免疫组化染色质量控制在肝脏穿刺组织切片中的应用

目的:探讨肝脏穿刺组织HE染色切片及免疫组化染色切片的质量控制与标准化操作在提高病理诊断准确率中的意义。方法:按照质控标准化对298例肝脏穿刺组织行HE制片和免疫组化染色,盲法比较标准化前后病理诊断结果。结果:按照质控标准化制备的常规HE染色切片优良率为92.3%,免疫组化染色切片优良率为91.1%;明显高于未标准化制备的HE切片和免疫组化染色切片(78.9%,74.9%),两者差异有统计学意义(P<0.05)。298例肝脏穿刺组织,标准化后做出明确诊断的有259例(86.9%),标准化前为219例(73.5%),两者差异有统计学意义(P<0.05)。结论:此实验流程提高了肝脏穿刺组织免疫组化染色的质量,诊断率提高,可作为肝脏穿刺组织制片的标准流程应用。     

淋巴组织免疫组织化学染色及质量控制

目的 建立淋巴组织的制片与免疫组化的标准化实验方法，达到临床病理检验质控要求。方法 详细介绍了淋巴组织的取材、固定、脱水、透明、石蜡包埋、切片、免疫组化和TUNEL染色方法及其质量控制环节。结果 用此法制备的免疫组化切片具有阳性结果呈颗粒状的棕黄色，定位准确，对比明显，背景浅，组织结构与细胞轮廓完整、清晰，适合显微照相以及染色结果稳定可靠，特异性强、敏感性高。结论 该方法可作为淋巴组织的制片与免疫组化的标准化实验方法应用。     

应用组织芯片技术对胃癌组织中cyclin E和p21WAF1蛋白表达观察的体会

目的:探讨使用组织芯片技术,观察细胞周期的调控因子cyclin E和p21WAF1在胃癌组织中的表达的方法.方法:以124例为观察研究对象,自制组织芯片,使用S-P法观察单克隆抗体cyclin E(MAB-0019)、p21WAF1(MAB-0235)在胃癌组织中的表达情况.对其中11例使用常规制片方法进行了对照免疫组化染色.结果:制成组织芯片2块,各含63块组织芯片,所制切片质量较满意,制片组织块完好率为95.2 %～98.4 %.所制成的组织芯片进行免疫组织化学染色,与采用常规制片方法进行免疫组化染色片对比,阳性率、阳性表达强度结果基本一致.结论:使用自制组织芯片进行cyclin E、p21WAF1免疫组化染色分析,效果良好,显示了组织芯片技术应用于临床病理免疫组化染色和实验分析的良好前景.     

应用组织芯片技术对胃癌组织中cyclinE和p21~(WAF1)蛋白表达观察的体会

目的 :探讨使用组织芯片技术 ,观察细胞周期的调控因子 cyclin E和 p2 1WAF1在胃癌组织中的表达的方法。方法 :以 12 4例为观察研究对象 ,自制组织芯片 ,使用 S- P法观察单克隆抗体 cyclin E(MAB- 0 0 19)、p2 1WAF 1 (MAB-0 2 35 )在胃癌组织中的表达情况。对其中 11例使用常规制片方法进行了对照免疫组化染色。结果 :制成组织芯片 2块 ,各含 6 3块组织芯片 ,所制切片质量较满意 ,制片组织块完好率为 95 .2 %～ 98.4 %。所制成的组织芯片进行免疫组织化学染色 ,与采用常规制片方法进行免疫组化染色片对比 ,阳性率、阳性表达强度结果基本一致。结论 :使用自制组织芯片进行 cyclin E、p2 1WAF1 免疫组化染色分析 ,效果良好 ,显示了组织芯片技术应用于临床病理免疫组化染色和实验分析的良好前景。     

应用组织芯片技术对胃癌组织中cyclin E和p21^WAF1蛋白表达观察的体会

目的：探讨使用组织芯片技术，观察细胞周期的调控因子cyclin E和p21^WAF1在胃癌组织中的表达的方法。方法：以124例为观察研究对象，自制组织芯片，使用S-P法观察单克隆抗体cyclin E(MAB-0019)、p21^WAF1(MAB-0235)在胃癌组织中的表达情况。对其中11例使用常规制片方法进行了对照免疫组化染色。结果：制成组织芯片2块，各合63块组织芯片，所制切片质量较满意，制片组织块完好率为95．2％～98．4％。所制成的组织芯片进行免疫组织化学染色，与采用常规制片方法进行免疫组化染色片对比，阳性率、阳性表达强度结果基本一致。结论：使用自制组织芯片进行cyclin E、p21^WAF1免疫组化染色分析，效果良好，显示了组织芯片技术应用于临床病理免疫组化染色和实验分析的良好前景。     

