基于1H-NMR结合GC-MS评价沉香挥发油品质

目的 分析不同树种来源的国产和进口沉香，经水蒸气蒸馏法制取挥发油前后化学组成的变化规律，评价沉香挥发油品质。方法 建立¹H-NMR指纹图谱，通过化学位移等信息指认代谢物，¹H-NMR图谱分段积分后以峰面积为变量进行化学模式识别。建立GC-MS指纹图谱，鉴定并通过峰面积归一法确定各化学成分及其相对含量，以GC-MS全谱碎片信息为变量进行化学模式识别。结果 沉香挥发油及其原药材¹H-NMR指纹图谱分别指认24，20个代谢产物，GC-MS指纹图谱分别检出64，112个代谢产物，均按树种来源分为国产和进口2类。沉香原药材经水蒸气蒸馏提取挥发油后，倍半萜类成分相对含量上升，α-愈创木烯、沉香螺醇对沉香挥发油的分组贡献大，茅苍术醇、苄基丙酮、γ-蛇床烯对沉香挥发油的分组贡献小。结论 同一提取工艺条件下，沉香原药材树种来源可影响其挥发油品质，国产和进口沉香挥发油的质量标志物可为其品质评价提供基础数据。     

国产沉香资源开发利用及化学成分研究进展

沉香为白木香Aquilaria sinensis(Lour.)Gilg含树脂的木材,是逾百种中成药的主要组方原料,用于治疗消化、呼吸、心脑血管、风湿等科的疾病。沉香药材主含挥发性(倍半萜类化合物)、2-(2-苯乙基)色酮类等成分;白木香叶具抗肿瘤和清除自由基活性;果皮具抗肿瘤活性;种子主含棕榈酸和油酸等脂肪酸,具有一定的抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)活性。沉香药材及白木香其他部位均具有非常高的药用开发价值。本文查阅了近15年国内外有关国产沉香药材的研究文献资料,对国产沉香药材资源开发利用、化学成分及药理活性研究作系统的归纳总结,为其新药开发及资源的综合开发利用提供参考。     

消乳散结胶囊联合他莫昔芬治疗乳腺增生症的疗效观察

目的 研究瑞香狼毒Stellera chamaejasme花中黄酮和木脂素类化学成分及其抗氧化活性,分析构效关系。方法 利用大孔吸附树脂、正反相硅胶、Sephadex LH-20等色谱分离材料,通过柱色谱和高效液相色谱等分离方法进行分离纯化,运用核磁共振（NMR）、质谱（MS）等波谱技术鉴定化合物结构,并采用FRAP法、DPPH法和ABTS法对分离得到的化合物进行体外抗氧化活性测试。结果 从瑞香狼毒花甲醇提取物中分离鉴定了12个化合物,分别鉴定为艾黄素（1）、槲皮素（2）、isoscutellarein-8-O-β-D-glucuronopyranoside（3）、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷（4）、紫云英苷（5）、hypolaetin-8-O-β-D-glucuronopyranoside（6）、kaempferol 3-O-β-D-glucopyranosyl-（1→2）-O-α-L-xylopyranoside（7）、rel-（3R,3''S,4R,4''S）-3,3'',4,4''-tetrahydro-6,6''-dimethoxy[3,3''-bi-2H-benzopyran]-4,4''-diol（8）、马台树脂醇（9）、乌拉尔醇（10）、环黄芪醇（11）、松脂醇（12）。抗氧化活性实验表明,黄酮和木脂素类化合物均显示了较强的抗氧化活性。结论 化合物1、3、5～7和10为首次从该植物中分离得到;化合物2、4、5和10表现出显著的抗氧化活性,其中黄酮类化合物C-3或C-8位连有糖链会降低其抗氧化活性。     

复方丹参浸膏中低聚糖成分的分离与结构鉴定

目的 研究复方丹参浸膏中的低聚糖化学成分。方法 采用固相萃取、聚丙烯酰胺凝胶色谱、亲水作用色谱（HILIC）-高效液相色谱（HPLC）-蒸发光散射检测器（ELSD）等技术,对复方丹参浸膏中的低聚糖成分进行分离纯化,并根据理化性质和波谱学手段进行结构鉴定。结果 通过方法优化,成功分离得到了5个低聚糖成分,通过波谱分析鉴定,5个低聚糖成分分别为α-D-吡喃半乳糖-(1→6)-α-D-吡喃半乳糖-(1→6)-α-D-吡喃葡萄糖-(1→2)-α-D-呋喃果糖（1）、α-D-吡喃葡萄糖-(1→2)-β-D-呋喃果糖-(1→1)-α-D-吡喃半乳糖（2）、蔗糖（3）、果糖（4）和葡萄糖（5）。结论 化合物1、2为首次在复方丹参浸膏中分离得到。     

