骨骼肌纤维内联苯胺阳性反应物质的横纹状分布

联苯胺、二氨基联苯眩(DAB)和四甲基联苯胺(TMB)等都可以用来显示给予体内的外源性过氧化物酶,如辣根过氧化物酶(HRP)等。此外体内也含有一些内源性过氧化物酶或具有过氧化物酶活性的物质,这些内源性过氧化物酶活性物质已在脑和其它许多器官组织中为DAB 法所证实。但是对骨骼肌纤维的     

以免疫斑点化学发光法检测大肠杆菌

免疫斑点法是以纤维膜为载体的免疫酶技术。常用辣根过氧化物酶(HRP)标记系统,底物为二氨基联苯胺(DAB)加H_2O_2,形成棕色斑点。近来,化学发光检测技术已应用子免疫测定。在过氧化物酶催化的鲁米诺化学发光反应中,若固定发光系统中鲁米诺及H_2O_2的量,则反应产生的光强度与过氧化物酶的含量在一定范围内正相关。据此,     

一种敏感的辣根过氧化物酶反应法:葡萄糖氧化酶-二氨基联苯胺-硫酸镍铵法

神经系统束路追踪法或免疫组化法的最后步骤,常常需要用辣根过氧化物酶的呈色来显示。显示辣根过氧化物酶最常用的色素为二氨基联苯胺,其呈色产物为棕色,稳定,而且电子密度高,适于作光镜和电镜研究。但该法不够敏感,不能显示低浓度的过氧化物酶是其缺点。我们用葡萄糖氧化酶和葡萄糖代替双氧水供氧,并用镍盐增强二氨基联苯胺的呈色强度,得出一种黑色反应产物,比棕色产物的二氨基联苯胺原法及其他二氨基联苯胺法均敏感。能显示免疫反应阳性的细微结构,对显示阳性反应的纤维和终末效果极佳。并可与二氨基联苯胺原法或其他法合用作免疫组化双标记或免疫组化与束路追踪双标记。     

强氧化剂脱黑色素对免疫组化染色影响的评估

黑色素瘤是临床上较为常见的皮肤黏膜和色素膜恶性肿瘤,也是发病率增长最快的恶性肿瘤之一[1].免疫组化染色是黑色素瘤病理学诊断常用的检查方法.富含黑色素的瘤组织行免疫组化染色时,组织中沉积的大量黑色素与免疫组化阳性所显示的DAB棕黄色颗粒互相干扰,影响结果判读[2].     

双重免疫组化染色在检测肝癌及癌旁肝内AFP和HBsAg、IgG或白蛋白的应用

本文报道的双重免疫组化染色技术,虽属单酶双底物(PAP)法,但它不用常规的二氨基联苯胺(DAB)显色,而用二种不同的水溶性底物来显示同一组织切片中的二种抗原,效果良好,现介绍如下。     

109例先天性甲状腺功能减低症患儿甲状腺过氧化物酶基因突变检测

目的对109例先天性甲状腺功能减低症患儿进行甲状腺过氧化物酶基因(TPO)基因突变研究。方法对109例先天性甲状腺功能减低症患儿采样并提取DNA,用wafergen验证检测患儿TPO基因突变。PCR扩增患儿TPO基因各外显子、外显子-内含子交界区以及3′端和5′端非翻译区,以DNA测序技术检测TPO基因突变。结果 7例CH患儿存在7种TPO基因突变,分别为c.1082GT[p.Arg361Leu]、c.1117GT[p.Ala373Ser]、c.2012GT[p.Trp671Leu]、c.2268ins T[p.Glu757fs]、c.1471CT[p.Arg491Cys]、c.2173AC[p.Thr725Pro]、c.2647CT[p.Pro883Ser]。结论中国人群先天性甲状腺功能减低症患儿存在较高频率的甲状腺过氧化物酶基因突变。     

免疫组织化学染色中不同返蓝液效果评价

<正>免疫组化是通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,利用带显色剂标记的特异性抗体(或抗原)对组织细胞内相应的抗原(或抗体)进行定性、定位、定量检测的一项技术[1-2],是病理科最常用的确诊疾病和诊断疑难病例的一种辅助检测手段[3-4]。免疫组化操作步骤包括抗原修复、抗体孵育、DAB显色、苏木精复染、分化、返蓝等[5-7],每一步都会影响切片的评片等级(如优秀、良好、合格及不合格),良好及以上的评片标准中不仅要求抗原定位准确、阳性着色与背景对     

