五步蛇和蝮蛇的抗蛇毒血清对烙铁头蛇毒的中和作用

针对我国院目前尚无烙铁头蛇毒血清，本研究旨在利用国内现有的精制抗五步蛇毒血清和精制抗蝮蛇毒血清，通过动物实验，证明这两种抗血清在体外和体内都能中和烙铁头蛇毒，对被烙铁头蛇毒中毒的小鼠有明显保护作用，且两种血清的保护率无显著差异。     

五种抗蛇毒血清对眼镜王蛇毒的中和作用

本文通过琼脂免疫扩散及动物实验，对我国现有五种抗蛇毒血清对眼镜王蛇毒的交叉免疫反应、体外中和作用以及体内保护作用进行了研究，结果表明：（1）抗眼镜和抗银环蛇毒血清对眼镜王蛇毒均有中和作用，但作用较弱，其中和效价为60μg／ml；（2）抗眼镜蛇毒血清和抗银环蛇毒血清联合应用时，其中和效价是它们单独应用的11倍，约660μg／ml；（3）抗金环蛇毒血清、抗蝮蛇毒血清及抗五步蛇毒血清虽与眼镜王蛇毒有弱的沉淀线，但却无中和作用。     

精制抗蝮蛇和抗五步蛇毒血清对烙铁头蛇毒毒性成份的中和效应

本文通过交叉免疫反应与毒素中和实验，利用抗原抗体中和反应原理，进一步证明精制抗蝮蛇和抗五步蛇毒血清对烙铁头蛇毒具有交叉免疫活性，能够中和烙铁头蛇毒中的出血毒素、坏死毒素和抗凝组份，而对诱导血小板聚集的活性没有影响。     

五步蛇毒类毒素免疫豚鼠对竹叶青及烙铁头蛇毒的交叉免疫试验

本文提示五步蛇毒类毒素免疫豚鼠可抵御18mg竹叶青蛇毒(6 MLD)或17.5mg烙铁头蛇毒(7MLD);免疫豚鼠血清每毫升可中和五步蛇毒(640μg相当小鼠8LD_(50))、竹叶青蛇毒160μg(4.6LD_(50))或烙铁头蛇毒140～180μg(3.2～4.1LD_(50))。本文提示五步蛇毒与竹叶青毒及烙铁头毒有共同抗原,可引起交叉免疫。     

抗五步蛇毒血清局部封闭治疗100例临床观察

目的 观察五步蛇咬伤后用抗蛇毒血清局部封闭治疗的临床疗效。方法 对五步蛇咬伤100例采用抗蛇毒血清400～600u＋生理盐水10～20ml进行伤口周围放射状局部封闭治疗。结果 治疗100例全部治愈，无一例死亡及伤残，以伤后2小时内封闭者效果尤佳。结论 抗蛇毒血清局部封闭治疗五步蛇咬伤疗效可靠。     

抗竹叶青蛇毒抗体F(ab'')2的制备

目的制备特异性强、高纯度的抗竹叶青蛇毒抗体F(ab')2.方法以竹叶青蛇毒为免疫原免疫马,试血效价达到要求后,从免疫马血浆中先提取IgG,然后酶解、过疏水柱后得到F(ab')2片段,以免疫扩散实验检测抗体F(ab')2片段的特异性,以小鼠中和试验测定其中和竹叶青蛇毒的能力.结果纯化得到的F(ab')2活性片段纯度可达90%;F(ab')2冻干品与竹叶青蛇毒在8∶1时出现免疫沉淀线,在20∶1时可保护小鼠100%存活.结论纯化得到的抗体F(ab')2活性片段对竹叶青蛇毒具有较好的中和能力.     

