固相酶免疫分析用于血清FT_3检测探讨

目的　研究血清游离三碘甲状腺原氨酸 (FT3)测定的固相酶免疫分析方法。方法　用聚苯乙烯固相载体、亲和纯化的兔抗 T3抗体和 T3-β-半乳糖苷酶标记物建立固相管竞争法、固相板竞争法和固相板顺序饱和法。通过对酶标物进行化学修饰、减少标准品或待测样品的上样量、扩大反应体系和采用顺序饱和法 ,避免或减少甲状腺激素结合蛋白 (TBP)的干扰。结果　 3种方法的可测范围均为 0 .4 8～ 4 5 .0 0 ng/ L ,其正常值分别为 (4.34± 1.0 3) ,(4.14± 0 .97) ,(4.0 3± 0 .82 ) ng/ L。正常人与甲状腺功能亢进症患者能明显分开。 3种方法的灵敏度分别为 0 .15 0 ,0 .130 ,0 .0 4 5 ng/ L ,平均批内变异系数分别为 6 .2 % ,6 .4 % ,5 .2 % ,平均批间变异系数分别为13.1% ,12 .4 % ,11.0 %。结论　固相酶免疫分析法基本解决了 TBP的干扰 ,其测定结果的灵敏度和精密度均达到放射免疫分析法 (RIA)的水平     

化学发光酶免疫分析法测定血清三碘甲状腺原氨酸的建立与研究

目的建立化学发光酶免疫分析法测定血清三碘甲腺原氨酸(T3)及临床甲状腺疾病病情的监测和预后。方法化学发光酶免疫分析法(CLEIA)采用辣根过氧化酶(HRP)-鲁米诺竞争法。结果该方法的灵敏度为0.19nmol/L,在0.52~10.28nmol/L的范围内线性良好。CLEIA测定血清T3的批内与日间变异系数分别为4.96%和4.935%。在血红蛋白浓度<2.4g/L、总胆红素浓度<342μmol/L、甘油三酯<9.9mmol/L时的干扰率无临床意义。与放射免疫分析法有较好的相关性(r=0.9264)。结论CLEIA法测定血清T3能及时有效地满足甲状腺疾病患者的临床需要,有助于进一步对检测试剂盒的研制。     

海尔福治疗氟中毒小鼠的实验研究

目的观察海尔福口服液对氟中毒小鼠的治疗作用.方法用高氟水给小白鼠自由饮用,20 d后治疗但同时加服海尔福口服液,正常对照组饮用蒸馏水.连续3个月.实验结束,从眼球取血,分离血清,测定血氟、血钙、肌酐、转氨酶等生化指标,处死动物,测定骨F-、骨羟脯氨酸,及测定粪F-.结果中毒组、治疗组、正常组血氟分别为(0.090±0.033),(0.054±0.011),(0.026±0.004)mg/L(各组比较均P＜0.001),血钙分别为(2.63±0.13),(2.86±0.31),(2.79±0.25)mmol/L(P＞0.05),肌酐分别为(108.68±16.70),(108.36±14.21),(116.11±12.98)nmol/L(P＞0.05),谷丙转氨酶分别为(75.14±16.71),(77.6±12.40),(81.75±20.08)μg/L(P＞0.05),骨F-分别为(35.5±34.78),(6.48±4.06),(5.51±4.39)mg/g.骨羟脯氨酸分别为(20.74±3.47),(24.04±2.56),(24.73±2.66)mg/g,粪F-分别为(15.33±3.06),(7.42±0.38),(2 83±1.10)mg/g.结论海尔福口服液对氟的排泄有明显的促进作用.     

慢性阻塞性肺疾病患者炎症细胞因子与肺通气功能的相关研究

目的　探讨慢性阻塞性肺疾病 (COPD)患者肺通气功能改变与炎症因子变化之间的关系。方法　稳定期COPD和慢性支气管炎 (简称慢支 )患者各 8例 ,,另有 8名健康者作为对照 ,进行肺功能检查 ,并经支气管肺泡灌洗获取肺泡巨噬细胞进行培养 ,采用酶联免疫吸附 (ELISA)方法测定大肠杆菌内毒素 (LPS)刺激后上清液中白细胞介素 8(IL 8)、IL 1β、IL 6和肿瘤坏死因子α(TNF α)的浓度 ,细胞因子之间相关性采用Pearson相关阵分析 ,肺功能值与细胞因子相关性采用多元后退回归法分析。结果　 (1)肺泡巨噬细胞释放IL 8:加入LPS后COPD组为 [(43± 2 7) μg/L和 (5 7± 41) μg/L],与正常对照组 [(13± 10 ) μg/L和 (2 0± 13 ) μg/L) ]比较差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;与慢支组 [(2 9± 2 1)μg/L和 (3 2± 2 3 ) μg/L]比较差异有显著性 (P >0 .0 5 )。 (2 )加入LPS前、后 ,COPD组、慢支组和正常对照组肺泡巨噬细胞释放IL 1β分别为 [(5 0± 41)ng/L、(94± 5 9)ng/L、(3 7± 3 2 )ng/L、(2 2 5± 10 8)ng/L、(15 3± 175 )ng/L、(70± 3 7)ng/L],与IL 8的释放呈正相关 (P <0 .0 5 ) ;三组肺泡巨噬细胞在LPS刺激后释放TNF α分别为 [(12 3 8± 679)ng/L、(3 0 88± 2 879)ng/L、(13 3 2± 1846)ng/L],与IL 1β呈正相     

