δ阿片受体激动剂对脓毒症大鼠细胞免疫功能的影响

目的 探讨δ阿片受体激动剂对脓毒症大鼠细胞免疫功能的影响.方法 健康成年雄性SD大鼠150只,体重154～198g,随机分为3组(n=50):假手术组(S组)仅穿线,不进行盲肠结扎穿孔;脓毒症组(SEP组)采用盲肠结扎穿孔的方法制备脓毒症模型;δ阿片受体激动剂组(DADLE组)于盲肠结扎穿孔后立即腹腔注射δ阿片受体激动剂DALDE 10 ml/kg,浓度为0.5 mg/ml.于盲肠结扎穿孔后4、8、12 h(T1～3)时各组随机取10只大鼠,抽取下腔静脉血样,采用ELISA法检测血清TNF-α和IL-10的浓度,采用流式细胞仪检测T淋巴细胞亚群变化.记录盲肠结扎穿孔后7 d内大鼠的生存情况.结果 与S组比较,SEP组和DADLE组各时点血清TNF-α和IL-10的浓度、TNF-α/lL-10比值升高,T3时CD4+T细胞水平和CD4+/CD8+降低,CD8+T细胞水平升高(P＜0.05或0.01);与SEP组比较,DADLE组T2.3时血清TNF-α和IL-10的浓度、TNF-α/IL-10比值降低,T3时CD4+T细胞水平和CD4+/CD8+升高,CD8+T细胞水平降低,盲肠结扎穿孔后7 d内大鼠生存率升高(P＜0.05).结论 δ阿片受体激动剂可改善细胞免疫功能,从而减轻炎性反应,有利于脓毒症大鼠的预后.     

异丙酚对脓毒症大鼠肝线粒体呼吸功能的保护作用

目的探讨异丙酚对脓毒症大鼠肝线粒体呼吸功能的保护作用。方法 健康SD大鼠 18只,随机分为3组(n=6):假手术组(C组)、生理盐水组(NS组)、异丙酚组(P组)。NS、P组采用盲 肠结扎穿孔法(CLP)制备脓毒症模型,C组仅做开腹、分离盲肠远端、关腹手术。CLP后12 hP组颈外 静脉输注异丙酚5 mg／kg负荷量,继以10 mg·kg-1·h-1维持,C组、NS组输注生理盐水0.5 ml／h。持续 静脉输注异丙酚4 h时处死大鼠,取肝脏,采用Clark氧电极技术测定线粒体呼吸功能,分光光度法测 定丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、NO2／NO3-(NO)水平,采用定磷法测定ATP酶活性。结果 与C组比较,NS组、P组SOD及ATP的酶活性、呼吸控制率(RCR)、磷／氧比(ADP／O)降低,MDA水平、 态3及态4的呼吸速率升高(P<0．01);与NS组比较,P组SOD及ATP酶的活性、RCR及其ADP／O水 平升高,MDA、NO水平、态3及态4的呼吸速率降低(P<0．01)。结论 异丙酚通过中和自由基,对 脓毒症大鼠肝线粒体呼吸功能产生一定的保护作用。     

自制多器官保存液对肾皮质能量代谢的影响

目的寻找理想的器官保存液，以提高器官移植的长期疗效。方法应用高效液相系统（HPLC），检测自制多器官保存液（SMO液）和对照组（HC-A液和UW液）对犬肾低温保存中皮质腺苷酸含量改变的影响。取皮质标本匀浆、沉淀蛋白、离心，HPLC检测上清中腺苷酸含量，根据标准曲线方程和加样回收率计算ATP、ADP、AMP含量、比值和能荷（EC）。结果随保存时间延长，各组皮质腺苷酸含量下降；保存12、36、72h后SMO组皮质ATP含量（3．7±0．5、3．1±0．3、2．3±0．5nmol／mg蛋白）高于HC—A组（2．8±0．2、2．0±0．2、1．5±0．2nmol／mg蛋白），P〈0．05，SMO组EC（0．38±0．04、0．37±0．05、0．35±0．04）高于HCfA组（0．32±0．03、0．30±0．04、0．28±0．03），P〈0．05，在多数保存时点SMO组ADP、ATP／AMP高于HC—A组（P〈0．05），但2组间AMP、ATP／ADP比值差异无统计学意义（P〉0．05）；犬肾保存期间SMO组腺苷酸含量及EC与UW组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论低温保存期间SMO液能够维持皮质内较高的ATP和EC水平，减轻肾脏低温缺血损伤。     

