辽东楤木叶总皂苷对人胃癌BGC细胞凋亡的影响

目的:探讨辽东楤木叶总皂苷(ETS)对人胃癌BGC细胞凋亡的影响。方法:采用MTT比色法测定辽东楤木叶总皂苷在体外对人胃癌BGC细胞增殖的影响;激光共聚焦显微镜观察FITC-Annexin V/PI双染法检测辽东楤木叶总皂苷作用于人胃癌BGC细胞后引起细胞凋亡的形态特征。结果:MTT比色法结果表明,辽东楤木叶总皂苷各剂量组能不同程度抑制人胃癌BGC细胞的增殖,激光共聚焦FITC-Annexin V/PI双染法检测辽东楤木叶总皂苷可诱导人胃癌BGC细胞出现凋亡早、中、晚期的细胞形态。凋亡早期仅细胞膜呈绿色,细胞核不染色;凋亡中、晚期则细胞膜呈绿色,细胞核呈红色。结论:辽东楤木叶总皂苷能够有效抑制癌细胞增殖、诱导凋亡,具有明显的抗肿瘤作用。     

药对肺癌细胞凋亡信号转导影响的研究进展

诱导肿瘤细胞凋亡是肿瘤治疗的新途径，在治疗肺癌方面尤其引人注目。中药单方或复方可以通过影响肺癌细胞Fas、Bcl-2、TNF等的表达和肺癌细胞内cAMP的浓度，激活相应的细胞凋亡信号转导途径，诱导肺癌细胞凋亡。     

蛞蝓提取物对人肺癌细胞凋亡的影响

目的：了解蛞蝓提取物对人肺癌细胞凋亡的影响。方法：运用流式细胞光度术检测细胞凋亡,分析蛞蝓提取物对人肺癌细胞A549凋亡的影响。结果：蛞蝓提取物能够诱导肺癌A549细胞发生凋亡,其凋亡率达5．3～15．1％,细胞凋亡率与药物浓度成正相关。结论：蛞蝓提取物町诱导人肺癌细胞凋亡。     

解毒消癥饮诱导胃癌细胞凋亡相关基因表达的研究

目的：探讨中药复方解毒消癥饮对人胃癌细胞凋亡相关基因表达的影响。方法：将人胃癌细胞株BGC-823分成空白对照组及药物干预低、中、高剂量组,分别加入空白对照血清和相应剂量的解毒消癥饮大鼠含药血清,培养24h、48h和72h;免疫荧光染色法检测细胞凋亡相关基因Bax、Bcl-2、Fas及Fas-L的表达,应用激光共聚焦显微镜观察并做半定量分析;另行电镜制样、观察。结果：胃癌细胞经解毒消癥饮含药血清干预后,Bax、Fas表达明显增加（P〈0.05）,且随药物浓度增加该趋势更加明显,Fas-L则随药物浓度的增加表达明显减弱（P〈0.05）;Bcl-2表达量无明显变化。电镜见胃癌细胞出现早期凋亡现象,主要为细胞核异染色质边聚;线粒体嵴消失、基质深染。结论：解毒消癥饮可能通过调控胃癌细胞Bax、Fas及Fas-L等基因,从而促进细胞凋亡,并降低细胞免疫逃逸的功能。     

中药诱导肺癌细胞凋亡的研究进展

细胞凋亡（apoptosis）又称程序性细胞死亡（programmedcelldeath,PCD）,是个体发育过程中基因调控下的细胞自杀活动,是多细胞有机体为调控机体发育、维护内环境稳定,由基因编码程序的细胞主动死亡过程。可以说细胞凋亡是“为生而死”,是生命体适应环境而生存的一种重要机制。细胞凋亡的分子机制迄今尚未完全阐明,     