鼻咽泡状核细胞癌超微结构的研究

目的观察泡状核细胞癌的超微结构及免疫组化特点,探讨其病因、组织起源与分型等问题。方法收集18例鼻咽泡状核细胞癌的活检标本,应用常规HE染色及免疫组化染色,其中10例于活检同时进行常规电镜制片。结果电镜下1例癌细胞核内见有直径约45nm的电子致密颗粒,考虑为乳头多瘤空泡病毒。癌细胞胞质泡状系统占优势,而张力微丝少见,桥粒发育不良,应将其列为柱状细胞癌,癌组织可能起源于鼻咽纤柱上皮的中间细胞或基底细胞。免疫组化CK-HMW染色,大多数呈阳性反应。结论电镜与免疫组化观察有助于泡状核细胞癌的病理鉴别诊断。     

Van-clear环保透明剂代替二甲苯制作蜡块对免疫组化结果的影响

目的：评估Van-clear环保透明剂代替二甲苯制作石蜡切片对免疫组化结果的影响。方法：用Van-clear环保透明剂代替二甲苯制备蜡块10000个、苏木精-伊红染色10000片和免疫组化染色2265片。结果：用Van-clear环保剂制作的蜡块,组织浸蜡充分,各种组织软硬适中,易于切片;制作的苏木精．伊红片,组织结构清楚,染色清晰,对比及透明度好;免疫组化染色切片,阳性定位准确,强度、对比度与常规制片一致;存档半年后蜡块切片,免疫组化染色结果与半年前结果一致。结论：用Van-clear环保透明剂代替二甲苯对病理常规制片的质量和免疫组化阳性结果无明显影响。Van-elear作为环保产品,有推广使用的价值。     

不同制片方法对乳腺疾病DNA倍体分析的影响

目的摸索三种不同制片方法对乳腺疾病石蜡组织细胞的DNA进行定量分析,探讨三种方法的优劣及其在细胞DNA定量分析过程中的影响。方法本实验采用常规制片脱蜡法、常规制片脱蜡酶消法、石蜡组织制备细胞悬液法,分别对80例乳腺疾病的石蜡组织进行Feulgen染色,应用全自动DNA倍体分析仪对DNA染色玻片进行扫描分析。结果在三种方法中,常规制片脱蜡法染色结果不理想,常规制片脱蜡酶消法取得了最佳的染色效果,而石蜡组织制备细胞悬液法制备的玻片上部分区域存在一定的细胞重叠现象。结论常规制片脱蜡酶消法可用于乳腺疾病石蜡切片的DNA倍体分析。     

组织芯片和常规制片检测乳腺癌相关癌基因产物的比较

目的:探讨不同规格组织芯片在乳腺癌相关基因产物检测中的应用价值。方法:采用微波修复免疫组织化学SP法和组织芯片技术,检测ER、PR、nm23、Her2、p53在31例乳腺癌组织中的表达,并与常规病理学方法进行比较分析。结果:不同规格组织芯相比较,免疫组化结果几乎完全一致。常规制片免疫组化阴性,而组织芯片免疫组化阳性者包括ER2例、PR1例;常规制片免疫组化阳性,而组织芯片免疫组化阴性者包括nm23、Her2各1例。部分病例常规制片免疫组化和组织芯片免疫组化阳性表达强度略有不同。结论:组织芯片的免疫组化结果与常规制片免疫组化比较,经统计学处理,差异无显著性(P>0.05)。组织芯片技术有良好应用价值和广阔发展前景。     

微波固定在病理制片中的应用

目的探讨微波固定在常规病理切片及免疫组化制片工作中的效果。方法将30例不同类型的组织块随机分为实验组与对照组,实验组用微波固定,对照组用10%福尔马林液固定,行常规及免疫组化制片,观察制片时间及制片质量。结果实验组的常规制片效果及免疫组化制片效果均与对照组差异无统计学意义(P>0.05),但大大缩短了固定时间。结论以微波技术进行固定是常规病理切片及免疫组化制片较实用的固定方法。     