δ阿片受体激动剂对脓毒症大鼠肺组织细胞凋亡及肺组织Bcl-2、Caspase-3表达的影响

目的:观察δ阿片受体激动剂DADLE对脓毒症大鼠肺组织细胞凋亡及肺组织Bcl-2、Caspase-3表达的影响。方法:采用盲肠结扎加穿孔(CLP)法制作大鼠脓毒症模型,SD大鼠54只随机分为CLP组、DADLE组和假手术(SHAM)组。在不同时间点(12h、36h、72h)处死大鼠,原位末端标记检测肺组织细胞凋亡情况,免疫组化法检测肺组织中Bcl-2、Caspase-3蛋白表达的动态变化并比较肺组织的病理改变。结果:CLP组大鼠肺组织病理损害较SHAM组明显加重,DADLE组肺组织的病理变化明显减轻;CLP组大鼠肺组织细胞凋亡指数较SHAM组明显升高(P0.01),以36h组最明显(P0.01)。结论:DADLE明显改善脓毒症大鼠肺组织的病理变化,可能与DADLE下调Caspase-3表达、上调Bcl-2表达,从而抑制肺组织细胞凋亡有关。     

丙酮酸乙酯对脓毒症大鼠肝细胞线粒体的保护作用

目的研究丙酮酸乙酯（ethyl pyruvate,EP）对脓毒症大鼠肝细胞线粒体的保护作用。方法采用盲肠结扎穿孔（cecal ligation-perforation,CLP）法制作大鼠脓毒症模型,60只大鼠分3组：假手术组（n=20）、CLP模型组（n=20）、CLP＋EP治疗组（n=20）,检测肝细胞线粒体超微结构及功能变化。结果电镜扫描结果显示CLP模型组肝细胞线粒体发生明显结构损伤改变,CLP＋EP治疗组肝细胞线粒体病变较轻。比较分析CLP模型组与CLP＋EP治疗组的超微结构参数表明：两组的比表面积及形态因子数值间差异无统计学意义（0．027vs.0．029,1．162vs．1．300）,但CLP＋EP治疗组的中位数较CLP模型组更接近正常;与CLP模型组比较,CLP＋EP治疗组线粒体横截表面积减小,差异有统计学意义[（0．641±0．460）vs.（0．231±0．110）μm^2,P〈0．01]。与假手术组比较。CLP模型组肝细胞线粒体呼吸链复合体Ⅰ活性下降42％;CLP＋EP治疗组的线粒体呼吸链复合体Ⅰ活性仅下降12％（P〈0．05）。结论EP对脓毒症大鼠肝细胞线粒体结构及功能有一定保护作用。     

缺血预处理对大鼠离体心脏心肌线粒体功能的影响

目的研究缺血预处理（IPC）对大鼠离体心脏心肌线粒体功能的影响。方法SD大鼠72只，随机分为4组（n=18）：对照组（CON组）、缺血再灌注组（IR组）、缺血预处理组（IPC组）和5-羟葵酸（5-HD）拮抗IPC组（5-HD＋IPC组）。采用Langendorff装置建立大鼠离体心脏缺血再灌注模型，IPC组在全心停灌前，给予2次缺血预处理，每次缺血5min，间隔5min；5-HD＋IPC组预处理前灌注5-HD 10min。各组于平衡末、缺血前、再灌注30min各取6个心脏，分离心肌线粒体并测定线粒体呼吸控制率（RCR）、磷氧比（ADP／O2）、NADH氧化酶（NADH-OX）、琥珀酸氧化酶（SUC-OX）、细胞色素C氧化酶（CYTC-OX）的活性。结果与CON组比较，IR组、IPC组和5-HD＋IPC组再灌注30min RCR、ADP／O2、NADH-OX、SUC-OX和CYTC＋OX的活性降低（P〈0．05）；与IR组比较，IPC组和5-HD＋IPC组再灌注30min上述各指标升高（P〈0．05）；与IPC组比较，5-HD＋IPC组再灌注30min上述各指标降低（P〈0．05）。结论缺血预处理可改善大鼠离体心脏缺血再灌注时心肌线粒体的功能，其机制与mitoKATP的激活有关。     

