人骨形成蛋白-2对人脑胶质瘤细胞周期和增殖的影响

目的 探讨人骨形成蛋白（ｒｈＢＭＰ－２）对体内,外人脑胶质瘤ＳＨＧ４４细胞周期和增殖的影响。方法 体外培养人脑胶质瘤细胞,绘制ｒｈＢＭＰ－２作用前、后的ＳＨＧ４４细胞生长曲线,ＭＴＴ法测定ｒｈＢＭＰ－２对ＳＨＧ４４细胞的增殖影响;以流式细胞仪、电镜和琼脂糖凝胶电泳分别检测其细胞周期、超微结构和ＤＮＡ片段改变,观察局部注射ｒｈＢＭＰ－２对裸鼠皮下ＳＨＧ４４胶质瘤增长的影响,结果 ｒｈＢＭＰ－２可抑制     

单克隆抗体SZ—39识别的人脑胶质瘤细胞SHG—44膜蛋白的提取

目的：提取ＭｃＡｂ ＳＺ－３９识别的人脑胶质瘤细胞ＳＨＧ－４４膜抗原蛋白,为其进一步研究作准备。方法：分别以两组去污剂（１）２％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１１４;（２）１％ＳＤＳ、１％去氧胆酸钠、１％ＮＰ－４０、１ｍｍｏｌ／Ｌ ＥＤＴＡ裂解ＳＨＧ－４４细胞,提取细胞蛋白,再以ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法分离蛋白,并以Ｗｅｓｔｅｒｎ－Ｂｌｏｔ法分析鉴定。结果：ＭｃＡｂ ＳＺ－３９识别的蛋白呈一条区带,分子量为６０ｋＤ     

去甲二氢愈创木酸对恶性胶质瘤细胞增殖和分化的影响

观察去甲二氢愈创木酸对人恶性胶质瘤细胞系ＳＨＧ－４４细胞增殖和分化的影响。方法细胞培养、免疫组化、光镜和电镜观察及流式细胞仪检测。结论：ＮＤＧＡ对ＳＨＧ－４４细胞有明显的增殖抑制和诱导分化作用,且这种作用有周期特异性。     

碱性成纤维细胞生长因子促进rhBMP-2诱导成骨的载体

目的 研究碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）在诱导成骨中的适宜载体。方法 ＢＡＬＢ／ｃ小鼠１４０只随机分为４组,每组３５只。设立ｒｈＢＭＰ－２／ｂＦＧＦ／ＰＶＰ为实验组,ｒｈＢＭＰ－２／ｂＦＧＦ,ｒｈＢＭＰ－２／ＰＶＰ和ｒｈＢＭＰ－２３组为对照组,分虽于术后３～２１ｄ共６个时间点取材,进行组织学、Ｘ线分析以及钙含量测定,观察４组诱导成骨情况。结果 ｒｈＢＭＰ－２／ｂＦＧＦ／ＰＶＰ组在诱导间充质细胞     

体外检测近交系小鼠HBsAg特异性细胞毒T淋巴细胞方法的建立

通过磷酸钙法用含ＨＢＶＳ基因的质粒ｐＲｃ／ＣＭＶＳ与含筛选标记基因－ｎｅｏ基因的质粒ｐＳＶ２－ｎｅｏ对ＢＡＬＢ／Ｃ近交系小鼠肥大细胞瘤细胞株Ｐ８１５细胞进行了质粒共转染，并经Ｇ４１８筛选得到了Ｇ４１８抗性细胞，即Ｐ８１５－Ｓ细胞，斑点杂交和免疫组化实验分别证实Ｐ８１５－Ｓ细胞内有ＨＢＶＳ基因的存在；Ｐ８１５－Ｓ细胞浆内和膜上有ＨＢｓＡｇ的表达。表明了Ｐ８１５－Ｓ细胞要作为体外检测ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠Ｈ     

转染wt-53基因对SHG44细胞恶性表型的影

目的：转染ｗｔ－ｐ５３基因对ＳＨＧ４４细胞恶性表型的影响。方法脂质体介导法,将ｗｔ－ｐ５３基因转导入ＳＨＧ４４人胶质瘤细胞,斑点霜交证实转染成功;观察阳性转染细胞在体外常规培养中生长速率,细胞培增时间;平板集落形成率,结果转染ｗｔ－ｐ５３的细胞生长速度明显减慢,倍增时间延长（Ｐ〈０．０１）;细胞集落形成数明显减少（Ｐ〈０．０１）,结论外源性野生型Ｐ５３基因对ＳＨＧ４４细胞的恶性表型有抑制作用。     

