石墨炉原子吸收法测定胎盘和脐带中铅及其质控

石墨炉原子吸收法测定胎盘和脐带中铅及其质控北京医科大学（１０００８３）俞苏蒙，王耐芬，王振刚，王醒芳采用石墨炉原子吸收方法对同一孕妇的胎盘组织、脐带组织及其血中铅同时测定的报道很少，现将我们的测定方法、质控及结果报告如下。１材料与方法１．１仪器和试剂...     

婴幼儿血铅水平与出生前后铅暴露关系的队列研究

[目的]了解婴幼儿血铅水平与出生前后铅暴露的关系,为防治和减轻铅暴露对婴幼儿的不利影响提供科学依据。[方法]采用前瞻性队列研究的方法,在环境铅污染区建立新婚夫妇研究队列,分别在女方怀孕前、孕中期、分娩时以及子代婴幼儿期采集血样,并用石墨炉原子吸收法测定血铅水平;纵向分析出生前后铅暴露对婴幼儿血铅水平的影响。[结果]基线血铅明显高于孕中血铅和脐带血铅,且孕中血铅、脐带血铅与基线血铅高度相关(P<0.01);婴幼儿血铅要明显高于母亲基线血铅、孕中血铅和脐带血铅(P<0.01),且婴幼儿血铅与母亲基线血和脐带血血铅均呈正相关,但差异均无显著性(P>0.05)。[结论]婴幼儿血铅水平与出生前宫内暴露和出生后环境暴露均有关,但与后者关系可能更密切。     

VEGF在人类低水平铅暴露胎盘的表达及意义

目的:探讨孕期低水平铅暴露时,人胎盘组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达及意义。方法:选择青岛市2005年3月～2006年3月孕期血铅水平在30～60μg/l的孕妇35例,血铅水平在60～100μg/l的孕妇32例,应用免疫组化法检测胎盘组织中VEGF的表达及与孕期血铅含量的关系。结果:VEGF表达于细胞的胞浆,在胎盘组织的蜕膜细胞、细胞滋养细胞及血管内皮细胞呈弥漫性分布或散在分布,两组比较,血铅高水平组胎盘VEGF表达强度显著减低(P<0.05)。结论:VEGF在胎盘中主要由绒毛滋养细胞分泌,孕期铅暴露胎盘VEGF分泌减少,可能是引起胎盘病理改变的原因之一。     

围产期铅暴露对新生大鼠血铅含量的影响

目的　了解铅通过母体对生长发育期仔代血铅的影响。方法　对不同浓度低水平铅暴露后的大鼠仔代的血铅进行测定。结果　铅可由母体经胎盘和乳汁传递给仔代。结论　胚胎期和哺乳期经胎盘和乳汁“染铅” ,是导致子代铅蓄积的重要原因。     

铅污染地区胎盘和脐带组织血中铅的相关性研究

铅污染地区胎盘和脐带组织血中铅的相关性研究俞苏蒙，王振刚，王耐芬，王醒芳，王新立，陵美娟，邢荣琦，周明河随着工业的发展，环境铅污染的加剧，人们对母体铅负荷增加所引起的子代危害日益关注。许多研究表明，孕妇体内铅可经胎盘和乳汁传递给子代并呈显著正相关。为...     

不同孕期铅暴露对大鼠妊娠结局及胎盘TIMP-1表达的影响

目的:观察孕期不同时段铅暴露对妊娠结局及胎盘TIMP-1表达的影响,探讨孕早期、孕后期及孕全程铅暴露的毒性特点及毒性机制。方法:采用原子吸收光谱仪测定孕期不同阶段低水平铅暴露后的大鼠孕末期血铅水平。0.025%醋酸铅对实验组孕鼠染毒,根据大鼠孕期3周推算足月剖宫产,观察异常分娩情况,记录胎盘质量、仔鼠数、仔鼠质量。免疫组化法测定胎盘滋养细胞TIMP-1的表达。结果:孕早期染铅对孕末期血铅水平及胎盘质量的影响较大,孕晚期染铅对仔鼠重量的影响较明显,孕全程染铅对孕末期血铅水平、胎盘质量及仔鼠质量均有明显影响。孕全程染铅组其胎盘TIMP-1表达最强。结论:铅具有生殖毒性及胚盘毒性,孕期不同时段铅暴露导致不同的妊娠结局。胎盘TIMP-1表达增强可能是铅致胎盘损伤的病理机制之一。     