a-硫辛酸对阻塞性黄疸大鼠肝细胞线粒体内能量代谢保护作用及机制

目的 探讨α-硫辛酸对阻塞性黄疸大鼠肝细胞线粒体内能量代谢的保护作用及其机制. 方法 将72只SD雄性大鼠随机分为对照组（SO组）,胆总管结扎＋0.9%氯化钠溶液组（BDL＋NS组）,胆总管结扎α-硫辛酸组（BDL＋LA组）.分别于术后7 d、14 d和2l d检测肝细胞线粒体内MDA、SOD、ATP、ADP和AMP含量并计算总腺苷酸（TAN）和能荷（EC）. 结果 BDL＋NS组各时间点肝细胞线粒体内MDA、ADP、AMP含量明显升高,而SOD、ATP、EC含量却明显降低.胆总管结扎7 d、14 d时,肝细胞线粒体内MDA含量BDL＋LA组比BDL＋NS组低,差异有统计学意义（P＜0.01）;2l d时,AMP、MDA含量BDL＋NS组和BDL＋LA中都更进一步升高,但两组比较差异无统计学意义（P＞0.05）.胆总管结扎7 d、14 d时,肝细胞线粒体内SOD含量、ATP含量BDL＋LA组比BDL＋NS组下降程度有显著性差异（7 d,P＜0.01;14 d,P＜0.05）;21 d时,两组肝细胞线粒体内SOD含量都进一步下降,但差异无统计学意义（p＞0.05）. 结论 α-硫辛酸在阻塞性黄疸早、中期有保护线粒体能量代谢作用,减轻了阻塞性黄疸时肝的损伤.     

右旋2-丙氨酸，5-亮氨酸脑腓肽诱导的心肌冬眠对离体兔心缺血-再灌注损伤的保护作用

目的观察δ阿片受体激动剂——右旋2-丙氨酸,5-亮氨酸脑腓肽（DADLE）是否具有保护成年兔离体心肌少受或免受缺血-再灌注损伤的作用,以探讨新的心肌保护方法和机制。方法30只兔制作Langendorff离体灌注模型,随机分成3组,每组10只,对照组：采用标准心脏停搏液灌注;组1：标准心脏停搏液＋DADLE（1mg／kg）灌注;组2：标准心脏停搏液＋纳洛酮（3mg／kg）灌注。3组心脏停搏后分别进行再灌注。检测3组缺血前、后左心室发展压（LVDP）、乳酸脱氢酶（LDH）的变化,在电子显微镜下观察心肌细胞超微结构,应用流式细胞仪检测心肌细胞的凋亡情况。结果缺血后3组间LVDP和LDH比较差异有统计学意义（P〈0．05）;组1 LVDP高于组2和对照组（69．8±5．8mmHg vs．23．4±3．9mmHg;69．8±5．8mmHg vs．37．9±4．7mmHg;P〈0．05）,而LDH低于组2和对照组（1272．6±59．1U／L vs．2764．4±27．7U／L,1272．6±59．1U／L vs．1884．4±37．5U／L;P〈0．05）。组1心肌细胞凋亡率低于组2和对照组。心肌超微结构显示：组1线粒体结构基本正常;组2线粒体结构损伤严重;对照组线粒体轻度损伤。结论应用DADLE灌注心肌可诱导心肌细胞冬眠,对缺血-再灌注损伤的心肌具有保护作用。     

DADLE对脓毒症大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响

目的研究δ阿片受体激动剂DADLE对脓毒症大鼠下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴的调节作用。方法选用72只SD大鼠随机分为假手术组(SO)、脓毒症组(SEP)、DADLE组[制模后腹腔内注射DADLE(5mg/kg)],每组24只。盲肠结扎穿孔(CLP)建立脓毒症模型,制模后于6,12,24小时各取8只处死取材,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清ACTH、CORT浓度。结果 SEP组及DADLE组6、12、24小时后血清ACTH水平均显著高于SO组(P0.05),DADLE组血清ACTH及CORT水平各时间点均低于SEP组(P0.05)。SEP组12、24小时血清ACTH及CORT均显著高于6小时(P0.05),SEP组24小时血清ACTH浓度高于12小时,但CORT浓度较12小时降低(P0.05)。DADLE组24小时初血清ACTH、CORT浓度显著低于12小时,但仍高于6小时(P0.05)。结论 DADLE通过降低血清ACTH、CORT水平来干预下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴,减轻脓毒症大鼠的过度应激状态。     

