FISH检测人端粒酶RNA基因扩增预测宫颈病变发展趋势

目的 分析探讨hTERC基因在不同程度子宫颈病变脱落细胞中的表达及对早期宫颈病变筛查的意义.方法 采用FISH检测120名正常子宫颈脱落细胞、86例子宫颈上皮CIN及14例子宫颈鳞状细胞癌脱落细胞hTERC的表达情况,并分析hTERC的表达与宫颈病变发展的相关性.结果 hTERc基因在正常子宫颈脱落细胞、炎症或伴湿疣组宫颈上皮CIN Ⅰ期、CIN Ⅱ期、CIN Ⅲ期及SCC组中的阳性表达率分别为1.7%(2/120)、2.6%(1/38)、55.6%(10/18)、87.5%(14/16)、100.0%(14/14)和100.0%(14/14).hTERC基因阳性表达率在SCC/CIN m期与CIN Ⅰ期/CIN Ⅱ期的差异有统计学意义(P=0.01);CIN Ⅰ～Ⅲ期组与健康对照组比较,其阳性表达率差异也具有统计学意义(X~2=113.52,P＜0.01);hTERC基因在CIN Ⅲ期和SCC组的阳性表达率用直接概率检验,差异无统计学意义(P=1.00),但随着病变加重,SCC组多倍体的拷贝数显著增加(hTERC基因扩增杂交信号≥3:3的细胞数占总异常细胞数的比例在CIN Ⅰ期、CIN Ⅱ期、CIN Ⅲ期和SCC组中分别为6.12%、7.98%、28.07%和33.97%),且呈渐进性上升趋势.结论 hTERC基因在CIN和SCC中的表达异常,且随病变程度增加阳性表达率增加,hTERC基因可作为SCC早期筛查的生物遗传学监测指标.     

宫颈病变组织中人类染色体端粒酶基因表达与人乳头瘤病毒亚型感染相关分析

目的探讨宫颈病变脱落细胞中人类染色体端粒酶基因(human telomerase RNA component,hTERC)的表达及人乳头瘤病毒(human papillomavirus,HPV)亚型感染情况,及其在宫颈癌筛查中的意义。方法宫颈病变患者宫颈脱落细胞标本129例,依据组织病理学结果分为宫颈上皮内瘤样病变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)I组41例、CINⅡ组29例、CINⅢ组35例及宫颈癌组(SCC组)24例,并选择同期体检健康者20例为对照组,各组均行宫颈液基细胞学检查及HPV DNA检测,并采用荧光原位杂交技术检测hTERC基因扩增情况。结果 hTERC表达阳性率CINⅠ组(7.31%)、CINⅡ组(34.48%)、CINⅢ组(62.86%)及SCC组(75.00%)与对照组(0)比较差异均有统计学意义(P<0.05),CINⅢ组与SCC组高于CINⅠ组(P<0.05);hTERC表达阳性率与宫颈病变程度呈正相关(r=0.931,P=0.031);对照组、宫颈癌前病变组(CINⅠ组+Ⅱ组+Ⅲ组)与SCC组HPV DNA阳性率分别为15.00%,45.71%,87.50%,差异有统计学意义(P<0.05);hTERC表达与高危型HPV感染呈正相关(r=0.381,P=0.002)。结论 hTERC扩增在宫颈高度病变及宫颈癌患者中比例较高,与高危型HPV感染有关,可能是宫颈癌进展的预测性指标。     