染铅大鼠胎盘MMP-9、TIMP-1表达与血铅水平的相关性

目的 观察孕期不同阶段铅暴露大鼠胎盘组织中基质金属蛋白酶-9和组织抑制因子-1的表达特征及其与孕末期血铅水平的相关性.方法 108只大鼠随机分为4组,于孕期不同阶段饮服0.025%醋酸铅.对照组孕期全程饮服蒸馏水;实验A组孕早期饮服醋酸铅,孕后期饮服蒸馏水;实验B组孕早期饮服蒸馏水,孕后期饮服醋酸铅;实验C组孕期全程饮服醋酸铅.孕末期腹腔静脉取血,用原子吸收光谱法测定血铅水平,用免疫组化法测定胎盘滋养层细胞中基质金属蛋白酶-9和组织抑制因子-1的表达.结果 ①对照组孕鼠孕末期平均血铅水平为0.04±0.01μmol/L,实验组孕鼠孕末期平均血铅水平均高于0.48μmol/L,以实验C组血铅水平最高;②基质金属蛋白酶-9和组织抑制因子-1在胎盘组织中的表达部位主要位于滋养层细胞胞质;③胎盘滋养层细胞基质金属蛋白酶-9的表达4组间总体比较差异有统计学意义(χ2=28.381,P<0.01),孕末期血铅水平轻度升高时基质金属蛋白酶-9表达阳性率增加,当血铅水平进一步升高后,基质金属蛋白酶-9表达阳性率反而下降,以血铅水平最高的实验C组阳性表达率最低,与对照组比较差异有统计学意义(χ 2=8.402,P<0.05);④胎盘滋养层细胞组织抑制因子-1的表达4组间总体比较差异有统计学意义(χ2=18.177,P<0.05),实验A、C组与对照组比较差异有统计学意义(χ2分别为10.688、8.720,均P<0.05),其表达强度随着孕末期血铅水平的增高而增强,呈剂量-效应关系.结论 孕鼠孕末期血铅水平与胎盘滋养层细胞基质金属蛋白酶-9和组织抑制因子-1的表达强度密切相关,以血铅水平最高的实验C组改变最为明显.血铅水平增高引起的基质金属蛋白酶-9和组织抑制因子-1表达失衡可能是铅致胎盘组织损伤的毒性机制之一.     

母鼠铅负荷对仔代活动行为及多巴胺水平的影响

本文研究了通过胎盘和乳汁暴露铅对小鼠仔代活动性行为及中枢多巴胺水平的影响。结果表明，仔鼠血及脑中铅含量明显增加，春血铅含量与母体血铅呈正相关；低浓度铅并不影响仔鼠大脑中多巴胺的水平，但却增加了仔鼠的站立行为；高浓度铅不仅增加了仔鼠的活动性行为，还进一步导致中枢多巴胺水平的变化。     

出生前铅暴露的研究

出生前铅暴露（宫内铅暴露），是指母亲血铅经胎盘转运至胚胎或胎儿，而引起的胚胎或胎儿的铅暴露。本从出生前铅暴露的生物标志物、骨铅测定、孕期骨铅动员及其对血铅水平的影响、出生前铅暴露对子代的影响和需要解决的问题等几个方面对出生前铅暴露进行了综述。     

S100B蛋白在不同孕期铅暴露大鼠胎盘中的表达

目的观察S100B蛋白在孕期不同阶段铅暴露下大鼠胎盘中的表达特征。方法 108只大鼠随机分为4组,于孕期不同时期饮服0.025%醋酸铅溶液;原子吸收光谱法测定孕末期血铅水平;免疫组化法测定胎盘组织中S100B蛋白的表达。计量资料组间比较采用单因素方差分析,计数资料组间比较采用卡方检验。结果实验组血铅水平均高于0.483μmol/L,与对照组比较差异有统计学意义(F=12.10,P=0.000);S100B蛋白主要表达于大鼠胎盘细胞滋养层细胞、蜕膜细胞及血管壁细胞胞质中,实验组阳性表达率高于对照组(52.94%),且孕期全程铅暴露组(93.33%)高于孕早期(87.50%)和孕晚期铅暴露组(80.00%),差异有统计学意义(χ2=18.62,P=0.029)。结论 S100B蛋白的表达与孕期铅暴露大鼠血铅水平相关,推测其在铅致胎盘的损伤中起重要作用。     