三叶青提取物对人肺癌H1299细胞凋亡的影响及机制研究

目的探讨三叶青提取物对人肺癌H1299细胞增殖抑制、凋亡作用及其机制。方法采用Cell Counting Kit-8（CCK-8）检测三叶青提取物对H1299细胞增殖的抑制作用;采用倒置显微镜观察三叶青提取物对H1299细胞形态的影响;荧光显微镜观察三叶青提取物作用细胞后经Hoechst 33258染色的凋亡形态变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率;蛋白印迹法（Western blot）检测pro-caspase-3、9,cle-caspase-3、9,poly-ADP-ribose polymerase（PARP）蛋白表达变化。结果与对照组比较,浓度为0.5、1、5、10 mg/m L三叶青提取物作用H1299细胞后抑制率升高（P〈0.05,P〈0.01）;同时作用时间越长,抑制率越高（P〈0.01）。倒置显微镜下观察给药后细胞形态明显改变,细胞减少;荧光显微镜下观察荧光染色后细胞核浓染和凋亡小体形成。流式细胞仪检测结果显示细胞凋亡率呈明显的量-效关系。Western blot结果表明：与对照组比较,浓度为5、10 mg/m L三叶青提取物明显抑制H1299细胞中pro-caspase-3、9和PARP蛋白表达,增加cle-caspase-3、9,cle-PARP蛋白的表达,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论三叶青提取物对人肺癌H1299细胞具有明显抑制其增殖,促进细胞凋亡作用,且其机制可能与激活caspase蛋白表达有关。     

异硫氰酸苯乙酯抑制PI3K/Akt通路激活从而促进肺癌细胞凋亡

目的：观察异硫氰酸苯乙酯（PEITC）诱导肺癌NCI-H446细胞凋亡的分子机制。方法：体外培养NCI-H446细胞,分别用10,30和50μmol/L PEITC作用24h,MTT法和流式细胞术分别检测细胞的增殖与凋亡;Western blot检测Akt磷酸化、细胞内凋亡相关蛋白bcl-2及Bax的含量。结果：不同PEITC处理后,可显著抑制NCI-H446细胞增殖,并诱导其凋亡。PEITC处理后,细胞内bcl-2含量显著高于对照组,同时,bax含量有所降低。PEITC也能抑制NCI-H446细胞中Akt的磷酸化水平。结论：PEITC可能通过影响PI3K/Akt的活性而发挥促凋亡作用。     

榄香烯对人肺癌细胞表面所表达与侵袭转移相关黏附蛋白的影响

目的：观察榄香烯对肺癌细胞系表面所表达与侵袭、转移相关的黏附蛋白的影响。方法：利用激光共聚焦显微镜观察高转移人巨细胞肺癌细胞PG和低转移人肺腺癌细胞PAa表达的血小板免疫相关抗原CD42a、TSP、CD9的表达情况；利用流式细胞仪检测的高转移人巨细胞肺癌细胞PG和低转移人肺腺癌细胞PAa表达的血小板免疫相关抗原CD42a、TSP、CD9的表达情况及二种癌细胞与高、中、低浓度的榄香烯注射液共同孵育后CD42a、TSP、CD9的表达改变。结果：利用激光扫描可见CD9、CD42a、TSP均匀的表达于细胞表面。流式细胞术结果显示，PG细胞表达的CD9阳性细胞数目和平均荧光强度低于PAa细胞，而PG细胞表达的CD42a、TSP阳性细胞数目和平均荧光强度均高于PAa细胞，从总的趋势来看，榄香烯注射液增高PG和PAa细胞CD9的表达，降低其CD42a、TSP的表达。结论：PG细胞系的转移能力高于PAa细胞系；对肺癌细胞表面所表达与侵袭、转移相关的粘附蛋白的影响，可能是榄香烯注射液抗肺癌转移的分子机理。     

六君子汤提取物对食管癌Eca109细胞的增殖抑制作用

目的:研究六君子汤乙酸乙酯提取物对食管癌Eca109细胞增殖的影响。方法:以104个/孔的细胞密度接种96孔板中,培养24 h后,各组分别加入不同浓度六君子汤提取物的培养液100μL,质量浓度为10,20,40,60,80,100 mg·L-1,另设空白孔,每组设8个复孔,采用MTT比色法检测六君子汤提取物对食管癌Eca109细胞株生长抑制作用,采用流式细胞仪检测药物作用后细胞凋亡情况,激光共聚焦显微镜观察药物作用后细胞形态变化。结果:在10~100 mg·L-1内,不同浓度六君子汤提取物能有效抑制Eca109细胞增殖(P<0.05)。21.06,49.65,67.47 mg·L-1的六君子汤提取物作用Eca109细胞48 h,细胞凋亡率明显增加,与空白组相比,差异有统计学意义(P<0.05);并且在激光共聚焦显微镜下观察到凋亡小体,与空白组相比,早期凋亡和晚期凋亡的细胞数量明显增多。结论:六君子汤提取物能显著抑制食管癌Eca109细胞增殖,诱导细胞凋亡,其作用机制有待进一步研究。     