荧光原位杂交hTERC基因扩增检测在宫颈癌早期诊断中的应用

目的探讨荧光原位杂交技术检测hTERC基因在子宫颈上皮内瘤变(CIN)和宫颈癌中的烤贝数扩增情况,了解其在宫颈癌早期诊断应用。方法收集2008年6月至2010年6月在本院就诊的396例宫颈脱落细胞,以生理盐水制片和液基细胞学(TCT)低渗法制片,应用荧光标记探针GLP TERC/CSP 300 m,用荧光原位杂交(FISH)技术进行hTERC基因烤贝数的检测,并分析检测结果的临床效应性。结果在396例临床标本中,正常宫颈细胞中表达率为1.012%(阈值);宫颈癌组的阳性率为93.65%(59/63)、CIN总阳性率为65.82%(104/158),宫颈癌组分别与正常组和炎性反应/CINⅠ组3.01%(4/133)相比较,差异均有统计学意义(P0.01);CINⅡ组的阳性表达率为60.24%(50/83),CINⅢ组的阳性率为72.0%(54/75),CINⅡ组、CINⅢ组分别与正常和炎性反应/CINⅠ组比较,差异均有统计学意义(P0.01);CINⅢ组、CINⅢ组与宫颈癌组比较,差异也均有统计学意义(P0.01);hTERC基因在宫颈癌细胞株hela和正常骨髓淋巴细胞中基因扩增呈阳性。结论 hTERC基因参与宫颈上皮内瘤变和宫颈癌的发生发展,作为宫颈上皮内瘤变及宫颈癌的标志物,hTERC的阳性表达率与宫颈细胞癌前病变具有严重程度相关。hTERC基因的检测可作为提高宫颈癌早期诊断率的重要手段和癌前病变治疗的重要依据。     

宫颈脱落细胞hTERC基因的表达及临床意义

目的探讨宫颈上皮内瘤变（CIN）和宫颈鳞癌（SCC）组织中人类染色体端粒酶基因（hTERC）的表达和临床意义。方法收集2007年10月-2009年6月经病理学证实的116例宫颈脱落细胞标本,其中LSIL（CINⅠ）30例、HSIL（CINⅡ/Ⅲ）37例、SCC16例、宫颈炎33例,用荧光原位杂交（FISH）方法检测脱落细胞hTERC基因。结果在宫颈炎、LSIL、HSIL和SCC组中hTERC基因的表达率分别是6.1%、16.7%、51.4%和93.8%,其中,HSIL、SCC组与宫颈炎组比较,hTERC基因阳性率差异有统计学意义（P〈0.05）,LSIL组与HSIL组比较、LSIL组与SCC组比较、HSIL组与SCC组比较,差异有统计学意义（P〈0.05）,且随着病变程度增加,hTERC基因表达率增加。结论 hTERC基因在细胞学LSIL、HSIL和SCC中表达异常,且随病变程度增加阳性表达率也增加,可作为宫颈癌癌前病变进展的生物遗传学监测指标,并有望成为宫颈癌早期筛查方法之一。     

