门静脉高压症大鼠断流术后胃黏膜缺氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子的表达

目的 观察缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和血管内皮生长因子（VEGF）在断流术前后肝前性门静脉高压症（PHPH）大鼠胃黏膜的表达，探讨HIF-1α和VEGF在门静脉高压胃病（PHG）的发生发展的作用。方法 取Wistar大鼠制备PHPH模型80只，设假手术组（SO）60只，在术后3周施断流术。检测HIF-1α、VEGF和CD34在大鼠胃壁组织中的表达。结果 断流术前PHPH组大鼠胃壁中HIF-1α（5．8±1．3）和VEGF（12．0±3．0）的表达均明显高于SO组[HIF-1α（0．03750±0．05175），VEGF（0．7±0．1），P〈0．01]。术后HIF-1α、VEGF和MVD均有升高趋势。结论 HIF-1α和VEGF可能参与了PHG的发生发展，断流术本身能通过某种机制影响HIF-1α和VEGF的表达，加重PHG。     

蛋白激酶Cα在门静脉高压患者肝内外血管表达的研究

目的：研究蛋白激酶Cα（PKCα)在门静脉高压患者肝内外血管的表达，探讨其在门静脉高压形成机制中的作用。方法：对34例门静脉高压患者的肝内外血管与30例对照组织行PKCα免疫组织化学染色。用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）测定门静脉高压患者脾静脉血管平滑肌细胞（VSMC）中PKCαmRNA的表达。结果：正常肝内外血管PKCα免疫组织化学染色呈阴性或弱阳性，门静脉高压患者的肝内血管和脾静脉呈强阳性，差异有非常显著性（P＜0．01）。RTPCR表明门静脉高压患者脾静脉VSMC中PKCαmRNA的表达是正常人的2．81倍。结论：PKCα过度表达可能是门静脉高压肝内外血管结构改变的重要原因，并可能改变其因管舒缩活性物质的合成及敏感性。     

缺氧诱导因子-1α与血管内皮生长因子在胶质瘤中的表达

目的 探讨缺氧诱导因子（HIF）-1α与血管内皮生长因子（VEGF）在不同级别胶质瘤中的表达特点及其生物学特性。方法 采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法和免疫组织化学法分别检测20例新鲜冷冻标本及117例多聚甲醛固定的不同级别胶质瘤标本中HIF-1α与VEGF的表达情况，并对实验结果进行半定量计算和统计学分析。结果 RT-PCR结果示正常脑组织和Ⅰ-Ⅳ级胶质瘤中HIF-1αmRNA平均吸光度值分别为11．99、12．18、48．31、80．96、112．77，正常脑组织和Ⅰ级胶质瘤间差异元统计学意义，其余各组间差异均有统计学意义（F=969．45，P〈0．01）；而VEGF mRNA平均吸光度值分别为29．50、37．97、60．33、84．61、112．97，各组间差异均有统计学意义（F=312．91，P〈0．01）。免疫组织化学结果示HIF-1α在正常脑组织和Ⅰ-Ⅳ级胶质瘤中的阳性表达率分别为10％、13．3％、53．5％、80．6％、100％，正常脑组织和Ⅰ级胶质瘤间差异无统计学意义，其余各组间差异均有统计学意义（χ^2=38．19，P〈0．05）；同样，VEGF在各组中的阳性表达率分别为0％、33．3％、62．8％、83．3％、100％，各组问差异均有统计学意义（χ^2=45．78，P〈0．05）。结论 HIF-1α与VEGF在胶质瘤中的表达与胶质瘤的病理分级密切相关，随着病理级别的升高，HIF-1α与VEGF无论是在mRNA水平还是在蛋白水平的表达均上调，并且两者间的表达也具有相关性。     

缺氧诱导因子-1α和血管内皮细胞生长因子在前列腺癌组织中的表达

目的：探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮细胞生长因子(VEGF)在前列腺癌中的表达及其与病理分级、临床分期的关系。方法：采用免疫组化方法检测前列腺癌和良性前列腺增生(BPH)组织中HIF-1α和VEGF的表达。结果：前列腺癌中HIF-1α和VEGF的表达均明显高于BPH;HIF-1α和VEGF在前列腺癌中的表达水平与其病理分级和临床分期均呈正相关;前列腺癌中的HIF-1α表达水平和VEGF的表达水平呈正相关。结论：HIF-1α和VEGF是检测前列腺癌的较好分子标志物,可望用于前列腺癌的辅助诊断和预后判断,HIF-1α是VEGF表达的调控因子之一。     