益肾健脾化瘀法治疗黄褐斑的研究

目的:观察益肾健脾化瘀法治疗黄褐斑的临床疗效及治疗前后黑素细胞及黑素的情况。方法:将130例黄褐斑病人随机分为两组:治疗组90例,给予益肾健脾化瘀祛斑方煎服治疗;对照组六味地黄丸、逍遥丸口服治疗。观察两组患者治疗前后皮损色素、皮损面积、黑素细胞的形态、黑素的含量等指标。结果:治疗组、对照组的有效率分别为88.89%(80/90)、27.50%(11/40),治疗组的疗效明显优于对照组(P<0.01);共聚焦激光扫描显微镜观察130例患者中,75例为真皮型、55例为表皮真皮混合型患者,治疗有效的患者表皮和/真皮的黑素含量明显减少,树枝状的黑素细胞树突明显变短变小或消失。治疗组皮损处与治疗前相比,治疗后MCI显著减少,P<0.05,对照组皮损处治疗前后MCI相比,差异不明显,P>0.05。结论:肾健脾化瘀法可抑制黑素细胞的树突化、减少黑素含量,因而治疗黄褐斑有效。     

激光共聚焦显微镜技术在中药研究中的应用

激光共聚焦扫描显微镜(LSCM)是近年来发展起来的一种高精度显微镜,具有高分辨率、高灵敏度、三维重建等优点,作为现代化的显微成像系统,被广泛应用于生物、医药、化工等研究领域,在中药研究中发挥日趋重要作用。本文概述了LSCM技术的基本原理及其在中药组织形态、组织结构、遗传育种、药效学等方面的应用,并对该技术存在问题及在中药研究领域的应用前景进行了讨论和展望。     

重楼皂苷对SGC-7901细胞增殖抑制及诱导凋亡的实验研究

目的 研究重楼皂苷对SGC-7901人低分化胃腺癌细胞的作用及影响机制.方法 在体外应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察重楼皂苷对细胞生长的抑制作用;应用Fluo-3/AM 荧光标记技术和激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)检测不同药物浓度处理的SGC-7901人低分化胃腺癌细胞[Ca2+]i 的变化.结果 重楼皂苷可显著抑制肿瘤细胞的增殖作用;重楼皂苷作用24h后能引发SGC-7901细胞[Ca2+]i的明显增加.结论 重楼皂苷可能通过增加细胞内[Ca2+]i诱导细胞凋亡,从而发挥其抗SGC-7901细胞增殖的作用.     

苦参素诱导卵巢癌HO8910细胞凋亡

目的:探讨苦参素对卵巢癌细胞株HO8910的细胞凋亡作用.方法:用苦参素处理HO8910细胞,采用透射电镜观察细胞形态学改变以及应用流式细胞仪观察细胞凋亡过程中细胞周期的变化.结果:在苦参素作用下,HO8910细胞呈凋亡改变,细胞表面突起减少或脱失,部分细胞核染色凝聚,边移.细胞凋亡的同时,细胞周期发生特定的改变.结论:苦参素不能抑制卵巢癌细胞增殖,而且能诱导卵巢癌细胞凋亡.     

熊果酸诱导SKOV3细胞凋亡与线粒体凋亡通路

目的:观察熊果酸(Ursolic acid,UA)是否通过激活卵巢癌SKOV3细胞的线粒体凋亡通路诱导细胞凋亡。方法:MTT法检测细胞增殖抑制,采用流式细胞术检测细胞凋亡和线粒体膜电位,免疫印迹法检测细胞色素C的表达,分光光度法检测Caspase-9、Caspase-3的活性。结果:熊果酸可以抑制SKOV3细胞增殖,40μmol/L熊果酸,作用于SKOV3细胞48 h,增殖抑制率可以达到76.85±3.1%;UA可以诱导细胞发生凋亡;熊果酸可以降低SKOV3细胞的线粒体膜电位,促进细胞色素C的表达,增强Caspase-9、Caspase-3的活性。结论:熊果酸可以促进SKOV3细胞的凋亡,可能的作用机制之一是可以激活SKOV3细胞的线粒体凋亡通路。     