脑钠素在慢性心力衰竭诊断、预后评估中的价值

目的 :探讨血清脑钠素水平变化在慢性心力衰竭患者的临床诊断、预后评估中的意义。方法 :用酶联免疫吸附法检测 72例慢性心力衰竭患者 (心力衰竭组 )和 2 0例无症状性心力衰竭患者 (无症状性心力衰竭组 )的血清脑钠素 3 2水平 ,并以 3 0例健康成人作为正常对照组。结果 :①心力衰竭组、无症状性心力衰竭组和正常对照组的血清脑钠素 3 2水平分别为 (85 8 7± 3 2 6 9)ng/L、(4 3 9 0± 14 2 8)ng/L和 (10 9 3± 3 7 6)ng/L ,3组间两两比较差异均有显著性 (P均 <0 0 1) ;心力衰竭组、无症状性心力衰竭组和正常对照组的血清脑钠素 3 2水平的 95 %可信区间分别为 781 9～ 93 5 5ng/L、3 72 2～ 5 0 5 8ng/L和 95 3～ 12 3 3ng/L ,相互之间无交叉。②血清脑钠素 3 2水平对心力衰竭的诊断界值为 12 0ng/L时 ,敏感性和特异性分别为10 0 %和 86 67%。③心功能 (NYHA )Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级和Ⅳ级的血清脑钠素 3 2水平分别为 (4 3 9 0± 14 2 8)ng/L、(63 8 5± 2 2 4 5 )ng/L、(878 0± 3 3 4 0 )ng/L和 (10 45 8± 5 85 1)ng/L ,各级间差异有显著性 (P均 <0 0 1) ;血清脑钠素 3 2水平与NYHA分级呈正相关 (r =0 818,P <0 0 1) ,与原发病无相关 (P >0 0 5 )。④心力衰竭组 2 4例血清脑钠素 3 2     

多器官功能障碍综合征血清炎性细胞因子变化的意义

目的 :探讨多器官功能障碍综合征 (MODS)血清炎性细胞因子的变化的意义。方法 :采用双抗体夹心酶联免疫吸附法测定 42例MODS和 3 0例健康对照组的血清肿瘤坏死因子 (TNF α)、白介素 1β(IL 1β)与白介素 6(IL 6)含量。结果 :MODS血清TNF α、IL 1β与IL 6含量 (各为2 77.64±5 4.3 6ng/L ,2 40 .97± 2 0 .87ng/L ,3 84.96± 73 .19ng/L)明显高于对照组 ( 2 3 .3 7± 7.96ng/L ,40 .65± 5 .87ng/L ,3 0 .2 6± 3 .61ng/L) ,P均 <0 .0 0 1;死亡组TNF α、IL 1β与IL 6含量 (各为5 5 4.86± 95 .69ng/L ,3 3 8.87± 41.2 1ng/L ,5 97.3 7± 118.3 6ng/L)高于非死亡组TNF α、IL 1β与IL 6含量 ( 2 77.64± 5 4.3 6ng/L ,2 40 .97± 2 0 .87ng/L ,3 84.96± 73 .19ng/L) ,P均 <0 .0 1。结论 :TNF α、IL 1β与IL 6对MODS的病理生理过程可能起作用 ,监测MODS患者血清TNF α、IL 1β与IL 6水平可作为反映病情严重程度和评估预后的一项参考指标     

C反应蛋白直接刺激人单核细胞肿瘤坏死因子α与白细胞介素6的表达

目的　比较急性冠状动脉综合征患者与健康人外周血单核细胞对一定浓度的C反应蛋白或细菌脂多糖刺激的炎症反应,并观察普伐他汀的干预效应。方法　采集并培养急性冠状动脉综合征患者(急性冠状动脉综合征组,n =15 )和健康志愿者(健康组,n =15 )的外周血单核细胞,分别用C反应蛋白(终浓度为2 0mg/L)或细菌脂多糖(终浓度10 μg/L)直接刺激2 4h。或用不同浓度(1、5和10 μmol/L)的普伐他汀预先孵育细胞2h ,再用C反应蛋白刺激。采用酶联免疫吸附试验法检测培养上清液中的肿瘤坏死因子α和白细胞介素6水平。结果　健康组受C反应蛋白刺激后肿瘤坏死因子α和白细胞介素6表达增加,分别为5 5 8±15 2ng/L和987±10 2ng/L ;受细菌脂多糖刺激后肿瘤坏死因子α和白细胞介素6增加显著,分别为10 5 4±371ng/L和185 4±4 6 7ng/L。急性冠状动脉综合征组受C反应蛋白刺激后肿瘤坏死因子α和白细胞介素6表达水平分别为15 5 4±784ng/L和312 9±333ng/L ;受细菌脂多糖刺激后分别为186 5±75 3ng/L和32 16±70 3ng/L。急性冠状动脉综合征组在1、5和10 μmol/L普伐他汀干预后,肿瘤坏死因子α表达分别下降14 %、36 %和4 9% ;白细胞介素6表达分别下降18%、2 6 %和36 % ,各亚组与C反应蛋白单独刺激组比较均有显著差异。健康组在普伐     

