食管鳞癌多阶段癌变中14-3-3σ和P53表达特征及相关性分析

目的:探讨14-3-3σ和P53蛋白表达在食管鳞癌和癌旁正常黏膜上皮、各级癌前病变中的变化特征及相关性.方法:采用免疫组织化学方法检测14-3-3σ和P53蛋白在60例不同分化程度食管鳞癌和癌旁正常食管黏膜上皮、各级癌前病变中的表达变化.结果:癌旁正常食管黏膜上皮中均可检测到不同程度的14-3-3σ蛋白表达(表达量8.22),随着癌前病变进展,14-3-3σ的表达率和表达量逐渐下降;低分化鳞癌中14-3-3σ的表达量最低(表达量0.45),完全失表达率为64%(7/11).P53蛋白在鳞癌中表达率最高67%(27/40),表达量为4.86,而只有25%(6/24)癌旁正常上皮表达P53蛋白(表达量0.42).14-3-3σ和P53蛋白的相关性分析表明二者呈显著负相关(P＜0.05).结论:P53蛋白可能通过负调控14-3-3σ基因的表达参与食管癌变多阶段演进过程,14-3-3σ和P53可能成为食管癌早期诊断及高危人群筛查的分子指标,同时也可能成为食管癌生物预防和疗效评价的新靶点.     

食管鳞癌组织中磷酸化表皮生长因子受体和Akt蛋白的表达

目的:探讨磷酸化表皮生长因子受体(p-EGFR)及其下游信号磷酸化蛋白激酶Akt(p-Akt)在食管鳞癌组织中的表达及其相关性。方法:采用免疫组化法检测50例食管鳞癌组织和50例相应癌旁正常食管黏膜组织中p-EGFR和p-Akt蛋白的表达,并分析二者与食管鳞癌患者临床病理特征的关系以及二者在食管鳞癌组织中表达的相关性。结果:食管癌组织中p-EGFR和p-Akt蛋白表达水平均高于癌旁正常食管黏膜组织(χ2配对=9.818和33.390,P<0.05)。p-EGFR和p-Akt蛋白的表达与食管鳞癌的分化程度(χ2=18.083和11.049,P<0.05)、淋巴结转移(χ2=7.284和5.817,P<0.05)有关,与患者的性别、肿瘤直径及TNM分期无关(P>0.05)。此外,p-EGFR和p-Akt蛋白在食管鳞癌中的表达呈正关联(rP=0.501,P<0.001)。结论:p-EGFR和p-Akt蛋白的高表达可能与食管鳞癌的恶性程度密切相关。     

IMP3在食管鳞癌中高表达是独立预后因素

目的 研究胰岛素样生长因子Ⅱ mRNA结合蛋白3(IMP3)在食管鳞癌组织中的表达及其与临床因素之间的关系.方法 免疫组织化学检测100对食管鳞癌及正常食管黏膜中的IMP3蛋白表达水平.Real time PCR检测33对食管鳞癌组织中IMP3的mRNA表达水平.结果 IMP3在癌组织中的表达显著高于癌旁正常组织(17%vs2%,P<0.001).IMP3的高表达与食管癌患者预后差之问显著相关(P=0.015),是独立的预后因素.IMP3的mKNA在癌组织中表达升高,但与蛋白水平之间没有相关性.结论 IMP3是食管癌患者预后因素之一.     

食管鳞状细胞癌组织中Ca125、Ca15-3、Ca19-9和Ca72-4的表达

目的:检测食管鳞状细胞癌组织中Ca125、Ca15-3、Ca19-9和Ca72-4蛋白的表达.方法:采用组织芯片技术及免疫组织化学方法检测59例食管鳞状细胞癌及相应癌旁黏膜组织中Ca125、Ca15-3、Ca19-9和Ca72-4蛋白的表达情况.结果:食管鳞状细胞癌组织中Ca125、Ca15-3的阳性表达率分别为20.7%和44.8%,高于癌旁黏膜组织(2.2%和12.8%.P均<0.05);食管鳞状细胞癌组织中Ca72-4的阳性表达率为22.0%,低于癌旁黏膜组织(61.4%.P<0.05).不同性别的食管癌患者癌组织中Ca15-3和Ca72-4的阳性表达率差异均有统计学意义(P<0.05).结论:食管鳞状细胞癌的发生可能与Ca125、Ca15-3表达上调及Ca72-4表达下调有关;Ca15-3蛋白和Ca724蛋白的表达与性别有关.     

