氧化苦参碱对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖及凋亡的作用

目的探讨氧化苦参碱对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖及凋亡的影响。方法从人的增生性瘢痕组织中提取成纤维细胞进行培养,通过MTT实验观察不同浓度的氧化苦参碱对成纤维细胞增殖的影响。应用流式细胞术检测经氧化苦参碱处理后成纤维细胞的周期变化,并通过Annexin V-FITC/PI双染色法和Hoechst 33258染色观察细胞的凋亡情况。通过Western Blot和RT-PCR检测氧化苦参碱对细胞周期蛋白CDK4、CDK6,以及凋亡调节蛋白Bcl-2和Bax的作用。结果与对照组相比,氧化苦参碱的浓度为10μmol·L~(-1)时,24 h细胞增殖的抑制率为(18.92±3.77)%,成纤维细胞的早期和晚期凋亡率分别为(3.28±2.56)%和(2.98±1.78)%;氧化苦参碱的浓度为20μmol·L~(-1)时,24 h细胞增殖的抑制率为(32.93±2.68)%,成纤维细胞的早期和晚期凋亡率分别为(6.89±0.76)%和(1.47±2.57)%。氧化苦参碱能够通过抑制细胞周期蛋白CDK4、CDK6和抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,诱导促凋亡蛋白Bax的表达来影响细胞周期进程,将细胞周期阻滞于G1期,使细胞增殖受到抑制,凋亡率增加。结论氧化苦参碱能够抑制人增生性瘢痕成纤维细胞的增殖并诱导其凋亡,可作为预防和治疗增生性瘢痕的潜在药物。     

纤维连接蛋白诱导人胚肺成纤维细胞增殖的信号转导通路研究

目的探讨纤维连接蛋白(FN)诱导人胚肺成纤维细胞(HFL-1)增殖的信号转导通路。方法采用不同浓度FN刺激HFL-1并观察磷酸酰基醇-3-激酶(PI3K)信号转导通路抑制剂wortmannin(WMN)、细胞外信号调节蛋白激酶(ERK)信号转导通路抑制剂PD98059和P38蛋白激酶信号转导通路抑制剂SB203580对FN诱导HFL-1增殖作用的影响。用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖情况。结果FN对HFL-1诱导增殖作用呈剂量依赖性升高趋势,在50ng/mL时作用显著;WMN,PD98059和SB203580均可抑制FN诱导的HFL-1细胞增殖。结论FN诱导HFL-1的细胞增殖可以通过PI3K和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导途径实现。     

基因重组bFGF的药效学研究

利用小型猪创伤模型,将bFGF分成3组(500、1 000、1 500 U/m)处理创面,并用SD-Ag及生理盐水做对照,观察创面愈合情况,结果表明1 000 U/ml浓度组促创伤作用比较明显,体外细胞培养50 ng/ml bFGF细胞增殖作用最明显.     

几丁糖对成纤维细胞增殖及Ⅲ型前胶原信使核糖核酸表达的影响

目的 :研究几丁糖对成纤维细胞增殖及Ⅲ型前胶原mRNA表达的影响 ,阐明其抗纤维化的作用机制。方法 :用四唑盐 (MTT)比色法及RNA斑点杂交分别检测NIH /3T3细胞增殖及Ⅲ型前胶原mRNA的表达。结果 :几丁糖能明显抑制成纤维细胞增殖及Ⅲ型前胶原mRNA的表达 ,并呈剂量依赖性。结论 :几丁糖可通过抑制成纤维细胞增殖及Ⅲ型前胶原mRNA的表达而起到抗肝纤维化作用     

一氧化氮对成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

在参与肝纤维化形成的细胞中，成纤维细胞能大量合成和分泌胶原蛋白。其质和量决定了组织器官的纤维化过程。我们研究发现，一氧化氮(nitric oxide，NO)具有抗肝纤维化作用。本文在此基础上，观察NO对体外培养的成纤维细胞增殖及胶原合成的影响，进一步阐明NO的抗肝纤维化作用。     

