新型快速中药材DNA提取方法的探索与应用

目的建立一种无设备快速30 s提取中药材DNA的方法。方法使用常规定性滤纸作为核酸吸附的载体,通过裂解液的裂解,释放核酸并吸附在滤纸上,利用洗脱液进行核酸纯化,即可完成不到30s的整个核酸提取过程,吸附核酸的滤纸可直接放入反应体系进行扩增。结果此方法可以成功提取不同药用部位的中药材核酸,提取得到的核酸经扩增验证,可获得与传统提取方法相一致的检测结果。结论此新型快速中药材DNA提取方法简单易行、速度快、成本低,可使核酸提取变得越来越大众化,不再局限于专业人员和实验室环境,为分子生药学的应用和发展提供了新思路。     

含淀粉及多糖类中药材DNA的提取方法研究

DNA分子标记技术已广泛用于中药材研究领域中,如药用植物亲缘与进化关系、分类和鉴定、道地药材的研究等,这些工作多需提取高质量的基因组DNA。但由于中药材多为干品,其含有大量的次生代谢产物,特别是淀粉、多糖等物质严重影响了DNA的提取,常规方法均很难直接从含大量淀粉以及多糖的干燥中药材中提取理想的DNA。本研究拟在常规的CTAB法的基础上[1],通过选取具有代表性的样品来探索一种从含淀粉及多糖类中药材中提取DNA的简单、     

适合中药材DNA条形码分析的DNA提取方法的研究

目的 建立适合中药材DNA条形码分析的DNA提取方法.方法 以6种富含次生代谢物质的药用顽拗植物为材料,对7种DNA提取方法进行比较.结果 CTAB法3对中药材具有通用性,操作简便、快速,提取的DNA浓度和合格率比其他对照方法高,能满足DNA条形码PCR扩增的要求.该方法主要特点:(1)用3%的CTAB浓度代替常用的2%CTAB;(2)采用1%的PVP与0.2%β-巯基乙醇共同去除杂质和防止DNA降解;(3)采用10000 r/min离心15 min去除蛋白质等杂质.结论 CTAB法3是适合中药材DNA条形码研究的DNA提取方法.     

中药材DNA分子标记研究的技术问题 Ⅰ.植物药基因组DNA的提取

随着DNA分子标记技术在中药中的广泛应用,快速有效地将材料中的DNA提取出来成为研究的关键步骤。综述了90年代以来文献报道的针对提取过程中出现的各种问题所采取的相应措施,主要涉及如何去除提取材料中的酚类和多糖类杂质。     

DNA分子遗传标记技术在中药材鉴定领域的应用

上世纪90年代，DNA遗传标记技术已经应用在中药材鉴定领域，现在随着PCR(Ploymorase Chain Reaction)技术的发展，以分子遗传标记进行物种鉴别得到了更广泛的应用。     

中药材种子DNA条形码鉴定研究进展

种子是中药产业的源头,中药材种子的准确鉴定不仅关系到中药材的真伪,更关系到中药的安全性和有效性。由于多数中药材种子体积较小、内含物丰富、形态特征易受种子成熟度和环境条件的影响,难以通过传统方法进行有效鉴定。DNA条形码技术利用一段标准的DNA序列从基因层面对物种进行鉴定,不受环境等外部因素影响,具有通用、快速、准确等特点,逐渐成为中药材种子鉴定的研究热点。简述了DNA条形码技术在中药材种子鉴定中的研究现状,分析了中药材种子DNA条形码鉴定的技术要点,总结了不同类型中药材种子进行DNA条形码鉴定的原则,并提出了利用宏条形码技术鉴定市售混合中药材种子的研究方法,为中药材种子鉴定提供新的研究思路。     

中药材DNA条形码鉴定的基因序列比较

该文综述了中药材DNA条形码的研究现状,在此基础上分析了叶绿体基因和核基因在中药材系统进化及鉴定中的优缺点。ITS序列在植物中进化速率较快,适合属、种等较低分类阶元的系统关系研究,而ITS2更适合于中药材的鉴定。因此,中药材系统进化与鉴定研究应当根据研究问题选择相应DNA条形码序列。随着测序成本不断下降,叶绿体全基因组条形码在药用植物鉴定中的应用将更卓有成效。     

中药DNA条形码鉴定中的DNA提取方法研究

目的：建立一种直接从药材中提取DNA的方法以满足中药材DNA条形码研究的需要。方法: 以麦冬药材为实验对象,对比5种常用植物DNA提取方法,筛选出最优方法后,对不同部位入药的10种中药材进行DNA提取,采用琼脂糖凝胶电泳及PCR扩增效果进行检测。结果：改良的CTAB法较适合药材DNA提取,虽然所有样品DNA都出现降解,但基于ITS2序列引物PCR扩增成功率为90%。结论：通过增加药材的预处理、核分离液等步骤,并改良CTAB浓度等措施,CTAB法能够用于上述不同药用部位入药的9种药材DNA提取,可以为中药DNA条形码鉴定中的DNA提取提供参考。     

中药材DNA条形码分子鉴定指导原则

随着中药材DNA条形码分子鉴定方法研究的深入与普及,国家药典委员会讨论通过在《中国药典》增补本中列入中药材DNA条形码分子鉴定指导原则,该指导原则通过对大样本量中药材进行DNA条形码分子鉴定研究,建立以ITS2为核心,psbA-trnH为辅的植物类药材DNA条形码鉴定体系和以COI为主、ITS2为辅的动物类药材DNA条形码鉴定体系.该文介绍了中药材DNA条形码分子鉴定指导原则及其起草说明,并对该原则在中药材鉴定方面的应用前景进行展望.     