百蕊草亲水性化学成分研究

目的 对百蕊草中亲水性化学成分进行研究。方法 采用硅胶柱色谱、SephadexLH-20凝胶柱色谱等分离手段,对百蕊草水提取物经AB-8大孔树脂吸附,50%乙醇洗脱的亲水性组分（TT50）进行分离纯化,应用核磁共振波谱分析、结合文献报道鉴定化合物结构。结果 从TT50中分离纯化得到6个化合物,分别鉴定为：山奈酚（1）,紫云英苷（2）,山奈酚-3,7-二-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（3）,山奈酚-3-O-L-吡喃鼠李糖基（1→2）-β-D-吡喃葡萄糖苷（4）,山奈酚-3-O-L-吡喃鼠李糖基（1→2）-［6-O-乙酰基］-β-D-吡喃葡萄糖苷（5）,芸香苷（6）。结论 TT50中主要成分为以山奈酚为母核的黄酮苷类化合物,化合物4、5为首次从百蕊草中分离得到。     

平消胶囊联合左甲状腺素钠治疗结节性甲状腺肿的临床研究

目的 对狭叶薰衣草Lavandula angustifolia中的木脂素类化合物进行研究。方法 运用RP-HPLC、TLC、硅胶、凝胶、MCI-gel树脂等方法进行分离纯化,并根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。结果 从狭叶薰衣草中分离得到11个木脂素类化合物,分别鉴定为松脂醇（1）、丁香树脂醇（2）、fraxiresinol-4''-O-β-D-glucopyranoside（3）、syringaresinol-4''-O-β-D-glucopyranoside（4）、8-hydroxypinoresinol-4-O-β-D-glucopyranoside（5）、rel-（2α,3β）-7-O-methylcedrusin（6）、落叶松脂醇-4''-O-β-D-葡萄糖苷（7）、（2S,3R）-2,3-dihydro-2-（4-hydroxy-3-methoxyphenyl）-3-hydroxymethyl-7-methoxybenzofuran-5-（trans） propen-1-ol-3-O-β-glucoside（8）、（7S,8R）-dihydrodehydrodiconiferyl alcohol-9-β-D-glucopyranoside（9）、（7R,8R）-7,8-dihydro-9''-hydroxyl-3''-methoxyl-8-hydroxymethyl-7-（4-hydroxy-3-methoxyphenyl）-1''-benzofuranpropanol-9''-O-β-D-glucopyranoside（10）、（E）-3-（（2S,3S）-2-（4-hydroxy-3-methoxyphenyl）-3-hydroxymethyl-7-methoxy-2,3-dihydrobenzofuran-5-yl） allyl-2-hydroxyacetate（11）。结论 11个化合物均首次从狭叶薰衣草中分离得到。     

糙叶败酱乙酸乙酯部位的化学成分研究

目的 研究糙叶败酱乙酸乙酯部位的化学成分。方法 利用硅胶及Sephadex LH-20凝胶柱色谱对其化学成分进行分离、纯化,根据理化性质及波谱数据进行结构鉴定。结果 从糙叶败酱水提取物的乙酸乙酯萃取部位分离得到11个化合物,分别为7α-甲氧基莫罗苷（1）、7β-甲氧基莫罗苷（2）、1-辛醇（3）、2,3-壬烯烃（4）、lariciresinol（5）、Jatamanin J（6）、落叶松脂醇-4-O-β-D-葡萄糖苷（7）、黄花败酱醇（8）、Jatamanin A（9）、Scabroside A（10）、十六烷酸-α-单甘油酯（11）。结论 化合物1~4为首次从该植物中分离得到,其中化合物3,4为首次从败酱科败酱属植物中分离得到。     

海绵共附生菌Streptomyces sp. LHW2432的次级代谢产物研究

目的 从海绵共附生菌Streptomyces sp. LHW2432的发酵产物中发现药用活性分子。方法 采用正向硅胶柱、ODS反向柱以及高效液相色谱分离技术,对LHW2432的发酵萃取物进行分离纯化;通过现代波谱技术和文献调研确定化合物结构;利用平板涂布法和微量稀释法,评价化合物对芽胞杆菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）、耻垢分支杆菌、白色念珠菌和大肠杆菌的抑菌活性。结果 从LHW2432发酵物中共分离鉴定了5个化合物：descycloavandulyl-lavanduquinocin (1)、N-acetyltyramine (2)、phomapyrone C (3)、germicidin A (4) 和germicidin I (5)。化合物1对MRSA和耻垢分支杆菌的最小抑菌浓度（MIC）值分别为100和64 μg/ml。结论 从LHW2432菌中分离得到5个化合物,其中,化合物1是新天然产物,可作为神经保护活性三环咔唑类生物碱的合成前体,其对G⁺菌有微弱的抑制活性。     