高危型人乳头瘤病毒感染的宫颈脱落细胞中HPVL1蛋白表达及hTERC基因的扩增与宫颈病变的相关性研究

目的探讨高危型人乳头瘤病毒感染的宫颈脱落细胞中人乳头瘤病毒(HPV)L1蛋白表达、人类染色体端粒酶RNA(hTERC)基因的表达与宫颈病变的相关性。方法选择宫颈高危型HPV感染阳性的240例妇女的宫颈脱落细胞标本作为研究对象,240例病例按照TBS(the Bethesda system)2001年宫颈细胞学诊断系统分为以下五组:(1)细胞学检查正常及慢性炎即正常宫颈组织(NILM)组(66例);(2)宫颈不典型鳞状细胞(ASCUS)组(27例);(3)宫颈低度病变(LISL)组(13例);(4)宫颈高度病变(HISL)组(86例);(5)宫颈癌(SCC)组(48例);根据阴道镜下活检送病理组织学检查的结果分为以下5组:(1)正常宫颈或慢性宫颈炎组即NILM组(51例);(2)宫颈上皮内瘤变1级(CIN1)组(42例);(3)宫颈上皮内瘤变2级(CIN2)组(28例);(4)宫颈上皮内瘤变3级(CIN3)组(73例);(5)SCC组(46例)。通过免疫细胞化学法检测宫颈脱落细胞中HPVL1蛋白的表达,通过荧光原位杂交(FISH)技术检测hTERC基因的表达,并对HPVL1蛋白及hTERC基因在不同级别病变的宫颈脱落细胞中的表达情况进行统计学分析。结果 240例高危型HPV感染妇女中150例hTERC基因扩增阳性,hTERC基因扩增阳性率为62.5%。NILM组、CIN1组、CIN2、CIN3和SCC组hTERC基因的扩增阳性率分别为7.8%、16.7%、75.0%、98.6%和100%,五组间hTERC基因扩增阳性率之间的差异有统计学意义(χ2=131.9,P<0.001)。此五组hTERC基因扩增阳性率的大小顺序为:SCC组≈CIN3组>CIN2组>CIN1组≈NILM组。通过Spearman等级相关分析,发现随着宫颈病变恶性程度的增加,各组中hTERC基因的扩增阳性率有增加的趋势(相关系数rs=0.71,P<0.001)。240例高危型HPV感染妇女中49例HPV L1壳蛋白表达阳性,HPV L1壳蛋白表达阳性率为20.4%。NILM组、CIN1组、CIN2组、CIN3组和SCC组HPV L1壳蛋白表达的阳性率分别为9.8%、66.7%、32.1%、9.6%和0%,五组间HPV L1壳蛋白表达阳性率之间的差异具有统计学意义(P<0.001)。通过Spearman等级相关分析,我们进一步发现HPV L1壳蛋白表达的阳性率与宫颈病变的恶性程度呈负相关(rs=-0.38,P<0.001)。结论随着宫颈病变恶性程度的增高,hTERC基因的阳性扩增率呈上升的趋势,HPVL1壳蛋白的阳性表达率呈现下降趋势,HPVL1壳蛋白与hTERC基因检测在临床上可以作为宫颈病变诊断及进一步评估进展风险的有效指标。     

荧光原位杂交检测细胞中hTERC基因扩增在宫颈癌早期诊断中的意义

目的检测hTERC基因在子宫颈上皮内瘤变（CIN）和宫颈癌中的拷贝数扩增情况,探讨其作为宫颈癌早期诊断标志物的可能性。方法采集在本院就诊的95例宫颈脱落细胞,经病理诊断确诊,其中正常10例,炎症／CINⅠ32例、CINⅡ20例、CINⅢ18例,宫颈癌15例。以生理盐水制片和TCT低渗法制片,应用荧光标记探针GLPTERC／CSP3米,用荧光原位杂交（FISH）方法进行hTERC基因拷贝数的检测。3号染色体着丝粒为对照,1株宫颈癌细胞和正常骨髓淋巴细胞为阳性对照,正常宫颈细胞为阴性对照。结果95例临床标本中,正常宫颈细胞中表达率为1．012％（阈值）;宫颈癌组的阳性率为93．3％（14／15）、CIN总阳性率为65．79％（25／38）,与正常和炎症／CINⅠ组3．13％（1／32）差异有统计学意义（P〈0．05）;CINⅡ组的阳性表达率为60％（12／20）,CINⅢ组的阳性率为72．2％（13／18）,与正常和炎症／CINI组差异有统计学意义（P〈0．05）;CINHI组与宫颈癌组差异无统计学意义（P〉0．05）;hTERC基因在宫颈癌细胞株hela和正常骨髓淋巴细胞中基因扩增呈阳性;hTERC的阳性表达率与宫颈细胞癌前病变的严重程度相关。结论hTERC基因参与宫颈上皮内瘤变和宫颈癌的发生发展,作为宫颈上皮内瘤变及宫颈癌的标志物,hTERC基因的检测可作为提高宫颈癌早期诊断率的重要手段和癌前病变治疗的重要依据。     

