精子DNA完整性对男性不育症患者精液常规参数和精子形态的影响

目的:探讨男性不育症患者精子DNA完整性与精子常规参数及形态的相关性。方法:纳入2016年1月至12月于我院就诊的男性不育症患者72例为观察组,同期体检健康男性100例为对照组。采用WLJY-9000型彩色精子质量检测系统检测精液常规参数及精子形态学参数,采用精子染色质扩散法(SCD)分析精子DNA完整性。对比观察组与对照组各检测指标差异。将观察组进一步划分为少精症组(n=16)、弱精症组(n=33)、白细胞精子症组(n=23),对比各小组检测指标的差异。分析观察组中精子DNA完整性与其它指标的相关性。结果:观察组精子浓度、精子存活率、前向运动精子占比、正常形态精子占比、精子DNA完整性均明显低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。少精症组精子浓度最低,弱精症组精子存活率最低,白细胞精子症组前向运动精子占比及正常形态精子占比最低,上述差异均有统计学意义(P0.05)。观察组精子DNA完整性与精子浓度、精子存活率、前向运动精子占比、正常形态精子占比均呈正相关(r=0.398、0.304、0.662、0.404,P均0.01)。结论:不孕症男性精子DNA完整性、精子浓度、精子存活率、前向运动精子占比、正常形态精子占比均明显下降,且精子DNA完整性与后4项观察指标均呈明显正相关。     

血管紧张素Ⅱ对精子运动参数和胞内钙离子的影响

目的:探讨血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)体外对不育症精子运动参数和胞内钙离子的影响。方法:不同浓度的AngⅡ在体外与经上游优化处理的不育症精子分别共同孵育20、40min,采用计算机辅助精子分析(CASA)检测人精子运动参数;荧光分光光度计检测胞内游离Ca2 荧光强度的变化。结果:AngⅡ(10nmol/L和100nmol/L)在体外能显著提高不育症精子活率及运动参数(p<0·05),并激发胞内Ca2 快速升高(p<0·001);Losartan(AngⅡ受体AT1拮抗剂)、EGTA可以明显阻断和抑制这些过程。结论:AngⅡ在体外可以显著增高不育症患者精子的运动参数,其结果可能是通过人精子膜上的AT1受体结合作用后使胞外Ca2 内流而实现的。     

异氟烷对人精子运动功能和顶体反应影响研究

目的:观察异氟烷对人精子运动功能、体外获能以及精子顶体反应的影响,对有生育要求的男性提供临床用药依据。方法:收集我院男科门诊就诊的男性精子标本,从中筛选出18份活力正常精子的精液作为标本,每例精液均分成3份,分别放置于3个试管中,分别给予1.1%异氟烷(ISO1组)、2.2%异氟烷(ISO2组)和空气作为对照组,把所有的有机玻璃箱放置于孵箱培养5h,对精子的运动、获能、顶体反应进行评价。结果:1.1%和2.2%浓度的异氟烷作用于精子5h以后,与对照组相比,精子的运动活力、直线速度、曲线速度、平均速度均明显下降,P<0.05,差异有统计学意义,ISO1组和ISO2组比较,ISO2组的下降更为明显,呈现剂量依赖关系,即随着浓度的升高,精子的运动功能抑制越明显。对于精子获能的影响,与对照组比较,两种浓度的异氟烷均明显地抑制精子的体外获能,P均<0.05,差异均有统计学意义,ISO1组和ISO2组比较无明显差异,P>0.05。两组精子发生顶体反应的百分率均较处理前明显增加,P<0.05,差异有统计学意义。但是处理后两组间比较无明显差异。结论:异氟烷能够抑制精子的运动和获能,并且随着浓度的增加,抑制作用增强;异氟烷对精子顶体反应影响不明显。     