高压氧辅助抗蛇毒血清治疗对五步蛇毒中毒大鼠肾保护作用研究

目的 探讨高压氧(HBO)辅助抗蛇毒血清治疗对五步蛇毒中毒大鼠肾的保护作用.方法 将96只健康成年雄性SD大鼠随机分为对照组(A组)、蛇毒中毒组(B组)、血清治疗组(C组)、血清联合HBO治疗组(D组),每组24只.B、C、D组大鼠经尾静脉注射五步蛇蛇毒0.8×LD50(LD50=1.594 mg/kg)建立中毒模型,观察五步蛇毒中毒后肾组织的病理变化.C组于建模成功后即从尾静脉注射抗蛇毒血清(0.8×78 U/kg),D组于注射抗蛇毒血清后0、4、11、23 h予以HBO治疗1次,A组不予任何处理.结果 B、C、D组静脉注射蛇毒后大鼠出现明显的中毒症状.与B组比较,C、D组大鼠肾功能、凝血功能明显改善(P＜0.05),且D组优于C组(P＜0.05).B组大鼠出现肾小球出血、肾小囊扩张,周围毛细血管存在不同程度的充血,肾小管管腔扩张,可见细胞低平,刷状缘脱落,肾小管上皮细胞空泡化,肾间质组织炎性细胞浸润.随着中毒时间的延长肾出血减少,炎性细胞浸润增加.C、D组大鼠以上病变明显改善.结论 五步蛇毒中毒可导致大鼠肾损伤;采用HBO辅助抗蛇毒血清治疗对五步蛇毒中毒大鼠肾损伤有保护作用,并且越早采用其保护效应越好.     

大剂量糖皮质激素联合抗蛇毒血清在竹叶青蛇伤致DIC临床观察

目的观察大剂量糖皮质激素联合抗蛇毒血清在治疗竹叶青蛇伤致 DIC 中的疗效。方法 57例竹叶青蛇伤致DIC 患者按单盲随机法分为两组,对照组28例,治疗组29例。对照组:常规综合治疗 抗蝮蛇血清;治疗组:在对照组基础上加用甲基泼尼松龙1000mg/d,观察两组疗效及凝血酶原时间(PT)、纤维蛋白原(Fg)和血小板(PLT)的恢复时间。结果治疗组总有效率96.6%,对照组75.0%,两者差异有显著性(P<0.05);治疗组 PT、Fg、PLT 与对照组比较,有显著性差异(P<0.05)。结论大剂量糖皮质激素联合抗蛇毒血清治疗竹叶青蛇伤致 DIC 可明显缩短凝血指标恢复时间及提高疗效。可以对竹叶青蛇毒起较好的中和作用,取得满意的临床治疗效果。     

基因重组蛇毒纤溶因子rFⅡ的酶学特性研究

目的研究重组蛇毒纤溶因子的酶学特性。方法通过SDS-PAGE分析其分子量、纯度,用SDSPAGE方法检测其对纤维蛋白原的水解能力,用分光光度法检测其水解azocasein的能力和PMSF及EDTA对蛇毒纤溶因子的作用。结果蛇毒重组纤溶因子rFII是一个分子量在28000的蛋白酶。它呈时间和浓度依赖性水解纤维蛋白原的Aα、Bβ、γ亚基,EDTA和PMSF均可以抑制该因子水解azocasein的能力。结论rFII是一种纤维蛋白原酶,它的酶活性可同时被EDTA和PMSF所抑制。     

基因重组蛇毒纤溶因子rFII理化特性及纤溶能力的研究

[目的]研究重组蛇毒纤溶因子的理化特性和纤溶能力.[方法]SDS-PAGE及高效液相法分析重组蛇毒纤溶因子rFII相对分子质量、纯度,等电聚焦分析其等电点;纤维平板和SDS-PAGE检测重组蛇毒纤溶因子对纤维蛋白及纤维蛋白原的水解能力.[结果]重组蛇毒纤溶因子rFII是一个相对分子质量在28 000,等电点9.0的碱性蛋白酶.它水解纤维蛋白原的Aα、Bβ、γ亚基,水解能力随时间和浓度的增加而增加.它对纤维蛋白的水解能力比相同浓度下的纤溶酶强4倍.[结论]rFII是一种高效的水解纤维蛋白原和纤维蛋白的碱性蛋白酶.     