中药材中农药残留提取方法比较研究

目的比较加速溶剂萃取、超声提取和索氏提取法3种常用提取方法对中药材中残留农药的提取差异。方法用加速溶剂萃取、超声提取和索氏提取分别对含有已知农药残留的中药材进行残留农药提取,经浓硫酸磺化、弗罗里硅土柱净化和凝胶渗透色谱3种净化方法,采用HP-5毛细管色谱柱分离样品,气相色谱-电子捕获检测器测定其农药残留的含量,外标法定量。结果超声提取的提取率显著低于索式提取、加速溶剂萃取(P0.05),加速溶剂萃取与索式提取的提取率差异无统计学意义(P0.05),3种净化方法回收率两两比较差异无统计学意义(P0.05)。结论加速溶剂萃取的提取率最高,其次为索氏提取,超声提取最低。检测者应根据需要选取不同的提取方法。     

优质中药材栽培合理施肥探讨

优质中药材合理施肥相关研究及标准缺乏,是制约中药现代化及国际化的关键瓶颈问题之一。本文对目前农业上的施肥现状及相关标准进行了整理,根据无公害、绿色、有机农业对肥料质量及施肥技术的 相关标准要求,提出优质中药材的施肥原则、肥料选择及施肥技术。优质中药材合理施肥原则应遵循有机肥为 主,辅以其他肥料使用,养分最大效率及无害化原则。无公害中药材施肥以有机肥为主,辅以其他肥料使用;绿 色中药材施肥在无公害施肥的基础上,化肥仅允许少量使用;有机中药材肥料必须没有受到重金属、农药及其 他有害化学物质污染且经过无害化处理,禁止施用人工化学合成的各种化肥和含氯肥料,可以施用一些天然的 矿物肥料,限制使用天然矿物来源的土壤调节剂。优质中药材施肥方法应根据药用植物营养生理特点、吸肥规 律、土壤供肥性能及肥料效应,确定肥料的适宜用量和比例及相应的施肥技术。本文为优质中药材合理施肥提 供科学参考。     

中药材二氧化硫残留快速检测方法的建立

目的:建立硫熏中药材中二氧化硫残留的快速检测方法.方法:采用分光测色计进行颜色测定,利用亚硫酸钠与邻苯二甲醛、乙酸铵溶液在一定条件下反应生成带有紫色物质的原理,对20批中药材进行检测,并半定量其二氧化硫残留量.结果:亚硫酸钠加入量与溶液颜色色度在0 ～ 25.23 μg线性关系良好,与标准加入量比对,可确定样品的二氧化硫含量范围.结论:该法简便、快速,灵敏度较高,可为中药材二氧化硫的快速检测及其半定量提供参考.     

中药材中二氧化硫的含量测定

酸蒸馏碘滴定法是测定一般食物中二氧化含量的一个标准检测方法。本文就此法测定中药材中二氧化硫含量的可行性和准确性作出探讨和研究。结果显示酸蒸馏碘滴定法用于中药材中二氧化硫的含量测定有很高的准确性和重现性。本文检验了３０种香港常用药材（共４２个样本）,发现其中有２４个样本中含有二氧化硫,而其中９个样本中的二氧化硫更超出５００μｇ／ｇ。     

中药材贮藏方法探要

从潮解、风化及失油、发霉泛油、虫蛀、变色与气味散失、融化、需要特殊贮藏的中药,论述中药材贮藏方法。指出：须按不同性质、种类、个性进行恰到好处的贮藏保管,以保证用药安全有效。     

中药临床试验中的证候规范化探讨

本文从证候与中药临床试验的紧密联系出发 ,对方证的源流、特点、分类及方证的规范化研究等有关问题作了概括性论述 ,认为方 (药 )证规范化是中药临床试验研究的重要内容和基本法则     

中药临床试验中的证候规范化探讨

本文从证候与中药临床试验的紧密联系出发 ,对方证的源流、特点、分类及方证的规范化研究等有关问题作了概括性论述 ,认为方 (药 )证规范化是中药临床试验研究的重要内容和基本法则。     

显微鉴定在中药质量标准中的应用及进展

显微鉴定具有准确、简便、快速、经济、实用及环保等特点,在中药质量标准中占有重要地位,已被主要国家的药典所采纳。本文从中药显微鉴定的理论基础——显微特征的稳定性与专属性两个方面介绍了中药显微鉴定在各国药典质量标准中的应用情况,并结合多年的研究实践提出中药质量标准中显微鉴定研究的技术路线图。最后,探讨了当前中药显微鉴定面临的挑战及发展方向。     

论中医理论与中药现代化国际化

广义的中医理论应包括高度抽象的基础理论、独到的诊疗技术、丰富实践经验的概括总结,同时浩如烟海的现代相关研究也应涵盖于其中。由于中医理论在中药研究与应用、中药现代化与国际化方面具有重要的指导或提示作用,在新形势下,中医理论的概念和内涵应具有开放性、兼容性和时代性。创新和把握中医理论的概念和内涵,对研究开发现代中药新药,有效应对“洋中药”、“植物药”、“天然药物”、“化学合成药”对我国中药市场的挑战,保护和发展民族医药工业等,具有重要的现实意义。     

试论中医蒙医通用药材比较研究

本文从中医药学和蒙医药学具有较多的通用药材为切入点,从传统医药理论、药物临床应用等方面比较研究,探讨异同之处。本文有助于拓展天然药物临床应用、探索天然药物的药性物质基础,进而开发针对现代疾病谱疗效确切的天然药物新药。     

试论中医蒙医通用药材比较研究

本文从中医药学和蒙医药学具有较多的通用药材为切入点,从传统医药理论、药物临床应用等方面比较研究,探讨异同之处.本文有助于拓展天然药物临床应用、探索天然药物的药性物质基础,进而开发针对现代疾病谱疗效确切的天然药物新药.