精子DNA损伤与精液参数、胚胎发育及早期自然流产相关性分析

目的:探讨精子DNA完整性与精液参数、体外受精-胚胎移植(IVF-ET)/卵胞浆内单精子注射(ICSI)胚胎发育及早期自然流产的关系。方法:采用改良精子染色质扩散实验(SCD)检测1160个辅助生殖技术(ART)周期(899对夫妻)中精子DNA的完整性,以精子DNA碎片指数(DFI)为参数,将患者分为高DFI组(DFI≥25%)和低DFI组(DFI <25%),根据采用不同的体外受精方式将两组又分为IVF亚组和ICSI亚组,比较组间精液参数、受精率、卵裂率、可移植胚胎率、优胚率、临床妊娠率、早期流产率、分娩率。结果:精液参数(精液密度、精子活力、正常精子形态率)与DFI显著相关,差异具有统计学意义(P <0. 05),低DFI组中的IVF亚组的受精率、分娩率显著高于高DFI组,早期流产率显著低于高DFI组,差异具有统计学意义(P <0. 05),其余各亚组间的卵裂率、可移植胚胎率、优胚率、临床妊娠率均差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论:精子DNA完整性与精液密度、精子活力、正常形态精子百分率呈负相关,对IVF的受精率、早期流产率和分娩率有显著影响,故建议在DFI≥25%时,优先考虑ICSI授精。同时建议将精子DNA完整性作为辅助生殖的常规精液指标。     

人乳头瘤病毒感染对精液参数及精子DNA损伤的影响

目的:探讨人乳头瘤病毒(HPV)感染对无症状男性精液参数和精子DNA损伤的影响。方法:选择2016年5月至2017年4月在华北石油管理局总医院进行精液常规检测的150例已婚男性为研究对象,对其精液标本进行HPV检测、精液参数分析和精子DNA碎片检测。将HPV检测阳性结果的男性纳入感染组,随机抽取同等数量的HPV检测阴性男性纳入对照组。对比分析两组男性精液质量和精子DNA损伤的差异。结果:150例精液样本检测出HPV阳性22例,阳性检出率14.67%。精子活力HPV感染组低于对照组(t=2.154,P=0.037),精子密度、精子活率、精子畸形率和精子DNA碎片指数(DFI)两组差异无统计学意义(P0.05)。结论:精液HPV感染有降低男性生育力的可能。对单纯精子活力减低的原发性不育男性,应当考虑到精液HPV感染的可能并予以检测。     

精子DNA碎片与年龄、精液常规参数和疾病因素的相关性分析

目的分析男性患者精子DNA碎片率和年龄、精液常规参数及疾病因素之间的相关性。方法按照年龄将患者分为20岁～25岁,26岁～30岁,31岁～35岁,36岁～40岁,41岁～45岁及45岁组。采用染色质结构分析(SCSA)实验检测精子DNA碎片率,按照世界卫生组织(WHO)标准检测精液各项参数。采用SPSS 19.0软件进行统计分析处理,分析精子DNA碎片率和年龄、精液常规参数及疾病因素之间的相关性。结果年龄与精子DNA碎片、精子活力、HDS之间存在负相关关系,与精子浓度之间的相关性无统计学意义。精子DNA碎片与精子浓度、精子活力之间存在负相关关系,与HDS之间存在正相关关系。精子HDS与精子浓度、精子活力之间存在负相关关系。DFI值的异常与弱精症、男性不育和尿路感染这3类男性疾病的关系较为密切。结论随年龄增长,精子活力可能会降低,DNA碎片率增加。因此精子DNA碎片检测可作为一项重要的精子质量评估指标,为全面、客观评估男性生育力提供了有效信息。     

不育男性精子自发顶体反应率、顶体酶活性与精液常规参数及精子功能指标的相关性分析

目的探讨不育男性精子自发顶体反应率、顶体酶活性与精液常规参数及精子功能指标的相关性。方法选取2019年4月至2020年2月广东省中医院生殖医学科诊治的77例不育男性作为研究对象。收集其实验室检测的精液分析数据进行回顾性分析。收集患者精子自发顶体反应、顶体酶活性、精子-透明质酸结合试验、精子DNA碎片、精子核蛋白、混合抗球蛋白反应试验(MAR)、精液常规分析的数据资料。采用Spearman相关性分析精子自发顶体反应率、顶体酶活性与精液常规参数及精子功能指标的相关性。结果精子自发顶体反应率与精子总数、尾部畸形率呈正相关(r=0.221、0.278,P=0.045、0.015),与平均路径速度(VAP)、顶体酶活性呈负相关(r=-0.223、-0.253,P=0.043、0.037);精子顶体酶活性与精子存活率呈正相关(r=2.84,P=0.018),与尾部畸形率呈显著负相关(r=-0.304,P=0.001)。精子自发顶体反应率、顶体酶活性与精子DNA碎片率、精子核蛋白不成熟度、精子-透明质酸结合率及MAR均无明显相关性(P0.05)。结论精子自发顶体反应率、顶体酶活性与部分精液参数有相关性,但与多项精子功能指标无明显相关性。     

