延胡索乙素为指标成分,用薄层荧光扫描法测定含量,采用正交试验法优选超声法提取延胡索有效部分的最佳工艺条件.结果粉末超声法提取延胡索最佳条件为药材粒度为40目、加水30倍、提取时间为30 min、提取次数1次.结论与常规水煮法、粉末温浸(80℃)法比较,用粉末超声法提取延胡索中的有效成分,节能、省时、提取率高,能避免热敏性成分延胡索乙素的破坏.     

延胡索生物碱超声法提取工艺的研究

目的探讨延胡索生物碱超声提取的最佳工艺。方法以浸膏得率与延胡索乙素质量分数为考察指标,通过L9(34)正交试验水平表考察乙醇体积分数、提取溶剂用量及提取时间对延胡索生物碱提取效果的影响,从而确定最佳提取工艺。结果延胡索生物碱提取的最佳工艺为加入7倍量50%(体积分数)乙醇,超声提取3次,每次45 min。结论该提取工艺合理、经济可行,适用于延胡索生物碱的提取。     

延胡索药材及饮片的UPLC质量控制方法

[目的] 检测延胡索药材及饮片中有效成分的含量,建立延胡索药材和饮片的超高液相色谱法(UPLC)质量控制方法。[方法] 采用UPLC检测方法,ACQUITY UPLC BEH C₁₈色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7 μm),乙腈(B)-0.1%甲酸水溶液,调pH值至5.0(A),流速:0.3 mL/min,柱温:45 ℃,进样量:5 μL;梯度洗脱。以延胡索乙素和去氢紫堇碱的含量为指标对延胡索的水提液进行检测。[结果] 样品中延胡索乙素的含量在0.229 1～0.775 5 mg/g之间,去氢紫堇碱的含量在0.781 0～2.931 0 mg/g之间,不同样品延胡索乙素和去氢紫堇碱的含量差异很大。[结论] UPLC法的灵敏度更高、检测速度更快,适用于组分多、成分复杂的中药材的分析及质量的评价。     

制川乌白芍合煎微波提取工艺研究

目的 优选微波法提取制川乌配伍白芍中有效成分乌头总生物碱和芍药苷的工艺条件。方法 采用单因素结合正交设计法,优选出65%乙醇为提取溶媒,进一步考察了微波功率、微波辐射时间、乙醇体积分数及料液比4个因素,用紫外可见分光光度法测定乌头总生物碱,采用HPLC法测定芍药苷,并以其量及浸膏得率作为评价指标。结果 以65%乙醇为提取溶媒,在微波功率800 W,微波辐射时间为0.5 h,固液比为1∶10时乌头总生物碱和芍药苷的提取量最高且浸膏得率最低。结论 微波提取时间短,有效成分提取率高,此方法是一种有发展潜力的工艺。     

正交试验优化羌黄祛痹颗粒处方药材醇提工艺

目的 优选羌黄祛痹颗粒处方药材乙醇提取的最佳工艺。方法 采用正交试验法,以异欧前胡素、芍药苷提取率为指标,优选最佳醇提工艺。结果 羌黄祛痹颗粒处方药材的最佳醇提工艺为采用5倍量95%乙醇提取2次,每次60 min。结论 优选的工艺稳定可行,可作为实际生产工艺。     

乌药总生物碱提取工艺的优选及镇痛作用的研究

目的 优选乌药总生物碱（TALR）的提取工艺并研究其镇痛作用。方法 采取乙醇回流法提取,考察乙醇浓度、乙醇用量、提取时间、提取次数影响,进行L₉(3⁴) 正交试验设计,以乌药总生物碱的紫外吸收峰最大吸光度A值为指标进行优选。镇痛实验取最佳提取方法所得TALR的不同浓度水溶液ig给予小鼠后,采用醋酸小鼠扭体法研究TALR的镇痛作用。结果 优选工艺为：加入14倍量95%乙醇提取1 h,酸溶碱沉得TALR,因其A值远高于其他工艺,故判断此法所得TALR质量分数相对最高。药理实验表明TALR可显著减少小鼠扭体次数。结论 优选工艺简单可行,质量分数较高;TALR具有较强的镇痛作用。     

