CD3＋细胞分选及临床应用

ＣＤ３４＋是造血干细胞的免疫表型，采用某种方法选择ＣＤ３４＋细胞，选择后ＣＤ３４＋细胞浓集，其百分率有较大增高，并可以有效去除Ｔ细胞及某些恶性肿瘤细胞，选择ＣＤ３４＋细胞移植可以减少异基因移植后急性，重度移植物抗宿主病（ＧＶＨＤ），并可能减少自体移植后原发病复发。本文介绍了造血干细胞的免疫表型，生物学特性及ＣＤ３＋细胞分选方法、临床应用等方面的研究进展。     

异基因骨髓移植治疗恶性组织细胞病一例

目的：观察异基因骨髓移植治疗恶性组织细胞病（恶组）的疗效及副作用。方法：化疗及全身照射后，输入ＨＬＡ－Ａ、Ｂ、ＤＲ、ＤＱ相合供者的异基因骨髓。结果：＋２２天ＤＮＡ指纹图证实完全植入；＋４０天出现Ⅱ度急性移植物抗宿主病；＋５０天骨髓有核细胞增生活跃，未见异常细胞；＋６个月颈部出现带状疱疹，经无环鸟苷治愈。移植后患者已无病生存２４个月。结论：该例为国内首例异基因骨髓移植治疗恶组取得骨髓植活、造血重建、生存期延长的明显效果     

人脐血造血干／祖细胞移植的研究进展

人脐血作为一种可替代骨髓的造血干细胞资源，具有移植成活率高，移植物抗宿主反应轻的特点。脐血富含ＣＤ３４＋细胞，对异抗原刺激反应较低，具有高增生和长期骨髓重建的能力。脐血造血干细胞较外周血和骨髓更为原始，大部分ＣＤ３４＋细胞属于寝髓系分化细胞，ＣＤ３４＋ＣＤ３８－具有Ｂ－细胞和粒细胞两种分化途径的能力。脐血具有独特的免疫特性，能耐受异基因的刺激，Ｂ细胞处于休眠状态。在一定条件下，脐血ＮＫ细胞毒作用明     

HLA相合同胞脐血移植治疗急性髓系白血病成功——国内首例报告

目的 研究脐血移植（ ＵＣＢＴ） 对恶性血液病的根治性治疗; 观察其长期造血重建和移植物抗宿主病（ＧＶＨＤ） 及移植并发症发生情况。方法 给１ 例急性粒细胞白血病完全缓解期的１１ 岁男性患儿移植ＨＬＡ 配型相合的同胞脐血。预处理选用ＢＵ／ＣＹ 方案（ 马利兰４ ｍ ｇ ·ｋｇ －１ ·ｄ － １ ×４ ,环磷酰胺６０ ｍｇ ·ｋｇ － １ ·ｄ － １ ×２） 。ＧＶＨＤ 预防用环孢霉素Ａ（ＣｓＡ） 。移植有核细胞为０ ．３５ ×１０８／ｋｇ ,ＣＦＵＧＭ １ ．８２ ×１０４／ｋｇ ,ＣＤ３４ ＋ 细胞２ ．０４ ×１０５／ｋｇ 。结果 ＋ １４ 天骨髓显示造血重建;＋ ２１ 天中性粒细胞（ＡＮＣ） ＞ １ ．０ ×１０９／Ｌ;＋ ６０ 天ＤＮＡ 位点检测显示移植物植入成功;＋ １００ 天受者血型由Ｏ 型转为供者血型Ｂ 型。随访３３０ 天,患者情况正常,未发生急、慢性ＧＶＨＤ。结论本例为国内首例异基因脐血移植治疗急性粒细胞白血病获得成功;开展同胞ＨＬＡ 相合脐血移植安全、有效,适合中国国情,值得深入研究。     

CD34^＋细胞纯化在外周血干细胞移植中的应用

外周血干细胞的纯化方法有多种，其中，利用干细胞和一些肿瘤细胞，Ｔ细胞表面不同的抗原表达而设计的ＣＤ３４阳性／阴性选择已开始应用于临床，可以明显减少干细胞植入时移植物所含的有肿瘤细胞和Ｔ细胞的数量，从而降低了自身移植后的复发倾向和同种异基因移植后ＧＶＨＤ的发生。     