人乳头瘤病毒载量和人端粒酶RNA组分基因与子宫颈病变的关系

目的研究子宫颈脱落细胞中人乳头瘤病毒（HPV）载量和人端粒酶RNA组分（hTERC）基因的表达与子宫颈上皮内瘤样病变（CIN）之间的关系。方法北京大学深圳医院子宫颈癌早诊早治中心诊断CINⅠ、CINⅡ/Ⅲ及浸润癌的患者分别为105例、59例、10例,并以51例非CIN（病理正常或炎症）者为对照。所有研究对象均取宫颈脱落细胞行HC-Ⅱ法高危型HPV（HR-HPV）和检测荧光原位杂交（FISH）法hTERC基因检测。结果 （1）根据组织学结果分为非CIN、CINⅠ、CINⅡ/Ⅲ和浸润癌组,各组HPV的阳性率分别为58.82%、67.62%、98.31%和100.00%,组间差异有统计学意义（P〈0.01）;非CIN、CINⅠ、CINⅡ/Ⅲ和浸润癌组病毒载量均值分别为135.67、345.04、535.08和612.62,CINⅡ/Ⅲ和浸润癌组的HPV病毒载量均值高于非CIN组（P〈0.05）。随着病变程度加重,HPV阳性率和病毒载量均增加。（2）非CIN、CINⅠ、CINⅡ/Ⅲ和浸润癌组hTERC扩增率分别为3.92%、5.71%、57.63%和90.00%,各组间hTERC差异存在统计学意义（P〈0.01）;在CINⅡ/Ⅲ及浸润癌组hTERC扩增率显著增高,为非CIN和CINⅠ的10～15倍。各组hTERC扩增均数分别为6.50、9.00、17.81、36.50,扩增均数随病变加重明显升高,CINⅠ与非CIN组之间差异无统计学意义（P〉0.05）,其余各组间差异均有统计学意义（P〈0.01）。CINⅡ/Ⅲ及浸润癌组hTERC扩增均数为非CIN和CINⅠ的2～4倍。（3）hTERC扩增在HPV阳性与阴性组分别为28.99%与3.57%,两组比较差异有统计学意义（P〈0.01）;非CIN组51例中,不伴有HPV感染的21例无hTERC扩增;CINⅠ与CINⅡ/Ⅲ组不伴HPV感染者各仅有1例hTERC扩增。结论 HPV载量和hTERC扩增均与CIN病变程度密切相关;hTERC扩增主要发生在HPV阳性病例,且与高度宫颈上皮内瘤变的关系更为密切,有望作为早期子宫颈癌及癌前病变的生物学标记物。     

宫颈上皮内瘤变和浸润性鳞状细胞癌中CK8、CK17的表达

目的检测宫颈上皮内瘤变(CIN)及浸润性鳞状细胞癌中CK8、CK17的表达,并探讨其病理意义。方法应用免疫组化MaxVision法检测宫颈上皮内瘤变(CIN)44例(Ⅰ级20例,Ⅱ、Ⅲ级24例)、浸润性鳞状细胞癌25例和正常宫颈组织20例中的CK8、CK17的表达情况。结果正常对照组鳞状上皮CK8、CK17均为(-);浸润性鳞状细胞癌的阳性率分别为88%和92%,其表达均以中等强度及强阳性为主;CIN高级别组的阳性率分别为58.3%和58.3%,以中等强度为主;CIN低级别组的阳性率分别为10%和30%,其均以弱及中等强度为主。结论 CK8、CK17的阳性表达率及程度与宫颈鳞状细胞病变的严重程度密切相关。CK8、CK17在宫颈癌变过程中起到重要作用。     