蝮蛇蛇毒柱层析分离及生化药理作用

应用ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－５０和ＮａＣｌ分段梯度洗脱的方法，对蝮蛇（Ａｇｋｉｓｔｒｏｄｏｎｂｌｏｍｈｏｆｆｉｂｒｅｖｉｃａｎｄｕｓ）蛇毒进行柱层析分离，获得１２个蛋白峰。１，３～７，１１组分有蛋白水解酶活性；２，３组分有磷酯酶Ａ２活性；５～８组分具有精氨酸酯酶、凝血酶样酶活性及出血毒性和致死毒性；４，５组分有神经毒作用。用体外微量培养方法测定，４～８组分对人肝癌细胞株（ＳＭＣ－１７２２）有杀伤或抑制生长作用。     

卵黄中蝮蛇蛇毒抗体对蝮蛇蛇毒毒性成分的中和作用

目的：制备特异性高的蝮蛇蛇毒卵黄抗休事半功倍对其体内保护和体外保护作用进行了研究。方法：用蝮蛇蛇毒作为抗原免疫鸡，使之在蛋黄中产生抗体IgY，然后用聚乙二醇法提取IgY，并通过小鼠体内保护和体外中和试验。研究IgY对蝮蛇蛇毒毒性成分的中和作用。结果：通过本法制得的IgY在体内和体外试验中都能中和蝮蛇蛇毒，对蝮蛇蛇毒急性中毒的小鼠有明显的保护作用。结论：聚乙二醇法从免疫鸡蛋黄中提取的蛇毒抗体IgY，可用于救治蝮蛇蛇毒急性中毒的小白鼠。     

尖吻蝮蛇蛇毒对弓形虫速殖子侵入Hela细胞的影响

目的：观察刚地弓形虫速殖子在来源于安徽省南部地区的尖吻蝮蛇蛇毒的作用下侵入Hela细胞的数量，探讨尖吻蝮蛇蛇毒对弓形虫速殖子侵入Hela细胞的作用。方法：以不同浓度尖吻蝮蛇毒加入分孔培养的细胞中，于不同时间观察感染弓形虫速殖子细胞的数量。结果：尖吻蝮蛇蛇毒对弓形虫速殖子侵入细胞有明显的促进作用，弓形虫速殖子在蛇毒的作用下在同一时间内对宿主细胞侵入的数量均高于对照组(P＜0．05——P＜0．01)，但不同剂量的尖吻蝮蛇毒对弓形虫速殖子侵入细胞的作用差异无显著性(P＞0．05)。5．0μg/ml和0．25μg/ml的剂量分别比对照组平均提高了125．49％和81．37％。结论：尖吻蝮蛇毒可以明显增加弓形虫速殖子对宿主细胞的感染率。     

Purification and characterization of an arginine ester hydrolase from the venom of Trimeresurus mucrosqumatus in Hunan province of China

Objective: To study the physical and chemical properties of an arginine ester hydrolase from the venom of Trimeresurus mucrosqumatus in Hunan province of China. Methods :The arginine ester hydrolase (AEH) was isolated from the venom of Chinese Trimeresurus mucrosqumatus by a combination of ionexchange chromatography on DEAE-Sephadex A-50, CM-Sepharose C1-6B and gel filtration on Sephadex G-100. Results: The purified protein named TM-AEH,a glycoprotein with carbohydrate content of 0. 5% neutral hexose and 0. 75 % sialic acid ,a relative molecular mass of 29.0 kDa ,and an isoelectric point (pI) of 5. 2. It shares with an extinction coefficient (E0.1%/cm) of 1. 332 at 280 nm,consisted of 225 amino acid residues ,and migrated as a band under reduced or non-reduced condition in basic PAGE. TM-AEH was a highly thermostable protein and was stable to pH changes between 5 and 9. The optimum temperature and optimum pH were 55C and 8. 4 for its catalytic activity respectively,which was inhibited by Fe^3 and Cu^2 . Conclusion :This protein can exhibit higher BAEE-hydrolysing activity and fibrinogenolytic activity as compared to that of whole venom.     

蕲蛇酶注射液致突变性研究(微核试验法)

小鼠分组静脉注射蕲蛇酶注射液,染毒后27h 取骨髓液制片,观察多染红细胞微核数。结果表明,蕲蛇酶注射液3个剂量组(5 mg/kg,2.5 mg/kg,1 mg/kg。静脉注射)微核出现率均低于阳性对照组(环磷酰胺1 00 mg/kg,皮下注射,P<0.01)与阴性对照组(生理盐水同体积)接近,各剂量组之间无显著性差别,据此认为蕲蛇酶注射液无致突变作用。