接触铅女工孕期血铅动态及对新生儿体格发育的影响

对某蓄电池厂接铅女工妊娠初期和分娩期血铅、血锌卟啉（ＺＰＰ）值动态变化及其与对照女工进行比较。接铅组女工血铅持续保持高水平，达０．９８μｍｏｌ／Ｌ，ＺＰＰ１．３５μｍｏｌ／Ｌ，婴儿脐带血铅达０．９０μｍｏｌ／Ｌ，ＺＰＰ１．ｌｌμｍｏｌ／Ｌ均显著高于对照组女工（血铅０．２６μｍｏｌ／Ｌ，ＺＰＰ０．５１μｍｏｌ／Ｌ，脐血铅０．３４μｍｏｌ／Ｌ，脐血ＺＰＰ０．７８μｍｏｌ／Ｌ）。并分析了血铅、血ＺＰＰ持续升高的意义、相关关系和对新生儿发育的影响。     

Smad4在孕期不同阶段铅暴露大鼠胎盘中的表达

目的观察孕期不同阶段铅暴露对大鼠胎盘中信号蛋白Smad4表达的影响。方法将72只健康清洁级Wistar妊娠大鼠随机分为4组,分别为孕早期铅暴露组[孕早期(妊娠1～10 d)饮用0.25g/L乙酸铅溶液染毒,孕晚期(妊娠11～20 d)饮用蒸馏水],孕晚期铅暴露组(孕早期饮用蒸馏水,孕晚期饮用0.25g/L乙酸铅溶液染毒),孕全期铅暴露组[孕期全程(妊娠1～20 d)饮用0.25 g/L乙酸铅溶液染毒],对照(蒸馏水)组,每组18只。测定孕末期腹腔静脉血铅水平;足月剖宫取胎盘并称重,统计不同妊娠结局。并测定大鼠胎盘中Smad4的表达。结果剔除自然分娩与异常妊娠结局大鼠后,最终入组大鼠分别为:孕早期铅暴露组16只,孕晚期铅暴露组15只,孕全期铅暴露组15只,对照组17只。大鼠孕末期血铅水平由低至高依次为对照组<孕晚期铅暴露组<孕早期铅暴露组<孕全期铅暴露组,胎盘重量由高至低依次为对照组>孕早期铅暴露组>孕晚期铅暴露组>孕全期铅暴露组,任意两组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。大鼠胎盘重量与孕末期血铅水平呈显著负相关(r=-0.652,P<0.01)。与对照组比较,各实验组大鼠胎盘中Smad4的表达均升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。与孕早期铅暴露组比较,孕晚期及孕全期铅暴露组大鼠胎盘中Smad4的表达均下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论铅暴露使得胎盘中Smad4的表达升高,早期铅暴露时Smad4的表达水平明显高于晚期铅暴露组及全程铅暴露组,血铅水平增高导致Smad4表达的异常可能是致胎盘损伤的毒性机制之一。     

低铅染毒对大鼠脂质过氧化作用的影响

目的 探讨长期低铅染毒对大鼠内分泌脂质过氧化作用及超氧化歧化酶活性的影响。方法 将40只大鼠随机分成4组，分别给予含有不同剂量的铅饲料8周，测定并分析大鼠染毒后血中、甲状腺、胰腺组织中的铅含量、MDA、T-SOD、CAT、GSH-Px含量，并进行相关分析。结果 各组血铅随染铅剂量升高而升高；甲状腺、胰腺组织中的MDA含量随染铅剂量升高而升高，并与血铅浓度呈正相关；而甲状腺、胰腺组织中的T-SOD和GSH-Px含量随染铅剂量升高而下降，并与血铅浓度呈负相关；甲状腺、胰腺组织中的CAT与染铅剂量无关。结论 慢性铅中毒增强机体的脂质过氧化作用，降低机体抗氧化酶系活力，可能参与了体内某些内分泌功能和组织学的损害机制。     

铅作业工人血铅的阳极微分溶出测定法

铅作业工人体内铅水平的评价主要有尿中铅浓度和血中铅浓度两个指标,人体内血铅浓度较尿铅更恒定,影响因素也少得多,更适宜评价人体内铅水平。血铅通常采用双硫腙比色法和石墨炉原子吸收法,前者样品预处理复杂,样品量要求多,分析周期时间也较长;后者仪器的投入相当大,一般基层防疫站难以承受。我们采用阳极微分溶出(DPSA)法测定血铅结果如下。     