Wnt-1和β-catenin在宫颈鳞状上皮癌变过程中的表达和意义

目的:探讨Wnt-1和β-catenin在宫颈正常鳞状上皮、宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和宫颈浸润性鳞状细胞癌(SCC)中的表达及意义,寻找早期诊断SCC的生物学指标.方法:采用免疫组织化学方法(SP法)检测Wnt-1和β-catenin蛋白在20例宫颈正常鳞状上皮、30例CIN Ⅰ、40例CINⅡ/Ⅲ及40例SCC患者中的表达情况.结果:(1)Wnt-1阳性表达率在宫颈正常鳞状上皮、CIN Ⅰ、CINⅡ/Ⅲ、SCC组织中分别是25.0%、60.0%、82.5%、97.5%,其在4组中的表达差异具有统计学意义(x2=40.04,P<0.05);(2)β-catenin异常表达率在宫颈正常鳞状上皮、CIN Ⅰ、CINⅡ/Ⅲ、SCC组织中分别是5.0%、26.7%、57.5%、82.5%,差异具有统计学意义(x2=37.25,P<0.05);(3)两者在SCC中表达的相关性:Wnt-1蛋白的阳性表达和β-catenin蛋白的异常表达有相关性(r=0.33,P<0.05).结论:Wnt-1和β-catenin参与了宫颈鳞状上皮的恶性转化过程,在由CIN发展到宫颈癌的过程中起了促进作用,联合检测这两项指标有助于早期诊断SCC.     

FISH技术检测桂林地区妇女宫颈脱落细胞hTERC基因扩增及其临床意义

目的探讨妇女宫颈上皮脱落细胞hTERC基因扩增情况和临床意义。方法采用荧光原位杂交技术(FISH)检测20例健康人及100例妇科疾病患者宫颈上皮脱落细胞hTERC基因扩增情况,确定hTERC基因扩增阳性阈值,研究临床病理诊断与hTERC基因扩增的关系。结果 FISH检测hTERC基因扩增阳性阈值为3.4%,CIN1患者FISH检测阳性率为8.8%(3/34例),CIN2患者为35.7%(5/14例),CIN3患者为77.8%(7/9例)以及宫颈癌患者为83.7%(36/43例)。健康对照组及CIN1者hTERC扩增发生机率显著低于CIN2及以上者(P<0.01)。结论 FISH可以成功地应用于妇女宫颈上皮脱落细胞hTERC基因扩增情况的研究;hTERC基因扩增与临床病理诊断密切相关。     

FISH技术探讨hTERC基因与子宫颈上皮内瘤样病变和宫颈癌的相关性

目的应用荧光原位杂交技术检测研究子宫颈上皮内瘤样病变(CIN)和宫颈癌人类染色体末端酶(hTERC)基因表达情况。方法收集120例LCT标本,应用荧光原位杂交技术检测hTERC基因扩增情况。结果 hTERC基因异常扩增阳性率在正常对照组与CINⅡ、CINⅢ、宫颈癌组间有显著性差异(P<0.01),在宫颈癌与CINⅠ、CINⅡ间有显著性差异(P<0.05),随着宫颈病变级别增加,hTERC基因异常扩增的阳性率明显增加。结论 hTERC基因异常扩增与宫颈癌密切相关;在LCT检查和HPV检测筛查宫颈癌的同时,检测hTERC基因扩增,有助于宫颈癌及癌前病变诊断,是预测癌前病变是否向宫颈癌进展的重要指标。     

HMGB1和细胞凋亡在宫颈病变中的表达及意义

[目的]探讨宫颈病变的高迁移率族蛋白B1(HMGB1)表达和细胞凋亡情况.[方法]分别应用免疫组化和末端核酸转移酶脱氧尿嘧啶标记法(TUNEL).检测并比较正常宫颈组织、宫颈上皮内瘤变(CIN)各期、宫颈鳞癌ⅠA期中HMGB1的表达和细胞凋亡情况.[结果]HMGB1在正常宫颈、CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ、宫颈鳞癌ⅠA...     