人脑胶质瘤细胞系CHG-5的建立及其生物学特性的分析

目的：建立一人脑胶质瘤细胞系并探讨其生物学特性。方法：取胶质瘤新鲜手术标本,经组织块法培养并克隆、建株,采用光镜、电镜、免疫组化、流式细胞术、染色体分析及异种移植瘤实验对细胞株生物学特性进行观察。结果：原位肿瘤、细胞株及移植瘤标本经电镜证实为星形细胞源性,免疫组化呈ＧＦＡＰ、Ｖｉｍ ｅｎｔｉｎ及ＶＥＧＦ阳性,异种移植成瘤率高。与ＳＨＧ－４４细胞比较,ＧＦＡＰ表达强,Ｖｉｍ ｅｎｔｉｎ 表达弱。结论：ＣＨＧ－５为一恶性胶质瘤细胞系,且其生物学特性可能与ＳＨＧ－４４细胞有所不同。该细胞高表达血管生成因子     

人参皂甙与LAK细胞联合治疗恶性脑胶质瘤的实验研究

目的：探索提高恶性脑胶质瘤治疗效果的新途径。方法：用人参皂甙（Ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ,ＧＳ）与白细胞介素２（ＩＬ－２）协同诱导人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）制成ＧＣ－ＬＡＫ细胞,用ＭＴＴ法测定其对恶性脑胶质瘤细胞（ＢＴ３２５）的杀伤活性,并与ＬＡＫ细胞相比较;结果：效应细胞ＧＳ－ＬＡＫ在增殖数量和杀伤恶性脑胶质瘤细胞活性等方面均优于ＬＡＫ细胞,且ＩＬ－２用量减少;     

外源性p16基因稳定转染对胶质瘤细胞周期和增殖的影响

目的：研究外源性ｐ１６基因对胶质瘤细胞系ＳＨＧ－４４的抑制作用,探索胶质瘤基因治疗的新途径。方法：利用携带４９０ｂｐ的人ｐ１６全长ｃＤＮＡ真核表达载体,采用脂质体介导法将其导入人恶性胶质瘤细胞系ＳＨＧ－４４中,用Ｇ４１８筛选阳性克隆,以原位杂交,免疫组化方法检测ｐ１６基因在细胞转染前后的表达情况。,应用流式细胞仪,电子显微镜,生长曲线测定等方法研究ｐ１６基因对胶质瘤细胞周期,形态,生长等的影响.     

鬼臼酰肼哌啶腙氮氧自由基对人胃癌细胞SGC—7901细胞周期的作用

目的 研究鬼臼酰肼哌啶腙氮氧自由基（ＧＰ１）对细胞周期的作用及探讨其抗肿瘤机制。方法 利用ＭＴＴ法、流式细胞术研究ＧＰ１对人类胃癌细胞ＳＧＣ－７９０１细胞的影响。结果 ＧＰ１能抑制ＳＧＣ－７９０１细胞的增长；流式细胞术显示ＧＰ１能阻滞细胞从Ｇ２／Ｍ期进入Ｇ２期。结论 ＧＰ１阻滞肿瘤细胞于细胞增殖周期的Ｇ２／Ｍ期是其重要的抗肿瘤机制。     

Inhibitory effects and mechanism of rhBMP-2 on the proliferation of SHG44 human glioma cells

Bone morphogenetic protein (BMP) has been denominated by its artivity of inducing bone formation. Re-cently, it was found to be a multifunctional factor andhave a key role in the regulation of elnbmpis andembryo deVelopment, hssue and cell ~ation andPndiferation. BMP could also inhibit many kinds of tumorcell growth and induce their apoptOSisL',']. the of BMPgenes were successop cloned and ~ssed in aam,such as BMP-2, BMP4 and BMP-7. The bone ~C Pmtein-2 is a htllnan P~ exPansed in vi…     