人体内耳冰冻切片免疫组织化学染色技术探讨

目的 通过对人内耳冰冻切片免疫组织化学染色制作过程中防脱片和抗原修复方法的探讨,寻找获得满意染色效果的最佳技术方法。 方法 取无已知耳科疾病的尸检颞骨标本,经取材、固定、脱钙、脱水、包埋后,行冰冻切片,-20 ℃冷冻保存。染色前的防脱片处理分为Ⅰ组(后固定组)、Ⅱ组(烤片组)和Ⅲ组(后固定联合烤片组)。处理后,每组再行抗原修复,分别分为A组(热修复组)、B组(酶消化组)和C组(Triton组)。应用间接荧光免疫组织化学技术检测WARP、NF200、CD68及IBA1这4种抗体在各组中的表达,激光共聚焦显微镜下观察,并对其脱片情况进行结果分析。 结果 在防脱片处理的3组中,Ⅲ组(后固定联合烤片组)的防脱片效果最佳,基本无脱片现象。抗原修复的3组中,A组和C组的抗原修复作用较为满意,B组修复作用不佳,且对组织的细胞结构产生了破坏作用。 结论 应用后固定联合烤片法防止脱片和应用热修复或Triton进行抗原修复在本研究中取得了良好的效果,适当的防脱片处理和抗原修复方法对提高内耳冰冻切片免疫组织化学染色的敏感性和制片质量起着至关重要的作用。     

吗啡类毒品中毒死亡者免疫组化染色观察

目的观察吗啡类毒品中毒死亡者不同组织的形态学及免疫组化改变。方法选取山西医科大学法医学院标本室内2例吗啡类毒品中毒死亡者作为实验组,1例冰毒中毒死亡者作为对照组,分别取心、脑、肺、肠组织进行HE染色,应用免疫组化SABC（Strept Avidin-Biotin Complex）法对各组类胰蛋白酶、类糜蛋白酶及黏附分子进行染色观察。结果吗啡中毒死亡者检材中HE染色观察到心肌纤维溶解、断裂,心肌细胞紊乱、水肿及纤维化;脑水肿,伴局灶性出血;明显肺水肿等病理表现。类胰蛋白酶、类糜蛋白酶及ICAM-1、VCAM-1免疫组化染色呈阳性表达,以肺及心肌组织为著。冰毒中毒死亡者检材免疫组化染色未见明显阳性颗粒。结论急性吗啡类毒品中毒死亡的主要表现与吗啡类药物引起的非变态反应性过敏反应中,肥大细胞脱颗粒释放类胰蛋白酶诱发肺泡基底膜降解、类糜蛋白酶促进心肌重塑等作用有关,而黏附分子表达升高对增强血管内炎症细胞附着与浸润发挥重要作用。     

一种可显示两种不同类型胶原的双重免疫组化染色

采用ＡＢＣ法（或ＰＡＰ法）和ＳＡＢＣ法的免疫酶双重标记染色法，能在同一张组织切片上先后显示，同时观察两种不同类型胶原成分。。其反应生成物颜色鲜艳，对比度好，尤其适用于观察同一病变组织中不同类型胶原的分类及含量的变化，对比较观察极为有利。     

全自动免疫组织化学染色技术的应用

目的：探讨全自动免疫组织化学染色技术在基层医院的应用。方法：随机选取常见肿瘤50例,经包埋、切片后分为2组,分别采用全自动免疫组化机与手工操作2种免疫组化染色方法,显微镜下观察染色结果。结果：免疫组化机染色的组织定位准确,染色强度强,背景清晰,未见切片边缘着色现象。而手工染色虽然组织定位准确,但染色强度强弱不一,背景不清晰,存在非特异性染色,切片边缘着色现象较多,两者比较有显著性差异,均P〈0．05。结论：全自动免疫组织化学染色技术比手工操作染色效果好,易于做到染色标准化。     

制作临床快速冰冻切片的质量控制

目的 :探讨冰冻切片的制作、HE染色和免疫组化的标准化实验方法 ,达到质量控制标准。方法 :详细介绍了冷冻切片的方法、影响因素、标准化与质量控制及其在临床快速病理诊断的 HE和免疫组织化学染色方法。结果 :经此方法制备的冷冻切片组织结构完整、细胞染色清晰、境界清楚、核质分明、对比度好 ,无刀痕、皱折、重叠、冰晶、切片平整、厚薄均匀一致等。结论 :可为临床快速病理诊断的 HE染色、脂肪黏液染色、酶组织化学、免疫组织化学、免疫荧光、核酸原位杂交以及原位 PCR等病理诊断与研究提供优质冷冻切片     