血管瘤中缺氧诱导因子-1α的表达和血管生成的研究

目的　探讨缺氧诱导因子- 1α(HIF-1α)在血管瘤中的表达以及其和血管内皮细胞生长因子 (VEGF)、新生微血管密度 (MVD)的关系。方法　采用免疫组化SP法检测 2 8例婴幼儿血管瘤中HIF 1α、VEGF的蛋白表达和MVD。结果　 2 8例血管瘤中HIF-1α、VEGF的蛋白表达阳性率分别是6 4 % ,71.4 %。其中增生期和消退期HIF 1α阳性率分别为 87.5 %、33.3% (P <0.0 1) ,VEGF阳性率分别为 93.7%、4 1.7% (P <0.0 1) ;MVD分别为 73 4± 14 6 3、30 2± 9 1(P <0.0 1)。HIF 1α蛋白表达与VEGF成正相关 (P <0.0 1) ,HIF 1α和VEGF与MVD都成正相关 (P <0.0 1)。结论　血管瘤增生期血管内皮细胞存在着特殊的缺氧微环境 ,并通过HIF-1α表达水平提高调节VEGF等血管生成相关因子表达水平升高 ,促进了新生微血管生成     

瘢痕中缺氧诱导因子-1α的表达及其与凋亡的关系

目的 探讨瘢痕内缺氧环境减轻的机制。方法 采用免疫组化法检测烧伤后肉芽、不同时期瘢痕和正常皮肤中缺氧诱导因子-1α（hypoxia-inducible factor 1α，HIF-1α）、p53的表达，采用权重方法分别对各组瘢痕的HIF-1α、p53表达结果进行量化，分析各自规律及相互间关系。结果 随着瘢痕的成熟，HIF-1α表达强度逐渐减弱，p53表达强度在1年内逐渐增强，相互间具有负相关性（P〈0．01）。结论 p53在瘢痕成熟过程中起重要作用，HIF-1α可能通过协同p53诱导细胞凋亡，减少耗氧来减轻缺氧环境。     

缺氧诱导对人结肠癌SW480细胞缺氧诱导因子-1α和Survivin基因表达的影响

目的 构建缺氧诱导模型和观察缺氧对人结肠癌SW480细胞系缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和Survivin基因表达的影响。方法 利用氯化钴（CoCl2）构建缺氧诱导模型；利用逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）分别测定CoCl2缺氧诱导与SW480细胞HIF—1α和Survivin基因mRNA表达的时效关系（0、2、4、8、24h）和量效关系（0、50、100、150、200／μmol／L）。结果HIF-1α和Survivin基因mRNA表达与氯化钴浓度呈明显的剂量依赖关系；HIF-1α基因表达随诱导时间的延长而逐渐增强，4h亚组出现一个表达高峰，Survivin基因在缺氧诱导4h呈现表达最高峰；HIF-1α与survivin基因mRNA的表达在缺氧诱导量效关系（r=0．521，P＜0．05）和时效关系（r=0．693，P＜0．05）中均呈显著正相关。结论 缺氧可以诱导HIF—1α和Survivin基因的表达增加；HIF—1α与Survivin基因的表达均呈显著相关，提示Survivin基因可能与HIF—1α存在某种调控关系并在缺氧抗凋亡机制中发挥作用。     

缺氧诱导因子-1α在肝癌中的表达及其对肿瘤细胞周期的影响和临床意义

目的探讨缺氧诱导因子（HIF）-1α在肝癌中的表达及其对肿瘤细胞周期的影响和临床意义。方法采用免疫组织化学SP法检测62例肝癌标本中HIF-1α和Cyclin E的表达，同时应用流式细胞仪对S期细胞比（SPF）进行检测。结果随着肝癌分化程度的降低，出现门脉／胆管浸润或发生淋巴结／远处转移，HIF-1α、Cyclin E阳性表达率增加，SPF值也升高（Х^2值分别为6．32、3．90、7．09；4．41、4．85、10．61，t值分别为5．827、5．959、5．331，P〈0．05或P〈0．01）；在短、中期生存患者中，三者也高于长期生存者（Х^2值分别为8．85、11．78；t值为3．014，P均〈0．01）。Cyclin E阳性表达病例SPF值高于其阴性表达者（t值为4．191，P〈0．01）。HIF-1α表达与Cyclin E表达、SPF值呈明显相关（Х^2值为4．18，t值为4．318，P〈0．05或P〈0．01）。结论三者的检测对判断肝癌的恶性程度、侵袭转移能力及预后具有重要的临床意义。在肝癌中，HIF-1α可能通过影响肿瘤细胞G1／S调控点（Cyclin E调控），SPF值升高从而促进肿瘤的进展。     