微循环形态学研究的常用方法及其评价

微循环形态学的研究是微循环研究的基础,同时也是解剖学、组织学、病理学、心血管病学的重要课题,对于完整地认识脏器结构,功能及病理改变具有重要意义。用合适的方法显示脏器微血管是进行微血管形态学研究的前提,现有的方法依据原理可分为四类。一、染色法用组织化学或免疫组织化学的方法染色,直接显示微血管,根据显示部位分为管内染色,管壁染色及管周染色。1.管内染色基本原理是利用红细胞中的内源性过氧化物酶及酶标抗体和血浆蛋白结合后的外源性过氧化物酶催化特异底物产生不溶的棕色沉淀显示血管内容物。红细胞中有很强的过氧化物酶活性,在组织切片上滴加联苯胺一过氧化氢反应液,就可以清楚地显示血管内红细胞,但红细     

DAB-硫酸镍铵加强法的改良

在神经科学、病理学、微生物学等医学生物学领域的研究中,免疫组织化学法是较常用的技术方法之一,如PAP、ABC法等,其中都含有辣根过氧化物酶(HRP),显示HRP常用DAB法.Adams在1977年提出于DAB液中加入氯化钴可使HRP-DAB呈色反应物加深,1984年Hancock又提出在DAB液中加入硫酸镍铵可加强DAB呈色反应,反应物呈黑色,可用于双标记.Itoh用DAB作电镜研究时,用葡萄糖氧化     

高海拔地区不同抗原修复法对免疫组化染色的影响

抗原修复是免疫组化技术中最关键的步骤[1].近年随着各医院病例大幅增多,病理技术对免疫组化自动化的需求也日益显著.云南省为高海拔地区,我院地处海拔1900 m,常压下水的沸点为94.3 ℃.全自动免疫组化染色仪均无高压功能,抗原修复温度最高只能达到水的沸点.受高海拔和抗原修复温度影响,云南省免疫组化自动化发展较慢,使用...     

酶标羊抗兔聚合物中加入不同表面活性剂对免疫组化染色强度的影响

在临床病理诊断和形态学研究中,免疫组化是病理科主要的辅助诊断技术之一,对疾病诊断、预后判断、靶向治疗相关指标的检测指导临床用药、了解发病机制和检测病原体等方面起重要的作用[1 -2].免疫组化整体染色步骤繁琐,每一步骤所用试剂及操作方法均可能影响染色效果,本文主要探索向酶标羊抗兔聚合物中添加不同表面活性剂对免疫组化染色...     

病理免疫组化染色方法质量控制应注意的基本问题

免疫组化可以辅助病理诊断、指导治疗、评估预后,所以在做免疫组化过程中的质控问题处理尤其重要[1].免疫组化技术是利用已知的特异性抗体或抗原特异性结合的特点.     

职教护理专业护理技术操作解剖学微课的制作与应用

人体解剖学是护理专业的基础核心课程,是后续学习护理技术操作的基础[1].临床护理调研显示,有81.2％的护士认为低年资护士或实习护士在与解剖学知识密切相关的护理技术操作中不成功的原因是和解剖学知识缺乏有关,抢救技术操作与解剖学密切相关[2].但由于《正常人体学》教材侧重点和护理技术操作需求的基础知识点供求不对等[3],以及学制、师资[4]和实验室的限制等诸多原因,造成解剖学在培养护理职业能力上作用不明显.     

S-P法免疫组化染色探讨

免疫组化技术是利用已知的特异性抗体或抗原能特异性结合的特点,通过化学反应使标记于结合后的抗体上的显色剂,如酶、金属离子、同位素等,显示一定的颜色。检测系统持续快速的发展,使免疫组化技术在现代病理诊断中的应用日益广泛,已成为常规病理诊断中不可缺少的辅助手段。但是免疫组化染色方法众多,对不同检测系统的认识和掌握,对取得好的实验结果至关重要。S-P法（链霉卵白素一过氧化物酶连结法）是20世纪90年代出现的检测系统,     