异基因造血干细胞移植后早期和成就T细胞亚群的恢复

对２１例异基因造血干细胞移植病人移植后３个月内外周血Ｔ细胞ＣＤ３＾－ＣＤ５＾＋和ＣＤ３＾＋ＣＤ５＾＋亚群的百分比进行了测定。ＣＤ３＾－ＣＤ５＾＋细胞作为早期胸腺细胞的标志,在移植后３个月内均低于正常对照,ＣＤ３＾＋ＣＤ＾＋细胞作为成熟Ｔ细胞的标志,在移植后２－３个月开始恢复,说明移植后早期（３个月内）Ｔ细胞数量的恢复主要依靠成就Ｔ细胞的扩增。ＣＤ３＾＋ＣＤ５＾＋细胞在发生急性移植物抗宿主病的病人中     

脐血CD34^＋细胞体外扩增的研究

采用ＤｙｎａｌＭ－４５０ＣＤ＿（３４）免疫磁珠分离纯化脐血ＣＤ＿（３４）￣＋细胞，并探讨了不同细胞因子［干细胞因子（ＳＣＦ）、白细胞介素６（ＩＬ－６）、白细胞介素３（ＩＬ－３）及红细胞生成素（Ｅｐｏ）］组合对脐血ＣＤ＿（３４）￣＋细胞的体外培养和扩增作用。结果表明：①经ＤｙｎａｌＭ－４５０ＣＤ＿（３４）免疫磁珠分离的脐血ＣＤ＿（３４）￣＋细胞，其纯度达８５％～。９５％；②甲基纤维素培养体系中，在不同组合的细胞因子作用下，脐血ＣＤ＿（３４）￣＋细胞的集落产率明显不同，单用ＩＬ－６最低，ＳＣＦ、ＩＬ－６、ＩＬ－３及Ｅｐｏ联用产率最高；③在低氧液体培养体系中，ＩＬ－６和ＩＬ６＋Ｅｐｏ不能有效地扩增脐血ＣＤ＿（３４）￣＋细胞，而其它细胞因子组合均可产生明显的扩增作用；其中加Ｅｐｏ的组合扩增效果显著高于无Ｅｐｏ的相应组合。脐血ＣＤ＿（３４）￣＋细胞分离、纯化及其体外扩增的研究对于脐血造血细胞库的建立，脐血造血细胞移植和基因导入的研究均具有重要意义。     

混合骨髓移植的实验研究

目的：探讨在异基因骨髓移植治疗白血病中既控制移植物抗宿主病（ＧＶＨＤ）又同时保留移植物抗白血病（ＧＶＬ）作用的移植方案。方法：采用近交系小鼠移植模型，在异基因骨髓、脾细胞移植物中混合一定比例的同基因脾细胞，观察移植后受鼠ＧＶＨＤ死亡率、脾结节数、移植后不同时间骨髓造血重建细胞来源以及受鼠脾脏淋巴细胞对供、受鼠双方来源的刺激细胞增殖反应；采用Ｌ６１５小鼠白血病模型观察混合移植对荷瘤小鼠生存时间及死亡原因的影响。结果：混合移植可以有效减轻ＧＶＨＤ，异基因造血免疫细胞在受鼠体内一过性存留并发挥移植物抗宿主反应，使荷瘤小鼠生存时间明显延长。结论：异基因骨髓、脾细胞移植物中混合一定比例的同基因脾细胞使移植受鼠体内既具有主要组织相容性抗原复合物（ＭＨＣ）不合的免疫活性细胞发挥一过性ＧＶＬ作用，同时减轻了异基因骨髓移植的严重ＧＶＨＤ。     

造血干细胞移植现状

造血干细胞是指具有自我复制并分化成为成熟血细胞与免疫活性细胞能力的细胞。根据干细胞的特性，现正日益广泛地用于各种肿瘤及某些遗传性疾病的治疗，由于造血干细胞可从骨髓、外周血、脐血、胎肝获得，因此临床上出现了骨髓移植、外周血干细胞移植、脐血细胞及胎肝移植。８０年代末以前重点为骨髓移植，随着对造血干细胞的深入研究，自８０年代末尤以９０年代开始，一致认为外周血干细胞经动员，其ＣＤ３４＋，ＣＦＵＧＭＦ含量均优于骨髓中的ＣＤ３４＋，ＣＦＵＧＭ含量，故自体及异体外周血干细胞移植有逐渐取代自体及异体骨髓移植…     

外周血CD34~+细胞移植(2)

异基因外周血ＣＤ34 细胞移植的临床应用6.1　ＭＬＡ相合同胞移植　比较异基因骨髓移植而言,ＧＣＳＦ动员的外周血白细胞分离产物中含的Ｔ淋巴细胞约多1个对数级。但近年越来越多的临床证实,ＨＬＡ相合同胞间异基因外周血干细胞移植后急性ＧＶＨＤ的发生并不比骨髓移植后的高,但慢性ＧＶＨＤ的发生要高一些,且临床表现有所不同。一般来讲,引起临床急性ＧＶＨＤ发生的Ｔ细胞输注量约为(0.1～1)×106/ｋｇ体重。实践证明,将造血细胞因子动员的外周血白细胞分离产物经分选富集ＣＤ34 细胞后,不仅可获得高纯度足量ＣＤ34 细胞用于临床移植,还可…     