生长激素和谷氨酰胺对脓毒症大鼠细胞因子和氨基酸代谢的影响

目的 探讨谷氨酰胺（Gln）联合生长激素（GH）对脓毒症大鼠肿瘤坏死因子α（TNFα）、白介素-1（IL-1）、IL-6、皮质醇及三甲基组氨酸（3MH）浓度和氨基酸代谢的影响。方法 79只SD大鼠，随机取其中10只设为对照组，另69只用盲肠结扎穿孔法建立腹腔感染、颈静脉置管肠外营养（PN）模型后，将其中存活超过6d的大鼠30只均分为3组：脓毒症组、Gln组和Gln＋GH组。第6d处死动物，取门静脉血，用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清TNFα、IL-1、IL-6和皮质醇浓度；氨基酸自动分析仪检测血清氨基酸浓度；取大鼠趾长伸肌组织，采用高效液相色谱法检测骨骼肌组织中3-MH浓度。结果 血清TNFα、IL-1、IL-6及皮质醇浓度对照组均低于脓毒症组（P〈0．05，P〈0．01），Gln＋GH组及Gln组均低于脓毒症组（P〈0．05，P〈0．01），Gln＋GH组亦低于Gln组。与对照组相比，脓毒症组血清总氨基酸浓度升高（P〈0．05），尤以谷氨酸和支链氨基酸明显（P〈0．05），Gln浓度明显降低（P〈0．05）；Gln组和Gln＋GH组与脓毒症组相比，血清总氨基酸浓度降低（P〈0．05），尤以Gln＋GH组降低明显（P〈0．05），Gln浓度明显升高（P〈0．05）。骨骼肌组织中3-MH浓度以脓毒症组为最高，Gln组又高于Gln＋GH组（P〈0．01）。结论 添加GH和Gln的PN，能降低细胞因子水平，改善氨基酸代谢。     

丙酮酸乙酯对脓毒症大鼠肠组织保护和HMGB1表达的影响

目的:通过观察丙酮酸乙酯对脓毒症大鼠肠组织HMGB1表达的影响,进一步揭示丙酮酸乙酯治疗脓毒症的分子作用机制。方法:将96只SD大鼠随机分为假手术组、脓毒症组、低剂量丙酮酸乙酯治疗组(LET组)、高剂量丙酮酸乙酯治疗组(ET组),以盲肠结扎穿刺法复制大鼠脓毒症模型。LET组(20 mg/kg)及ET组(40 mg/kg)即刻腹腔内注射EP注射液4 mL,每6 h重复注射一次,直至实验结束,假手术组及脓毒症组在相同时间用相同剂量的生理盐水腹腔内注射。各组大鼠分别于术后2 h、8 h、24 h、48 h 4个时间点随机处死6只大鼠,经腹主动脉取血,用ELISA方法检测血浆TNF-α、IL-6、HMGB1水平。术后24 h,取大鼠末端回肠,用RT-PCR法检测回肠组织HMGB1mRNA表达水平,用免疫组织化学两步方法观察肠组织HMGB1蛋白表达,在光镜下观察大鼠肠组织的病理变化。结果:与假手术组相比,脓毒症组血浆HMGB1在术后8 h、24 h、48 h显著增高,脓毒症组回肠组织HMGB1mRNA及蛋白表达在术后24 h显著增高(P0.05)。与脓毒症组相比,ET组、LET组血浆HMGB1在术后8 h、24 h、48 h显著降低,ET组、LET组回肠组织HMGB1mRNA及蛋白表达在术后24h显著降低(P0.05)。结论:脓毒症大鼠血浆HMGB1出现时间晚,作用时间长,提示HMGB1是脓毒症的重要晚期炎症介质。丙酮酸乙酯可抑制脓毒症大鼠血浆及肠组织HMGB1的表达,提示丙酮酸乙酯对脓毒症的治疗机制可能与其直接或间接抑制HMGB1的表达有关。     

