泛素蛋白酶体抑制剂MG-132对胃癌细胞增殖和凋亡的影响

目的:研究泛素蛋白酶体抑制剂对胃癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:将泛素蛋白酶体抑制剂MG-132加入胃癌细胞SGC7901,用四氮唑蓝(MTT)法测定细胞生长抑制效应,流式细胞仪检测细胞凋亡,免疫细胞化学检测生存素的表达。结果:MG-132对胃癌细胞有显著的抑制作用,24,48h的IC50分别为80.9,9.1μmol·L-1;MG1325.0μmol·L-1作用胃癌细胞24,48,72,96h后,细胞凋亡率分别为(4.2±s0.6)%,(30±4)%,(47±6)%,(53±6)%,生存素在胃癌细胞中呈高表达,经MG132作用后,表达明显降低。结论:MG132能显著抑制胃癌细胞的增殖、诱导其凋亡,并下调生存素的表达。     

蛋白酶体抑制剂MG-132对大鼠骨骼肌成肌调节因子MyoD基因表达的实验研究

<正>泛素-蛋白酶体通路是失神经骨骼肌分解代谢的主要途径,其对蛋白底物的水解作用,可以被蛋白酶体抑制剂所阻断,从而影响细胞的一系列生理功能[1]。Grace等[2]研究表明,损伤后的骨骼肌再生及发育都受成肌调节因子(myogenic     

卡维地洛干预对小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎的影响

目的观察新型β受体阻滞剂卡维地洛干预对小鼠柯萨奇B(CVB3)病毒性心肌炎(VMC)的影响。方法140只近交系4～6周龄♂性Balb/c小鼠随机分为4组。空白对照组20只,心肌炎对照组、卡维地洛干预组及美托洛尔干预组各40只。观察各组的生存率、心肌组织中病毒滴度、心肌组织病理学改变及血清IFN-γ与血清心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnⅠ)含量。结果卡维地洛干预组小鼠的生存率明显高于心肌炎对照组,心肌组织中病毒滴度下降,心肌组织病理改变减轻,血清IFN-γ含量升高,cTnⅠ含量降低。美托洛尔干预组的小鼠生存率、心肌组织中病毒滴度与心肌炎对照组比较无明显差异,心肌组织的病变程度也无明显减轻,与心肌炎对照组相比仅d 14血清cTnⅠ含量降低,血清IFN-γ含量虽升高,但无统计学意义。结论卡维地洛对CVB3感染VMC小鼠有明显的保护作用,美托洛尔对CVB3感染的VMC没有明显保护效果。     

柠檬提取物抗小鼠柯萨奇B3m病毒性心肌炎的研究

目的：观察柠檬提取物对实验性小鼠急性柯萨奇B3m病毒性心肌炎的影响。方法：选取4～6周龄雄性Balb／C鼠腹腔注射柯萨奇病毒B3m株（CVB3m）建立实验性小鼠急性病毒性心肌炎模型。小鼠随机分为正常对照组、模型对照组及3个实验组（实验Ⅰ～Ⅲ组），每组10只。模型对照组和各实验组小鼠腹腔注射病毒1h后灌胃给药，实验Ⅰ～Ⅲ组分别灌服20、60、180倍稀释的柠檬提取液，模型对照组灌服等体积生理盐水，连用7d，正常对照组自然喂养，于第14天处死小鼠。观察各组小鼠心脏质量与体质量比（HM／BM）及心肌HE染色切片病理变化，并测定血清心肌酶含量。结果：（1）各实验组HM／BM较模型对照组明显降低（P〈0．05），实验Ⅰ组、Ⅱ组心肌病理积分较模型对照组明显降低（P〈0．05）。（2）实验Ⅰ组、Ⅱ组血清心肌酶活性较模型对照组明显降低（P〈0．05或P〈0．01）。结论：柠檬提取物对实验性小鼠急性柯萨奇B3m病毒性心肌炎具有一定的治疗作用。     