肉桂酰胺类化合物抗癌活性研究进展

针对肉桂酰胺类化合物的药物研发已有几十年的历史,国内外文献对其药理活性有许多报道,其中大部分都集中在抗惊厥[1]、扩张血管[2]、杀虫[3]、抗诱变[4]、治疗糖尿病[5]、抗抑郁[6]以及消炎[7]等方面.近二十年,肉桂酰胺类化合物抗肿瘤活性的报道逐年增多,本文就此展开综述,希望能为肉桂酰胺类药物的研发提供参考. 肉桂酰胺及其相关化合物在自然界中广泛存在,形成了一系列具有抗癌活性的物质[8],具体分为以下几类:     

提高全自动免疫组化仪制片质量的相关细节

为确保免疫组化染色结果的重复性和真实性,现代病理工作者已逐渐将目光转向高品质的全自动免疫组化仪,但自动化染色也可能产生一些假象.我们在使用美国Bench Mark XT全自动免疫组化仪后总结了针对提高制片质量的几点建议,与大家共同探讨. 1 标本固定、处理及蜡块选择的相关细节 免疫组化染色过程中抗原性保存完整、不弥散或丢失是实验成功的重要保证.在一张组织或细胞已坏死、抗原已丢失的材料上,再好的技术和抗体也难以成功染色[1].组织处理之前必须保证组织充分固定,如果固定不适当、不完全,可能会改变组织的染色特性[2].     

FineFix固定液与福尔马林固定液对组织保存及固定的比较

随着石蜡切片、免疫组化、特殊染色以及分子遗传学分析在病理诊断上的普遍应用,对标本组织处理要求越来越严格.固定是标本处理过程中的重要环节,如果固定液选择不当、浓度不均、固定时间与温度不合适以及固定液过少等均会使组织固定不良而影响制片质量、免疫标记及分子生物学检测结果,从而影响病理诊断.福尔马林是一种有毒、致敏及致癌物,废液处理成本较高,经其固定的组织抗原蛋白的氨基与醛基交联形成羧甲基封闭抗原决定簇,使免疫组化着色效果减弱[1].本实验采用FineFix固定液(以下简称FF)与福尔马林液固定的组织进行对比,经FF固定的组织形态结构完整,尤其在提取DNA和RNA的质和量上具有明显的优越性[2].     

一种新的抗原修复方法的应用

在用多聚甲醛固定组织时,常在组织中的氨基酸残基的分子间或分子内形成醛键,从而使得一些抗原决定簇封闭起来,在免疫组织化学过程中需要进行抗原修复,使被封闭的抗原决定簇重新暴露而容易被检测到[1-3].因此,抗原修复是免疫组化中非常重要的步骤.常用的抗原修复方法有高压修复、微波修复、胰酶修复、胃蛋白酶修复、透明质酸酶修复、蛋白酶K修复以及复合酶修复等.一般认为修复能力由强到弱依次是:高温高压法>高温煮沸法>微波法>超声法>酶消化法[4].对于某些特定的抗原,加热修复法并不是最理想的修复方法[5].尿素作为一种蛋白质的变性剂,可以打断分子间的化学键,从而暴露抗原决定簇.     

子宫颈细胞蜡块p16/Ki-67双染在子宫颈癌早期筛查中的应用

子宫颈癌是继乳腺癌之后的第二大妇科常见肿瘤,也是女性癌症死亡的第三大主要原因[1].据报道,全球子宫颈癌的发病人数每年超过53 万,每年死亡人数接近27. 5 万[2].子宫颈癌筛查和预防显得尤为重要.传统的免疫组化单染技术具有一定的局限性,免疫组化双染技术的出现增加了子宫颈癌的筛查手段,弥补了单染技术的不足.本文应用...     

麦芽凝集素辣根过氧化物酶、类霍乱原结合辣根过氧化物酶及辣根过氧化物酶—四甲基联苯胺法成色脑切片的保存时间探讨

目前,辣根过氧化物酶(HRP)法已被推广和改进,在HRP束路追踪技术中,四甲基联苯胺(TMB)因其灵敏度高又无致癌作用而被广泛采用.一般认为TMB反应产物易受高pH、酒精、温度、紫外线照射等因素影响而退色.TMB呈色时加钼酸铵再稳定,有利于切片的保存.能保存多久.其消退程度如何,采用麦芽凝集素辣根过氧化物酶(WGA-HRP)、类霍乱原结合辣根过氧化物酶(CB-HRP)及HRP(Sigma VI)法制作的切片,保存时间上有无明显差别是本文研究的目的所在.