肺肠合治法对哮喘小鼠血清总IgE影响的实验研究

目的：采用肺肠合治法原理,运用加味升降散方药,探讨该方法治疗哮喘的免疫学作用机理。方法：将小鼠随机分为空白组、模型组、肺肠合治组、治肺组、治肠组和阳性对照组共6组,除空白组外均用鸡卵清蛋白致敏并激发哮喘,采用酶连免疫法检测各组血清总IgE。结果：腹腔注射鸡卵清蛋白可使小鼠血清总IgE水平增高,药物干预可使IgE水平降低;模型组与空白组比较血清总IgE水平明显升高（P〈0.01）;阳性对照组、肺肠合治组、治肺组、治肠组血清总IgE含量依次升高,与模型组比较均有显著差异（P〈0.01）。结论：本方法对哮喘小鼠有治疗作用,其平喘作用与降低哮喘模型小鼠异常升高的血清总IgE水平,参与机体的免疫调节有关。     

咳喘宁对支气管哮喘患者外周血嗜酸粒细胞及血清IgE的影响

目的：探讨咳喘宁胶囊对支气管哮喘患者外周血嗜酸粒细胞、血清IgE及病情控制水平的影响。方法：72例支气管哮喘患者分为咳喘宁治疗组（n=42）和对照组（n=30）,治疗前及治疗后8w,测定外周血嗜酸粒细胞与IgE。结果：治疗8w后,两组患者的外周血嗜酸粒细胞、血清IgE水平较治疗前减少（P〈0．01）;咳喘宁治疗组患者的外周血嗜酸粒细胞数量、血清IgE水平明显低于对照组（P〈0．05）。结论：咳喘宁胶囊能降低支气管哮喘患者外周血嗜酸粒细胞数量、血清IgE水平。     

宁夏沙枣花乙醇提取物对哮喘模型小鼠气道炎症的实验研究

目的:观察沙枣花乙醇提取物对哮喘模型小鼠气道炎症及血清白介素4(Interleukin-4,IL-4)、IgE-免疫球蛋白(IgE-immunoglobulin,IgE)、γ干扰素(Interferon-γ,IFN-γ)含量的影响,探讨其抑制哮喘气道炎症的作用机制。方法:将BALB/c小鼠随机分为6组,分别为正常组、模型组、地塞米松10mg/kg组和沙枣花乙醇提取物4g/kg、8g/kg、16g/kg组,除空白对照组外,其余各组用改良的卵白蛋白多点注射致敏与雾化吸入激发法建立小鼠哮喘模型,连续14 d。小鼠末次激发24 h后,处死各组小鼠留取标本。镜下观察各组哮喘小鼠肺组织病理形态变化及支气管肺泡灌洗液中白细胞计数和分类计数,并进行炎症评分;采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定小鼠支气管肺泡灌洗液及血清中IL-4、IgE、IFN-γ含量。结果:与模型组比较,沙枣花乙醇提取物8g/kg、16g/kg组和地塞米松组可显著降低哮喘模型小鼠支气管肺泡灌洗液及血清中IgE、IL-4含量和IL-4/IFN-γ比值;16g/kg、8g/kg组和地塞米松组可显著升高支气管肺泡灌洗液及血清中IFN-γ含量。与模型组比较,沙枣花乙醇提取物16g/kg、8g/kg组和地塞米松组可显著降低白细胞总数、嗜酸性粒细胞及巨噬细胞比率;各给药组可显著升高中性粒细胞比率。病理切片染色结果显示沙枣花乙醇提取物16g/kg、8g/kg组能够明显减轻肺组织细胞炎性浸润等病理症状,与模型组比较,可显著降低炎症评分。结论:沙枣花提取物可通过降低IL-4及IgE含量、升高IFN-γ的含量,调节Th1/Th2免疫平衡而改善哮喘模型小鼠气道炎症。     