不育男性年龄与精子核DNA碎片率及精液参数的相关性研究

目的:探讨不育男性年龄与精子核DNA碎片率及精液参数的关系。方法:选取于武汉大学人民医院生殖中心就诊的912名不育男性,按照年龄分组,分为三组:年龄20~29岁(A组)、年龄30~39岁(B组)、年龄≥40岁(C组),采用精子核染色体结构检测(SCSA)方法对三组912名男性精子核DNA碎片率(DFI)检测,同时按照WHO第五版标准进行精液常规分析;对年龄与精子核DNA碎片率、精子畸形率、精子密度和前向运动精子活率的关系进行分析。结果:精子浓度、精子畸形率与年龄无明显相关性,前向运动精子百分率与年龄有显著负相关关系,前向运动精子百分率随着年龄升高而显著降低,年龄与精子核DNA碎片率有显著正相关关系,精子核DNA碎片率随着年龄的增加而升高。结论:精子核DNA碎片率及精子前向运动精子百分率会受到年龄的影响,其生育力亦受到年龄的影响。     

欧前胡素抑制人表皮黑素细胞黑素生成

目的：评价欧前胡素对培养人表皮黑素细胞黑素生成的作用。方法：体外分离、纯化培养人表皮黑素细胞。随机分为空白组、熊果苷组和欧前胡素组（12．5μM,25μM和50μM）,作用48h,观察黑素细胞形态．检测黑素细胞活力、酪氨酸酶活性和黑素含量,免疫荧光显微镜观察欧前胡素对黑素细胞酪氨酸酶的影响。结果：不同浓度（0、12．5μM、25μM和50μM）欧前胡素作用于黑素细胞48h后,细胞活力分别为100％、107．8％、87．5％和59．7％。低浓度欧前胡素不影响黑素细胞形态,高浓度（50μM）对黑素细胞活力、酪氨酸酶活性、黑素含量有抑制作用,呈剂量依赖性。欧前胡素对酪氨酸酶蛋白在细胞内定位未见明显影响,但酪氨酸酶荧光强度降低。结论：欧前胡素抑制体外培养人表皮黑素细胞酪氨酸酶活性而降低黑素生成。     

男性不育患者年龄与精子DNA碎片和精液常规参数的相关性分析

目的:分析男性不育患者年龄与精子DNA碎片率和精液常规参数的相关性.方法:按照年龄将85例男性不育患者分为三组.20～29岁组(n=31),30～ 35岁组(n=28),36 ～ 50组(n=26),采用染色质扩散(SCD)实验检测精子DNA碎片率,按照世界卫生组织标准检测精液常规各参数.采用SPSS 13.0软件包进行统计处理,分析精子DNA碎片率和精子参数在各组的差异及年龄与精子DNA碎片率和精液参数的相关性.结果:年龄与精子活力存在负相关关系(r=-2.31,P＜0.05),但与精子密度,精子形态和精子DNA碎片无相关性.精子密度与精子形态存在正相关关系(r=0.528,P＜0.01),与精子活力存在正相关关系,(r=0.31,P＜0.01).精子DNA碎片率与精液常规各参数无相关性.结论:随着男性年龄的增长,精子的活力可能降低,并影响男性的生育力,精子DFI与精液常规各参数无相关性.故精子DNA碎片检测可作为精液常规分析的补充,进一步反映男性的生育能力.     

