Upregulation of sFlt-1 by trophoblasts induces the barrier dysfunction of glomerular endothelial cells

This study examined the effect of over-expression of sFlt-1 by trophoblasts on the barrier function of glomerular endothelial cells and the role of VEGF in this process in order to explore the pathogen...     

先兆子痫患者母、脐血NK细胞增殖能力及杀伤功能测定

目的:测定先兆子痫患者母、脐血NK细胞增殖能力及杀伤功能,探讨先兆子痫的病因。方法:采用MTT法和51Cr释放法分别对先兆子痫患者(n=18)和正常晚孕妇女(n=18)的母血、脐血NK细胞进行细胞增殖能力和杀伤功能测定,同时测量NK细胞含量,并以NK-92细胞作为阳性对照。结果:先兆子痫患者和正常晚孕妇女脐血NK细胞数均高于母血(P<0.05);先兆子痫患者NK细胞增殖能力高于正常晚孕组(P<0.05);2组中脐血NK细胞增殖能力高于母血(P<0.05);先兆子痫患者NK细胞杀伤能力高于正常晚孕组(P<0.05)。结论:先兆子痫患者体内NK细胞数量及功能均表现增强状态,且脐血明显高于母血,从而在妊娠过程中影响母胎免疫耐受。     

高浓度胰岛素对无血清培养的人脐静脉内皮细胞一氧化氮产生的影响

目的　观察无血清培养条件下 ,高浓度胰岛素对人脐静脉内皮细胞 (HU VECs)产生一氧化氮 (NO即 EDRF)功能的影响 .方法　第 2～ 4代的 HUVEC以普通 DMEM培养液培养 3d后 ,试验组换用含 14.35 ,2 8.70和 5 7.40 nmol· L- 1重组人胰岛素的无血清无酚红 DMEM培养液培养 ,对照组采用普通无血清无酚红 DMEM培养液培养 .每 2 4h换液 1次至72 h,换液时利用 Griess反应比色法检测细胞培养上清中 NO代谢产物— NO2 - 离子的 2 4h累积量 .结果　无血清培养条件下 2 8.70和 5 7.40 nmol· L- 1 胰岛素培养 48h可以使HU VEC培养上清 NO2 -离子的 2 4h累积量显著减少 .对照组 (4 7.0± 4.0 ) nmol,2 8.70 nmol·L- 1 胰岛素组 (4 0 .9± 3.4)nm ol;5 7.40 nm ol· L- 1胰岛素组 (38.1± 1.9) nmol,P<0 .0 5 .结论　高浓度胰岛素 (>2 8.70 nmol· L- 1 )长时间 (>48h)作用可以减少无血清培养的 HUVEC NO的产生 .由于NO是心血管系统重要的保护因子 ,高浓度胰岛素可能通过本途径直接促进心血管系统疾病的发生和发展 .     

芪丹通脉片对动脉粥样硬化大鼠血清NO含量及动脉壁eNOS基因表达的影响

目的: 观察芪丹通脉片(QDTMT)对实验性动脉粥样硬化(AS)大鼠血清一氧化氮(NO)含量和动脉壁匀浆中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因表达的影响,探讨QDTMT的抗AS机制. 方法: 将健康雄性SD大鼠72只随机分为6组,每组12只:模型组(model)、空白对照组(control)、阳性对照辛伐他汀组(simvastatin)、QDTMT低剂量组(QDTMT-L)、QDTMT中剂量组(QDTMT-M)、QDTMT高剂量组(QDTMT-H). 采用高脂饮食配合灌胃给予维生素D3建立大鼠AS模型,各组动物灌胃给药. 采用萘胺重氮分光光度法测定血清NO含量,采用半定量RT-PCR方法检测各组动物动脉壁匀浆中eNOS基因的表达,分析造模及各药物组血清NO含量及eNOS基因表达的变化. 结果: 与空白对照组相比,模型组和各用药组血清NO含量均明显增加(P<0.01);模型组eNOS基因的表达较空白对照组明显减少(P<0.01),与模型组相比,辛伐他汀组及各中药组均能增加eNOS基因的表达(P<0.01),且QDTMT各剂量组之间存在量效关系. 结论: QDTMT能增加AS大鼠动脉壁eNOS基因的表达,这可能是QDTMT抗AS的机制之一.     