蛋白酶体抑制剂MG-132通过JNK信号通路对人脑胶质瘤细胞SHG-44内质网应激相关机制的探讨

目的探讨MG-132通过内质网应激途径在诱导人脑胶质瘤细胞SHG-44凋亡中的作用。选择内质网应激凋亡信号转导通路JNK,使用JNK特异阻断剂SP600125,观察MG-132通过JNK信号通路诱导胶质瘤细胞凋亡过程中凋亡指标的变化。方法传代法培养人脑胶质瘤细胞。选择浓度为5、10、15、50μmol/L的MG-132,分别作用于实验组,用噻唑噻(MTT)法筛选半数有效浓度后进行实验。实验分为5组:正常对照组、二硫苏糖醇(DTT)组、MG-132组、SP600125组、MG-132+SP600125组。试剂干预终止后,应用流式细胞仪和DNALadder评估肿瘤细胞凋亡,以聚合酶链反应(PCR)和蛋白印迹法检测内质网应激指标GRP78、JNK。结果5μmol/L为筛选的最佳抑制浓度,SHG-44细胞活力下降达39%(P<0.05)。MG-132干预后,与对照组比较,DNA电泳呈凋亡特征(梯状条带),细胞凋亡率显著增加(P<0.05),GRP78m RNA表达明显增加(P<0.05)。但给予DTT后,与MG-132组表现一致,差异无统计学意义(P>0.05)。SP600125+MG-132较DTT和MG-132组有所减低,但不如单独SP600125组降低明显(P<0.05)。蛋白印迹法结果显示,与对照组比较,MG-132组和DTT组内质网应激指标GRP78、JNK表达明显增加(P<0.05),SP600125+MG-132组表达有所减低,但不如单独给予SP600125组明显(P<0.05)。结论内质网应激是MG-132诱导胶质瘤细胞凋亡的主要途径之一,JNK通路抑制剂SP600125可以部分阻断内质网应激,即JNK信号通路为MG-132发挥凋亡作用的途径之一。     

柯萨奇病毒与病毒性心肌炎

急慢性心肌炎有 45 %～ 65 %是由柯萨奇病毒引起。其引起心肌损伤的原因可能与宿主自身免疫状况、病毒毒株等多种因素有关 ,现将其引起心肌损伤的机制的研究作一综述     

三七总皂苷对小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎诱导型一氧化氮合酶的影响

目的：探讨三七总皂苷对小鼠柯萨奇B3病毒所致病毒性心肌炎模型中诱导型一氧化氮合酶（iNOS）表达的影响,为病毒性心肌炎的治疗寻找新的理论依据。方法：选用近交系4～6周龄雄性BALB／C小鼠84只,随机分为3组：空白对照组（C组）24只,心肌炎组（V组）30只,治疗组（T组）30只。于病毒接种后第8天、第15天、第21天分别采血后处死小鼠并留取心脏标本,采用免疫组化法检测心肌iNOS蛋白表达,硝酸还原酶法测定血清NO含量,光镜及透射电镜观察心肌组织病理及细胞超微结构改变。结果：（1）V组和T组小鼠心肌细胞iNOS免疫组化染色表达呈阳性,c组iNOS免疫组化染色阴性;（2）T组与V组比较,心肌细胞iNOS表达在第15天及第21天明显降低,差异有统计学意义（P〈0．05、P〈0．01）;（3）T组在第15天及第21天血清NO含量较V组明显降低（P〈0．05）;（4）光镜下T组炎症细胞浸润较V组轻,炎症积分在第15天及第21天明显低于V组（P〈0．05、P〈0．01）;（5）电镜下V组及T组可见肌原纤维溶解断裂,线粒体膜消失,含溶酶体丰富的单核巨噬细胞浸润,c组小鼠心肌未见上述变化。结论：三七总皂苷可降低小鼠病毒性心肌炎iNOS的表达,从而减少NO释放,可能对病毒性心肌炎有一定治疗作用。     

泛素-蛋白酶体抑制剂MG-132对食管癌细胞凋亡和生存素表达的影响

目的:研究泛素-蛋白酶体抑制剂MG-132对食管癌细胞凋亡和生存素(survivin)表达的影响。方法:将泛素-蛋白酶体抑制剂MG-132加入食管癌细胞Eca9706中,采用MTT法测定细胞生长抑制率,经流式细胞仪检测细胞凋亡,免疫细胞化学法检测survivin的表达。结果:MG-132对食管癌细胞生长具有显著抑制作用,作用24、48、72、96h后的IC50分别为120.2、18.1、—12.2、—16.9μmol/L;5.0μmol/L的MG-132作用于食管癌细胞24、48、72、96h后,细胞凋亡率分别为(3.1±0.4)%、(31.7±3.5)%、(50.4±4.8)%、(66.6±6.2)%;Survivin在食管癌细胞中呈高表达,经MG-132作用后,表达明显降低。结论:MG-132能显著抑制食管癌细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与下调survivin表达有关。     