模拟微重力环境对小鼠成纤维细胞增殖和创伤修复相关蛋白基因表达的影响

目的：研究微重力细胞培养系统( RCCS)模拟微重力环境下小鼠成纤维细胞( L929细胞)增殖及创伤修复相关蛋白基因表达的变化。方法将L929细胞随机分为微重力组和正常重力对照组,分别在RCCS中培养3、5、7天,流式细胞仪检测细胞周期,实时荧光定量聚合酶链反应检测创伤修复蛋白mRNA表达水平。培养第7天取两组细胞-微载体悬液观察细胞微丝结构形态变化。结果微重力组L929细胞的G1期细胞在第3、5、7天明显少于正常重力对照组(P<0．05);与正常重力对照组相比,微重力组S期细胞在第3、5天有所增加,第7天减少,G2/M期细胞在培养第3、7天升高,培养第5天下降(P<0．05)。培养第3天微重力组Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)和Ⅲ型胶原蛋白(ColⅢ)、β转化生长因子( TGF-β) mRNA表达低于正常重力对照组( P<0．05);培养第5天微重力组Caspase-3 mRNA表达低于正常重力对照组,ColⅠ、TGF-β及Bcl-2 mRNA表达均高于正常重力对照组(P<0．05);培养第7天微重力组创伤修复相关蛋白mRNA表达均高于正常重力对照组( P<0．05)。模拟微重力环境下培养7 d对L929细胞微丝结构有影响但两组间差异无明显差别。结论模拟微重力环境能改变L929细胞周期转化、增强细胞增殖能力,并影响创伤修复相关蛋白的表达。     

A型肉毒毒素对增生性瘢痕组织aFGF和bFGF因子mRNA表达的作用

目的探讨A型肉毒毒素(BTXA)对增生性瘢痕组织成纤维细胞的作用以及酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响。方法实验用的成纤维细胞来源于增生性瘢痕组织,在体外用含有0.2～1.6 U/ml浓度的BTXA的培养液孵育增生性瘢痕的成纤维细胞,采用MTT法测定细胞的存活率,罗丹明123染色在荧光显微镜下观察线粒体膜电位改变,H2DCFDA检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,评估其对瘢痕成纤维细胞的凋亡影响。利用RT-PCR分析用药前后aFGF和bFGF mRNA表达的变化。结果 BTXA能够降低增生性瘢痕成纤维细胞的线粒体膜电位,改变线粒体膜通透性的稳定状态,并能够增加细胞内的活性氧(ROS)含量从而抑制增生性瘢痕成纤维细胞的增殖,同时诱导过度增殖的成纤维细胞凋亡;同时A型肉毒毒素也能够使两种成纤维细胞生长因子aFGF和bFGFmRNA的表达也呈下降趋势。结论 BTXA对增生性瘢痕组织中成纤维细胞的增殖有明显抑制并诱导其凋亡,其作用机制可能与BTXA下调瘢痕组织中的成纤维细胞aFGF和bFGF两种因子的mR...     

创伤愈合中bFGF bFGF受体的研究进展及其对表皮干细胞的影响

皮肤损伤是临床常见的外伤之一，大面积的皮肤损伤会危及患者的生命。因此，研究创伤愈合具有重大的临床意义。近年来，干细胞研究已经成为医学和生物学领域中最引人注目的热点之一。表皮千细胞在创伤修复中的作用也日益引起了人们的注意，因此本文主要就碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、bFGF受体及其对表皮干细胞的影响做一综述。     

bFGF对断层皮片组织学变化影响的实验研究

目的：探讨应用外源性bFGF对实验断层皮片组织变化的影响。方法：建立豚鼠断层皮片自体移植模型。A组为对照组，B、C、D组为实验组，分别给予bFGF300Au/ml,600-Au/ml,900Au/ml。术后第1、2、4周切取皮片，行常规组织学，电镜观察并计数真皮毛细血管数量与成纤维细胞密度值。结果：术后第1周，除A组外，各组均见毛细血管，成纤维细胞及胶原纤维增生，D组更显，术后第2周，B、C、D组毛细血管，成纤维细胞及胶原纤维增生，仍以D组更显，术后第4周，B、C、D组轻度毛细血管，成纤维细胞及胶原纤维增生，各组差别不明显，结论：外源性bFGF具有促进实验断层皮片毛细血管，成纤维细胞及胶原纤维增生的作用，并呈剂量依赖性，bFGF有利于皮片的愈合及创面修复。     

