大蒜素对人喉癌Hep-2细胞周期与细胞凋亡的影响

目的研究大蒜素对人喉癌Hep-2细胞周期与细胞凋亡的影响。方法实验分为空白对照组、大蒜素25μg/m L组、大蒜素50μg/m L组、大蒜素100μg/m L组和顺铂40μg/m L组,取对数生长期人喉癌Hep-2细胞,每组分别给予相应干预24 h后,采用MTT法测定细胞增殖抑制率,通过流式细胞术检测细胞周期、观察细胞凋亡状况并计算凋亡率,RTPCR法检测bcl-2 mRNA和bax mRNA表达并计算bax/bcl-2表达比值,Western blotting法检测Caspase-3蛋白表达情况。结果与空白对照组比较,大蒜素50μg/m L组、大蒜素100μg/m L组和顺铂40μg/m L组人喉癌Hep-2细胞增殖抑制率显著升高,细胞周期G0/G1期显著增长、G2/M期显著缩短,细胞凋亡率显著升高,bcl-2 mRNA表达显著下调而bax mRNA显著上调,bax/bcl-2表达比值显著升高,Caspase-3蛋白表达显著上调,差异均有统计学意义(P均<0.05)。大蒜素100μg/m L组细胞增殖抑制率、细胞凋亡率和Caspase-3蛋白表达量均显著高于顺铂40μg/m L组(P均<0.05)。结论大蒜素具有阻滞人喉癌Hep-2细胞周期进程和促进其凋亡的作用,机制可能与其能够调节凋亡相关基因和蛋白表达有关。     

鹿茸多肽对兔骨性关节炎软骨细胞的影响

目的:观察鹿茸多肽对兔骨性关节炎软骨细胞的影响。方法:参考Hulth法建立骨性关节炎模型,给予不同浓度的鹿茸多肽进行干预,分别进行MTT法检测、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测,获得鹿茸多肽对软骨细胞作用。结果:鹿茸多肽对骨性关节炎软骨细胞有一定的增殖作用,骨性关节炎软骨细胞直接分泌到胞外的基质金属蛋白酶含量变化不明显,骨性关节炎软骨细胞核酸中金属蛋白酶有一定表达。结论:骨性关节炎软骨细胞在正常分化及增殖发生改变过程中,其软骨基质的降解是金属蛋白酶与其它因子协同作用的结果;鹿茸多肽有促进骨性关节炎软骨细胞增殖作用,并可抑制骨性关节炎软骨细胞中金属蛋白酶的过度表达,可能对治疗骨性关节炎有较好的作用。     

梅花鹿茸和马鹿茸多肽化学性质及生物活性比较

目的 :比较梅花鹿茸多肽和马鹿茸多肽化学组成及生物活性异同。方法 :用相同工艺提取梅花鹿茸和马鹿茸多肽组分 ;采用电泳和质谱等分离分析手段比较多肽组分的化学性质 ;用 [³H]TdR参入细胞DNA比较两种鹿茸多肽的促细胞增殖活性。结果 :梅花鹿茸和马鹿茸多肽组分的电泳图谱和质谱有明显差异 ,而中国的东北马鹿茸和新西兰马鹿茸多肽的图谱十分相近 ;梅花鹿茸和马鹿茸多肽对软骨细胞和表皮细胞分裂都有促进作用 ,但马鹿茸多肽对表皮细胞的增殖作用比梅花鹿茸多肽强。结论 :梅花鹿茸和马鹿茸多肽的化学性质和生物活性有较大差异。     

鹿茸多肽的药理作用研究进展

鹿茸为传统名贵中药,含有多种成分.其中含量最多的鹿茸多肽药理作用广泛,主要对循环系统、免疫系统、运动系统、神经系统起重要作用.同时还具有促进皮肤再生、抑制肝炎和治疗糖尿病等作用.本文总结近年来公开发表的文献,对鹿茸多肽的药理作用进行分析,为临床应用提供科学依据.     

