蛋白质组学技术在细胞信号传递机制研究中的应用

细胞信号传递是生命中的重要现象，蛋白质组学技术为细胞信号传递机制的研究提供了一种新的思路和尝试。采用蛋白质组学技术可以对细胞信号传递过程的差异信号蛋白、磷酸化蛋白、蛋白质的胞内分布和移位、蛋白分子的相互作用以及蛋白结构域进行细致的研究，从而阐明复杂的细胞信号传递机制。     

报告基因及其在生物膜研究中的应用

报告基因技术是指通过把转录控制元件剪接到报告基因,从而报告细胞内与基因表达有关的信号级联,被广泛应用于检测细胞信号传导和基因表达.伴随激光共聚焦显微镜、荧光共振能量转移技术等观察成像技术的进步,绿色荧光蛋白、红色荧光蛋白等新报告基因的应用,为生物膜胞间信号传递及基因表达变化的研究提供了新的途径.     

蛋白质组学在口腔医学中的研究进展

蛋白质组学是在人类基因组计划研究发展的基础上形成的新兴学科,它的主要任务是识别、鉴定细胞、组织或机体的全部蛋白质,并分析蛋白质的功能及其模式.随着蛋白分离,鉴定技术和生物信息学的完善,蛋白质组学在各个基础和临床领域得到了长足的发展.在口腔医学领域从鳞癌蛋白质含量对比分析开始,其高通量、高灵敏度的技术特点已逐渐应用于口腔牙体组织、唾液的蛋白质全表达、口腔内环境菌群蛋白功能研究、口腔肿瘤发生发展的蛋白机制表达和生物标记等方面,并取得了相应的成果,我们就蛋白质组学在口腔医学中应用的相关技术及其研究进展作一阐述.     

报告基因及其在生物膜研究中的应用

报告基因技术是指通过把转录控制元件剪接到报告基因，从而报告细胞内与基因表达有关的信号级联，被广泛应用于检测细胞信号传导和基因表达。伴随激光共聚焦显微镜、荧光共振能量转移技术等观察成像技术的进步，绿色荧光蛋白、红色荧光蛋白等新报告基因的应用，为生物膜胞间信号传递及基因表达变化的研究提供了新的途径。     

差异蛋白质组学常用技术及其在牙周炎研究中的应用

蛋白质组学是连接基因、蛋白质和生命活动研究的桥梁,差异蛋白质组学则是它的主要研究内容之一.利用其常用技术来检测牙周炎不同环境下的差异蛋白,将有助于对疾病的诊断和治疗.本文就差异蛋白质组学常用技术及其在牙周炎中的应用作一综述.     

唾液蛋白质组学的研究进展

唾液作为一种成分复杂,在口腔内具有多种生物学功能的液体.它起到润滑、辅助消化、抗菌等诸多作用,而对唾液的功能和其分泌的分子机制的研究离不开对唾液蛋白质的研究.蛋白质组学作为大规模蛋白质分离和识别技术研究蛋白质组的一门学科,已经开始在很多领域得到应用,同时正逐渐成为唾液蛋白组研究中的新技术.本文就蛋白质组学在唾液中的蛋白全表达、生物标记应用等方面内容作一综述.     

唾液蛋白质组学的研究进展

唾液作为一种成分复杂，在口腔内具有多种生物学功能的液体。它起到润滑、辅助消化、抗茵等诸多作用，而对唾液的功能和其分泌的分子机制的研究离不开对唾液蛋白质的研究。蛋白质组学作为大规模蛋白质分离和识别技术研究蛋白质组的一门学科，已经开始在很多领域得到应用，同时正逐渐成为唾液蛋白组研究中的新技术。本文就蛋白质组学在唾液中的蛋白全表达、生物标记应用等方面内容作一综述。     

骨组织受张力作用的信号传递和细胞应答

骨组织受机械应力作用后的生物学行为变化是近年来的研究热点,也是口腔医学研究的一个重要课题,目前,应力作用下的细胞信号传递和组织反应机制并不完全清楚,由于机械张力与成骨活动密切相关,因此本文特别就骨组织受张力作用后细胞间信号传递通道和效应细胞分化,增殖及其功能改变的研究进展作一综述。     

RNA干扰技术在口腔医学领域应用的研究进展

RNA干扰技术是过去几年分子生物学领域最重要的发现之一。目前,RNA干扰已经成为研究基因功能、细胞信号传导、细胞分化、发病机制和基因治疗的一种有力工具。下面就RNA干扰的作用机制,RNA干扰在口腔医学中的研究应用作一综述。     