免疫调理对脓毒症大鼠中性粒细胞和淋巴细胞亚群的影响

目的研究免疫调理对脓毒症大鼠中性粒细胞和淋巴细胞及其亚群的影响,阐明免疫调理在脓毒症治疗中的作用。方法成功制作SD大鼠盲肠结扎穿孔（CLP）脓毒症模型,被分为假手术组、对照组和实验组,各20只。制作脓毒症模型后分别在3、12、24、48h采血待测。检查外周血涂片、白细胞总数、中性粒细胞、淋巴细胞计数和CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞亚群。结果实验组白细胞计数和中性粒细胞计数比对照组明显降低,而淋巴细胞计数和CD8^＋T淋巴细胞水平比对照组明显升高,P〈0．05。实验组CD8们林巴细胞水平与对照组差异无统计学意义。结论免疫调理可以明显降低脓毒症大鼠白细胞和中性粒细胞,从而减轻炎症反应。免疫调理可以提高脓毒症大鼠淋巴细胞计数和CD4^＋T淋巴细胞,从而改善免疫功能。     

卡巴胆碱对脓毒症大鼠促炎症细胞因子所致心肌损伤的保护作用

目的：研究卡巴胆碱对脓毒症大鼠促炎症因子所致心肌损伤的保护作用。方法：雄性SD大鼠32只,采用盲肠结扎穿孔术（CLP）制备大鼠脓毒症模型,随机分为CLP组、卡巴胆碱干预组（CAR组）,每组16只。CLP术后立即静脉注射CAR10μg／kg（CAR组）或等量生理盐水（CLP组）。各组大鼠于CLP术后6h和12h取血检测血浆肌酸激酶同工酶（CK—MB）活性;然后处死动物,取心肌组织,测定肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平、一氧化氮（NO）含量、髓过氧化物酶（MPO）活性以及组织含水率。结果：CLP术后6h和12h,CAR组血浆CK—MB水平显著低于CLP组（P〈0．05）,CAR组心肌组织TNF-α水平、N0含量和MPO活性显著低于CLP组（P〈0．05）。CAR组心肌组织含水率均低于CLP组[6h：（69．5±2．3）％vs．（74．3±2．6）％,P〈0．05;12h：（71．4±2．4）％vs．（76．7±2．1）％,P〈0．05]。结论：卡巴胆碱能显著抑制脓毒症大鼠心肌促炎症因子水平,减轻心肌组织水肿和功能损害。卡巴胆碱的抗炎和心肌保护作用机制可能与兴奋胆碱能抗炎通路有关。     

农毒症大鼠结肠内容物CFA／Ⅰ、SpaBnRNA的动态变化及意义

目的：观察CFA／I、SpaB基因在脓毒症大鼠结肠内容物中的表达,探讨CFA／I、SpaB基因表达在脓毒症发病机制中的作用。方法：SD大鼠64只,随机分为假手术组和脓毒症组各32。假手术组和脓毒症组根据术后取标本的时间各自分为1周、2周、3周、4周四个亚组,每个亚组8只,制定脓毒症和假手术组模型,在规定的时间点内按要求取结肠内容物标本,实时荧光PGR法检测结肠内容物CFA／I、SpaB mRNA的表达。结果：脓毒症组大鼠结肠内容物CFA／I基因表达同期高于假手术组,SpaB基因表达低于同期假手术组（P〈0．05）：结论：脓毒症大鼠结肠内容物CFA／I基因表达增加,SpaB基因表达减弱与膝毒症发病机制有关。     

大鼠自体原位肝移植术后早期小肠黏膜损伤的病理及炎症因子变化特点

观察大鼠自体原位肝移植术后早期不同时期小肠黏膜病理变化特点与肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-1β和 IL-6水平的动态变化,探讨肝移植术后肠道损伤的发生机制.方法 Sprague-Dawley(SD)大鼠25只,随机分为假手术组(S组)和模型组(R组):假手术组大鼠开腹后只进行肝血管的分离,模型组大鼠建立自体原位肝移植模型,在肝脏阻断20 min后,根据再灌注时间不同分为再灌注后4、8、16、24 h 4个亚组(即R4组、R8组、R16组和R24组),每组各5只动物.检测各组小肠黏膜组织病理学改变与小肠组织IL-1β、TNF-α和 IL-6水平变化.结果 在光镜下观察发现S组大多数未见明显病理改变,各模型组肠组织光镜下可见上皮层结构出现破坏,由最初的绒毛尖端上皮下间隙增大逐渐发展到上皮层与固有层大量分离,累及绒毛两侧,部分绒毛顶端甚至出现破损,这些病理改变在R8和R16组达到高峰,然后逐渐恢复.与S组比较,各模型组Chiu's评分增高(均为P<0.05);各模型组相比,R8组、R16组较R4组、R24组Chiu's评分增高(均为P<0.05).与S组比较,R16组肠组织TNF-α、IL-1β和 IL-6水平均增高(P<0.05);各模型组的肠组织TNF-α、IL-1β、IL-6在肝脏再灌注后4 h(R4组)开始升高,在16 h达到高峰(R16组),在24 h开始逐渐恢复(R24组).结论 大鼠自体原位肝移植术后早期出现小肠黏膜损伤,4 h内损伤逐渐加重,24 h开始逐渐恢复;该损伤可能与小肠组织炎症因子TNF-α、IL-1β和 IL-6的改变相关.     