桂郁金提取物对人肝星状细胞增殖、细胞周期及凋亡影响的研究

目的观察桂郁金提取物对人肝星状细胞的作用,了解其对该细胞的增殖、细胞周期和凋亡情况的影响。方法将人肝星状细胞株(HSC-LX2)与药物孵育48 h后,用MTT比色法测定细胞的增殖抑制率。用流式细胞术(PI染色法)检测各周期细胞的DNA含量及细胞凋亡的概况。结果低、中、高浓度桂郁金提取物均可抑制HSC-LX2细胞的增殖,48h的增值抑制率分别为15.4%、49.1%、58.3%;48 h的IC50为45μmol/L;均可阻止HSC-LX2细胞进入DNA合成增殖周期,并诱导HSC-LX2细胞发生早期及晚期凋亡,48 h的S期+G2/M期细胞总数百分比分别为70.1%、63.6%、50.2%;凋亡概率分别为13.9%、18.9%、23.5%。结论桂郁金提取物具有抑制HSC-LX2细胞增殖、阻止细胞进入DNA合成增殖周期、诱导细胞发生凋亡的能力,从而可以干预肝纤维化病程;以上能力均具有剂量依赖性;且中、高剂量桂郁金提取物组以上能力明显比秋水仙碱组和复方鳖甲软肝片组强。     

三氧化二砷对体外人胶质瘤细胞株U251的影响

目的探讨三氧化二砷(As2O3)对体外培养的人类成神经胶质瘤细胞株U251MG的作用及其机制。方法应用倒置相差显微镜、四甲基偶氮唑蓝法、流式细胞仪,分别对不同浓度加药组及对照组U251细胞的存活、形态学改变、细胞DNA含量的分布进行观察和测定。结果0.5～4μmol/L的As2O3可明显抑制U251的增殖。流式细胞仪分析显示,加药组在G1期细胞前均出现亚二倍体峰,且G0/G1期细胞减少,诱导细胞凋亡。结论As2O3能抑制体外人胶质瘤细胞株U251的增殖,有望用于神经胶质瘤的治疗。     

纳米鹿茸粗多肽对体外培养的软骨细胞代谢的影响

软骨细胞是关节软骨中惟一的细胞，在软骨形成、代谢以及修复中起着极其重要的作用。有研究表明，鹿茸具有促软骨细胞增殖作用，本研究旨在探讨纳米鹿茸及普通鹿茸粗多肽对体外培养的软骨细胞代谢功能的影响，比较药物制成纳米粉后与普通粉的作用强度。     

番茄红素对人肺癌A549细胞凋亡及细胞周期的影响

目的:探讨番茄红素对人非小细胞肺癌细胞A549凋亡及对细胞周期的影响。方法:体外培养并取处于对数生长期的A549细胞进行分组,分别给予培养液(空白对照组)、不同浓度番茄红素(20、10、5μg/mL)及顺铂(40μg/m L)进行干预,每组10个复孔。药物干预48小时后,噻唑蓝(MTT)比色法测定各组细胞增值抑制率;流式细胞术(FCM)检测各组细胞周期、观察细胞凋亡状况并计算凋亡率;应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测细胞凋亡相关基因Bcl-2 mRNA、Bax m RNA表达;蛋白免疫印迹(Western blotting)法检测细胞周期蛋白(cyclin B1、cyclin D1)和周期蛋白依赖性激酶(CDK1、CDK2)表达。结果:与空白对照组比较,番茄红素各剂量组和顺铂组A549细胞增值抑制率提高,番茄红素(20、10μg/mL)组细胞处于G2-M期的比例提高、凋亡率显著升高,Bcl-2 mRNA表达下调且Bax mRNA表达上调,Bax/Bcl-2值显著提高,cyclin B1蛋白和CDK1蛋白表达上调,cyclin D1蛋白和CDK2蛋白表达下调,差异均具有统计学意义(P0.05)。结论:番茄红素具有促进人非小细胞肺癌A549细胞凋亡,阻滞其有丝分裂,从而抑制其增殖的作用,可能与番茄红素影响凋亡相关调控基因及细胞周期相关调控蛋白表达有关。     

鹿茸多肽对雄鼠黄体生成素和睾丸酮分泌的影响

本文报道鹿茸多肽对雄鼠垂体－性腺分泌功能的影响。无论在体实验中，还是体外腺垂体细胞培养实验中，分别给小白鼠按２５ｍｇ／ｋｇ；５０ｍｇ／ｋｇ；１００ｍｇ／ｋｇ．ｉｐ鹿茸多肽和按２０μｇ／ｍｌ；４０μｇ／ｍｌ；８０μｇ／ｍｌ将鹿茸多肽加入培养瓶中，均能使雄鼠血浆中和细胞培养液中黄体生成素（ＬＨ）含量增多，并呈明显的量效关系。在体实验还发现，鹿茸多肽按２５ｍｇ／ｋｇ；５０ｍｇ／ｋｇ；１０ｍｇ／ｋｇ分别给     