不明原因复发性流产与精子DNA完整性的相关性研究探讨

目的:分析与探讨不明原因复发性流产与精子DNA完整性的相互关系。方法:精子DNA完整性的检验选用精子染色质扩散实验(sperm chromatin dispersion,SCD),以精子DNA碎片指数(DNA fragmentation index,DFI)表示。将符合条件的65例男性患者作为实验组,随机选取配偶有正常妊娠史且无流产史的65例男性患者作为对照组,并分别测定两组男性精液相关参数和精子DFI。结果:实验组与对照组比较,在年龄、禁欲时间、精液量、精子活率、精子密度差异无统计学意义(P0.05)。实验组的DFI为(40.89±14.50),对照组的DFI为(22.89±6.94),差异具有统计学意义(P0.01)。结论:不明原因复发性流产与精子DNA损伤存在一定的关系。     

杨梅黄酮对人成纤维细胞增殖及胶原合成的影响

目的: 明确杨梅黄酮对人皮肤成纤维细胞增殖及胶原合成的影响。方法: 原代培养的人皮肤成纤维细胞加入不同浓度(0,10,25,50,75,100μM)的杨梅黄酮,流式细胞仪检测细胞周期,MTT检测细胞增殖活性和胶原合成。结果: 杨梅黄酮浓度为10μM及25μM时成纤维细胞增殖活性明显增加;浓度高于50μM处理后的成纤维细胞增殖活性降低,I型胶原表达减少。结论: 杨梅黄酮大于50μM时能抑制成纤维细胞胶原合成,提示该药具有较好的抗皮肤和内脏器官纤维化作用,为治疗纤维化相关疾病提供了一定的理论依据。     

不育男性不同影响因素与精子质量参数的关系研究

目的:对门诊就诊不育男性的身体质量指数(body mass index,BMI)、不良生活习惯、特殊工作环境、泌尿系统炎症感染与精子质量参数的关系进行研究。方法:选择2014年1月至2015年12月来院就诊的男性不育患者510例,测量患者身高体重,进行问卷调查,并结合计算机辅助精液分析系统(CASA)及试剂盒对精液液化时间、p H值、精液浓度、精子活率活力、精子形态和精子DNA碎片化指数(DNA fragmentation index,DFI)等参数进行分析。结果:按照BMI标准分组后显示低体重组、超重组、肥胖组、重度肥胖组在精子浓度、精子活率、精子正常形态率、精子DFI指数方面与标准体重组比较均有降低或升高的趋势,且差异显著,有统计学意义(P0.05);不良生活习惯(如长期吸烟、酗酒、熬夜)和某些特殊职业(高温、辐射和挥发性化学物质)及男性泌尿生殖系统炎症感染等因素对精液质量下降影响较大,差异显著,有统计学意义(P0.05);个别组在精液液化时间、精液量及精液p H方面存在差异,有统计学意义(P0.05)。结论:BMI指数异常、不良生活习惯、特殊职业及男性泌尿生殖系统炎症感染等因素可引起精子质量多项参数改变,是影响男性精液质量下降的重要原因。该研究为男性不育症发生机制的探索及诊治方向的判断提供理论参考。     

精子核成熟度与早期不明原因复发性流产的相关性研究

目的:探讨精子核成熟度与早期不明原因复发性流产的相关性。方法:收集配偶具有早期不明原因复发性流产史的患者50例为URM组,正常生育的男性30例为对照组,通过计算机辅助精液分析仪检测精子的浓度和活动力等,精子染色质扩散实验检测精子DNA完整性,苯胺蓝染色法检测精子核蛋白组型转换,分别比较两组精子DNA完整性、精子核蛋白组型转换率和精液参数的差异。结果:URM组与对照组之间精液量(3.23±1.13 vs 3.37±1.23)mL、精子浓度(29.33±3.76 vs 31.16±4.29)×10~6/mL的比较差异没有统计学意义(P0.05);精子前向运动(35.19±7.26 vs 50.12±10.84)%、精子正常形态(2.07±2.94 vs 8.69±4.13)%、精子DNA碎片率(39.28±15.95 vs 23.16±15.17)%及精子核蛋白组型转换率(41.99±8.63 vs 18.81±7.53)%比较差异有统计学意义(P0.05)。结论:早期不明原因复发性流产可能与精子核成熟度异常有关,建议RSA患者常规检测夫精精子核成熟度。     