半枝莲诱导人肺巨细胞癌细胞株PG细胞凋亡的初步研究

1实验材料药品:半枝莲Herba Scutellariae Barbatae购自济南市建联中药店,并由山东中医药大学药学院生药系石俊英教授鉴定。人肺巨细胞癌细胞株PG细胞,由山东省医学科学院基础所提供。动物:Wistar大鼠,雄性,体重200~240g,由山东中医药大学实验动物中心提供。实验仪器与试剂:FACScan型注式细胞仪,美国BD公司。倒置相差显微镜:美国AO。小牛血清:杭州四季青生物材料研究所。顺铂(DDP):齐鲁制药有限公司。胰蛋白酶:GIBCO分装,伯安生命技术有限公司。2实验方法2.1半枝莲水提取物的制备称取半枝莲200g,加适量水浸泡1~2小时,水煎煮提取两…     

激光共聚焦显微技术及其在抗肿瘤药物研究中的应用

激光共聚焦显微镜(1aser scanni con focal microscope，ISCM)是一项集激光技术、电子技术、光学设计及计算机于一体的高科技产品，由激光器、荧光显微镜、共聚焦探测系统和图像分析系统等几部分组成，是近代生物医学图像分析仪器最重要的发展之一，它是在荧光成像基础上加装激光扫描装置，利用计算机进行图像处理，使用紫外线或可见光激发荧光探针，从而得到细胞或组织内部微细结构的荧光图像，在亚细胞水平上观察诸如Ca2 、pH值、膜电位等生理信号及细胞形态的变化，成为形态学、分子细胞生物学、神经科学、药理学、遗传学等领域中新一代强有力的工具。     

白藜芦醇抑制胆囊癌细胞生长与诱导细胞凋亡的实验研究

目的:探讨白藜芦醇(Res)对胆囊癌细胞(GBC)和正常成纤维细胞(3T3)体外增殖的影响,进而观察Res对GBC和3T3细胞凋亡的影响.方法:MTT法测定肿瘤细胞生长抑制率;流式细胞术分析细胞周期,检测细胞凋亡;SABC法检测细胞bcl-2、c-myc、p53蛋白表达.结果:Res呈浓度依赖性抑制GBC细胞的生长与增殖(P＜0.01),抑制率最高可达54%.Res能明显诱导GBC细胞凋亡,凋亡率最高为30.52%;处理组较对照组G1期细胞由34.88%上升至55.47±3.95%,S期细胞减少8.41%～17.54%,呈明显的G0/G1期阻滞现象.GBC细胞的bcl-2、c-myc基因蛋白表达降低,而p53基因蛋白表达增强.结论:Res能通过诱导GBC细胞凋亡而抑制其生长与增殖,但对3T3细胞无此作用.     

白毛藤诱导人肺癌A549细胞凋亡及其作用机制的研究

目的：研究白毛藤诱导肺癌细胞凋亡的作用及其机制。方法：荧光显微镜观察不同浓度白毛藤诱导A549细胞凋亡的作用,RT—PCR检测Bcl—xl、p53基因表达量的变化。结果：白毛藤具有诱导A549细胞凋亡的作用,并且上调p53基因、降低Bcl—xl基因的表达。结论：白毛藤促进A549细胞凋亡,其机制可能与激活p53基因、抑制Bel—xl基因表达有关。     

TEM观察益肺饮诱导肺癌细胞凋亡

电镜观察益肺饮诱导肺癌细胞凋亡。镜下可见：细胞凋亡分为早期阶段、中期阶段、凋亡小体形成阶段和晚期阶段（3期4阶段）,其超微结构主要可见到细胞形态、胞浆、胞核、染色质的变化,及细胞凋亡的特异性标志——凋亡小体。提示：细胞凋亡多见孤立、分散的癌细胞。益肺饮可诱导肺癌细胞凋亡。