CDC25B和14-3-3δ蛋白在膀胱癌中的表达及意义

目的探讨CDC25B和14-3-3δ蛋白在膀胱癌中的表达与病理分级、临床分期的关系,为临床上判断膀胱癌的恶性程度和膀胱癌的新的治疗方法提供理论依据。方法采用免疫印迹（Western Blot）法检测64例膀胱癌、9例癌旁正常膀胱粘膜中CDC25B和14-3-3δ蛋白的表达。1）观察CDC25B和14-3-3δ蛋白在膀胱癌和癌旁正常膀胱粘膜中的表达情况;2）分析CDC25B和14-3-3δ蛋白在膀胱癌中的表达与病理分级和临床分期的关系。结果所测组织中均有CDC25B的表达,膀胱癌中呈高表达;并且在膀胱癌各病理分级、临床分期间的表达亦有差异。CDC25B随着肿瘤的分化程度降低而表达逐渐增加,CDC25B在浸润性膀胱癌中表达高于非浸润性膀胱癌。14-3-3δ蛋白在癌旁正常膀胱粘膜中大量表达,在膀胱癌中均呈低表达,但未见其与肿瘤病理分级有明显相关性。结论 CDC25B在膀胱癌组织中表达明显高于癌旁正常膀胱粘膜,且CDC25B的高表达与膀胱癌的分化程度和浸润性密切相关;14-3-3δ蛋白在癌旁膀胱粘膜大量表达,而在膀胱癌组织中均呈低表达,但与肿瘤分化程度无相关性。CDC25B及14-3-3δ蛋白可能成为膀胱癌潜在的诊断标记和治疗靶点。     

CMTM3在食管癌的表达变化及意义

目的 检测食管鳞癌组织中CMTM3的表达并探讨其临床意义.方法 收集食管鳞癌组织62例,用免疫组织化学方法检测肿瘤组织和癌旁正常组织中CMTM3蛋白的表达,并比较不同分化程度的食管鳞癌组织中CMTM3蛋白表达的变化.结果 CMTM3蛋白在食管鳞癌组织和正常组织均定位于细胞膜和细胞质;食管鳞癌组织CMTM3的平均灰度值为(30.586±3.015),明显低于正常组织的(49.805±4.139)(P＜0.05);食管癌的分化程度越低,CMTM3蛋白的表达越低.结论 CMTM3可能是肿瘤抑制基因,并与肿瘤的发展和预后有关.     

PI3K和Akt蛋白在食管鳞状细胞癌组织中的表达及意义

目的 检测PI3K和Akt蛋白在食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中的表达,观察两者的相关性并探讨其在食管癌发生发展中的作用.方法 应用免疫组化法检测40例食管鳞癌组织、20 例癌旁组织中PI3K(SP法)和Akt(PV法)的表达情况,并分析蛋白表达与性别、年龄、分化、转移的关系和两蛋白表达的相关性.结果 ESCC中PI3K和Akt蛋白的阳性表达水平分别为77.5%(31/40)和65.0%(26/40),与对照组(食管癌旁组织和正常组织)比较差异有统计学意义(P<0.01).两者间表达呈正相关(r=0.358,P<0.05). 结论 PI3K和Akt蛋白在食管鳞癌组织中高表达,且与分化程度、转移情况相关,提示PI3K和Akt基因在食管癌发生发展过程中可能起一定的作用.     