苯甲基磺酰氟在低温保存人类精子中的应用

目的：探讨苯甲基磺酰氟（Phenylmethanesulfonyl fluoride，PMSF）对低温保存的人类精子存活率及DNA双链不完整性的影响。方法：将新采集的80份人类精液分成两等份，其中一份加入PMSF冷冻保护剂，另一份不加入PMSF冷冻保护剂，将两份标本保存在4℃冰箱中，通过实验比较精子在两种状态下30min～120h内精子活率及DNA双链不完整率差异。结果：低温保存30min～120h，不加入冷冻保护剂组精子平均活率及 DNA 双链不完整率分别为：（73.2±2.74）％、（67.3±2.56）％、（56.5±2.42）％、（47.4±2.18）％、（41±2.58）％、（30.8±2.64）％；（7.3±1.35）％、（13.8±1.26）％、（16.3±1.56）％、（25±1.36）％、（34.2±1.34）％、（39.2±1.52）％；低温保存30min ～120h，加入冷冻保护剂组精子平均活率及DNA双链不完整率分别为：（73.2±2.36）％、（70.2±2.68）％、（59.8±2.46）％、（51.2±2.68）％、（44.5±2.95）％、（33±2.89）％；（7.3±1.45）％、（11.5±1.64）％、（14.3±1.68）％、（22±1.58）％、（30.8±1.65）％、（35.7±1.87）％。结论：低温保存30min～120h之内，精子活率及DNA双链不完整率的差异有统计学意义，在同样的条件下加入PMSF冷冻保护剂同不加入PMSF冷冻保护剂进行低温保存相比，精子的平均活率和DNA双链不完整率的差异无统计学意义。使用与不使用PMSF冷冻保护剂对人类精子进行低温保存都是可行的，如使用PMSF，最佳保护效果只维持在48h之内，之后随时间延长，精子活率降低，DNA双链不完整率升高，120h之后精子几乎没有活率。     

麒麟丸联合维参锌胶囊治疗复发性流产史男性精子DNA损伤的临床观察

目的:探讨麒麟丸在男性不育患者精子DNA损伤中的保护作用。方法:选择66例合并有精子DNA完整性异常(DFI15%)的复发性流产史男性不育症患者,随机分为治疗组33例和对照组33例。治疗组口服麒麟丸联合维参锌胶囊;对照组单独服用维参锌胶囊,共3个月。于治疗前及治疗3个月末采用计算机辅助精子分析(CASA)系统与流式细胞仪分别检测精液常规参数和DFI。使用SPSS19.0统计软件对治疗前后各项精液参数及DFI进行数据分析。结果:治疗前治疗组与对照组的精子密度、精子活动率、前向运动精子百分比和DFI差异无统计学意义(P0.05)。治疗3个月后,治疗组精子活动率与对照组及治疗前相比有显著提高(P0.01);前向运动精子百分比与对照组及治疗前相比有显著提高(P0.01);精子密度比对照组及治疗前有显著提高(P0.05);DFI较对照组及治疗前显著下降(P0.05)。结论:应用麒麟丸联合维参锌胶囊治疗复发性流产史男性不育症患者,可以显著改善其精子活力与精子DNA完整性。     

不育症患者精子DNA损伤的临床分析与治疗研究

目的了解不育症患者的精子DNA损伤情况,并探讨不育症患者精子DNA损伤的治疗方法。方法选取2017年1月至2018年8月广东省妇幼保健院诊治的600例男性不育症患者作为研究对象。采集其精液标本进行精液分析,根据其精液分析结果,将患者分为精液正常组、弱精子症组、少精子症组,再采用精子染色质扩散方法对三组患者的精子DNA完整性进行检测,比较三组患者的精子DNA损伤率、精子DNA碎片化指数(DFI)。按照精子DNA完整性检测结果,将600例不育症患者分为精子DNA损伤组、精子DNA完整组,比较其精子密度、精子活动力、精子存活率、精子形态正常率。采用Pearson相关分析法,研究不育症患者精子DNA损伤与精液分析指标间的相关性。给予精子DNA损伤组患者左卡尼汀口服液治疗,比较治疗前后患者的DFI指数和精液分析指标。结果①弱精子症组、少精子症组、精液正常组的精子DNA损伤率、DFI指数比较,差异均具有统计学意义(P<0.05),从高至低依次为弱精子症组、少精子症组、精液正常组。②精子DNA损伤组的精子密度、精子活动力、精子存活率、精子形态正常率均低于精子DNA完整组,差异具有统计学意义(P<0.05)。③经相关性分析,不育症患者的精子DNA损伤与精子密度、精子活动力、精子存活率、精子形态正常率等精液分析指标密切相关,呈负相关。④经左卡尼汀治疗后,精子DNA损伤患者的精子密度、精子活动力、精子存活率、精子形态正常率均较治疗前增高,差异具有统计学意义(P<0.05),其DFI指数较治疗前降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论不育症患者的精子DNA碎片化严重,其精子DNA损伤主要与其精液质量有关,临床上可采用左卡尼汀对精子DNA损伤予以治疗,可有效改善其精液质量,减轻其精子DNA碎片化。     