复方石韦片的质量控制

目的：研究北鹤虱(天名精的果实)的化学成分。方法：通过各种色谱手段（silica gel、ODS、HPLC）对北鹤虱甲醇提取物的二氯甲烷层进行分离纯化,通过¹H-NMR、¹³C-NMR等波谱技术确定化合物的结构。结果：分离并鉴定了5个倍半萜类化合物,分别为特勒内酯（1）、3-epiisotelekin（2）、11β,13-dihydro-1-epi-inuviscolide（3）、天名精内酯酮（4）、天名精内酯醇（5）。结论：化合物2、3为首次从天名精属植物分离得到。     

蜘蛛香的化学成分研究

目的：研究蜘蛛香Valeriana jatamansi的化学成分。方法：通过各种色谱手段（Silica gel、ODS、HPLC）对蜘蛛香甲醇提取物进行分离纯化,通过¹H-NMR、¹³C-NMR等波谱技术确定化合物的结构。结果：分离并鉴定了4个含氯元素的环烯醚萜类化合物,分别为rupesin B（1）、chlorovaltrate（2）、volvaltrates B（3）、1,5-dihydroxy-3, 8-epoxyvalechlorine A（4）。结论：化合物1～3为首次从植物蜘蛛香中分离得到。     

常见肝损伤动物模型构建和应用的研究状况

肝是机体生物转化的最主要器官,对于维持机体的生命活动发挥着重要作用.因此肝损伤会对机体造成严重伤害,轻则引发脂肪肝,持续性加重将诱导肝纤维化和肝硬化,最终导致肝衰竭或肝癌,严重危及人体生命健康.对此,建立与临床肝损伤的病理生理过程及发病程度相似的动物模型对于更好地探究肝损伤患者的发病机制及临床治疗方法就具有十分重要的意...     

肝损状态下尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶研究进展

肝脏是人体内最重要的代谢器官,包含绝大部分的Ⅰ相和Ⅱ相代谢酶,在内源性和外源性物质的代谢解毒方面起着重要的作用.参与葡萄糖醛酸代谢的尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(UGT)是Ⅱ相代谢中最重要的酶,与常见的CYP450酶相比,研究相对滞后,尤其在肝损伤状态下UGT的相关研究仍处于探索阶段.本文参考最新UGT的研究成果,综述了UGT分子生物学目前研究的概况、肝脏分布及其与肝脏疾病的关系;总结了几种不同诱因的肝损伤病理状态UGT表达和葡萄糖醛酸代谢的变化情况并且深入探讨了相关机制,旨在为药物的肝脏代谢尤其是在肝损状态下葡萄糖醛酸结合消除研究提供一定的参考依据,为肝脏疾病患者的临床合理用药提供指导.     

吲哚菁绿 15 min 滞留率在肝储备功能评估中的价值探讨

目的 探讨吲哚菁绿 15 min 滞留率（ICGR15）评估肝储备功能的价值。 方法 肝病患者 185 例, 其中肝衰竭组 45 例、肝硬化组 90 例（Child A、B 及 C 分别为 16、26 及 48 例）、急性肝炎组 20 例、慢性肝炎组（轻、中度）30 例。 比较各组的 ICGR15 表达水平差异。 比较肝衰竭组治疗前及治疗后 1 个月时 ICGR15、总胆红素（TBIL）、白蛋白（ALB）、凝血时间（PT）的变化。 急性肝炎组治疗前及治疗后 1 个月丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、 TBIL 及 ICGR15 水平的变化。 结果 肝衰竭组、肝硬化组、急性肝炎组、慢性肝炎组 ICGR15（%）分别为 56.3±14.7、 28.9±9.6、 22.4±6.8、 13.7±2.3, 呈逐渐下降趋势（F=125.317, P＜ 0.05）。 其中 , 肝硬化组 Child A 、 B 及 C 级别组 ICGR15（%）水平分别为 17.3±5.4、25.7±7.5、34.5±7.3, 呈逐渐升高趋势（P＜ 0.05）。 治疗后１个月时, 肝衰竭组 TBIL、 PT 及 ICGR15 均低于治疗前, 急性肝炎组 ALT、AST、TBIL 及 ICGR15 均低于治疗前（P＜ 0.05）。 结论 ICGR15 可以反映肝功能储备情况, 且不受 ALB、鲜血浆应用的影响, 弥补了 ALB、PT 检查的不足。     