肾透明细胞癌中VHL基因突变与缺氧诱导因子-1α表达的研究

目的　探讨肾透明细胞癌VHL基因突变与缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)表达的关系及意义。方法　应用聚合酶链反应 (PCR)、变性高效液相色谱 (DHPLC)、基因测序及免疫组织化学方法检测 32例肾透明细胞癌患者手术切除癌组织及远离肿瘤的正常肾脏组织中VHL基因突变及HIF 1α的表达。结果　 32例患者中 17例 (5 3 1% )癌组织术前有VHL基因突变 ,32例远离肿瘤的正常肾脏组织均无HIF 1α表达 ;17例VHL突变的癌组织中 12例 (70 6 % )有HIF 1α表达 ,15例无VHL突变的癌组织中 4例 (2 6 7% )有HIF 1α表达 ,二者相比差异有显著意义 (P <0 0 5 )。结论　VHL基因在肾透明细胞癌中具有高频突变率 ,HIF 1α在癌组织中的表达与VHL基因突变相关     

缺氧诱导因子-1α表达与膀胱癌分级与复发相关性研究

目的 :探讨缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)在膀胱癌中的表达与肿瘤微血管计数 (MVC)、分级、复发的关系。方法 :用免疫组织化学方法染色显示膀胱癌中HIF 1α表达 ,并用计数定量血管形成 ,回顾性分析HIF 1α表达与MVC、肿瘤分级、肿瘤复发的关系。结果 :HIF 1α表达 19例正常膀胱黏膜均为阴性 ,在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级膀胱肿瘤中HIF 1α阳性率分别为 2 4 %、4 1%和 73% ,Ⅰ级与Ⅲ级阳性率差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。 19例正常膀胱黏膜MVC为 0 ,在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级膀胱肿瘤中MVC分别为 (39.71± 11.6 2 )、(44 .70± 11.5 2 )和 (5 2 .36± 16 .83)。其中Ⅰ级与Ⅲ级差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。根据肿瘤属于初发或复发分组 ,初发组 5 1例 ,复发组 19例 ,HIF 1α阳性率分别为 35 %和 74 % ,差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。MVC初发组和复发组分别为 (42 .6 8± 13.73)和(5 3.4 7± 12 .5 0 ) ,差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。结论 :HIF 1α的表达与膀胱肿瘤MVC、分级以及复发呈正相关关系 ,提示HIF 1α表达与膀胱癌的生物学行为有关 ,可作为膀胱癌生物学行为的标志     

缺氧诱导因子-1α与前列腺癌

新血管的形成和葡萄糖转运、糖酵解的增加是实体肿瘤的两个普遍特性,肿瘤的新血管形成及肿瘤对缺氧微环境的适应与肿瘤的浸润、转移及毁坏性密切相关.     

缺氧诱导因子-1αsiRNA增强耐药肝癌细胞的化疗敏感性

目的 观察缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）特异性小分子干扰RNA（siRNA）对肝癌化疗的增敏作用。方法 构建HIF-1αsiRNA真核表达质粒，经脂质体稳定转染于耐药的C28肝癌细胞。研究分为实验组、阴性对照组和空白对照组。荧光定量PCR和Western blot技术分别检测3组细胞中多药耐药相关基因MDR1、LRP、MRP1在mRNA和蛋白水平的表达，PI法流式细胞术分析3组细胞在受到5-Fu作用后的凋亡指数。每组细胞分别随机注入10只裸鼠皮下，比较3组细胞成瘤后对ADM治疗的反应性。结果 HIF-1αsiRNA能有效抑制HIF-1α基因的表达，并能使C28耐药肝癌细胞内MDR1、MRP1、LRP基因在mRNA和蛋白水平表达明显下降。在5-Fu作用后第24、48、72小时，实验组细胞的凋亡指数分别是阴性对照组的2．88、3．56和3．87倍，实验组对化疗药物5-Fu的敏感性显著增强（P〈0．01）。注射阿霉素后，实验组裸鼠皮下的耐药肝癌瘤体明显缩小，肿瘤抑制率为41．35％，与阴性对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论 成功构建了HIF-1α—siRNA的真核表达质粒。HIF—1α靶序列特异性的siRNA可增强肝癌细胞对化疗药物的敏感性，它与传统化疗药物的联合应用可望实现对肝癌的有效治疗。     