鹿茸多肽对大鼠心肌缺血损伤的保护作用

目的:探讨鹿茸多肽对大鼠心肌缺血损伤的保护作用.方法:采用结扎冠状动脉制备大鼠心肌缺血损伤模型,将动物随机分假手术组、模型组、地尔硫卓组(1 mg·kg~(-1))、鹿茸多肽低、中、高剂量组(30,60,120 mg·kg~(-1)).除假手术组和模型组给与同体积生理盐水外,各组动物在术后12,23 h分别尾静脉注射给药1次.术后24 h,测定心肌梗死范围、血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)心肌组织MDA,SOD,并记录心电图ST段.结果:鹿茸多肽60,120 mg·kg~(-1)剂量组能明显减少心肌缺血损伤大鼠心肌梗死面积,分别为(21.67±5.19)%,(19.56±9.15)%,而模型组为(34.52±8.69)%;模型组心电图出现S-T段明显抬高(0.41±0.05)mV,而鹿茸多肽30,60,120 mg·kg~(-1)剂量组能明显降低S-T段抬高(0.28±0.03),(0.21±0.03),(0.16±0.02)mV(均P＜0.01).另外,鹿茸多肽能降低血清CK,LDH,AST活性,血清及心肌组织MDA含量,增加血清及心肌组织SOD活性.结论:鹿茸多肽对大鼠心肌缺血损伤具有保护作用,其机制可能与抗氧化作用有关.     

鹿茸多肽对微波辐射致小鼠卵巢次级卵泡发育损伤的保护作用

  目的：研究鹿茸多肽(VAP)对微波辐射所致小鼠卵巢次级卵泡发育损伤的保护作用及其机制  方法：将75只8周龄昆明种雌性小鼠,随机分为对照组、微波辐射组(MR组)、MR+低VAP组、MR+中VAP组、MR+高VAP组,每组15只。除对照组外,其余小鼠进行5 mW/cm²强度的微波辐射30天;然后MR+低VAP组、MR+中VAP组、MR+高VAP组腹腔注射VAP 30天,剂量分别为1.5 mg·kg-1·d-1、3 mg·kg-1·d-1和6 mg·kg-1·d-1。观察小鼠卵巢组织中次级卵泡的发育情况,TUNEL法检测小鼠次级卵泡中颗粒细胞的凋亡,免疫组织化学法检测小鼠次级卵泡颗粒细胞中凋亡抑制蛋白Bcl-2 和活化型促凋亡蛋白caspase-3的表达,ELISA法检测小鼠血清中雌激素水平  结果：与MR组比较,高浓度VAP显著提高了小鼠卵巢组织中次级卵泡的发育,改善其组织结构状态,显著减少次级卵泡颗粒细胞的凋亡和活化型促凋亡蛋白caspase-3的表达,升高次级卵泡颗粒细胞中凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达和小鼠血清中的雌激素水平  结论：VAP可显著修复微波辐射引起的小鼠卵巢次级卵泡发育损伤,其修复机制可能与减少次级卵泡中颗粒细胞凋亡,促进卵泡雌激素合成和分泌有关。     

鹿茸多肽诱导心肌干细胞分化作用及对心肌细胞特征性MHC基因表达的影响

目的从新生大鼠心脏中分离得到心肌干细胞,体外培养,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法观察鹿茸多肽诱导前后心肌细胞特征性基因α-心肌肌球蛋白重链(α-MHC)和β心肌肌球蛋白重链(β-MHC)的表达,探讨鹿茸多肽对心肌干细胞分化的促进作用。方法胰酶消化法分离心肌干细胞(CSCs),并进行传代培养,流式细胞法及免疫组化染色鉴定,于第3代CSCs培养液中加入不同浓度的(50,100,200,400,800,1 600μg/mL)鹿茸多肽进行体外诱导,3周后,用细胞刷收集细胞,利用RT-PCR技术观察心肌细胞特征性基因MHC的表达情况。结果鹿茸多肽对CSCs的MHC基因表达有促进作用,在一定范围内存在量效关系,并随着鹿茸多肽浓度的增加,α-MHC和β-MHC基因的表达均有所增加。结论鹿茸多肽对心肌干细胞分化心肌细胞有促进作用,表明其在心肌损伤性疾病的康复中有潜在的治疗价值,值得进一步全面深入的研究。     

基于组织结构特征和蛋白质与钙含量比值的鹿茸分区研究

目的 建立客观鹿茸分区方法.方法 采集3种规格的鹿茸,分别为马鹿三杈茸、梅花鹿三杈茸和二杠茸.通过纵向剖面、横断面和组织学切片对鹿茸内部组织结构、形态特征和组织类型进行分析,确定鹿茸的感官分区指标.通过测定鹿茸不同区段成分上的差异,设立数据化的分区指标.结果 建立血管形态和骨密质环2个感官分区指标,蜡片:无肉眼可见血管...     