人工肝支持系统在各型重型肝炎治疗中的应用

目的 探讨人工体外支持系统在重型肝炎治疗中的疗效及其影响疗效的因素。方法 采用血浆交换仪进行血浆交换和胆红素吸附治疗各型重型肝炎患75例,共141例次。结果 75例重型肝炎患经血浆置换和/或胆红素吸附治疗后临床症状得到一定程度的改善,血清胆红素从平均495.6umol/L降至256.7unol/L,凝血酶原活动度从26.9%提高至54.3%。人工肝支持治疗后总生存率为58.6%(44/75）,但该疗法对早期慢性重型肝炎疗效最佳,其存活率达86.2%(25/29）。肝肾综合征对该治疗效果影响最大,出现该并发症的患病死率高达82.6%(19/23）。结论 人工肝支持治疗对重型肝炎病情的改善、存活率的提高、黄疸的消退、凝血功能的改善均有肯定的疗效;该治疗对早期慢性重型肝炎疗效较好。     

复方中药对肝星状细胞胶原合成与降解的影响

目的观察中药复方丹参对肝星状细胞胶原合成与降解的影响.方法选择肝星状细胞系作为体外研究对象,MTT法观察药物对细胞增殖的影响,ELISA法检测细胞上清液Ⅰ、Ⅲ、V型胶原含量,RNA-cDNA分子杂交检测细胞内Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原及TGF β1 mRNA稳态水平.逆转录多聚酶链反应检测间质胶原酶及金属蛋白酶组织抑制因子-1基因表达水平.结果中药复方丹参明显抑制肝星状细胞增殖且呈剂量依赖趋势,与对照组比较,中药组细胞上清液中Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原含量明显降低,细胞内Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原及TGF β1 mRNA稳态水平明显降低,间质胶原酶基因表达水平明显增强,金属蛋白酶组织抑制因子-1基因表达水平明显受到抑制(P＜0.01).结论中药复方丹参可能通过抑制肝星状细胞的增殖,抑制胶原的异常合成,促进异常沉积胶原的降解,从而起到抗肝纤维化的作用.     

海狗油保肝作用的实验研究

目的：观察海狗油对化学毒物所致小鼠、大鼠急性肝损伤及对长期喂食高脂饲料大鼠的影响。方法：实验分为6组(n=10)：即空白组、模型组、阳性药组、海狗油低、中、高剂量组。化学毒物乙硫氨酸或四氯化碳致急性肝损伤实验：小鼠和大鼠各组分别灌胃(ig)给供试药9d或7d；d7ig DL-乙硫氨酸，实验结束时测定肝脂；d6ip四氯化碳，实验结束时测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和组织学检查。长期喂食高脂饲料大鼠实验：于实验d1一次性皮下注射小剂量四氯化碳并长期喂食高脂饲料造成脂肪肝模型大鼠，同时各组分别ig供试药，每天1次，连续10周后，称肝脏重量并计算肝脏系数，测定血脂、肝脂、脂质过氧化指标和组织学检查。结果：对乙硫氨酸致急性肝损伤的小鼠和大鼠ig给予海狗油(小鼠7．2 g·kg~(-1)，大鼠4．8g·kg~(-1))后，与模型组比较甘油三酯(TG)分别降低23％和16％(P＜0．01)；对四氯化碳致急性肝损伤的大鼠，海狗油4．8mg·kg~(-1)组使ALT降低24％(P＜0．01)、AST降低16％(P＜0．01)。长期喂食高脂饲料大鼠，与模型组比较，海狗油4．8mg·kg~(-1)组血清总胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA)、肝重量及肝细胞内TG、TC、FFA和丙二醛(MDA)含量显著降低(P＜0．01)，超氧化物歧化酶(SOD)活性升高(P＜0．01)，组织学检查显示肝细胞内脂变程度减轻，脂滴减少。结论：海狗油对化学毒物所致急性肝损伤的肝细胞有保护作用，对脂肪肝的形成具有明显的预防作用。     

Overdose pattern and outcome in paracetamol-induced acute severe hepatotoxicity

AIMS

Paracetamol (acetaminophen) hepatotoxicity is the commonest cause of acute liver failure (ALF) in the UK. Conflicting data regarding the outcomes of paracetamol-induced ALF resulting from different overdose patterns are reported.