脐血CD34＋细胞扩增和改善其移植效率的实验研究

目的：探讨脐血ＣＤ３４＋细胞对造血生长因子的扩增效应及其植入成人骨髓基质的能力。方法：利用免疫磁珠法（ＭＡＣＳ）分离纯化脐血ＣＤ３４＋细胞，在液体培养体系中对其进行体外扩增，并利用铺展贴壁实验研究其移植效率。结果：脐血ＣＤ３４＋ＣＤ３８－细胞亚群的比例明显高于骨髓和外周血；在干细胞因子、白细胞介素（ＩＬ）－３、ＩＬ－６、粒细胞集落刺激因子、红细胞生成素存在的情况下，１０～１４天造血祖细胞可扩增近１００倍，细胞总数超过５００倍；但经２小时铺展贴壁后，仅有３６％的脐血ＣＤ３４＋细胞植入经照射预处理的成人骨髓基质，若经粒－巨噬系集落刺激因子和ＩＬ－３预处理６～８小时后则有６８．０％～８９．６％的ＣＤ３４＋细胞植入基质。结论：细胞因子有可能在体外扩增脐血ＣＤ３４＋细胞数量，改善其移植效率，使脐血祖细胞在“质”和“量”上满足临床移植的需要。     

人类脐血CD34^＋细胞的研究进展

本文综述了近年来对脐血ＣＤ３４＾＋细胞（即造血干／祖细胞）的研究进展，表明虽脐血ＣＤ３４＾＋细胞水平低于正常成人骨髓，但其干细胞比例较高且造血功能较强，有利于移植后长期造血的重建。     

外周血干细胞的动员和采集及移植后造血重建研究

对２４例外周血干细胞（ＰＢＳＣ）移植的三种动员方案、采集及移植后的ＰＢＳＣ数量与造血重建关系进行研究。２４例中急性白血病１３例，多发性骨髓瘤６例，非霍奇金淋巴瘤４例，晚期乳癌１例。三组动员方案：化疗＋四氢叶酸＋氟美松；化疗＋ｒｈＧＭ－ＣＳＦ＋氟美松；化疗＋ｒｈＧ－ＣＳＦ＋氟美松。用流式细胞仪双染色直接免疫荧光法测定ｒｈＧ－ＣＳＦ组中９例ＣＤ３４＋ＣＤ３３＋细胞。结果表明：ｒｈＧ－ＣＳＦ组ＰＢＳＣ产率最高，平均每例单个核细胞（９．８６±６．０１）×１０８／ｋｇ，ＣＦＵ－ＧＭ（２１．０８±１６．８６）×１０４／ｋｇ，ＣＤ３４＋细胞数与ＣＦＵ－ＧＭ正相关（ｒ＝０．６８）。动员后再用ｒｈＧ－ＣＳＦ１周，ＣＤ３４＋细胞显著增多，可连续每日采集，当≥５×１０６／ｋｇ即可停止；采集与回输的ＰＢＳＣ数与造血重建时间密切相关。     

白血病多药耐药基因表达与细胞表面分化抗原表达的关系

作者对３７例未治白血病同时检测多药耐药基因ｍＲＮＡ水平及细胞表面分化抗原，探讨两种标志表达的关系及意义。发现在急性非淋巴细胞白血病（ＡＮＬＬ）中多药耐药基因表达增加与ＣＤ３４抗原表达相关，两种标志皆为阳性表达组（ＭＤＲ１＾＋／ＣＤ３４＾＋），化疗敏感性明显降低。结合文献报告所见，认为ＭＤＲ１＾＋／ＣＤ３４＾＋可做为ＡＮＬＬ化疗不敏感的预后指标。在急性淋巴细胞白血病中，多药耐药基因表达增加与ＣＤ３、     