氧化苦参碱对成纤维细胞增殖及Ⅰ型胶原合成的影响

目的：研究氧化苦参碱对成纤维细胞增殖及Ⅰ型胶原合成的影响,阐明其抗肝纤雏化的作用机制．方法：用甲基噻哇基四哇MTT(metyl thiazolyl tetronzolium)色法和免疫细胞化学染色技术分剐检潮小鼠皮肤成纤雏细胞(NIH3T3)增殖和Ⅰ型胶原的合成。结果：氧化苦参碱能明显抑制成纤雏细胞的增殖及Ⅰ型胶原的合成,并呈剂量依赖性．结论;氧化苦参碱可通过抑制成纤维细胞增殖及Ⅰ型肢原合成而起到抗肝纤雏化作用。     

碱性成纤维细胞因子促进创面修复的临床疗效

目的:观察碱性成纤维细胞因子(bFGF)对创面修复的疗效及毒副作用.方法:173例患者分为治疗组89例,其中急性创面55例,慢性难愈合创面34例,采用bFGF局部外用,每平方厘米150活性单位,qd,7 d为1个疗程;对照组84例,其中急性创面50例,慢性难愈合创面34例,除未用bFGF外,其他疗法同治疗组.结果:治疗组较对照组创面修复质量显著提高,创面愈合时间缩短,且无明显毒副作用.结论:bFGF具有促进创面修复作用,有很大临床应用价值.     

碱性成纤维细胞生长因子对兔甲状软骨细胞的影响

目的 研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对免甲状软骨细胞的影响，探索软骨细胞体外扩增方法，为软骨组织工程提供理论依据。方法 分离鬼甲状软骨细胞，分4组培养，每组用含不同成分的培养基一第1组：只用DMEM培养基；第2组：DMEM培养基 10％小牛血清；第3组：DMEM培养基加bFGF(10ng/m1)；第4组：DMEM培养基 10％小牛血清 bFGF(10ng/m1)。采用软骨细胞计数观察各组细胞增殖情况。结果 在培养基成分相同时，补充bFGF组比未补充组细胞数目明显增多，即第3组多于第1组，第4组多于第2组。结论 bFGF能够促进单层培养中兔甲状软骨细胞的增殖，在软骨组织工程细胞增殖阶段，可能成为软骨细胞体外大量扩增的主要生长因子之一。     

重组人酸性成纤维细胞生长因子治疗肛瘘术后创面的随机对照试验

目的：观察重组人酸性成纤维细胞生长因子（rh-aFGF）对肛瘘术后的创面促愈合作用.方法：237例肛瘘术后患者随机分为2组,观察组（n=125）给予rh-aFGF,对照组（n=112）给予重组人碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）进行创面治疗.观察治疗3周后两组剩余创面大小、愈合率、创面祛腐时间、创面平均愈合时间、创面愈合率、肉芽生长开始时间等情况,及治疗后第7、14、21天肉芽组织生长、创面疼痛情况.结果：治疗3周后,观察组在减少创面面积,增强创面愈合率,缩短愈合时间、祛腐时间,以及肉芽组织开始生长时间等方面均优于对照组（P＜0.05或0.01）;治疗后第7天两组肉芽组织生长情况及疼痛情况差异无统计学意义（P＞0.05）,治疗第14天及第21天,两组肉芽组织生长及疼痛差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论：rh-aFGF对肛瘘术后的促修复作用较bFGF更强,有效促进创面缩小、缩短祛腐时间与愈合时间、缩短肉芽生长开始时间、提高创面愈合率、有效提高肉芽组织生长、缓解创面疼痛等方面的作用.     