骨组织受张力作用的信号传递和细胞应答

骨组织受机械应力作用后的生物学行为变化是近年来的研宄热点,也是口腔医学研究的一个重要课题。目前,应力作用下的细胞信号传递和组织反应机制并不完全清楚。由于机械张力与成骨活动密切相关,因此本文特别就骨组织受张力作用后细胞间信号传递通道和效应细胞分化、增殖及其功能改变的研究进展作一综述。     

变异链球菌的比较蛋白质组学研究进展

最近公布的变异链球菌全菌基因组序列,使得对变异链球菌全面的蛋白组图谱分析成为可能。变异链球菌的蛋白质组学研究将进一步揭示其致龋的分子机制。比较蛋白质组学是蛋白质组学的一个重要分支,因此下面就变异链球菌对酸反应的比较蛋白质组学研究和变异链球菌浮游态与生物膜态的比较蛋白质组学等研究,介绍比较蛋白质组学在变异链球菌中的研究进展。     

口腔扁平苔藓基因表达谱中差异表达基因初步探讨

目的筛选口腔扁平苔藓组织中的差异表达基因,并对其进行功能分类。方法用4 000种人类基因多聚酶链反应产物制成BiostarH- 40s型表达谱芯片,分离纯化正常口腔黏膜组织和口腔扁平苔藓病变组织mRNA,制备表达谱探针,用ScanArray 4000 荧光扫描仪扫描芯片荧光信号图像,分析正常口腔黏膜组织和口腔扁平苔藓组织之间差异表达的基因。结果1）在4 000条基因中,有213条基因表达差异,其中122条基因表达上调,91条基因表达下调。2）在表达上调基因中,功能分类主要包括免疫相关基因、代谢相关基因、癌基因、细胞因子、细胞信号和传递蛋白。3）在表达下调基因中,功能分类主要包括DNA结合、转录和转录因子、细胞信号和传递蛋白、免疫相关基因、细胞因子、代谢相关基因。结论口腔扁平苔藓的发生、发展过程中存在着多条不同功能基因表达调控的改变。     

用比较蛋白质组学技术筛选口腔黏膜上皮细胞体外癌变的相关蛋白

目的：探讨口腔黏膜上皮细胞在体外癌变不同阶段表达的差异蛋白质。方法：以口腔黏膜上皮细胞体外癌变模型为对象,采用双向凝胶电泳技术和图像分析软件PDQuest分离和分析不同阶段细胞间的差异蛋白质点,采用LC-MS/MS质谱分析系统鉴定差异蛋白质点,采用Gene Ontology Annotation将已知差异蛋白质进行分类。结果：采用双向凝胶电泳技术和图像分析软件PDQuest,得到差异蛋白质点54个,采用LC-MS/MS质谱鉴定后,共得到候选差异蛋白质45个。根据Gene Ontology Annotation分类,按细胞组成分布最多的差异蛋白质位于细胞质和细胞膜,按分子功能分布最多的是磷酸酶活性、催化活性、结构分子功能和钙离子结合功能,按生物过程分布最多的是代谢过程、细胞信号传导和细胞黏附与运动。结论：比较蛋白质组学方法中的双向凝胶电泳和质谱技术,能够很好分离和鉴定口腔黏膜上皮细胞体外癌变模型中不同阶段细胞的差异蛋白质。     

nm23基因调控机理的研究进展

nm23基因作为肿瘤转移抑制因子,在肿瘤发展和转移过程中有重要调节作用。近年来,通过对nm23基因及其蛋白产物NDPK的深入研究揭示,nm23/NDPK以组氨酸依赖性磷酸转移酶活性和丝氨酸自磷酸化为基础,对细胞信号传递系统、微管相关蛋白和基底膜形成微环境的调节,以及nm23-H2的转录激活因子作用和DNA结合特性,是nm23基因调控的基本机理。     

唾液蛋白质组学唾液样本制备的方法学初探

目的：通过对唾液淀粉酶单克隆抗体的制备和鉴定,寻找蛋白质组学研究中样本制备关键环节的可行性方案,为日后唾液蛋白质组学研究奠定基础。方法：将腮腺液经超滤法浓缩蛋白后,进行SDS-PAGE分析,切取分子量为50～65kDa的高丰度蛋白条带,研磨后注射BALB/c小鼠,诱导产生免疫应答并制备人唾液淀粉酶单克隆抗体,应用酶联免疫吸附试验和蛋白免疫印记等方法鉴定。结果：成功制备和鉴定了人唾液淀粉酶单克隆抗体。结论：成功制备和鉴定了唾液淀粉酶单克隆抗体,为唾液蛋白质组学研究中样本制备提供解决方案。     