升气壮阳膏方联合特异性免疫对哮喘小鼠气道炎症的影响

目的观察中药膏方联合特异性免疫治疗(SIT)对小鼠支气管哮喘的治疗作用。方法将BALB/c小鼠按随机数字表法随机分为空白对照组、哮喘模型组、SIT组、SIT联合中药膏方组,采用卵清蛋白(OVA)腹腔注射及雾化激发构建支气管哮喘小鼠模型,给予SIT及中药膏方灌胃治疗,进行肺泡灌洗液细胞计数和分类,用ELISA法测定血清IgE、肺泡灌洗液IL-4、IFN-γ含量,用HE染色法检测小鼠肺组织病理学改变。结果 SIT、中药膏方联合SIT治疗组小鼠肺组织炎症细胞浸润程度减轻,其中后者作用更显著,血清IgE水平较哮喘组下降(P0.05),中药膏方组联合SIT组较SIT下降显著;SIT、中药膏方联合SIT组在肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数及嗜酸性粒细胞总数均减少,BALF的IL-4下降、IFN-γ上升(P0.05),但两者间差异无统计学意义(P0.05)。结论中药膏方联合特异性免疫治疗可以降低小鼠血清IgE水平,减轻肺部炎症细胞浸润程度。     

甘草次酸对支气管哮喘大鼠IgE、IL-4及TNF-α的影响

目的:观察甘草次酸(Glycyrrhetinic acid,GA)对哮喘大鼠肺泡灌洗液(Bronchoalveolar lavage fluid,BALF)白细胞计数及血清Ig E、IL-4、TNF-α水平的影响,探讨其防治哮喘的机制。方法:将60只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、地塞米松0.5 mg/kg组、甘草次酸200、100、50 mg/kg剂量组。采用卵清白蛋白(OVA)与氢氧化铝致敏,并OVA雾化吸入激发制备大鼠支气管哮喘模型。各组给予相应剂量的药物7d,于末次给药后24h,处死动物,取血清测IgE、IL-4及TNF-α含量,收集BALF进行白细胞分类计数,Western-blot法检测甘草次酸对哮喘大鼠肺组织IgE、IL-4及TNF-α蛋白表达的影响。结果:与哮喘模型组比较,甘草次酸200、100 mg/kg可使哮喘大鼠BALF淋巴细胞及嗜酸性粒细胞数降低,中性粒细胞数增多,使血清及肺组织IgE、IL-4及TNF-α水平明显下降。结论:甘草次酸可通过减少炎性细胞(淋巴细胞及嗜酸性粒细胞)和下调细胞因子IgE、IL-4及TNF-α水平减轻哮喘大鼠气道炎症,改善哮喘症状。     

加味射干麻黄汤对支气管哮喘小鼠模型的影响

目的：观察加味射干麻黄汤对哮喘小鼠模型血清中干扰素-γ（IFN-γ）和氧自由基的影响,探讨其作用机制。方法：将40只小鼠随机分组为正常对照组、哮喘组、中药组、西药组,每组10只。采用卵白蛋白（OVA）腹腔注射致敏和雾化激发的方法建立小鼠支气管哮喘模型,然后用不同的措施对哮喘小鼠模型进行干预。干预完成后,采用ELISA方法检测每只小鼠血清中IFN-γ水平,分光光度法检测小鼠肺组织中超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛（MDA）含量。并对各组小鼠肺组织进行病理形态学观察。结果：模型组与正常组相比,前者血清中IFN-γ水平显著降低（P〈0.01）;肺组织中SOD活性显著降低（P〈0.05）;伴MDA含量增高（P〈0.01）。中药组和西药组与模型组相比,前二者血清中IFN-γ水平则高于模型组（P〈0.05-0.01）;肺组织中SOD活性明显升高（P〈0.01）而MDA降低（P〈0.01）。正常对照组IFN-γ水平、肺组织SOD和MDA活性与中药组及西药组比较,无统计学意义（P〉0.05）;中药组IFN-γ水平、肺组织中SOD和MDA与西药组比较亦无统计学意义（P〉0.05）。结论：通过促进哮喘小鼠体内干扰素-γ表达,提高肺组织抗氧化能力,从而减轻气道免疫炎症、降低支气管高反应性可能是加味射干麻黄汤治疗哮喘的作用机制之一。     