The anti-osteoporotic effect of velvet antler polypeptides from Cervus elaphus Linnaeus in ovariectomized rats

Ethnopharmacological relevance

The deer velvet antler is well known for its traditional medicinal value, and is widely used in the clinic. It is recorded in the Compendium of Materia Medica that the deer velvet antler replenishes vital essence and strengthens the bone.

Aim of the study

The goal of this study was to investigate the anti-osteoporotic effect of total velvet antler polypeptides from Cervus elaphus Linnaeus (TVAPL) on ovariectomized rats (OVX), and their possible mechanism of the action.

Materials and methods

Wistar rats were divided into five groups: sham-operated group, OVX group, and OVX rats treated with 20, 40, or 60 mk/kg TVAPL for 12 weeks. Calcium and phosphorus levels, bone weight coefficient (BWC), bone mineral density (BMD), and bone mineral content (BMC) were evaluated. The MTT assay was used to measure the activities of interleukin-1 (IL-1) and interleukin-6 (IL-6). In addition, cartilage cells and osteoblast-like cells were exposed to TVAPL, natural velvet antler polypeptides (nVAP), and synthetic velvet antler polypeptides (sVAP), to determine their effects on cell proliferation using the tritiated thymidine incorporation assay. Finally, the enzyme-linked immunosorbent assay was used to determine the effects of nVAP and sVAP on cytokines related to bone metabolism.

Results

The administration of TVAPL for 12 weeks significantly reversed osteoporosis in OVX rats, thereby improving the BWC, BMD, BMC, and bone microarchitecture. IL-1 and IL-6 were significantly activated in the OVX group, and their activation was inhibited by TVAPL. In addition, nVAP and sVAP promoted the proliferation of cartilage and osteoblast-like cells (p<0.01 or p<0.001), and inhibited the secretion of IL-1α from THP-1 monocytic cells in vitro.

Conclusion

These results suggest that TVAPL are effective in preventing bone loss in OVX rats. The effect of TVAPL on osteoporosis is due to inhibition of IL-1 and IL-6 by nVAP, and promotion of mitosis. sVAP has similar bioactivity as nVAP. Thus, both TVAPL and sVAP may be potential therapeutic agents for the treatment of postmenopausal osteoporosis.     

鹿茸总多肽对维A酸致骨质疏松大鼠的防治作用

 目的观察鹿茸总多肽(TVAP)对维A酸诱导大鼠骨质疏松的影响。方法通过ig维A酸70 mg·kg^-1·d^-1,连续14d,建立大鼠骨质疏松模型。造模同时sc TVAP 60,40,20 mg·kg^-1·d^-1,治疗30 d后,处死动物。取血分离血清,测定血清钙(Ca)、磷(P)、碱性磷酸酶(ALP);取左侧股骨,计算骨重系数和测定骨Ca,P含量;取右侧股骨,测定中段和下1/3处骨密度;取左侧胫骨,做骨组织形态计量测定。结果与模型组比较,TVAP明显改善维A酸诱导大鼠的骨Ca含量降低(P<0.01),骨重系数下降(P<0.001)和骨密度降低(P<0.05,P<0.01)以及骨病理形态发生的明显改变:平均骨小梁宽度(MTPT)变窄(P<0.001)、平均骨小梁间距(MTPS)变大(P<0.05)、松质骨体积(TBV)降低(P<0.01)等骨质疏松改变。但对血中反映骨代谢状况的生化指标Ca,P含量和ALP活性无明显影响。结论TVAP能纠正维A酸所致骨重建的负平衡状态,使骨量增加,骨组织显微结构趋于正常,对大鼠骨质疏松有防治作用。     