妊娠注意铅伤害

研究表明，孕妇吸收的铅90％会通过胎盘传输给胎儿。而铅具有极强的生殖毒性、胚胎毒性和致畸作用，不仅会影响胎儿的正常发育，还会导致胎儿的流产、早产或是智障、畸形宝宝的出生。宝宝出生后，如果血液中含有过量的铅，智商、体格成长、记忆力等也会比同龄儿童低下。所以，女性在怀孕前三个月就要注意到铅危害并去医院做血铅检查。     

母体铅经胎盘和乳汁传递的实验

研究表明,铅能够通过胎盘和乳汁传递至子代;母体血铅与胎儿脐带血铅呈明显正相关;乳儿铅危害程度随母体乳汁铅含量而增加。然而,对于胎盘的铅屏障作用强度看法仍有分歧;并且母体铅经乳汁传递的时间规律研究的报道也极少。为此,本文应用恒河猴进行实验观察,以进一步阐明铅经胎盘、乳汁传递的规律和作用。     

人体铅的胎盘转运和乳汁传递

采用原子吸收光谱法对上海市区165名无职业铅接触史产妇的血铅、脐血铅、乳汁铅(119份)、胎盘组织铅(153份)样品进行测定,其均值分别为0.68±0.33μmol/L(14.13±16.79μg/dl)、0.40±0.23μmol/L(8.27±4.87μg/dl)、5.63±4.39ppb、1.14±1.10μmol/kg(23.73±22.85μg/100g)[中位数为0.63(13.2)、0.33(6.90)、4.74、0.86(17.85)]。产妇年龄对母血铅、脐血铅、乳汁铅和胎盘组织铅无显著影响。脐血铅、乳汁铅随母血铅增高而上升,其相关系数分别为0.714(P<0.0001)和0.353(P<0.01)。12名铅作业产妇平均年龄24岁,工龄1.9年,其乳汁铅几何均值为52.68ppb,显著高于非职业接触人群的4.43ppb(P<0.01),两者相差约12倍,提示对乳儿健康可能构成威胁。本文在国内首次报告了正常产妇的血铅、乳汁铅、脐血铅以及胎盘组织铅的参考值。     

孕期和哺乳期骨铅动员对子代的毒性作用

人体的大部分铅贮存于骨骼中，儿童早期铅暴露可使铅贮存于骨基质中直至成年期。这部分铅在特定的生理状态，如怀孕、哺乳等状态下，随着骨吸收的增加从骨中动员出来进入血浆，使母亲血铅水平明显升高，通过胎盘转运和母乳转运到达胎儿或婴儿体内，经胎儿或婴儿未发育成熟的血脑屏障进入正在发育的脑中，影响神经系统的发育。同时，大量的铅从母体内转移到子代正在发育的骨骼中，造成子代持续铅暴露的来源。孕期充足的钙摄人可减少骨铅的动员，孕期补钙可能是成本和风险相对较低的一种干预方法。建议应加强孕产妇血铅的监测，及时采取有效防治措施，以免影响胎儿及婴儿的脑发育。     

某铅冶炼厂周围儿童血铅水平调查

为了解居住在某铅冶炼厂周围儿童的血铅水平,为降低和控制周围儿童的铅负荷以及评价该厂对周围环境的影响提供依据,笔者于2005年12月-2006年2月对居住在该铅厂周围500m内的0～16岁儿童以及该厂部分行政人员的子弟(居住在距该厂约20 km的市区)的血铅含量进行了调查.取静脉血1～2 ml,按照WS/T 20-1996《血中铅的石墨炉原子吸收光谱测定方法》进行血铅的测定.每测定10件样品后,测定1次质控样品.……     

铅对孕鼠脑垂体—卵巢—胎盘轴及人绒毛毒性作用的研究

铅有胚胎毒作用,可致畸或流产及死胎,铅可经胎盘入胎体直接影响胚胎的发育,或通过对母体的影响而波及胚胎。但铅对胎盘毒作用的机制及其量效关系至今仍不甚明了。本文观察铅对孕鼠脑垂体-卵巢-胎盘轴的毒性作用和血铅浓度与这些器官损害程度之间的关