山莨菪碱对脂多糖结合血管内皮细胞及诱导NO合成的抑制作用

目的：实验观察山莨菪碱对细菌脂多糖（LPS）结合血管内皮细胞膜及诱导NO生成的影响。方法：体外分离培养牛主动脉血管内皮细胞，用免疫组化显色反应显示细菌脂多糖与血管内皮细胞的结合，并通过图像分析对结果进行半定量；用高压液相色谱分析细胞培养液中NO3^-的含量，间接反应NO的生成水平。结果：细胞分组处理，间接法显色后图像分析，结果表明山莨菪碱组的平均灰度值明显低于LPS组（P＜0.05)；并且对细胞培养液中NO3^-的检测显示山莨菪碱组的浓度明显低于LPS组（P＜0.05)。结论：山莨菪碱能够抑制LPS结合血管内皮细胞，并且能够抑制LPS对NO合成的诱导作用。     

重度子痫前期患者分娩前后血清VEGF浓度的改变

目的探讨子痫前期患者外周血中VEGF在分娩前后的变化以及与临床症状的相关性。方法采用ELISA法检测50例重度子痫前期患者和年龄、孕周匹配的50例正常对照者分娩前和分娩后72h外周血中VEGF的浓度,对比分析重度子痫前期患者外周血VEGF水平分娩前后的改变以及分娩前与临床指标的相关性。结果重度子痫前期组产前VEGF水平明显高于正常对照组(P<0.01);分娩后72h重度子痫前期组的VEGF水平迅速回落至近似正常对照组水平(P<0.001);正常对照组分娩前后以及与重度子痫前期组分娩后比较VEGF水平差异均无显著性(P>0.05)。相关分析发现重度子痫前期组血清VEGF水平与收缩压、舒张压和24h尿蛋白定量、ALT和AST呈正相关关系,而与血清钙呈负相关关系,统计学分析差异均具有显著性。正常对照组中VEGF水平与临床资料及实验室数据之间统计学分析均未见相关性。结论重度子痫前期母体循环中VEGF浓度显著增加,而于分娩后72h迅速下降,并且与其临床指标相关,提示VEGF在重度子痫前期疾病发病中起着重要作用。     

原发性高血压及高血压合并糖耐量异常患者血管内皮依赖性舒张功能的研究

目的:探讨原发性高血压及高血压合并糖耐量异常患者血管内皮依赖性舒张功能损伤的变化。方法:对单纯高血压(n=30)、高血压合并糖耐量异常(n=30)患者及正常人(n=20)采用高分辨率超声技术检测血流介导的肱动脉舒张功能(FMD),并分别测定血清一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平。结果:与正常对照组比较,单纯高血压、高血压合并糖耐量异常患者FMD、NO、SOD水平明显下降(P<0.05),MDA的水平明显升高(P<0.05);与单纯高血压组比较,高血压合并糖耐量异常组FMD、NO、SOD水平明显下降(P<0.05),MDA的水平明显升高(P<0.05)。经直线相关分析显示,血清NO、FMD与SOD呈正相关(P<0.05),血清NO、FMD与MDA呈负相关(P<0.05)。结论:原发性高血压及高血压合并糖耐量异常患者血管内皮明显受损,在高血压基础上合并糖耐量异常将进一步导致血管内皮依赖性舒张功能受损。     