METHODS

Using prospectively defined criteria, we have analysed the impact of overdose pattern upon outcome in a cohort of 938 acute severe liver injury patients admitted to the Scottish Liver Transplantation Unit.

RESULTS

Between 1992 and 2008, 663 patients were admitted with paracetamol-induced acute severe liver injury. Of these patients, 500 (75.4%) had taken an intentional paracetamol overdose, whilst 110 (16.6%) had taken an unintentional overdose. No clear overdose pattern could be determined in 53 (8.0%). Unintentional overdose patients were significantly older, more likely to abuse alcohol, and more commonly overdosed on compound narcotic/paracetamol analgesics compared with intentional overdose patients. Unintentional overdoses had significantly lower admission paracetamol and alanine aminotransferase concentrations compared with intentional overdoses. However, unintentional overdoses had greater organ dysfunction at admission, and subsequently higher mortality (unintentional 42/110 (38.2%), intentional 128/500 (25.6%), P < 0.001). The King''s College poor prognostic criteria had reduced sensitivity in unintentional overdoses (77.8%, 95% confidence intervals (CI) 62.9, 88.8) compared with intentional overdoses (89.9%, 95% CI 83.4, 94.5). Unintentional overdose was independently predictive of death or liver transplantation on multivariate analysis (odds ratio 1.91 (95% CI 1.07, 3.43), P= 0.032).

CONCLUSIONS

Unintentional paracetamol overdose is associated with increased mortality compared with intentional paracetamol overdose, despite lower admission paracetamol concentrations. Alternative prognostic criteria may be required for unintentional paracetamol overdoses.     

Novel findings for the development of drug therapy for various liver diseases: Current state and future prospects for our liver regeneration therapy using autologous bone marrow cells for decompensated liver cirrhosis patients

We have developed an in vivo mouse model [the green fluorescent protein (GFP) / carbon tetrachloride (CCl(4)) model] and reported that infused GFP-positive bone marrow cells administered via a tail vein efficiently repopulated cirrhotic liver tissue under conditions of persistent liver damage induced by CCl(4). Moreover, bone marrow cells infused into the liver improved liver function and ameliorated liver fibrosis with higher expression of matrix metalloproteinase 9 (MMP-9), consistent with improved survival rate. Based on these findings, we started a multicenter clinical trial of autologous bone marrow cell infusion (ABMi) therapy for decompensated liver cirrhosis patients and demonstrated the efficacy of this approach without unexpected complications. However, this therapy involves bone marrow aspiration under general anesthesia and is not indicated for patients for whom general anesthesia is difficult. We therefore aimed to develop a new liver regeneration therapy in which cells having a curative effect on liver cirrhosis are isolated and cultured from a small amount of autologous bone marrow aspirated under local anesthesia and infused back into the same subject. Herein, we present results for the GFP/CCl(4) model and ABMi therapy and future prospects for a new liver regeneration therapy.     

Staggered overdose pattern and delay to hospital presentation are associated with adverse outcomes following paracetamol-induced hepatotoxicity

AIMS

Paracetamol (acetaminophen) poisoning remains the major cause of severe acute hepatotoxicity in the UK. In this large single centre cohort study we examined the clinical impact of staggered overdoses and delayed presentation following paracetamol overdose.

RESULTS

Between 1992 and 2008, 663 patients were admitted with paracetamol-induced severe liver injury, of whom 161 (24.3%) had taken a staggered overdose. Staggered overdose patients were significantly older and more likely to abuse alcohol than single time point overdose patients. Relief of pain (58.2%) was the commonest rationale for repeated supratherapeutic ingestion. Despite lower total ingested paracetamol doses and lower admission serum alanine aminotransferase concentrations, staggered overdose patients were more likely to be encephalopathic on admission, require renal replacement therapy or mechanical ventilation and had higher mortality rates compared with single time point overdoses (37.3% vs. 27.8%, P = 0.025), although this overdose pattern did not independently predict death. The King''s College poor prognostic criteria had reduced sensitivity (77.6, 95% CI 70.8, 81.5) for this pattern of overdose. Of the 396/450 (88.0%) single time point overdoses in whom accurate timings could be obtained, 178 (44.9%) presented to medical services >24 h following overdose. Delayed presentation beyond 24 h post overdose was independently associated with death/liver transplantation (OR 2.25, 95% CI 1.23, 4.12, P = 0.009).

CONCLUSIONS

Both delayed presentation and staggered overdose pattern are associated with adverse outcomes following paracetamol overdose. These patients are at increased risk of developing multi-organ failure and should be considered for early transfer to specialist liver centres.