低血容量性休克大鼠缺氧诱导因子1α的表达及其在血管低反应性发生中的作用

目的观察低血容量性休克大鼠肠系膜上动脉(SMA)血管组织中缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达情况及其与血管低反应性发生的关系。方法将112只SD大鼠建立低血容量性休克模型后分为休克组(56只)、给药组(56只,于建立休克模型前4 h在大鼠腹腔内注射9μg／kg寡霉素)。于伤后0.0(10-15 min)、0.5、1．0、2．0、3．0、4．0、6．0 h,采大鼠动脉血后处死大鼠取SMA,每组每时相点8只。采用离体血管环张力测定技术测定血管环对梯度浓度去甲肾上腺素(NE)的收缩力;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量分析法检测SMA血管组织中HIF-1α、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、血红素氧合酶1(HO-1)mRNA的表达水平;连二亚硫酸钠还原法和硝酸还原酶法分别测定其全血一氧化碳(CO)浓度和血浆一氧化氮(NO)含量。另取8只大鼠作为正常对照组,不作处理,留取标本检测以上指标。结果与正常对照组比较,休克组大鼠伤后早期(0．0-1．0 h)血管反应性增高,伤后0．5 h达峰值,血管环对NE的最大收缩反应(Emax)增大,NE的50％最大效应的负对数克分子浓度(pD2)减小;伤后0．5-1．0 h Emax值均高于正常对照组(P<0．01);休克中、后期,血管反应性进行性下降,Emax减小、pD,增大,伤后4．0 h Emax低于正常对照组(P<0．01)。给药组伤后早期(0．0-1．0 h)血管反应性增高部分受抑制(P<0．05),伤后0．5 h Emax值为(2．01±0．22) g／mg,明显低于休克组[(2．96±0．18)g／mg,P<0．05]。休克晚期给药组血管反应性轻度回升,与休克组伤后4．0、6．0 h比较,差异有统计学意义(P<0．05或0．01)。与正常对照组比较,休克组伤后HIF-1αmRNA的表达呈稳步增高,伤后4．0 h达峰值(P<0．01);iNOS、HO-1mRNA表达水平亦逐渐增高,分别于伤后2．0、4．0 h达峰值(P<0．01)。与正常对照组比较,休克组随着病情的发展全血CO浓度和血浆NO含量呈逐渐升高的趋势。与休克组相比,给药组全血CO浓度基本稳定在正常范围内,血浆NO含量也明显降低。结论低血容量性休克可引起血管反应性的双相变化。HIF-1α在血管低反应性的形成中发挥了重要作用。     

缺氧诱导因子-1α在结肠肿瘤中的表达及意义

目的探讨缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）在结肠肿瘤中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学方法,对30例结肠癌患者癌组织及癌旁组织、10例结肠腺瘤患者腺瘤组织中H1F-1α的表达情况进行检测,并分析HIF-1α表达与结肠癌临床病理特征之间的关系。结果HIF-1α阳性率在结肠癌和结肠腺瘤组织中分别为73．3％（22／30）和10．0％（1／10）,而在癌旁组织中无表达（P〈0．05）。结肠癌组织中HIF．1et的表达水平与患者性别、年龄、病理组织学类型及分化程度无关（P〉0．05）,而与区域淋巴结转移状况及Dukes分期密切相关（P〈0．05）。结论HIF-1α过度表达与结肠癌的浸润、转移密切相关,可能作为判断预后的重要指标。     

缺氧诱导因子-1α在前列腺癌中的表达及意义

目的　探讨缺氧诱导因子 1α(HIF 1α)蛋白在前列腺癌 (CaP)中的表达及意义。　方法　应用免疫组化SP法检测 42例CaP和相应癌旁组织 ,12例高分级前列腺上皮内瘤 (PIN )以及 9例正常前列腺组织 (NP)中HIF 1α的表达 ,免疫印迹技术分析不同氧浓度诱导下CaP细胞株PC 3M的HIF 1α蛋白水平。　结果　 3 3例 (78.6% )CaP和 9例PIN组织HIF 1α蛋白表达阳性 ,有远处转移的CaP组织中HIF 1α表达显著高于无转移者 (P <0 .0 5) ,癌旁组织及正常前列腺组织中无阳性表达 ;PC 3M细胞株中HIF 1α表达水平随氧浓度减小而明显升高 ,差异有显著性意义 (P <0 .0 1)。　结论　HIF 1α表达是CaP形成的早期事件 ,其水平升高可能导致肿瘤向恶性发展表型 ,HIF 1α可作为CaP的早期诊断指标和治疗新靶点     

缺氧诱导因子-1αmRNA表达与胃癌血管生成、侵袭转移及预后的关系

近年来发现的转录因子缺氧诱导因子-1（hypoxia inducible factor-1,HIF-1）在氧平衡及肿瘤微血管形成中起着重要作用,HIF-1由α和β两个亚单位组成.其中HIF-1α是决定HIF-1活性的缺氧调节亚基.为此,我们采用原位分子杂交方法检测胃癌组织中的HIF-1α mRNA表达并分析其与血管内皮细胞生长因子（VEGF）蛋白,微血管密度（MVD）及生存期的关系,旨在探讨HIF-1α和VEGF在胃癌侵袭转移中的作用及对胃癌患者预后的影响.     