三九贴穴位贴敷对哮喘大鼠血清IgE水平影响的研究

目的：通过建立哮喘大鼠模型,观察三九贴穴位贴敷对支气管哮喘模型大鼠血清IgE水平的影响。方法：将60只Wistar大鼠适应性喂养5天后,随机分为对照组（A组）、模型组（B组）、地塞米松组（C组）、三九贴高剂量组（D组）、三九贴中剂量组（E组）、三九贴低剂量组（F组）6组,每组10只。各组大鼠经卵蛋白免疫造模成功并分别穴位贴敷治疗10 d后,观察血清IgE含量的变化。结果：模型组大鼠血清IgE含量明显高于对照组（P〈0.01）,提示造模成功;与模型组比较,三九贴低剂量组血清IgE水平略低,但差异没有统计学意义（P〉0.05）;地塞米松组血清IgE水平均低于模型组（P〈0.01）;三九贴中、高剂量组亦低于模型组（P〈0.05）;三九贴高剂量组血清IgE水平高于地塞米松组（P〈0.05）。提示三九贴中、高剂量组对哮喘大鼠IgE升高有明显抑制作用,并呈现一定剂量依赖性。结论：三九贴穴位贴敷能降低哮喘大鼠血清IgE水平,通过减轻免疫炎性反应,对哮喘有较好的防治作用。     

平喘颗粒调控M2型巨噬细胞极化改善哮喘小鼠气道炎症及气道重塑的实验研究

目的 观察平喘颗粒对哮喘小鼠气道炎症、气道重塑及M2型巨噬细胞极化相关因子的影响。方法 选择30只6～8周雌性BALB/C小鼠随机分为空白组、模型组、平喘颗粒组，采用卵清蛋白和氢氧化铝构建哮喘小鼠模型，给予平喘颗粒进行干预。采用HE和PAS染色检测各组小鼠肺组织病理形态变化；吉姆萨染色计数各组小鼠肺泡灌洗液中总细胞数、嗜酸性粒细胞数、中性粒细胞数、巨噬细胞数；ELISA法检测各组小鼠血清IgE含量及肺泡灌洗液中巨噬细胞M2标记物Arg1、白细胞介素-10(IL-10)的含量；real-time PCR检测各组小鼠肺组织中巨噬细胞M2标记物YM1、MRC1的水平；免疫荧光检测肺组织F4/80与MRC1的表达与共定位。结果 与模型组相比，平喘颗粒组小鼠肺组织炎性细胞浸润情况明显减少，气道黏液及杯状细胞明显减轻。与模型组相比，平喘颗粒组BALF中白细胞总数、嗜酸性粒细胞数量、中性粒细胞数量、巨噬细胞数量明显降低，差异有统计学意义（P <0.05）。平喘颗粒组小鼠血清中IgE水平明显低于模型组，但高于空白组，与模型组及空白组比较差异均有统计学意义（P <0.05）。与模型组相比，平...     

胸段硬膜外阻滞联合中药对哮喘大鼠IL-12 GM-CSF的影响

目的：探讨中药联合胸段硬膜外阻滞对哮喘大鼠肺泡灌洗液GM-CSF、血清中IL-12水平的影响。方法：将健康大鼠40只（雌雄各半）按随机数字表将其分为5组：空白组（A组）、哮喘模型组（B组）、中药组（C组）、胸段硬膜外阻滞组（D组）、胸段硬膜外阻滞＋中药组（E组）。建立大鼠哮喘模型以及胸段硬膜外阻滞的模型,采用中药灌胃及硬膜外给药,用ELISA法检测大鼠血清当中IL-12、肺泡灌洗液中GM-CSF水平的变化。结果：哮喘大鼠血清中IL-12水平明显降低,肺泡灌洗液中GM-CSF水平明显升高。中药与硬膜外阻滞以及二者的联合应用均可抑制IL-12水平的下降和GM-CSF水平的升高。二者联合应用组IL-12的下降、GM-CSF水平的升高低于中药组与单纯硬膜外阻滞组。中药组与单纯硬膜外阻滞组IL-12、GM-CSF含量无显著性差异。结论：胸段硬膜外阻滞联合中药对IL-12的下降及GM-CSF的升高有明显的抑制作用。     

基于气相色谱离子迁移谱技术的川贝母差异性探索

目的:采用气相色谱离子迁移谱法(GC-IMS)对川贝母及其他贝母进行鉴别。方法:利用GC-IMS得到川贝母(包括松贝、青贝、炉贝)、平贝母、伊贝母的指纹图谱,计算挥发性物质含量;采用主成分分析(PCA)对不同贝母及不同川贝母所含挥发性物质进行比较。结果:松贝、炉贝和青贝样品中相似的挥发性物质较多,且这些挥发性成分在平贝母和伊贝母样品中含量很低或者不含有。通过主成分动态分析,选取所有的信号峰,5种样品区分明显,其中松贝、炉贝和青贝样品的聚类较为集中,平贝母和伊贝母的聚类较为分散。结论:采用GC-IMS能够有效区分不同的贝母样品,可为川贝母的快速真伪鉴别提供参考。     