细胞块切片免疫组化染色在胸腔积液病理诊断中的应用

目的 探讨细胞块切片免疫组化染色应用于胸腔积液病理诊断的临床效果.方法 选择本院收治的60例胸腔积液患者作为研究对象,分别采用细胞块切片免疫组化染色检测和常规细胞涂片检测,检测患者的CK7、CD15、MOC-31、BerEP4、TTF-1、CEA、Calretinin、WT-1、CK5/6、Desmin等指标表达,对鉴别诊断肺腺癌和间皮病变的相关免疫标记组化进行筛选.结果 两组胸腔积液的阳性检出率相比,P＜0.05.细胞块切片免疫组化染色检测分型诊断恶性胸腔积液的符合率高达96.67％,经过组合性抗体检测发现,间皮病变呈现Calretinin、WT-1、CK5/6、Desmin指标高表达,而肺腺癌则呈现CK7、CD15、MOC-31、BerEP4、TTF-1、CEA指标高表达,显示细胞块切片免疫组化染色检测明显优于常规细胞涂片检测（P＜0.01）.结论 在适当的抗体组合下,胸腔积液细胞块切片结合免疫组化染色检测对肺腺癌和间皮瘤等恶性胸腔积液具有非常的病理鉴别诊断效果,值得临床推广.     

淋巴组织免疫组织化学染色方法的探讨

目的:鉴于病理淋巴组织的切片常见组织较硬、细胞脆性大,免疫组织化学染色显色模糊,甚至出现假阴性现象,探讨淋巴组织制片与免疫组化染色的新方法与新思路。方法:采用B-5固定液、软化剂的处理进行石蜡切片、免疫组织化学染色方法进行染色。结果:制出背景清晰、定位准确、反差分明、效果较好的免疫组化染色淋巴组织切片。结论:经B-5固定液固定、软化剂处理过的淋巴组织免疫组化切片能为淋巴组织疾病诊断提供定位准确、阳性明显的抗原表达信息。     

肿瘤组织与正常组织对比切片在病理实验教学中应用

目的探讨肿瘤组织与正常组织对比切片在病理实验教学中的应用价值。方法分别应用常规染色(HE染色)、特殊染色和免疫组化技术,对50例肿瘤组织及相应的正常组织标本进行染色。结果镜下观察切片正常组织与肿瘤组织3种染色对比明显,HE染色切片可见肿瘤组织细胞的形态、排列与正常组织明显不同,癌细胞胞核大而不规则,核质比例变小;特殊染色可见正常组织与肿瘤组织的弹性纤维、网状纤维及胶原纤维的分布和含量不同;免疫组化染色可见正常组织不或极低表达P53和增殖细胞核抗原(PCNA),CD34阳性标记细胞少、规则,肿瘤组织P53和PCNA表达显著增多,CD34阳性标记细胞多,且分布、排列等不同于正常组织。结论肿瘤组织与正常组织对比切片易于观察、比较和分析,提高了病理学实验教学的效果。     

喉癌中PTTG的表达及其与bFGF和微血管密度的关系

目的探讨喉癌中PTTG、bFGF的表达以及在新生血管生成过程中的作用。方法应用免疫组化SP法分别检测57例喉癌、26例癌旁和9例正常喉黏膜中PTTG、bFGF蛋白的表达,用CD34标记并计数肿瘤内微血管密度。结果喉癌中PTTG蛋白和bFGF蛋白表达率分别为84.2%和78.9%,明显高于癌旁及正常喉黏膜的表达率（P〈0.05）。PTTG的表达与肿瘤分化程度、临床分期相关和淋巴结转移差异有统计学意义（P〈0.05）,bFGF的表达与肿瘤分化程度和淋巴结转移差异有统计学意义（P〈0.05）,与临床分期差异无统计学意义（P〉0.05）。两者的表达均与患者年龄、性别和肿瘤原发部位差异无统计学意义（P〉0.05）,且两者之间呈显著正相关（P〈0.05）。喉癌中MVD值明显大于癌旁和正常喉黏膜（P〈0.05）,并与淋巴结转移显著相关（P〈0.05）,MVD分别与PTTG和bF-GF的表达相关（P〈0.05）。结论PTTG和bFGF的表达与喉癌的临床病理学特征密切相关,二者的检测将有助于喉癌的诊断、评估喉癌患者的恶性程度。