妊娠对乙型肝炎肝郁脾虚型患者血清细胞因子浓度的影响及临床意义

目的 :探讨妊娠对慢性乙型肝炎 (乙肝 )肝郁脾虚型患者血清白细胞介素 - 10、12 (IL - 10、IL - 12 )、γ-干扰素 (IFN-γ)浓度的影响及临床意义。方法 :用酶联免疫法 (EL ISA)检测孕期和非孕期患者 IL - 10、IL - 12及 IFN -γ血清浓度 ,并作同期肝功能指标检查。患者分为早孕期 (2 6例 )、晚孕期 (32例 )、非孕期 (31例 ) 3组。 2 0例非孕期健康者为对照组。结果 :早孕期组 IL - 10水平 [(2 6 .0± 9.8) ng/ L ]较非孕期组 [(18.0± 1.3) ng/ L ]升高 (P <0 .0 5 ) ,而与对照组 [(2 9.4± 5 .1) ng/ L ]相近 (P >0 .0 5 )。IL - 12、IFN -γ分别为 (5 4 .1± 2 6 .0 ) ng/ L和 (45 .5± 17.3) ng/ L ,较对照组 [(8.2± 2 .1) ng/ L、(2 4 .5± 6 .1) ng/ L ]和非孕期组 [(8.0± 2 .7) ng/ L、(16 .7± 3.7) ng/ L ]均明显升高 (均P <0 .0 1)。晚孕期组与其他各组比较 ,IL - 10 [(9.4± 1.9) ng/ L ]明显下降 (P <0 .0 1) ,但 IL - 12 [(16 6 8.0± 318.2 )ng/ L ]、IFN -γ[(46 1.0± 10 3.3) ng/ L ]显著升高。结论 :妊娠可使慢性乙肝肝郁脾虚型患者血清 IL - 12、IFN-γ浓度升高 ,在晚孕期表现更为明显。     

人表皮生长因子受体-2、癌胚抗原、腺苷脱氨酶对鉴别肺癌相关性恶性胸腔积液和结核性胸腔积液的诊断价值

目的探讨胸腔积液中人表皮生长因子受体-2(human epidermal growth factor receptor 2,HER-2)、癌胚抗原(carcinoembryonic antigen,CEA)和腺苷脱氨酶(adenosine deaminase,ADA)三者及三者联合检测对鉴别和结核性胸腔积液的诊断价值。方法选择20例肺癌相关性恶性胸腔积液(malignant pleural effusion,MPE)患者,20例结核性胸膜炎(tuberculous pleurisy,TBP)患者,均诊断明确,分别采用酶联免疫吸附法、化学发光法和酶比色分析法检测两组病例胸液和血清HER-2、CEA和ADA水平。用免疫组织化学方法(SP法)检测胸液沉渣细胞HER-2蛋白。结果①MPE组胸液HER-2水平为(6.18±2.35)ng/mL,显著高于TBP组(3.06±1.18)ng/mL(P0.01),MPE组血清HER-2水平(3.89±1.98)ng/mL也显著高于TBP组(2.31±0.65)ng/mL(P0.05);②TBP组胸液ADA水平(40.70±20.60)U/L显著高于MPE组(13.40±3.18)U/L(P0.01);③MPE组胸液CEA水平为(66.50±43.60)ng/mL,显著高于TBP组(7.91±4.20)ng/mL(P0.01);④检测胸液中HER-2、ADA、CEA水平诊断恶性胸液的灵敏度、特异度、准确度分别为80.0%、95.0%、87.5%;70.0%、90.0%、80.0%;70.0%、100.0%、85.0%。联合检测HER-2、ADA、CEA三者水平诊断恶性胸液的灵敏度、特异度、准确度分别为90.0%、95.0%、92.5%;⑤MPE胸液沉渣细胞免疫组织化学方法(SP法)检测HER-2阳性率达85.0%。结论①单项检测胸液HER-2、CEA、ADA水平对鉴别肺癌相关性MPE和TBP有临床诊断价值;②胸腔积液沉渣细胞免疫组化法HER-2阳性表达率高,且具有较高特异性,有助于肺癌相关性的诊断;③联合检测胸液中HER-2、ADA、CEA水平对鉴别肺癌相关性MPE和TBP具有更理想的临床诊断价值。     

高压液相色谱对甲状腺MIT,DIT,T3和T4的分析研究

采用HPLC法测定甲状腺组织中MIT、DIT、T_3和 T_4的含量,分离测定效果好,无其它干扰物质,检测灵敏度可达 ng 级;分析速度快,15分钟内可完成一个样品的分析;分析的精密度和灵敏度高,其变异系数在5%以内,回收率在90%以上。本方法可应用于甲状腺内 DIT,MIT、T_3和T_4含量的测定。