麸炒苍术标准汤剂的质量评价

[目的] 建立麸炒苍术标准汤剂的质量评价方法,为麸炒苍术汤剂和配方颗粒等常用剂型的质量控制提供参考依据。[方法] 收集合格的18批麸炒苍术饮片,制备相应标准汤剂,采用超高效液相色谱（UPLC）法测定指标成分绿原酸的含量,计算相应转移率及出膏率,并建立麸炒苍术标准汤剂指纹图谱,采用液相-质谱联用（LC-MS）法对共有峰进行结构确认。[结果] 18批麸炒苍术标准汤剂出膏率为30.4%~41.4%,绿原酸含量为0.121~0.745 mg/g,转移率为30.7%~79.5%,麸炒苍术标准汤剂指纹图谱共标定18个共有峰,相似度均在0.90以上,并确认5-羟甲基糠醛、绿原酸、咖啡酸等特征峰。[结论] 麸炒苍术标准汤剂制备规范,工艺稳定,检测方法的精密度、稳定性和重复性良好,可为麸炒苍术标准汤剂终端产品的质量控制提供参考。     

氟喹诺酮C-3均三唑席夫碱硫乙酸的合成及抗肿瘤活性(X)

为进一步发现培氟沙星C-3羧基等排体-均三唑的结构优化新方法,用硫乙酸和席夫碱侧链作为其修饰基团,设计合成了12个新的C-3均三唑硫乙酸席夫碱目标化合物(7a~7l),其结构经元素分析和光谱数据确证,评价了它们对SMMC-7721、L1210和HL60 3种肿瘤细胞株的体外抗增殖活性。初步药理筛选结果表明,目标化合物的抗肿瘤活性显著高于母体化合物1和前体胺6,尤其是苯环含氟原子和硝基的目标化合物(7j,7l)对SMMC-7721的IC₅₀已达到毫摩尔浓度。实验结果表明,氟喹诺酮C-3羧基的等排体均三唑杂环用席夫碱和硫乙酸这两种功能基侧链修饰有利于提高氟喹诺酮的抗肿瘤活性。     

氟喹诺酮C-3羧基等排体的合成及抗肿瘤活性VI.均三唑-酰腙甲硫醚衍生物

为寻找氟喹诺酮羧基等排体的优化方法,基于药效团拼合原理,用功能酰腙链作为培氟沙星C-3羧基等排体均三唑的修饰基团,设计合成了C-3均三唑酰腙硫醚衍生物17个(6a~6q),其结构经元素分析和光谱数据确证,并评价其对SMMC-7721、L1210和HL60 3种肿瘤细胞株的体外增殖抑制活性。初步研究表明,目标化合物的抗肿瘤活性显著高于母体化合物;同时,酰腙修饰基芳香环上带吸电子取代基的化合物其抗肿瘤活性显著高于供电子基的活性,尤其是苯环带羧酸基的化合物其活性与对照阿霉素相当,这提示等排体修饰基羧基的存在有利于提高抗肿瘤活性。     

制川乌与法半夏不同比例配伍组合对乌头类生物碱的影响

目的 研究制川乌与法半夏不同配伍组合中乌头类生物碱的变化趋势,阐明两药配伍后的化学物质基础。方法 采用LC-MS技术分析久煎处理的不同配伍组合,结合药液pH值的变化,运用化学计量学方法寻找、分析差异标记物。结果 制川乌与法半夏不同配伍组合化学成分的量差异明显,随着法半夏比例的增大,药液pH值呈上升趋势,乌头类双酯型生物碱的量整体呈下降趋势。结论 制川乌与法半夏配伍后毒性物质减少,这可能与法半夏中的某些成分影响了乌头类生物碱的稳定状态有关。     

附子-甘草配伍前后汤液中沉积物的化学组分对比研究

目的 研究附子-甘草配伍前后汤液中沉积物的化学组成,以揭示附子-甘草配伍作用机制。方法 采用高效液相-飞行时间质谱（HPLC-TOF-MS）对比分析附子-甘草合煎前后沉积物中6种酯型生物碱的量,借助傅里叶变换红外光谱（FTIR）及二阶光谱比较附子-甘草合煎前后沉积物的结构变化。结果 附子配伍甘草合煎过程中,附子中大量酯型生物碱被甘草成分复合而发生沉积,沉积物产生的机制初步确定为生物碱中叔胺N与甘草羧酸C＝O发生缔合。结论 初步探析了附子-甘草合煎前后汤液中沉积物化学组分变化,有助于揭示附子-甘草配伍过程中化学组分变化及配伍作用机制。     