高渗和低渗造影剂对大鼠肾动脉内皮功能的影响及意义

目的 探讨不同类型和剂量的造影剂对大鼠肾动脉内皮功能的影响和内皮细胞损伤情况,为造影剂肾病的发生及防治提供研究资料.方法 肾动脉血管环在含不同剂量高渗造影剂泛影葡胺和低渗造影剂碘佛醇的IMDM培养液中孵育1 h,Griess法和放免法分别检测培养液中一氧化氮(nitric oxide, NO)和内皮素(endothelin-1, ET-1)的含量,并用化学发光法检测血管内皮细胞乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase, LDH)的释放情况.结果 肾动脉血管环在含泛影葡胺和碘佛醇的培养液中孵育1 h后,NO分泌无明显变化,而ET-1分泌增加,且呈剂量依赖性.孵育4 h后,泛影葡胺90 μl/ml组肾动脉内皮LDH释放显著增加;碘佛醇各剂量组引起的LDH释放增加没有统计学意义.结论 高渗造影剂泛影葡胺和低渗造影剂碘佛醇都可以影响肾动脉内皮功能,这一作用可能主要与ET-1分泌增加有关,而NO的分泌没有明显改变.泛影葡胺对肾动脉内皮功能的影响比碘佛醇严重,大剂量的泛影葡胺在一定时间内还可以导致孵育的肾动脉内皮细胞损伤.     

高糖降低内皮细胞ABCG1表达与内皮细胞损伤相关

目的探讨ABCG1在高糖促进内皮细胞功能损伤中的作用。方法不同浓度D-葡萄糖(5.6 mmol/L和30 mmol/L)干预血管内皮细胞24~72 h,Real time PCR及Western blotting检测葡萄糖对血管内皮细胞ABCG1 mRNA和蛋白水平的影响,液体闪烁仪分析细胞内胆固醇流出率,并测量葡萄糖干预后内皮细胞NOS活性;使用LXR内源性激活剂22(R)-hydroxycholesterol预先干预内皮细胞2 h,再予不同浓度葡萄糖干预48 h,观察血管内皮细胞ABCG1表达、功能及内皮细胞NOS活性的改变。结果高糖时间依赖性地抑制血管内皮细胞ABCG1mRNA和蛋白水平的表达,同时降低细胞内胆固醇向HDL流出,高糖也降低了内皮细胞eNOS活性。使用22(R)-hydroxycholesterol逆转高糖对ABCG1表达的抑制后,细胞内胆固醇流出率增加,高糖对内皮细胞eNOS活性的抑制也被部分逆转。结论高糖损伤内皮细胞功能的机制可能与高糖降低内皮细胞ABCG1表达相关。     

一氧化氮合酶在大鼠糖尿病性勃起功能障碍中的作用研究

目的:研究一氧化氮合酶(NOS)在糖尿病性勃起功能障碍中的作用。方法:对正常对照组(n=10)、糖尿病组(DM组,n=10)和链脲佐菌素组(STZ组,n=10)大鼠于造模9周后进行阿朴吗啡阴茎勃起实验,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测阴茎组织中一氧化氮合酶(NOS)活性。结果:DM组大鼠阴茎勃起率较正常对照组及STZ组明显降低(P<0.01),NOS活性亦显著降低(P<0.01),但正常对照组与STZ组之间的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:糖尿病可引起勃起性功能障碍,NOS活性的下降可能参与了DM时勃起性功能障碍的发生。     

二甲双胍对低密度脂蛋白诱导的大鼠血管内皮功能紊乱的改善作用

目的 研究二甲双胍是否对低密度脂蛋白损伤的大鼠血管内皮功能具有保护作用并探讨其机制.方法 一次性从大鼠舌下静脉注射天然低密度脂蛋白(n-LDL)4mg/kg诱发血管内皮细胞损伤,随后测定血管舒张功能及血脂,血清一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)和SOD活性.结果 单次静脉注射n-LDL能降低大鼠胸主动脉乙酰胆碱诱导的内皮依赖性舒张反应,而对硝普钠诱导的非内皮依赖性舒张反应无影响;血清NO水平及SOD活性显著降低.MDA浓度明显增高而血脂水平无明显变化.二甲双胍预处理能改善n-LDL诱导的内皮舒张功能障碍,增加血清NO水平,减少MDA生成,不改变血脂含量.结论 二甲双胍对体内LDL损伤的血管内皮功能具有保护作用.其机制可能与二甲双胍保护内皮依赖性舒张因子和抗氧化作用有关.     