siRNA沉默CathepsinB对人食管鳞状细胞癌增殖的影响

目的:评估人类食管鳞癌组织中CathepsinB在体内的表达水平和功能。方法:收集53例术中食管鳞癌标本,通过免疫组织化学染色、免疫印迹分析和逆转录-定量聚合酶链式反应检测人食管鳞癌组织、癌旁组织中CathepsinB的mRNA和蛋白表达。构建能有效抑制人食管癌EC9706细胞CathepsinB表达的siRNA序列,用Western blotting从蛋白水平证实沉默效果。靶向沉默CathepsinB基因后用CCK8法检测细胞增殖水平。结果:免疫组化结果显示,CathepsinB在食管癌组织中表达增高,且CathepsinB阳性表达者与肿瘤组织的分化程度、淋巴结转移明显相关性(P<0.05),但其表达与患者的性别、肿瘤浸润深度、肿块最大径、远处转移、临床分期无明显相关性(P>0.05)。WB和RT-PCR检测结果显示,在食管癌组织中CathepsinB的蛋白和mRNA表达量均高于癌旁组织(P<0.05)。结论:相对于癌旁组织,CathepsinB在食管癌组织中表达上调;靶向沉默CathepsinB基因后能有效抑制人食管癌细胞EC9706的体外增殖能力;CathepsinB在食管癌发生发展及细胞增殖过程中起着重要的作用,可能为食管癌早期诊断及分子靶向治疗提供研究切入点。     

食管鳞癌中RUNX3蛋白表达下调或缺失及临床意义

目的探讨食管鳞癌中RUNX3蛋白表达及其与临床病理参数的关系。方法采用蛋白质印迹法检测RUNX3蛋白在42例食管鳞癌组织及癌旁组织中表达的差异,并分析与临床病理参数的关系。结果蛋白质印迹显示47.6%(20/42)的食管鳞癌组织RUNX3蛋白表达明显下调或缺失,而在癌旁正常组织中表达正常,RUNX3蛋白在食管鳞癌组织与癌旁正常组织中的表达差异有统计学意义(P<0.001),RUNX3蛋白的表达下调或缺失与淋巴结转移、TNM分期显著相关(P值分别为0.047及0.026)),与性别、年龄、肿瘤大小、分化程度、饮酒史、家族史等之间无明显相关(P>0.05)。结论 RUNX3蛋白在食管鳞癌组织中存在明显的表达缺失或下调,并与食管鳞癌TNM分期及淋巴结转移密切相关,其表达下调与食管鳞癌的浸润、转移有关。     

食管鳞癌中RUN×3蛋白表达下调或缺失及临床意义

目的 探讨食管鳞癌中RUNX3蛋白表达及其与临床病理参数的关系.方法 采用蛋白质印迹法检测RUNX3蛋白在42例食管鳞癌组织及癌旁组织中表达的差异,并分析与临床病理参数的关系.结果 蛋白质印迹显示47.6%(20/42)的食管鳞癌组织RUNX3蛋白表达明显下调或缺失,而在癌旁正常组织中表达正常,RUNX3蛋白在食管鳞癌组织与癌旁正常组织中的表达差异有统计学意义(P＜0.001),RUNX3蛋白的表达下调或缺失与淋巴结转移、TNM分期显著相关(P值分别为0.047及0.026)),与性别、年龄、肿瘤大小、分化程度、饮酒史、家族史等之间无明显相关(P＞0.05).结论 RUNX3蛋白在食管鳞癌组织中存在明显的表达缺失或下调,并与食管鳞癌TNM分期及淋巴结转移密切相关,其表达下调与食管鳞癌的浸润、转移有关.     