结直肠癌中缺氧诱导因子-1α与NDRG1表达的关系

目的探讨结肠癌LS174T细胞及结直肠腺癌组织中缺氧诱导因子-1d（HIF-1d）的表达及与NDRG1的相关性。方法构建靶向HIF—1d的质粒pSi1ence-2．1-U6-siRNA并鉴定，采用阳离子脂质体转染法将其转染LS174T细胞，低氧培养24h，运用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测HIF-1α、NDRG1mRNA表达。Western blots检测NDRG1蛋白表达。采用原位杂交技术检测人结直肠腺瘤和腺癌组织中HIF-1dmRNA，应用免疫组织化学方法检测NDRG1蛋白的表达。结果siRNA从转录水平抑制了HIF-1d基因表达。同时，NDRG1mRNA、蛋白表达也显著受抑制。结直肠腺癌组织中HIF-1dmRNA阳性表达率为67．7％（42／62），腺瘤为44．4％（8／18）。从DukesA期到DukesC＋D期演变过程中HIF-1dmRNA表达阳性率不断增加（P〈0．05）。腺癌组NDRG1阳性表达率显著高于腺瘤组。结直肠腺癌中NDRG1阳性表达与Dukes分期显著相关。HIF-1d与NDRG1均呈正相关（P〈0．05）。结论HIF-1d可能通过上调NDRG1表达参与了结直肠腺的进展．     

膀胱移行细胞癌中缺氧诱导因子1α与血管内皮生长因子的关系

缺氧诱导因子1α(hypoxia inducible factorld．HIF-1α)在目前肿瘤血管生成方面的研究中，作为调节血管生长因子的转录因子受到关注。我们检测膀胱移行细胞癌中HIF-1α和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)的表达，以研究HIF-1α在膀胱癌中的作用及与血管生长调节的关系。     

缺氧诱导乳鼠脊髓神经元HIF-1α表达和凋亡的体外实验研究

目的 研究缺氧诱导脊髓神经元低氧诱导因子-1α（HIF-1α）表达和凋亡的变化，探讨HIF-1α在耐受缺氧和诱导凋亡机制中的作用。方法 以体外培养的乳鼠脊髓神经元细胞为研究对象。采用激光共聚焦显微镜（LCSM）、DNA琼脂糖凝胶电泳观察缺氧诱导脊髓神经元凋亡的变化；免疫组化检测HIF-1α在缺氧脊髓神经元中的表达；流式细胞术（FCM）检测缺氧对脊髓神经元P53、bcl-2蛋白水平表达的影响。结果 持续缺氧显著抑制脊髓神经元细胞的生长；荧光显微镜下可见脊髓神经元细胞呈典型凋亡的形态学改变。脊髓神经元缺氧2、4h时HIF-1α、P53、bcl-2表达上调（P〈0．01），8h时其表达下调（P〈0．05）。结论 缺氧诱导的HIF-1α的表达，在脊髓神经元的耐受缺氧和诱导凋亡机制中起着重要的作用。     

缺氧诱导因子-1α在乳腺癌组织中的表达及其与肿瘤血管形成的关系

目的探讨乳腺癌组织中缺氧诱导因子1α(hypoxiainduciblefactor1alpha,HIF1α)的表达及其与血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF),微血管密度(microvesseldensity,MVD)等生物学指标及临床病理因素的关系。方法采用免疫组化SP法检测乳腺纤维腺瘤、普通乳腺增生组织和乳腺癌中HIF1α、VEGF蛋白的表达,用CD34单克隆抗体标记血管内皮细胞并记数MVD。结果HIF1α蛋白在乳腺纤维腺瘤、普通乳腺增生组织中不表达;乳腺导管内原位癌中阳性率55%,浸润性乳腺癌中阴性率85%;乳腺癌中VEGF阳性率81.3%。乳腺癌中HIF1α表达与VEGF显著正相关(r=0.762,P<0.01),HIF1α表达与原位癌中MVD呈正相关(r=0.682,P<0.05),与浸润性癌中MVD无相关关系。结论HIF1α及其靶基因VEGF在乳腺癌组织中明显上调,与肿瘤新生血管密切相关;HIF1α表达与淋巴结转移、雌激素受体状态及组织学分级相关,提示HIF1α对乳腺癌的发生发展起重要作用。