硝普钠对高血压病患者动脉血管平滑细胞的NO含量及细胞增殖的调节作用

目的　硝普钠 (SNP)对高血压病 (EH)患者动脉血管平滑肌细胞 (VSMC)的一氧化氮合酶 (NOS)活性和一氧化氮(NO)含量、细胞周期、细胞数量、细胞增殖指数的影响 .方法　对血压正常 (NT)者和 EH患者的肠系膜动脉进行分离培养 ,对比观察在基础状态和 SNP作用下 ,EH组和 NT组动脉VSMC的 NOS活性、NO含量、细胞周期、细胞数量、细胞增殖指数的变化 ,从而研究 SNP对 EH患者的动脉 VSMC的NOS- NO系统及细胞增殖的影响 .结果　 1在基础状态下 ,EH组 VSMC的 NO含量、NOS活性低于 NT组 ,而且两组间有显著差异 (P<0 .0 5 ) ;2在 SNP作用下 ,EH组 VSMC的NO含量、NOS活性较 NT组减少 ,但两组间无明显差异 (P>0 .0 5 ) ;3在基础状态下 ,EH组动脉 VSMC的 S期的百分率、细胞增殖指数 (PI)、细胞数量均明显高于 NT组 ,且两组间有明显差别 (P<0 .0 5 ) ;4在 SNP作用下 ,EH组动脉 VSMC的S期的百分率、细胞增殖指数 (PI)、细胞数量均高于 NT组 ,且两组间无明显差别 (P>0 .0 5 ) .结论　 NO的供体药物 SNP可以通过分解产生大量的外源性 NO,纠正 EH患者 VSMC的 NO含量不足的缺陷 ,抑制 EH患者动脉 VSMC的增殖 ,从而抑制 EH患者动脉血管的重构 ,阻止 EH的发生、发展 .     

Sin-1对内皮细胞生长及细胞骨架的影响

目的：通过观察一氧化氮（Nitric oxide,NO)供体sin-1对内皮细胞生长及细胞骨架的影响,来探讨NO对内皮细胞单层通透性的可能的影响机制。方法：用不同浓度sin-1作用于培养的人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞,观察其对细胞生长及细胞骨架蛋白f-actin的影响。结果：6.25-100μmol/L的sin-1可不同程度抑制内皮细胞的生长,50-100μmol/L浓度的sin-1可致细胞死亡。100μmol/L浓度的sin-1作用4h后,f-actin的含量明显降低。结论：在某些情况下局部或血液中NO浓度异常增高时,可能通过抑制内皮细胞的生长、直接导致内皮细胞死亡或使细胞骨架蛋白f-actin的含量下降等途径,使血管的通透性增加。     

葛根素辅助治疗重度子痫前期的临床疗效观察

目的观察葛根素注射液治疗重度子痫前期患者临床疗效,并探讨其作用机制。方法将100例重度子痫前期患者随机平均分为葛根素辅助治疗组(观察组)和常规治疗组(对照组)各50例。在0天和7天分别测量患者的平均动脉压(MAP)、24小时尿蛋白水平、全血比粘度、红细胞比容(HCT%)、血小板(PLT)和APTT,以及血中ET-1、IL-6和TNF-α水平。结果通过7天的治疗后,两组患者MAP、24小时蛋白尿、全血比粘度、HCT%、PLT均有显著改善,差异有统计学意义(均P<0.05)。同时观察组患者MAP、24小时蛋白尿、全血比粘度、HCT%和PLT改善情况较对照组更加明显,差异有统计学意义(均P<0.05)。常规的治疗不能改善APTT的异常(P>0.05),而观察组患者APTT有明显的延长(P<0.05)。进一步研究发现,治疗7天后两组患者血中ET-1、IL-6和TNF-α水平均较治疗前有不同程度下降,差异有统计学意义(均P<0.05),且观察组患者血中ET-1、IL-6和TNF-α水平下降更加明显,差异有统计学意义(均P<0.05)。治疗过程中未见明显的药物不良反应。结论葛根素注射液可有效改善重度子痫前期的临床症状,并能明显缓解子痫前期患者的凝血功能障碍和血管内皮细胞功能异常,同时治疗过程中未见明显的药物不良反应,值得临床推广应用。     