血管内皮生长因子165反义RNA治疗人脑胶质瘤的实验研究

目的 探讨应用血管内皮生长因子１６５（ＶＥＧＦ１６５）反义ＲＮＡ治疗人脑胶质瘤的可行性。方法 构建和鉴定反义ＶＥＧＦ１６５真核表达载体;将其转染入人脑胶质瘤细胞ＳＨＧ４４,检测其转染前、后的生物学性状;比较转染前、后ＳＨＧ４４细胞的裸鼠皮下致瘤性;分别应用免疫印迹、免疫组织化学、微血管计数、电镜和流式细胞仪检测上述改变。结果 成功构建反义ＶＥＧＦ１６５真核表达载体并在ＳＨＧ４４细胞获得表达,该细胞     

血管内皮生长因子_(165)反义RNA治疗人脑胶质瘤的实验研究

目的　探讨应用血管内皮生长因子165(VEGF165)反义RNA治疗人脑胶质瘤的可行性。方法　构建和鉴定反义VEGF165真核表达载体 ;将其转染入人脑胶质瘤细胞SHG44 ,检测其转染前、后的生物学性状 ;比较转染前、后SHG44细胞的裸鼠皮下致瘤性 ;分别应用免疫印迹、免疫组织化学、微血管计数、电镜和流式细胞仪检测上述改变。结果　成功构建反义VEGF165真核表达载体并在SHG44细胞获得表达 ,该细胞生物学性状不受外源基因表达影响 ,其在裸鼠皮下致瘤性和血管生成能力明显下降。肿瘤终体积 :实验组 2 12mm3,对照组 7897mm3(P <0 .0 1) ;血管计数 :实验组 5 .5 0 ,对照组11 2 2 (P <0 .0 1)。结论　VEGF165反义RNA能有效抑制人脑胶质瘤血管生成和肿瘤生长 ,为基因治疗实体瘤奠定了基础     

PTEN基因诱导人脑胶质瘤SHG-44细胞凋亡及bcl-2表达下调

目的 探讨PTEN基因对人脑胶质瘤SHG－44细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2表达的影响，阐明PTEN基因抑制肿瘤细胞增殖的机制。方法PTEN基因体外转染SHG－44细胞，筛选阳性细胞克隆，以原位杂、免疫组化方法检测PTEN基因的表达情况；采用透射电镜、流式细胞仪和核DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞的凋亡情况；以免疫荧光法检测bcl-2基因的表达。结果 PTEN基因转染的SHG－44细胞有PTEN蛋白的表达。透射电镜下可见转染PTEN基因后细胞核染色质浓缩边集、胞质浓缩、核破裂及凋亡小体形成等典型的凋亡表现；流式细胞仪显示细胞周期从G1期到S期发生抑制，并且在G1期峰前出现一明显的凋亡峰（15．9％）；细胞核DNA琼脂糖凝胶电泳呈现凋亡细胞特有的梯状条带；bcl-2的表达也显著下调。结论 PTEN基因可诱导SHG－44细胞凋亡，并下调bcl-2蛋白的表达，这可能是PTEN基因抑制肿瘤细胞增殖的分子机制之一。     

局部分泌的血管抑素K（1—3）蛋白抑制人脑胶质瘤生长的实验研究

目的 探讨局部分泌血管抑素Ｋ（１￣３）蛋白〔ａｎｇｉｏｓｔａｔｉｎ Ｋ（１￣３）,ＡＫ（１￣３）〕治疗人脑胶质瘤的可行性。方法 构建ＡＫ（１￣３０基因的真核表达载体ｐｃＤＮＡ－ＳＡＫ（１￣３）,经脂质体法将该载体转染入人脑胶质瘤细胞ＳＨＧ４４、行Ｇ４１８筛选。用电镜和流式细胞仪测定转染细胞的生物学性状,以内皮细胞抑制实验和免疫荧光实验检测该细胞表达的ＡＫ（１￣３）蛋白。应用裸鼠皮下致瘤性实验,结合     