半夏干燥过程中褐变机制的研究

目的 研究导致半夏干燥过程中发生褐变的机制。方法 采用紫外分光光度法检测干燥过程中半夏中多酚氧化酶活性的变化,使用色彩色差计测量半夏表面颜色的变化值,考察酶促反应是否是发生褐变的唯一机制。采用HPLC-ELSD法检测半夏中还原性糖的种类及含量,分析半夏中的氨基酸种类,判断其发生羰氨反应的可能性。结果 导致半夏褐变的反应并不唯一,酶促反应对其颜色变化的影响主要发生在干燥前期,羰氨反应对半夏褐变也有影响。结论 导致半夏干燥过程中发生褐变的机制并不单一,酶促反应和羰氨反应都对其颜色变化有影响。     

MicroRNA-340在肝细胞肝癌中抑制细胞增殖并促进凋亡

目的 探讨微RNA-340(miR-340)在肝细胞肝癌中的表达特点及其对细胞生物学行为的影响.方法 收集重庆医科大学附属第一医院肝胆外科2015年3月至2016年9月收治的40例肝细胞肝癌患者手术后切除的癌组织和癌旁组织标本.通过qPCR检测组织标本中miR-340的表达,并分析miR-340表达与临床病理学指标的关系.分别培养肝癌细胞株Hep3B、Bel-7402、HepG2和SMMC-7721以及正常肝细胞株HL-7702,48 h后使用qPCR检测5种细胞中miR-340的表达水平.通过转染增加或抑制SMMC-7721细胞中miR-340的表达,然后分别于细胞培养24、48、72 h后采用CCK-8法检测SMMC-7721细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡.通过生物信息学软件预测miR-340的靶基因,并使用qPCR和蛋白质印迹法进一步验证miR-340对靶基因的作用.结果 癌组织中miR-340的表达低于癌旁组织(P＜0.01),并且miR-340的表达与乙肝表面抗原、HBV DNA载量、肿瘤大小以及临床TNM分期有关(P＜0.01).正常肝细胞HL-7702内miR-340的表达高于4种肝癌细胞Hep3B、Bel-7402、HepG2和SMMC-7721(P＜0.05,P＜0.01).增加miR-340表达可抑制SMMC-7721细胞的增殖(P＜0.05,P＜0.01),而抑制miR-340的表达则促进SMMC-7721细胞的增殖(P＜0.05,P＜0.01);增加miR-340的表达可促进SMMC-7721细胞的凋亡(P＜0.01),而抑制miR-340则减少凋亡(P＜0.01).生物信息学分析显示S期激酶相关蛋白2(SKP2)基因是miR-340下游的一个靶基因.qPCR和蛋白质印迹分析结果显示增加SMMC-7721细胞中miR-340的表达可抑制SKP2的mRNA和蛋白表达,抑制miR-340表达则增加SKP2的mRNA和蛋白表达.结论 miR-340的异常表达可能与乙肝病毒的感染有关,其异常表达有助于评价病情以及预后.在肝癌细胞系SMMC-7721细胞中,miR-340能够抑制细胞增殖并促进凋亡,这一作用结果可能是通过miR-340对SKP2的抑制而实现的.     

丹皮酚增强顺铂对人肝癌细胞SMMC-7721的增殖抑制作用

目的探讨丹皮酚和顺铂联合应用对人肝癌细胞SMMC07721的增殖抑制作用。方法用不同浓度的丹皮酚、顺铂和两药联用处理人肝癌细胞SMMC-7721,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法测定药物在体外对人肝癌SMMC07721细胞的增殖抑制作用,应用两药相互作用指数（CDI）进行联合用药分析。结果丹皮酚（7．81-250mg／L）和顺铂（0．625～20mg／L）单独应用均对人肝癌SMMC-7721细胞有抑制作用,呈现剂量效应关系。丹皮酚与顺铂联合应用后对人肝癌SMMC-7721细胞的抑制率明显大于单药,有显著的协同杀伤作用。结论丹皮酚与顺铂联合应用具有明显的协同抗肝癌细胞株SMMC-7721增殖的作用。