复元胶囊对大鼠实验性骨关节炎软骨IL-6、bFGF的干预研究

目的:研究复元胶囊对大鼠实验性骨关节炎(OA)软骨白细胞介素-6(IL-6)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达的影响。方法:Hulth法复制大鼠OA模型,随机分为对照、模型、四环素和复元胶囊高、中、低剂量组。灌胃给药,每天1次,连续10周。10周后取软骨标本,行大体观察、Mankin’s评分及免疫组化测定软骨中IL-6、bFGF的表达水平,并将IL-6、bFGF的表达水平与Mankin’s评分指数进行Pearson相关分析。结果:复元胶囊各组关节软骨Mankin’s评分、IL-6表达水平均低于模型组(P<0.01或P<0.05),bFGF表达水平均高于模型组(P<0.01);复元胶囊各剂量组Mankin’s评分差异具有显著性(P<0.05),IL-6表达水平与关节病理改变的Mankin’s评分指数呈正相关(P<0.01),bFGF表达水平与关节病理改变的Mankin’s评分无明显相关。结论:复元胶囊能下调大鼠OA软骨IL-6的表达,上调bFGF的表达,其作用呈剂量依赖性。高剂量复元胶囊抗大鼠OA作用与四环素相当。     

碱性成纤维细胞因子对脑缺血的保护作用

碱性成纤维细胞因子作为一种可以对抗缺血性脑损伤的神经细胞生长因子，近年来得到了广泛的研究。现已证明，缺血后脑组织内的内源性碱性成纤维细胞因子及其受体表达上调。并对神经元保护作用。在多种脑缺血损伤模型中，给予外源性碱性成纤维细胞因子也可减轻缺血性神经损伤，碱性成纤维细胞因子对缺血性神经损伤的保护机制可能有：（1）拮抗兴奋性氨基酸毒性，维持细胞内钙稳态；（2）增强抗氧化酶活性，抑制诱导型一氧化氮合酶的表达，抗自由基损伤；（3）抗细胞凋亡；（4）修复受损神经元，本文对碱性成纤维细胞因子的一般特性及神经保护作用和机制的研究状况进行了介绍，为进一步探索缺血性神经损伤的病理生理机制和寻找有临床价值的药物提供思路。     

重组人酸性成纤维细胞生长因子促进烧伤与创伤愈合作用研究

目的观察重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)对小型猪创伤修复和家兔烫伤创面修复的促进作用。方法建立小型猪创伤模型，其中3组分别按90，60，30 AU·(cm2) 1的剂量给予人碱性成纤维细胞生长因子（haFGF），阳性对照组按60 AU·(cm2) 1的剂量给予rhbFGF，阴性对照组给予等量基质，空白对照组不给予任何药物，采用创面照像和透明膜描记称量法记录伤后第4，8，14天创面面积，用注水法测量伤腔容积。观察伤后第8天和第14天创面肉芽组织生长与再上皮化变化，评价修复效果。另建立家兔烫伤创面模型，分组与给药方法同上。观察伤后3，7，14，21 d创面面积，以及伤后14，21 d创面肉芽组织生长与再上皮化变化情况，评价修复效果。结果各组小猪创面面积随伤后时间的延长逐渐缩小，其中rhaFGF 90 AU·(cm2)^-1组和hbFGF 60 AU·(cm2)^-1组小猪的疗效更显著。各组小猪创面伤腔容积随伤后时间的延长而逐渐缩小，其中rhaFGF 90 AU·(cm2)^-1组和hbFGF 60 AU·(cm2)^-1组更为明显（P＜0.05）。组织学检查，可见经rhaFGF和rhbFGF治疗8 d后小猪的创面成纤维细胞生长活跃，数量多，毛细血管胚芽与成纤维细胞数量显著多于对照组。伤后第14天，各组家兔创面均已愈合，但各rhaFGF治疗组和阳性对照组家兔的创面表皮层较厚。各组家兔烫伤创面面积随伤后时间的延长而逐渐缩小，其中以rhaFGF 90 AU·(cm2)^-1组和hbFGF 60 AU·(cm2)^-1组的效果更明显。组织学检查，可见rhaFGF 90 AU·(cm2)^-1组家兔的创面在伤后14 d大部分已被新生表皮覆盖，表面附着少量坏死组织，创面基本愈合。结论rhaFGF对小型猪背部刀伤创面有促修复作用，可促进创面肉芽组织生长、毛细血管胚芽形成与再上皮化。rhaFGF对家兔背部烫伤创面有促修复作用，可促进创面肉芽组织生长，还可以促进坏死组织脱落与再上皮化。     