丁酸钠对人脑胶质瘤细胞系SHG-44增殖分化的影响

目的 研究丁酸钠对培养人脑胶质瘤SHG-44细胞的增殖抑制和分化诱导。方法 以2mmol／L丁酸钠处理SHG-44细胞，用MTT比色、核仁组成区银染观察细胞增殖抑制，用流式细胞术、电镜观察超微结构、免疫组织化学染色、凝集试验鉴定细胞分化。结果 SHG-44细胞经丁酸钠处理后：①细胞增殖受到明显抑制，并具有时间、剂量依赖性；②细胞周期受阻，S期细胞比例减少；③电镜观察发现细胞核变规则，异染色质增多，胞浆中线粒体、粗面内质网等细胞器增多并趋于正常；④胶质纤维酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein，GFAP)表达增强，改型蛋白(Vimentin)表达减弱；⑤细胞凝集度明显变低。结论 丁酸钠能抑制人脑胶质瘤SHG-44细胞的增殖，2mmol／L丁酸钠能诱导SHG-44细胞发生明显分化。     

Endostatin裸DNA对人脑胶质瘤的抑瘤效应

目的：探讨endostatin裸DNA对裸鼠皮下脑胶质瘤生长的影响特点。方法：用脂质体包埋法将endostatin基因的真核表达载体pcDNA-S-Endo注入裸鼠皮下SHG44人脑胶质瘤内,观察肿瘤生长情况并计算抑瘤率,结合免疫组化、电镜、微血管和瘤体坏死区计数,确定endostatin裸DNA治疗人脑胶质瘤的特点。结果：Endostatin裸DNA在荷瘤裸鼠体内获得表达,裸鼠皮下胶质瘤血管生成能力显下降,肿瘤生长受到抑制,抑瘤率达到41．6％。结论：Endostatin裸DNA能够抑制人脑胶质瘤生长41．6％。结论：Endostatin裸DNA能够抑制人脑胶质瘤生长,它是通过抑制肿瘤血管生成,导致肿瘤坏死实现的。本研究为应用裸DNA药物治疗人脑质瘤奠定了初步基础。     

异甘草素通过下调基质金属蛋白酶抑制人脑胶质瘤干细胞迁移和侵袭

目的: 探讨异甘草素对人脑胶质瘤干细胞迁移和侵袭能力的影响及相关机制。方法: 免疫荧光法检测SHG44人脑胶质瘤干细胞的干性特征;transwell实验观察SHG44人脑胶质瘤干细胞的迁移和侵袭能力;实时定量RT-PCR法和蛋白质印迹法分别检测SHG44人脑胶质瘤干细胞中基质金属蛋白酶（MMP）2和MMP-9的mRNA和蛋白表达量。结果: SHG44细胞中干细胞标志物CD133和Nestin呈阳性表达。20 μmol/L和80 μmol/L的异甘草素作用于胶质瘤干细胞48 h后,迁移细胞数分别为76±5和42±4,与阴性对照组（85±6）差异有统计学意义（均P < 0.01）,且80 μmol/L异甘草素组迁移细胞数少于20 μmol/L异甘草素组（P < 0.01）;穿透滤膜至小室背面的细胞数分别为190±13和130±9,与阴性对照组（230±14）差异有统计学意义（均P < 0.01）,且80 μmol/L异甘草素组穿透滤膜至小室背面的细胞数少于20 μmol/L异甘草素组（P < 0.01）;MMP-2、MMP-9 mRNA和蛋白表达量均较阴性对照组下调（P < 0.05或P < 0.01）,且80 μmol/L异甘草素组MMP-2、MMP-9 mRNA和蛋白表达量低于20 μmol/L异甘草素组（P < 0.05或P < 0.01）。结论: 异甘草素可通过下调MMP-2和MMP-9的表达抑制胶质瘤干细胞迁移和侵袭。     

外源性血管抑素K(1-3)基因在人脑胶质瘤中的表达意义

目的 探讨外源性血和抑素Ｋ（１－３）基因「ａｎｇｉｏｓｔａｔｉｎＫ９１－３）,ＡＫ（１－３）」在人脑胶质瘤中的表达及其作用。方法 应用ＰＣＲ法,使人Ｉｇｋａｐｐａ链分泌信号肽序列Ｓ中装在ＡＫ（１－３）基因上－ＳＡＫ（１－３）;构建ＳＡＫ（１－３）基因的真核表达载体ｐｃＤＮＡ－ＳＡＫ（１－３）。经脂质体法将其转染入ＳＨＧ４４人脑胶质瘤细胞,行Ｇ４１８筛选获得转基因瘤细胞克隆,比较转基因和内皮细胞抑制