ID-3在食管鳞状细胞癌中的表达及意义

目的探讨食管鳞状细胞癌中DNA结合抑制蛋白-3(inhibitors of DNA binding 3,ID-3)的表达及临床意义。方法应用免疫组化SP法对109例食管鳞癌组织、40例切缘正常组织进行ID-3免疫组化染色,检测癌组织、正常食管黏膜组织中ID-3的表达,并分析ID-3的表达与食管鳞癌临床病理特征的关系。结果食管鳞癌组织中ID-3蛋白的表达显著高于切缘正常组织(P<0.01),ID-3蛋白表达与肿瘤分化呈正相关(P<0.01),ID-3蛋白表达与患者的年龄、性别、浸润深度及是否伴淋巴结转移均无关。结论 ID-3高表达可能是食管鳞癌的一个重要的分子学改变,可能在食管鳞癌的发生、发展中起重要作用。     

河南食管癌高发区食管癌组织中C-erbB-2蛋白和mRNA的表达

目的:探讨河南食管癌高发区居民食管癌组织中c-erbB-2 mRNA及蛋白的表达.方法:采用RT-PCR和免疫组化法检测食管癌高发区河南林州市正常人食管上皮组织和食管鳞癌手术切除的癌组织和癌旁组织中c-erbB-2的表达情况.结果:癌组织中C-erbB-2蛋白表达高于癌旁组织(P＜0.05);癌组织和癌旁组织中c-erbB-2mRNA表达率与正常人食管胃镜活检组织相比,差异无统计学意义.结论:C-erbB-2蛋白的表达在食管鳞癌的发生过程中可能起一定作用.     

14-3-3ζ蛋白在胃癌中的表达及意义

目的 探讨14-3-3ζ蛋白在胃癌和正常胃黏膜组织中的表达及其临床意义.方法 选取100例手术切除的胃癌组织标本及其中76例癌旁正常胃黏膜组织标本制备组织芯片,应用免疫组织化学方法检测组织芯片中14-3-3ζ蛋白的表达.分析胃癌患者的临床病理学特征与14-3-3ζ蛋白表达的相关性.结果 100例胃癌组织中79例(79.00%)表达14-3-3ζ蛋白;而正常胃黏膜中仅散在个别细胞弱表达.按组织学分类法,在乳头状腺癌和管状腺癌中14-3-3ζ蛋白阳性表达率分别为100%和86.75%,显著高于黏液腺癌和印戒细胞癌(42.86%、0)(P<0.05).按Lauren分类法,肠型胃癌中14-3-3ζ蛋白阳性表达率显著高于弥漫型胃癌(90.91% vs 73.13%)(P<0.05).在不同浸润深度的胃癌中,肌层和浆膜层的14-3-3ζ蛋白阳性表达率分别为78.57%和81.93%,均显著高于黏膜层和黏膜下层(0、0)(P<0.05).进展期胃癌的14-3-3ζ蛋白阳性表达率为81.44%,而3例早期胃癌均不表达(P<0.05).结论 胃癌组织中14-3-3ζ蛋白表达与其组织学类型和浸润状况密切相关.提示14-3-3ζ蛋白有可能成为评估胃癌的预后指标和潜在的生物治疗靶点.     

食管鳞癌中MEKK3和NF-κB的表达及其临床意义

目的研究有丝分裂原活化蛋白激酶激酶激酶3（MEKK3）、核转录因子（NF-κB）蛋白在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义。方法收集76例食管鳞癌患者的癌组织及相应的35例癌旁异型增生组织和20例正常食管黏膜组织,应用免疫组化EnVision法检测MEKK3、NF-κB蛋白的表达。结果食管鳞癌组织中MEKK3蛋白阳性表达率高于癌旁异型增生组织和正常食管黏膜组织（均P＜0.05）;NF-κB蛋白表达阳性率在正常食管黏膜组、癌旁异型增生组、食管鳞癌组中依次升高;MEKK3、NF-κB蛋白表达与临床分期、浸润深度及淋巴结转移均相关（均P＜0.05）,而与患者年龄、性别及组织学分级均无关（均P＞0.05）;MEKK3与NF-κB蛋白的阳性表达呈正相关（r=0.308,P＜0.05）。结论 MEKK3、NF-κB蛋白异常表达与食管鳞癌的发生、浸润转移及预后相关,且两者呈正相关。联合检测MEKK3和NF-κB蛋白表达可作为食管鳞癌的诊断、预后评估的参考依据。     