LMP-1转染人胎盘源间充质干细胞前后蛋白质组学研究

目的:采用蛋白质组学技术检测LIM矿化蛋白-1(LIM mineralization protein-1,LMP-1)转染人胎盘源间充质干细胞(Human placenta-derived mesenchymal stem cells,hPDMSCs)前后蛋白质组学改变。方法:提取hPDMSCs LMP-1和hPDMSCsvector细胞总蛋白,通过二维凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)制备两组细胞的二维电泳图谱,并用PDQuest软件进行图像分析,寻找差异表达的蛋白质点,并用基质辅助激光解吸粒子-飞行时间电离质谱(matrix-assisted laser desorption-ionization time-of-flight tandem mass spectrometry,MALDI-TOF-MS)分析技术对这些差异表达的蛋白质点进行鉴定,并选取6个与成骨相关的蛋白(PCNA, vimentin, annexin A1, annexin A2, eEF2和peroxiredoxin-1)作为验证对象,蛋白质印迹法检测各蛋白在两组细胞中的表达水平。结果:采用2-DE技术建立了hPDMSCsLMP-1和hPDMSCsvector两组细胞的二维电泳图谱;PDQuest软件分析图像发现两组细胞有22个差异蛋白质点,采用MALDI-TOF-MS质谱初步鉴定出15个蛋白质点,其中表达上调9个,下调6个。Western blot检测结果与蛋白质组学一致。结论:LMP-1基因转染hPDMSCs后共筛选获得15个差异表达的蛋白,它们是成骨分化潜在的重要参与者,为进一步阐明LMP-1对hPDMSCs细胞功能和成骨分化影响的分子机制奠定基础。     

连接蛋白43与正畸骨重建

正畸力引起骨重建,它包括骨细胞、成骨细胞、破骨细胞和牙周膜细胞的协同作用,但细胞与细胞间的传递机制远未研究清楚。随着免疫组化和分子生物学技术的应用,研究表明:连接蛋白43(Connexin43,Cx43),作为骨细胞间隙连接的主要结构蛋白,在细胞间的信息传递中起着重要作用。本文就连接蛋白Cx43及其与正畸骨重建关系方面的研究进展进行综述。     

牙龈和牙周膜成纤维细胞标志及信号的研究进展

对牙龈成纤维细胞和牙周膜成纤维细胞骨化功能标志蛋白、细胞信号分子、细胞表面抗原等特异性的表达标志最新研究结果进行综述。     

nm23基因调控机理的研究进展

ｎｍ２３基因作为肿瘤转移抑制因子，在肿瘤发展和转移过程中有重要调节作用。近年来，通过对ｎｍ２３基因及其蛋白产物ＮＤＰＫ的深入研究揭示，ｎｍ２３／ＮＤＰＫ以组氨酸依赖性磷酸转移酶活性和丝氨酸自磷酸化为基础，对细胞信号传递系统、微管相关蛋白和基底膜形成微环境的调节，以及ｎｍ２３－Ｈ２的转录激活因子作用和ＤＮＡ结合特性，是ｎｍ２３基因调控的基本机理。     

2型糖尿病大鼠下颌骨的蛋白质组学研究

目的:通过蛋白质组学研究,检测2型糖尿病大鼠下颌骨与正常大鼠下颌骨表达差异的蛋白。方法:选取8周龄Wistar大鼠和2型糖尿病大鼠Goto-Kakizaki(GK)大鼠,分别作为对照组和实验组。测量2组大鼠的体重和血糖,同期处死后切取下颌骨。提取各组下颌骨蛋白后,经双向凝胶电泳(2-DE)及MALDI-TOF/TOF质谱分析,鉴定筛选出2组大鼠下颌骨组织差异表达的蛋白。采用SPSS15.0软件包对数据进行统计学分析。结果:2组大鼠体重无显著差异,GK大鼠血糖显著高于Wistar大鼠(P<0.05)。经蛋白质组学研究,成功鉴定出20个2组间差异3倍以上的蛋白,其中5个蛋白点差异倍数在20倍以上。5个蛋白主要涉及代谢、蛋白结合以及信号转导3大功能。结论:2型糖尿病大鼠与正常大鼠下颌骨组织间存在的差异蛋白,有助于探讨2型糖尿病对下颌骨的影响机制。