重组牛碱性成纤维细胞生长因子治疗放射性口腔粘膜反应的疗效观察

目的:观察重组牛碱性成纤维细胞生长因子(rbFGF)对放射性口腔粘膜反应的预防和治疗作用。方法:将放射治疗头颈部肿瘤患者120例随机分成治疗组和对照组各60例,于放疗1wk后,治疗组餐后口腔内喷雾rbFGF5喷,3次/d ;对照组餐后含漱朵贝尔氏液,3次/d ,直至放疗结束。结果:治疗组放射性口腔粘膜反应轻于对照组(P<0 .001) ,且治疗组Ⅲ度以上口咽反应发生时间较对照组明显延迟(P<0 .05)。结论:rbFGF能延迟和减轻放射性口腔粘膜反应,且应用安全、可靠。     

重组人酸性成纤维细胞生长因子促进儿童创面愈合的多中心、开放性随机对照试验

目的:观察重组人酸性成纤维细胞生长因子(rh-a FGF)对儿童手术或意外创面愈合的促进作用。方法:206例患儿随机分作2组,观察组给予rh-a FGF、对照组给予重组人碱性成纤维细胞生长因子(b FGF),分别进行创面治疗,观察治疗7 d后两组伤口愈合、患儿感染、脂肪液化等疗效情况,及治疗6个月后的瘢痕、色素沉着及不良反应等情况。结果:rh-a FGF、b FGF治疗7 d的愈合率分别为88.4%、74.2%,剩余创面面积分别为(2.2±1.1)cm2、(3.9±2.4)cm2;6个月后rh-a FGF组与b FGF组疤痕发生率分别为27.2%、67.5%,色素沉着发生率分别为30.1%、69.9%,两组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:rh-a FGF对儿童手术或意外创伤创面的促修复作用较b FGF更强,可有效促进创面愈合、缩短愈合时间、降低疤痕发生率及色素沉着发生率、有效减少疤痕面积及色素沉着面积。     

碱性成纤维生长因子与血管内皮生长因子联合对大鼠后肢动脉硬化闭塞血管再生作用机制的研究

目的探讨联合应用血管内皮生长因子(VEGF)与碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对大鼠后肢动脉硬化闭塞血管再生的作用机制。方法建立大鼠后肢动脉硬化闭塞模型60只,随机分为4组,生理盐水治疗组(NS组)15只,碱性成纤维细胞生长因子组(bFGF组)15只,血管内皮生长因子组(VEGF组)15只,血管内皮生长因子+碱性成纤维细胞生长因子(VEGF+bFGF组)15只。NS组、VEGF组分别隔日一次腹腔注射生理盐水1mL、100μg/LVEGF 1mL;bFGF组隔日一次后肢股内侧多点肌肉注射100μg/L bFGF 1mL;VEGF+bFGF组隔日一次腹腔注射100μg/L LVEGF 1mL+后肢股内侧多点肌肉注射100μg/L bFGF 1mL,共治疗21d。分别于7d、14d、21d观察大鼠后肢缺血情况如:间歇性跛行情况、皮肤颜色改变、皮温改变、足溃疡情况等。继续饲养至3个月后取后肢股内侧部位肌肉组织行免疫组化观察血管数。结果 VEGF+bFGF组微血管密度显著高于bFGF组、VEGF组及NS组,差异有显著性意义(P<0.05);其他各组间差异无显著性意义(P>0.05)。可见VEGF与bFGF联合应用可促进后肢动脉硬化闭塞大鼠的血管再生。结论 VEGF联合bFGF能促进大鼠后肢动脉硬化闭塞血管再生,为临床治疗下肢动脉硬化闭塞提供新的治疗依据。     

碱性成纤维细胞生长因子凝胶的无菌检查

目的建立碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）凝胶剂的无菌检查方法。方法依据《中国药典》2010年版三部要求,采用直接接种法进行bFGF凝胶剂无菌检查并进行方法学验证。结果与结论通过方法学验证说明建立的无菌检查法适用于bFGF凝胶剂的无菌检查。