泌尿生殖道感染不育男性与精子活率、抗精子抗体的关系研究

目的:探讨泌尿生殖道感染不育男性与精子活率、抗精子抗体的关系。方法:随机选取近3年来就诊于我院的患者180例:其中60例男性不育且既往或正患有泌尿生殖系统感染(包括支原体、衣原体等感染)的患者为研究对象(A组);其中60例男性不育且无泌尿生殖系统感染(包括支原体、衣原体等感染)的患者为研究对象(B组);其中38例已生育健康男性作为对照(C组)。采用精子微生物动静态图象检测系统(Computer-aided sperm analysis,CASA)检测精液的基本参数;采用ELISA法进行检测抗精子抗体;结果采用Spearman相关性分析。结果:A组与B组之间在抗精子抗体方面存在统计学差异(P<0.05);A组与C组之间在精子活力、精子活率、抗精子抗体等方面均存在统计学差异(P<0.05);B组与C组之间在精子活率方面存在统计学差异(P<0.05)。经Spearman相关性分析可知:泌尿生殖道感染不育男性与精子活力之间没有显著的相关性(P>0.05);泌尿生殖道感染不育男性与精子活率之间有显著的正相关性(P<0.05);泌尿生殖道感染不育男性与抗精子抗体之间有显著的负相关性(P<0.05)。结论:泌尿生殖系统感染不育男性与精子活率、抗精子抗体之间具有一定的相关性,但是具体的病理病因机制尚未探讨,以期后期更加深入地研究。     

海藻糖对过氧化氢诱导M14黑素瘤细胞氧化损伤的保护作用

目的:确定海藻糖对过氧化氢诱导的M14黑素瘤细胞损伤的保护作用。方法:不同浓度过氧化氢处理后的M14黑素瘤细胞加入0.5μg/mL、1μg/mL、10μg/mL海藻糖,采用MTT法检测各组细胞存活率,嘌呤氧化酶法检测处理前后超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结果:浓度为1μg/mL的海藻糖抗氧化作用明显,可提高低浓度过氧化氢(小于400μmol/L)损伤后的M14黑素瘤细胞存活率约33%,可提高SOD活力约20%。当过氧化氢浓度大于400μmol/L时,各浓度海藻糖对提高细胞存活率无明显作用。结论:1μg/mL海藻糖对低浓度(小于400μmol/L)过氧化氢诱导的M14黑素瘤细胞损伤具有保护作用。     

血清ApoB/ApoA-I比值与男性不育症患者精子质量相关性分析

目的分析男性不育症患者血清载脂蛋白B与载脂蛋白A-I比值(ApoB/ApoA-I)和精子质量的相关性。方法对46例受试者(24例男性不育患者,22名正常生育力男性)进行精子质量评估,包括精液量、pH以及精子浓度、精子总活力、前向运动精子率和正常形态精子率;全自动生化仪检测受试者血清ApoB和ApoA-I水平;比较健康组与不育组精子质量和ApoB/ApoA-I水平;Spearman法分析不育组内ApoB/ApoA-I与精子质量的相关性。结果不育男性精子浓度、总活力、正常形态精子率和前向运动精子率均低于健康男性(P<0.001),但ApoB/ApoA-I比值高于健康男性(P<0.05);ApoB/ApoA-I与精子浓度、精子总活力、前向运动精子率和正常形态精子率呈显著负相关关系。结论 ApoB/ApoA-I比值升高与男性不育患者的精子质量受损存在明显的相关性。