食管鳞癌张力蛋白同源物磷酸脂酶基因蛋白及基质金属蛋白酶-7的表达和临床意义

目的探讨张力蛋白同源物磷酸脂酶基因（PTEN）蛋白及基质金属蛋白酶-7（MMP-7）的表达与食管癌发生、发展及浸润、转移的关系。方法应用免疫组织化学法检测61例食管鳞癌组织、30例癌旁不典型增生组织及60例正常食管黏膜组织中PTEN蛋白及MMP-7蛋白的表达。结果食管鳞癌组织中PTEN蛋白与MMP-7蛋白的表达与癌的组织学分级、浸润深度及淋巴结转移密切相关（P〈0．01）;在食管上皮癌变过程中PTEN蛋白在正常黏膜组织、癌旁不典型增生组织及癌组织中的表达率依次降低,分别为93．3％（56／60）、73．3％（22／30）、54．1％（33／61）,纽间比较差异有统计学意义（P〈0．01）;而MMP-7蛋白在癌组织及癌旁不典型增生组织表达率显著高于正常黏膜组织,分别为42．6％（26／61）、33．3％（10／30）、18．3％（11／60）,组间比较差异有统计学意义（P〈0．01）;PTEN蛋白与MMP-7的表达呈负相关（P〈0．01）。结论PTEN蛋白和MMP-7在食管癌的浸润、转移及黏膜上皮癌变过程中起重要作用,PTEN蛋白及MMP-7的联合检测有望成为食管鳞癌早期诊断和判断预后的分子指标之一。     

14-3-3ζ蛋白在胃癌中的表达及意义

目的探讨14-3-3ζ蛋白在胃癌和正常胃黏膜组织中的表达及其临床意义。方法选取100例手术切除的胃癌组织标本及其中76例癌旁正常胃黏膜组织标本制备组织芯片,应用免疫组织化学方法检测组织芯片中14-3-3ζ蛋白的表达。分析胃癌患者的临床病理学特征与14-3-3ζ蛋白表达的相关性。结果 100例胃癌组织中79例（79.00%）表达14-3-3ζ蛋白;而正常胃黏膜中仅散在个别细胞弱表达。按组织学分类法,在乳头状腺癌和管状腺癌中14-3-3ζ蛋白阳性表达率分别为100%和86.75%,显著高于黏液腺癌和印戒细胞癌（42.86%、0）（P〈0.05）。按Lauren分类法,肠型胃癌中14-3-3ζ蛋白阳性表达率显著高于弥漫型胃癌（90.91%vs73.13%）（P〈0.05）。在不同浸润深度的胃癌中,肌层和浆膜层的14-3-3ζ蛋白阳性表达率分别为78.57%和81.93%,均显著高于黏膜层和黏膜下层（0、0）（P〈0.05）。进展期胃癌的14-3-3ζ蛋白阳性表达率为81.44%,而3例早期胃癌均不表达（P〈0.05）。结论胃癌组织中14-3-3ζ蛋白表达与其组织学类型和浸润状况密切相关。提示14-3-3ζ蛋白有可能成为评估胃癌的预后指标和潜在的生物治疗靶点。     

程序性死亡配体-1 在食管鳞癌中的表达 及临床意义

目的 分析程序性死亡配体-1（PD-L1）在食管鳞癌中的表达及其临床意义。方法 采用免疫组织 化学染色、Western blot 检测PD-L1 在50 例食管鳞癌患者的癌组织及其相应癌旁组织中的表达,并分析PD-L1 表达与食管鳞癌临床病理学特征及预后的相关性。结果 PD-L1 在食管鳞癌组织中阳性表达率为42.0%（21/50） 高于癌旁组织22.0%（11/50）,差异有统计学意义（P <0.05）。PD-L1 蛋白的表达水平与患者肿瘤浸润深度及临 床分期相关（P <0.05）。Kaplan-Meier 生存分析表明PD-L1 的阳性组较阴性组预后较差,PD-L1 阳性组和阴性 组患者30 个月生存率分别为38.1% 和86.2%,差异有统计学意义（P <0.05）。多变量COX 回归分析结果显示 PD-L1 是食管癌患者的预后因素。结论 PD-L1 蛋白高表达在食管鳞癌的发生发展过程中具有重要作用,可能 成为食管鳞癌预后的评价指标,并为食管鳞癌的治疗提供新的靶点。     