肠源性脓毒症大鼠肠系膜淋巴结免疫状态变化规律

目的：探讨肠系膜淋巴结（MLN）在腹腔感染状态下的免疫功能变化规律及产生机制。方法雄性Wistar大鼠80只．体重200—250g．随机分为假手术组（S组）和盲肠结扎穿孔组（CLP组）．每组40只。分别于CLP后6h（T1）,12h（T2）．24h（T3）、72h（T4）（每个时点10只大鼠）留取腹主动脉血和MLN组织,鲎试剂偶氮显色法测定血浆内毒素水平．运用流式细胞仪测定MLN中 Th1／Th2比值和调节性T细胞（Treg）占CD4＋T细胞比例。结果：与S组比较。CLP组血浆内毒素水平在T2．T3和T4时升高．T3时达峰值（P〈0.01）;与S组比较．CLP组MLN Th1／Th2比值在T1时升高．T2．T3和T4时降低（P〈0．05或P〈0.01）,CLP组MLN Treg比例在T3时降低．在T2、T3和T4时升高（P〈0．05）;与T1时比较．CLP组MLN细胞Th1／Th2比值在T2,T3和T4时降低（P〈0.05或P〈0．01）．CLP组MLN细胞Treg比例在T2,T3和T4时升高（P〈0.05或P〈0.01）。大鼠MLN的Th1／Th2比值与Treg比例呈线性负相关（r=-0．871,P〈0．05）。结论：腹腔感染状态下．MLN细胞免疫功能受到抑制。表现为Th1／Th2比值减少,导致经肠道淋巴途径移位的肠源性内毒素清除减少,引发了肠源性内毒素血症的形成。其机制可能与肠源性内毒素介导MLN Treg比例增加有关。     

δ阿片受体激动剂对脓毒症大鼠血液动力学和氧代谢的影响

目的 探讨δ阿片受体激动剂(DADLE)对脓毒症大鼠血液动力学和氧代谢的影响.方法清洁级健康雄性SD大鼠80只,采用随机数字表法,将大鼠随机分为4组(n=20):假手术组(S组)仅穿线,不结扎穿孔;脓毒症组(SEP组)采用盲肠结扎穿孔法制备脓毒症模型;DADLE1组和DADLE2组分别于制模前0.5 h和制模后即刻经腹腔注射DADLE 10 mg/kg,浓度为0.5mg/ml.于制模后即刻、2 4 6 h(T1～4)时记录心排血量(CO)、MAP、左心室收缩压(LVSP)和心室压力最大变化速率(±dp/dtmax),计算心指数(CI).于T4时从左颈总动脉及右颈外静脉取血样,计算氧供给(DO2)、氧消耗(VO2)、氧摄取率(ER02).结果 与S组比较,SEP组MAP、LVSP T2时升高,T3,4时降低,±dp/dtmax升高,DADLE1组和DADLE2组MAP T2时升高,T3,4时降低,LVSP T2,3时升高,T4时降低,±dP/dtmax升高,SEP组、DADLE1组和DADLE2组CI、DO2和VO2降低,ERO2升高.与SEP组比较,DADLE1组和DADLE2组MAP、LVSP、±dp/dtmax T3,4时升高,CI、DO2和VO2升高,ERO2降低(P＜0.05).DADLE1组和DADLE2组间上述各指标差异无统计学意义(P＞0.05).结论 DADLE能改善脓毒症大鼠血液动力学和氧代谢.