宫颈癌变过程中XIAP和caspase-3表达水平的变化及其与高危型人乳头瘤病毒感染的相关性

目的：探讨X-连锁凋亡抑制蛋白（X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP）和caspase 3在宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia,CIN）及宫颈鳞癌（squamous carcinoma of the cervix,SCC）中的表达水平及其与高危型人乳头瘤病毒（human papilloma virus,HPV）感染的关系.方法：采用免疫组织化学Envision二步法检测XIAP和caspase-3在SCC（n=25）、CIN（n=80）及正常宫颈（normal cervix,NC,n=10）石蜡包埋组织中的表达,并进行HPV分型检测.结果：高危型HPV 总感染率为62.6％（72/115）.SCC、CINⅢ、CINⅡ、CIN Ⅰ、NC组的高危型HPV感染率分别为88.0％（22/25）、84.0％（21/25）、68.0％（17/25）、33.3％（10/30）、20.0％（2/10）,高危型HPV感染率随着宫颈病变的加重呈上升趋势,差异有统计学意义（x2 =30.820,P =0.000）.NC、CIN Ⅰ、CINⅡ与SCC组的XIAP阳性表达率两两比较差异均有统计学意义（P均＜0.01）,XIAP阳性率及表达水平与宫颈病变的严重程度呈正相关（r=0.410,P=0.000）.NC、CIN Ⅰ、CINⅡ、CINⅢ与SCC组的caspase-3阳性表达率两两比较差异均有统计学意义（P均＜0.05）,其阳性率及表达水平与宫颈病变的严重程度呈负相关（r=-0.320,P=0.000）.在CIN及SCC中,XIAP与caspase-3、XIAP与高危型HPV感染分别呈负相关（r=-0.402,P=0.000）和正相关（r=0.458,P=0.000）.结论：高危型HPV感染、XIAP高表达和caspase-3表达下调在宫颈癌前病变向SCC演变的过程中可能起促进作用.     

宫颈上皮内瘤变中hTERC基因扩增状况的研究

目的 探讨人染色体端粒酶基因(hTERC)在宫颈病变中的表达及其临床意义.方法 采用荧光原位杂交方法 检测20例正常宫颈和100例有不同程度宫颈病变的脱落细胞学标本及10例宫颈鳞癌组织标本中hTERC基因的表达情况.结果 hTERC基因在正常组、ASCUS、ASCUS-H、LSIL和HSIL组中的阳性表达率分别为0、19.44%、57.14%、41.86%和71.43%;在正常组、CIN1、CIN2、CIN3和宫颈鳞癌组中的阳性表达率分别为12.5%、60%、66.67%、75%和100%.hTERC基因在正常组与上皮内瘤变各组以及与宫颈鳞癌组组间比较差异显著.结论 hTERC基因高表达在宫颈癌发生、发展中可能起重要作用,采用FISH检测hTERC基因有望成为宫颈癌早期筛查的方法 之一.     

宫颈鳞癌组织圆柱瘤基因mRNA表达及其意义

目的探讨宫颈鳞癌组织中圆柱瘤基因（CYLD）mRNA的表达及其临床意义。方法采用原位杂交法检测45例宫颈鳞癌、64例官颈上皮内瘤变（cIN,包括CINI26例、CIN Ⅱ-Ⅲ38例）及20例正常宫颈组织中CYLD mRNA的表达,分析其阳性表达率与宫颈鳞癌临床病理特征的关系。结果CYLDmRNA在宫颈鳞癌、CINⅡ—Ⅲ、CINI及正常宫颈组织中的阳性表达率分别为42．2％、52．6％、73．1％、80．0％,宫颈鳞癌、CINⅡ-Ⅲ组织中CYLDmRNA的阳性表达率明显低于正常宫颈组织,差异均有统计学意义（x2=7．85、4．42,P〈0．05）。宫颈鳞癌CYLDmRNA表达与临床分期及淋巴结转移密切相关（x^2=4．64、5．59,P〈0．05）,但与组织学分级、肿瘤大小、病人年龄无关。结论CYLDmRNA低表达可能与宫颈癌的发生、发展及转移有关。