食管鳞状细胞癌组织中Livin与半胱氨酸蛋白酶-3的表达

目的：检测食管鳞状细胞癌（ESCC）组织中Livin与半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）蛋白的表达。方法：采用免疫组化SP法检测53例ESCC及53例癌旁正常食管组织中Livin及Caspase-3蛋白的表达。结果：ESCC组织中Livin蛋白的阳性表达率（52.8%）高于癌旁正常食管组织（7.5%,χ2=20.346,P〈0.001）,其阳性表达率与ESCC浸润深度及淋巴结转移有关（P均〈0.05）。ESCC组织中Caspase-3的阳性表达率（39.6%）低于癌旁正常食管组织（83.0%,χ2=16.690,P〈0.001）,其阳性表达率与ESCC组织分化程度、浸润深度及淋巴结转移有关（P均〈0.05）。ESCC组织中Livin与Caspase-3蛋白的表达负关联（rP=-0.302,P=0.021）。结论：Livin和Caspase-3蛋白参与了ESCC的发生与发展;Livin蛋白可能通过抑制Caspase-3蛋白的活性发挥作用。     

食管鳞癌FHIT蛋白表达的免疫组化分析

目的 FHIT基因是食管鳞癌候选肿瘤抑制基因，本研究旨在探讨FHIT蛋白在食管鳞癌中的变化。方法 用免疫组化SABC法分析了65例食管鳞癌及对应癌旁组织FHIT蛋白表达。结果 FHIT蛋白在食管癌和癌旁的表达并无显著差异。结论 食管癌中FHIT癌蛋白表达的变化与基因改变的变化并非一致。一部分食管癌FHIT基因表达降调则可能要归因于表遗传机制。     

浸润性乳腺癌中14-3-3σ蛋白的表达与ER、PR的相关性研究

目的 探讨浸润性乳腺癌组织中14-3-3σ蛋白的表达与雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)的相关性.方法 选择2012年12月～2014年10月重庆市公安消防总队医院手术切除的浸润性乳腺癌组织标本55例及其相应的癌旁正常组织31例为研究对象,分别将其作为浸润性乳腺癌组织组和正常乳腺组织组.采用免疫组化SP法检测乳腺组织中14-3-3σ蛋白及ER、PR的表达情况;采用Pearson相关系数分析14-3-3σ蛋白表达水平与ER、PR的相关性.结果 浸润性乳腺癌组织14-3-3σ蛋白及ER阳性表达率明显低于正常乳腺组织,差异均有统计学意义(P＜ 0.05或P＜0.01);浸润性乳腺癌组织PR阳性表达率与正常乳腺组织比较,差异无统计学意义(P＞0.05);浸润性乳腺癌组织中,14-3-3σ蛋白阳性表达率明显低于ER、PR,差异均有统计学意义(均P＜0.05);正常乳腺组织中,14-3-3σ蛋白、ER及PR表达情况比较,差异无统计学意义(P＞0.05).不同年龄、肿瘤大小、腋窝淋巴结转移情况的浸润性乳腺癌患者14-3-3σ蛋白阳性表达率比较,差异无统计学意义(P＞0.05);不同TNM分期、组织分型、分化程度、PR及ER表达情况的浸润性乳腺癌患者14-3-3σ蛋白阳性表达率比较,差异均有统计学意义(均P＜ 0.05).Pearson相关性分析显示,14-3-3σ蛋白与ER阳性表达呈正相关(r=0.3334,P＜0.05),14-3-3σ蛋白与PR无相关性(P＞0.05).结论 14-3-3σ蛋白可能参与浸润性乳腺癌的发生、发展和转移,14-3-3σ与ER的联合检测可成为乳腺癌患者预后判断的重要指标.