突变的人DHFR肿瘤耐药基因转导脐血干细胞的体外实验研究

目的探讨突变的人二氢叶酸还原酶（ｍＤＨＦＲ）耐药基因在人造血干细胞中抗甲氨蝶呤（ＭＴＸ）的效应。方法应用免疫磁珠分选系统（ＭＡＣＳ）分离纯化脐血ＣＤ３４＋细胞后，用含ｍＤＨＦＲ的逆转录病毒上清转染脐血ＣＤ３４＋细胞，采用造血干细胞集落形成实验进行转导后细胞抗ＭＴＸ分析。结果应用ＭＡＣＳ能高度纯化人ＣＤ３４＋细胞，使分选后的脐血ＣＤ３４＋细胞的纯度平均达９０％，回收率为７１．１％。在ＭＴＸ浓度为２０ｎｍｏｌ／Ｌ的条件下培养１４天，转导ｍＤＨＦＲ耐药基因的脐血干细胞集落形成数明显高于对照组（Ｐ＜０．０１），同时对ＭＴＸ的抗性提高了约２倍。结论突变的人ＤＨＦＲ耐药基因能提高人的造血干细胞对化疗药物ＭＴＸ的抗性。     

慢性髓细胞白血病骨髓的体外净化

慢性髓细胞白血病骨髓的体外净化王立生综述裴雪涛吴祖泽审校慢性髓细胞白血病（ＣＭＬ）是一种造血干细胞起源的恶性血液疾病。异基因骨髓移植（ａｌｌｏ－ＢＭＴ）虽可根治ＣＭＬ，但由于供者来源困难及移植后严重移植物抗宿主病（ＧＶＨＤ）的产生等原因使其应用受到一...     

CD34^＋造血祖细胞的研究进展

ＣＤ３４抗原是造血祖细胞表面的一个较为特异的抗原；ＣＤ３４抗原在造血祖细胞的分化过程中起着某种调节作用；ＣＤ３４＾＋细胞可以重建并维持机体的正常造血，利用ＣＤ３４抗原的一些单克隆抗体可以富集造血祖细胞，用于造血干细胞移植和基因治疗。本文对ＣＤ３４抗原的生物学特性、ＣＤ３４＾＋细胞的特性及分离检测方法、临床应用进行了综述。     

非亲缘异基因骨髓移植急性移植物抗宿主病的护理

非亲缘异基因骨髓移植 (ＵＲＤ -ＢＭＴ)是从无血缘关系人类白细胞抗原 (ＨＬＡ)配型相合的供者体内采集骨髓 ,移植于受者体内以恢复造血功能 ,根治白血病的一种有效方法。在我国因供者选择困难及移植并发症高尚处于起步阶段。据报道 ,ＵＲＤ -ＢＭＴ移植相关死亡率高于亲缘异基因骨髓移植 ,而急性移植物抗宿主病 (ａＧＶＨＤ)是移植失败的主要原因之一[1] 。提高护士对ＵＲＤ -ＢＭＴ后ａＧＶＨＤ临床特点的认识 ,采取有效的护理措施 ,对移植成功与否至关重要。现将我院 1999年 6月～ 2 0 0 1年 8月进行的非亲缘异基因骨髓移植 8例患者ａＧ…     

自体外周血干细胞移植后血小板恢复的预测指标

目的：寻找更确切、有效、方便的预测自体外周血干细胞移植（ＡＰＢＳＣＴ）后血小板恢复能力的指标。方法：利用巨核细胞集落形成单位（ＣＦＵＭＫ）、流式细胞术等技术检测１７例恶性血液病及实体瘤患者外周血干细胞移植物中巨核细胞前体细胞的数量。结果：①ＣＤ３４＋细胞中同时表达血小板膜糖蛋白者＜５％；②ＣＤ３４＋／ＣＤ４１ａ＋细胞的数量与ＡＰＢＳＣＴ后血小板恢复时间之间的相关性较ＣＤ３４＋细胞数量与血小板恢复时间之间的相关性好；③ＣＦＵＭＫ的数量与血小板恢复之间有较好的相关性；④ＣＤ３４＋／ＣＤ４１ａ＋细胞数量与ＣＦＵＭＫ数量之间具有较好的相关性。结论：移植物中ＣＤ３４＋／ＣＤ４１ａ＋细胞数量及ＣＦＵＭＫ数量均可作为ＡＰＢＳＣＴ后血小板恢复的预测指标，但以前者更方便、可靠     

非血缘关系骨髓移植的临床应用

目的 观察配型相合的非血缘关系骨髓移植（ＵＤ－ＢＭＴ）治疗急、慢性白血病的疗效及移植相关并发症。方法 联合化疗及全身照射后,回输配型相合或基本相合的非血缘供者骨髓。结果 ３例患者均值活,并发生急性移植物抗宿主病（ＧＶＨＤ）。例１于＋１００ｄ死于白血病复发,例２于＋６４ｄ血型由Ｏ型转为供者Ｂ型,一年后因白血病复发死亡。例３因呼吸功能衰竭死于移植后＋６４ｄ。结论 ＵＤ－ＢＭＴ治疗进展期白血病,尤其是慢