基于ITS2序列鉴定川贝母及其混伪品基原植物

本研究对川贝母5种不同基原植物ITS2序列进行PCR扩增和测序;同时扩大研究范围,从GenBank上下载川贝母及其常见混伪品共10个物种13个样本的ITS2序列。用MEGA4.1计算其种间、种内的K-2-P距离,并分析各样本间ITS2序列二级结构的差异,最后利用ITS2序列重构其系统发育树。结果显示川贝母基原植物种内最大K-2-P距离为0.0276,与混伪品的种间最小K-2-P距离为0.0583;川贝母及其混伪品的ITS2二级结构存在明显差异;重构的系统发育树显示川贝母不同基原物种聚为一支,能较好与混伪品区分。研究结果表明ITS2条形码序列能够成功鉴定川贝母及其混伪品的原植物,为川贝母混伪鉴别提供了新工具。     

乌头属中药及其炮制品与浙贝母、川贝母配伍的化学研究

目的通过考察川乌、制川乌、草乌、制草乌、生附子、黑顺片分别与浙贝母、川贝母配伍前后双酯型生物碱的量,分析共煎液中乌头类生物碱之间的转化。方法采用HPLC及电喷雾质谱技术,对川乌、草乌、生附子及其炮制品与浙贝母、川贝母配伍前后双酯型生物碱进行定量测定。结果乌头属中药及其炮制品在与浙贝母配伍时能够抑制双酯型生物碱的水解转化,而与川贝母配伍对双酯型生物碱的水解转化则起到促进作用。结论从化学成分量的变化方面分析,中药"十八反"之"乌头反贝母"并不是绝对的,乌头属中药及其炮制品与浙贝母配伍"相反",与川贝母配伍"不反"。     

浅析不同来源贝母类药材在中成药中的质量控制

目前,药材市场中贝母类药材有川贝母、浙贝母、平贝母等多种贝母,容易导致混用、错用。因此,作者针对2010年版药典中贝母类药材的来源、检测指标及测定方法、所含生物碱类成分及其含量等方面进行综述。结果表明：2010年版药典中所收载的贝母的来源各不相同,性味归经及功能主治各有侧重。所含成分虽均多为生物碱类成分,但川贝母和伊贝母中所含特征生物碱成分为西贝母碱,平贝母和浙贝母多以贝母素甲、贝母素乙为对照进行薄层检查及含量测定。且贝母类药材中所含生物碱的量也各不相同。结论：控制中成药中贝母类药材的质量时应依据不同来源贝母类药材各自的特征性成分、含量高低相应的制定薄层鉴别、含量测定等质量标准,使制剂的质量标准更加准确且具有针对性。     

川产道地药材川贝母(栽培品)鉴别与品质研究

目的:对川贝母最新试验研究结果进行描述,为川贝母药材鉴别方法提供一定提升思路。方法:用性状观察,薄层色谱研究,含量测定方法对川贝母药材特点进行详细描述。结果:1)栽培品与野生川贝母在性状方面的区别主要在于栽培品鳞叶表面的颜色偏黄,有皱缩,稍粗糙,青贝的个体较大(可达4 cm);2)实际上市的栽培品中具松贝性状特征的,主要源于暗紫贝母,具青贝性状特征的主要源于川贝母、瓦布贝母和太白贝母;3)川贝母的薄层色谱特征主要与植物基源有关,有效成分结构类型相似但细微结构有差异;4)具有松贝特征的栽培品与具有青贝特征的栽培品的总生物碱含量有明显差异。结论:建议将川贝母"栽培品"细分为"松贝栽培品"和"青贝栽培品"2种规格以便市场管理和临床应用,对川贝母薄层色谱鉴别方法和现行标准中总生物碱含量限度提出了修订建议。     

中药川贝母资源学与商品鉴别研究进展

中药川贝母是我国传统名贵珍稀中药材,具有很高的药用价值和保健功效,开发潜力巨大,市场前景广阔。通过对近年来中药川贝母的资源分布、生物学特性、品质生态学特性、引种栽培、商品鉴别等研究进行全面分析整理,编制川贝母基原植物分类检索表及市售混伪品鉴别检索表,为中药川贝母资源调查、保育栽培、质量控制和评价及相关混伪品的鉴别工作提供了依据,也为中药川贝母种质资源持续利用,规模化引种栽培,野生抚育,濒危保护,新资源开发,新品种选育等方面提供了资料。今后,应进一步加强对川贝母野生种质资源的保护及其生物学特性相关研究,加强川贝母品种选育与生产技术的集约化系统化研究,从更深层次更广范围更高水平推动中药川贝母的发展。     