重度子间疒前期患者凝血功能变化研究

目的了解重度子间疒前期患者凝血功能变化情况。方法119例重度子疒间前期患者为重度子间疒前期（S-PE）组,同期正常的单胎晚期妊娠孕妇116例为对照组。采集孕妇清晨空腹静脉血,测定血浆凝血酶原时间（PT）、国际标准化比值（INR）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、纤维蛋白原（Fbg）及凝血酶时间（TT）。结果S-PE组孕妇的PT值、INR值、APTT值、Fbg值低于对照组（P〈0.05或P〈0.01）,TT值高于对照组（P〈0.01）。结论重度子疒间前期患者血液处于高凝状态,应及早采取措施以防止并发症的发生。     

一氧化氮合酶蛋白和基因在肝肺综合征大鼠肺组织中的表达

目的　探讨一氧化氮 (NO) 在肝肺综合征 (HPS) 发生机制中的作用。方法　采用 Wistar大鼠行胆总管结扎术 (CBDL) 制备HPS动物模型, 应用免疫组化方法观察内皮型一氧化氮合酶 (eNOS) 和诱导型一氧化氮合酶(iNOS) 蛋白在肺血管的表达和分布特点, 采用RT PCR方法检测肺组织中eNOS、iNOS mRNA的表达。结果　CB- DL组肺血管eNOS染色强度较假手术组显著升高 (P<0 .01), 而 iNOS表达在两组间差异无显著性意义 (P>0 .05);CBDL组大鼠肺组织eNOS mRNA的表达较对照组增高 (P<0. 01), 两组iNOS mRNA的相对表达量差异无统计学意义; 相关分析表明, 肺组织中eNOS mRNA水平与肺泡动脉氧分压差 (A- aDO2) 显著相关 (r=0. 920 1, P<0. 01)。结论　HPS时内皮细胞eNOS表达增强可能是肺血管NO增多的主要原因。     

Microinflammation is involved in the dysfunction of arteriovenous fistula in patients with maintenance hemodialysis

Background Vascular access （VA） dysfunction is a major clinical complication in the hemodialysis population and has a direct effect on dialysis outcome. This study was conducted to explore the role of microinflammation in the VA dysfunction in maintenance hemodialysis patients.
Methods Forty-seven patients （male 35 and female 12） receiving maintenance hemodialysis were included for this study. They were divided into three groups： group 1 （n=15）, patients with initial hemodialysis and new arteriovenous fistula （AVF）; group 2 （n=18）, patients treated with hemodialysis for long term with well-functional VA; group 3 （n=14）, maintenance hemodialysis patients with VA dysfunction. Biochemical parameters and serum tumor necrosis factor-α （TNF-α）, interleukin 6 （IL-6） and monocyte chemoattractant protein-1 （MCP-1） were determined. High-sensitivity C-reactive protein （hs-CRP） was determined by latex-enhanced immuno-nephelometric method. Tissues of radial artery were taken from group 1 and group 3 for the histological study. Expression of CD68 and MCP-1 in the radial artery was determined by immunohistochemistry.
Results Serum hs-CRP in group 3 was significantly higher than those in group 1 and group 2 （（7.40±2.42） mg/L vs （4.21±1.62） mg/L and （5.04±3.65） mg/L, P 〈0.01 and P 〈0.05, respectively）. Serum TNF-α in group 3 was significantly higher than those in group 1 and group 2 （（64.03±9.29） pg/ml vs （54.69±12.39） pg/ml and （54.05±7.68） pg/ml, P 〈0.05 and P 〈0.01, respectively）. Serum IL-6 in group 3 was also significantly higher than those in group 1 and group 2 （（70.09±14.53） pg/ml vs （56.43±10.11） pg/ml and （60.77±9.70） pg/ml, P 〈0.01 and P 〈0.05, respectively）. Patients in group 3 had a thicker internal layer of vessels than in group 1 （（0.356±0.056） mm vs （0.111±0.021） mm, P 〈0.01）. Expression of CD68 and MCP-1 in the fistula vessel walls in group 3 were much higher than those in group 1     