Abstract：

Objective To investigate the effects of δ-opioid receptor agonist DADLE (D-Ala2-D-Leu5-enkephalin) on the hemodynamics and oxygen metabolism in rats with sepsis. Methods Eighty healthy male SD rats were randomly divided into 4 groups ( n = 20 each) : sham operation group (group S), sepsis group (group SEP) ,DADLE, group and DADLE2, group. Sepsis was induced by cecum ligation and puncture (CLP) in SEP, DADLE,and DADLE2 groups. In DADLE1 and DADLE2 groups, 0.5 mg/ml DADLE 10 mg/kg was injected intraperitoneally (IP) 0.5 h before CLP and immediately after CLP respectively. Mean arterial pressure (MAP), left ventricular systolic pressure (LVSP) and ± dp/dtmax were recorded at 0, 2, 4 and 6 h after CLP (T1-4). Blood samples from left common carotid artery and right external jugular vein were collected at T4 for blood gas analysis. The cardiac index (CI), O2 delivery (DO2), O2 consumption (VO2) and O2 extraction rate (ERO2) were calculated.Results Compared with group S, MAP and LVSP were significantly increased at T2, while decreased at T3,4, and ± dp/dtmax was significantly increased in group SEP, MAP was significantly increased at T2, while decreased at T3,4, LVSP was significantly increased at T2,3, while decreased at T4 , and ± dp/dtmax was significantly increased in DADLE, and DADLE2 groups, and CI, DO2 and VO2 were significantly decreased and ERO2 was increased in SEP, DADLE, and DADLE2 groups (P＜0.05). Compared with group SEP, MAP, LVSP and ± dp/dtmax at T3,4 and CI, DO2 and VO2 were significantly increased, while ERO2 was significantly decreased in DADLE1 and DADLE2 groups (P ＜ 0.05). There was no significant difference in the parameters mentioned above between DADLE1 and DADLE2 groups ( P ＞ 0.05). Conclusion δ-opioid receptor agonist DADLE can obviously improve the hemodynamics and oxygen metabolism in septic rats.     

抗CD54抗体对脓毒症小鼠的治疗作用

目的探讨应用抗CD54抗体保护脓毒症小鼠肺脏功能并改善其免疫功能状态的机制。方法24只C57／BL6小鼠按完全随机法分为4组：假手术组（Sham组）、盲肠结扎穿孔（cecal ligation and puncture,CLP）模型小鼠±生理盐水组（CLP组）、CLP±抗CD54抗体组（Anti-CD54组）和CLP±抗CD54抗体同型对照组（Isotype组）,每组6只。观察各组小鼠肺组织病理形态学改变,肺组织炎性因子肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF）mRNA、白介素（intedeukin,IL）-10和IL-6的mRNA表达水平,胸腺、脾脏和肺组织髓过氧化物酶（myeloperoxidase,MPO）活性,肺组织湿重／干重比值,外周血和腹腔灌洗液细菌清除率,胸腺和脾脏细胞凋亡情况。结果苏木精-伊红（hematoxvlin-eosin,HE）染色显示应用Anti-CD54组小鼠与CLP组和Isotype组小鼠比较,肺组织的损伤程度减轻,表现为间隔轻度增宽、无明显出血,少量炎性细胞浸润;Anti．D54组肺组织TNF-α（3．93±0．82）和IL-10（2．83±0．55）的mRNA水平,均显著低于CLP组[（8．22±2．34）、（6．05±1．52）]和Isotype组[（8．54±1．75）、（5．56±1．33）]（P〈0．05）;Anti-CD54组胸腺[（45±10）U／mg]、脾脏[（39±8）U／mg]和肺组织[（64±12）U／mg]匀浆MPO活性（P〈0．05）,均显著低于CLP组[（98±13）、（78±12）、（105_±10）U／mg]和Isotype组[（88±20）、（90±16）、（110±16）U／mg]（P〈0．05）;Anti-CD54组（4．03±0．18）肺组织湿重／干重比值,显著低于CLP组（4．95±0．18）和Isotype组（4．81±0．31）（P〈0．05）;Anti-CD54组血液（6±2）及腹腔灌洗液（5±2）细菌清除率显著高于CLP组[（76±18）、（72833±7176）]和Isotype组[（69±18）、（66532±143006）]（P〈0．001）;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（terminal deoxynueleotidyl transferase mediated nick end labeling,TUNEL）结果显示：Anti-CD54组胸腺（55±13）和脾脏（45±17）组织凋亡细胞百分比数显著少于CLP组[（127±30）、（130±25）]和Isotype组[（223±15）、（110±42）]（P〈0．05）。结论抗CD54抗体对脓毒症小鼠具有一定的治疗作用,可能与其改善小鼠肺功能状态,提高血液和腹腔清除率,抑制小鼠脾脏和胸腺凋亡有关。