鹿茸多肽促进大鼠坐骨神经再生的实验研究

目的 :探讨鹿茸多肽对大鼠坐骨神经损伤后神经再生的影响。方法 :Wistar大鼠 36只 ,雌雄各半 ,随机分成对照组和鹿茸多肽用药组。建立切断大鼠坐骨神经保留一侧神经外膜模型 ,术后隔日于失神经支配的靶器官注射给药。于术后 2、4、6周观察坐骨神经功能指数、电生理、组织学及超微结构。结果 :坐骨神经功能指数、潜伏期及诱发电位恢复率在各时间点上用药组优于对照组P <0 0 1。组织学检查有髓神经纤维数、纤维直径、截面积在各时间点上用药组优于对照组P <0 0 1。超微结构观察用药组各时间点上有髓神经纤维的髓鞘厚度、成熟度均优于对照组。结论 :鹿茸多肽能促进神经再生及功能的恢复。     

Photodynamic effect of hypericin in primary cultures of human umbilical endothelial cells and glioma cell lines

Hypericin is the most powerful naturally occurring photosensitizer and as such there is renaissant interest in the potentials of this compound for anticancer photodynamic therapy (PDT). The purpose of this study was to investigate the hypericin‐mediated photodynamic therapy effects on normal human umbilical endothelial cells (HUVECs) in comparison with cancer human glioma cell lines U‐87 MG and U‐373 MG, in in vitro conditions. The data suggest that endothelial cells as well as glioma cell lines are sensitive only to photoactivated hypericin. The inhibitory effects of photoactivated hypericin did not differ in endothelial compared with tumor cells in cytotoxicity MTT and DNA fragmentation assays. However, an important difference in sensitivity was found between the above mentioned cell types in migration and metalloproteinases inhibition assays performed as cell function tests. The findings in both function tests were supported by the high sensitivity of endothelial cells in an additional angiogenesis test of tubular formation in vitro. Copyright © 2009 John Wiley & Sons, Ltd.     

密蒙花方对缺氧状态下人血管内皮细胞细胞周期的影响

目的探讨密蒙花方对缺氧状态下人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vascular endothelialcell,HUVEC)细胞周期的影响。方法体外培养HUVEC,采用二氯化钴(CoCl2)建立细胞化学缺氧模型,采用流式细胞仪(flow cytometer,FCM)检测不同浓度密蒙花方水提液(10、20、40 mg/ml)对缺氧状态下HUVEC细胞周期的影响。结果①缺氧组较正常组G0/G1期细胞比例减少,S期细胞比例增高,差异具有统计学意义(P<0.01);②各密蒙花方组均较缺氧组G0/G1期细胞比例增高,S期细胞比例减少(P<0.01),组间具有浓度依赖关系(P<0.01);③密蒙花方组在G0/G1期前还出现了指示细胞凋亡的亚G1期凋亡峰,表明密蒙花方对缺氧状态下的HUVEC具有促凋亡作用。结论密蒙花方抑制HUVEC增殖的作用与阻滞细胞由G1期进入S期,促进细胞凋亡有关。     

注射砒霜大鼠的血清对白血病细胞膜流动性及细胞周期的影响

目的：探讨砒霜治疗白血病的作用机理。方法：用血清药理学方法研究砒霜对人白血病细胞株K562细胞的作用。通过荧光光度测定法、流式细胞术检测细胞膜流动性、细胞周期。结果：砒霜能使K562细胞膜流动性增高，G0-G1期细胞百分数减少，S期细胞百分数增加，并具有诱导K562细胞凋亡的作用。     

Fructus ligustri lucidi extracts induce human glioma cell death through regulation of Akt/mTOR pathway In Vitro and reduce glioma tumor growth in U87MG xenograft mouse model

The present study was undertaken to examine the effect of Fructus ligustri lucidi (FLL) extracts on glioma cell growth and to determine the underlying mechanism by which FLL extracts exert anticancer properties in human U87MG glioma cells. The FLL extracts resulted in cell death in a dose‐ and time‐dependent manner. Western blot analysis showed that treatment with FLL extracts caused down‐regulation of the phosphatidylinositol‐3 kinase (PI3K)/Akt pathway. Overexpression of Akt prevented the cell death induced by the FLL extracts. The FLL extracts caused a decrease in the expression of mammalian target of rapamycin (mTOR) and the FLL extract‐induced cell death was increased by the mTOR inhibitor rapamycin. The FLL extracts decreased the expression of survivin. Oral administration of FLL extracts in subcutaneous U87MG xenograft models reduced the glioma tumor volume. These findings indicate that the FLL extracts resulted in glioma cell death through regulation of the Akt/mTOR/survivin pathway in vitro and inhibited glioma tumor growth in vivo. These data suggest that the FLL extracts may serve as a potential therapeutic agent for malignant human gliomas. Copyright © 2010 John Wiley & Sons, Ltd.