NO与梗阻性黄疸时肾功能损害的关系

目的 探讨梗阻性黄疸时肾脏功能与血浆一氧化氮（NO）水平及肾内诱生型一氧化氮合酶（iNOS）表达之间的关系。方法 用胆总管结扎法建立大鼠梗阻性黄疸模型，模型制备成功后2周分别检测正常组（N组，n=10）、胆总管结扎组（BDL组，n=20）和N^G－硝基L精氨酸甲酯组（L－NAME组，n=20）大鼠血浆胆红素、尿素氮、肌酐和NO水平，免疫组织化学染色法观测肾内血浆胆红素无明显变化，尿素氮、肌酐与NO水平均明显下降，与正常组水平相似，其间无明显差别，肾内iNOS表达亦不明显。结论 梗阻性黄疸时肾功能明显受损，血浆NO水平增高，肾内iNOS表达增加，NO在肾功能损害的发生中起一定作用，一氧化氮合酶抑制剂对梗阻性黄疸肾功能损害有保护作用。     

脓毒症患者的肠屏障功能损伤变化情况探究

目的探讨脓毒症患者的肠屏障功能损伤变化情况。方法选取2017年10月至2020年4月在本院ICU的30例脓毒症患者设为脓毒症组,另选30例脓毒症休克患者设为脓毒症休克组,所有患者均行酶法测定患者进入住ICU第1天与第3天的细菌内毒素水平以及血清D-乳酸水平,患者入住ICU第3天的CPR(心肺复苏)、急性生理学及慢性健康状况评分、序贯器官衰竭评分。结果入住ICU第1天,脓毒症组的血清D-乳酸水平明显低于脓毒症休克组(P0.05);脓毒症组与脓毒症休克组患者的细菌内毒素水平比较,差异无统计学意义(P0.05);在入住ICU第3天,脓毒症组患者的细菌内毒素水平及血清D-乳酸水平均明显低于脓毒症休克组(P0.05);脓毒症组患者入住ICU第3天的CPR、APACHEⅡ评分(慢性健康状况评分)、SOFA评分(序贯器官衰竭评分)均明显低于脓毒症休克组(P0.05);经检测,入住ICU第1天,脓毒症组患者的细菌内毒素水平均低于脓毒症休克组(P0.05);入住ICU第3天,脓毒症组患者的细菌内毒素水平、血清D-乳酸水平明显低于脓毒症休克组(P0.05)。结论脓毒症患者与脓毒症休克患者均发生了不同程度的肠道屏障损伤,肠道屏障损伤的发生与其感染部位无关,与患者疾病的严重程度具有一定的关联。     

一氧化氮介导内皮细胞对平滑肌细胞增殖的调节作用

用噻唑蓝比色法观察了过氧化氢、Ｌ精氨酸、ＮＧ硝基Ｌ精氮酸处理的内皮细胞条件培养液对平滑肌细胞增殖的影响。结果显示：过氧化氢和ＮＧ硝基Ｌ精氨酸处理的内皮细胞条件培养液对平滑肌细胞增殖有明显促进作用;而Ｌ精氨酸内皮细胞条件培养液有明显的抑制平滑肌细胞增殖作用;说明内皮细胞通过合成释放一氧化氮调节平滑肌细胞增殖。