中药川贝母定量分析方法研究

目的:研究常用中药川贝母的定量分析方法。方法:应用高效液相色谱法。以4种川贝母共有的有效成分贝母辛为指标;采用AgilentHypersilBDS C₁₈(4. 0mm×2 5 0mm ,5 μm)色谱柱,以乙腈水 二乙胺(37∶6 3∶0 .0 3)为流动相,流速1 0mL·min^-1;Alltech 2 0 0 0蒸发光散射检测器检测,外标两点法定量。结果:贝母辛在0 . 0 3188～1. 0 2 0mg·mL^-1呈线性,回收率为10 2. 1% (n=5 ) ,RSD 3. 86 %。根据33批不同产地或来源的川贝母药材中贝母辛的含量结果,确定贝母辛的含量限度为0 . 0 0 70 %。结论:本法为良好的贝母辛的定量分析方法,可用于川贝母药材的质量控制。     

蛇胆川贝液生产工艺研究

目的：解放蛇胆川贝液澄明度问题。方法：比较平贝母的提取工艺、蛇胆汁的处理方法和成品的配制工艺。采用薄层色谱法鉴别有效成分。结果与结论：蛇胆汁经加热、贝母液用渗漉法处理的产品澄明度最好。     

中药川贝母对哮喘模型小鼠MMP-2,MMP-9和TIMP-1的影响

观察中药川贝母对哮喘模型小鼠气道重塑及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)与基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)的影响,探讨其治疗哮喘的作用机制。BALB/C小鼠,随机分为正常组、模型组、高剂量组、低剂量组、阳性对照组。除正常组外,其他各组用卵蛋白(OVA)建立哮喘小鼠模型。造模成功后高剂量组和低剂量组分别按18.0,9.0 mg·kg-1剂量给予中药川贝母灌胃;阳性对照组于腹腔注射0.5 mg·kg-1剂量地塞米松;正常组和模型组等量生理盐水灌胃,每天1次,连续28 d。观察各组小鼠气道反应性的变化,支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数和白细胞分类的变化以及支气管管壁厚度和支气管平滑肌厚度的变化;ELISA法检测MMP-2,MMP-9,TIMP-1水平;RT-PCR检测MMP-2,MMP-9,TIMP-1 mRNA的表达。结果显示,模型组气道反应性、BALF中细胞总数以及中性粒细胞、巨噬细胞、淋巴细胞和嗜酸性粒细胞计数、支气管管壁厚度和支气管平滑肌厚度明显高于正常组(P0.01),高剂量组和低剂量组与阳性对照组则明显低于模型组(P0.05或P0.01);模型组MMP-2,MMP-9和TIMP-1水平和mRNA表达明显高于正常组(P0.01),高剂量组和低剂量组与阳性对照组则明显低于模型组,差异具有统计学意义(P0.01)。推断中药川贝母可改善哮喘模型小鼠气道重塑状态,其机制可能与其降低MMP-2,MMP-9和TIMP-1有关。     

制川乌与川贝母、浙贝母配伍前后化学成分的变化研究

目的 研究制川乌与川贝母、浙贝母配伍前后其化学成分的整体变化情况,从而分析乌头反贝母的相反机制.方法 使用UPLC-ESI-LTQ-MS对配伍前后的煎煮液进行分析,采用主成分分析(PCA)对数据进行分析并采用多级串联质谱技术对化学标志物进行鉴定.结果 制川乌与川贝母、浙贝母配伍前后成分均有明显差异,其中与川贝母配伍产生5个化学标志物,与浙贝母配伍产生6个化学标志物,重复出现的标志物为次乌头碱和苯甲酰基次乌头原碱.结论 制川乌与两种贝母配伍后的化学标志物差异较大,仅有2个相同,结合前期的急性毒性试验结果,推测制川乌与不同贝母配伍后LD50的变化与其配伍后化学成分的变化相关;从而说明相反不完全是通过其化学成分变化引起的,其相反机制可能还通过其他因素共同引起.