泛素-蛋白酶体途径在病毒感染中的作用研究进展

泛素-蛋白酶体途径是真核生物中非溶酶体蛋白降解的主要系统,主要包括泛素,26S蛋白酶体和酶系统E1、E2、E3。泛素-蛋白酶体参与调节细胞周期进程、抗原递呈、转录和信号转导等多种细胞生理过程。研究发现,病毒可以利用泛素系统调控病毒的基因转录、抑制细胞凋亡、降解抗病毒蛋白、促使病毒出芽和释放等逃避宿主的免疫监视。深入理解泛素-蛋白酶体在病毒感染中的作用可以为抗病毒治疗提供新思路。     

Proteasome inhibitor MG-132 induces C6 glioma cell apoptosis via oxidative stress

Aim:

Proteasome inhibitors have been found to suppress glioma cell proliferation and induce apoptosis, but the mechanisms are not fully elucidated. In this study we investigated the mechanisms underlying the apoptosis induced by the proteasome inhibitor MG-132 in glioma cells.

Methods:

C6 glioma cells were used. MTT assay was used to analyze cell proliferation. Proteasome activity was assayed using Succinyl-LLVY-AMC, and intracellular ROS level was evaluated with the redox-sensitive dye DCFH-DA. Apoptosis was detected using fluorescence and transmission electron microscopy as well as flow cytometry. The expression of apoptosis-related proteins was investigated using Western blot analysis.

Results:

MG-132 inhibited C6 glioma cell proliferation in a time- and dose-dependent manner (the IC₅₀ value at 24 h was 18.5 μmol/L). MG-132 (18.5 μmol/L) suppressed the proteasome activity by about 70% at 3 h. It induced apoptosis via down-regulation of antiapoptotic proteins Bcl-2 and XIAP, up-regulation of pro-apoptotic protein Bax and caspase-3, and production of cleaved C-terminal 85 kDa PARP). It also caused a more than 5-fold increase of reactive oxygen species. Tiron (1 mmol/L) effectively blocked oxidative stress induced by MG-132 (18.5 μmol/L), attenuated proliferation inhibition and apoptosis in C6 glioma cells, and reversed the expression pattern of apoptosis-related proteins.

Conclusion:

MG-132 induced apoptosis of C6 glioma cells via the oxidative stress.     

带有caspase富集功能域的凋亡抑制因子对急性病毒性心肌炎小鼠心肌的保护作用

目的 研究急性病毒性心肌炎（AVMC）小鼠的带有caspase富集功能域的凋亡抑制因子（ARC）的表达及对心肌的保护。方法 将60只成功建立AVMC模型的小鼠随机分为ARC反义寡核苷酸组（A组）、ARC错义寡核苷酸组（B组）和生理盐水对照组（C组）,每组20只。分期分别采集标本测定外周血心肌钙蛋白T（cTnT）、心肌钙蛋白I（cTnI）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同功酶（CK-MB）水平和ARC、动力相关蛋白1（Drp1）表达等数据。结果 造模后第7、14、21天,3组外周血cTnT、cTnI、CK、CK-MB水平差异有统计学意义（P<0.05）,C组与B组相近（P>0.05）,但均低于A组（P<0.05）。造模后第7天,3组ARC与Drp1蛋白表达水平差异有统计学意义（P<0.05）,C组ARC表达与B组相近（P>0.05）,但均高于A组（P<0.05）,C组Drp1蛋白表达与B组相近（P>0.05）,但均低于A组（P<0.05）;造模后第14、21天3组ARC与Drp1蛋白表达水平差异无统计学意义（P>0.05）。结论 小鼠发生AVMC后高表达的ARC可抑制心肌细胞凋亡,对心肌组织有保护作用。     

病毒性心肌炎脂联素表达及替米沙坦的干预效果

目的：探讨替米沙坦对病毒性心肌炎小鼠脂联素,肿瘤坏死因子-α表达的影响。方法制备柯萨奇B3病毒感染的心肌炎小鼠60例,其中30例自病毒感染之日并连续7 d喂食替米沙坦作为观察组;另外30例无药物干预的心肌炎小鼠作为对照组;10例未感染病毒也无药物干预的小鼠作为空白组。观察3组小鼠的心肌病理组织学积分;组织病理改变;双抗体夹心酶联免疫法测定血清脂联素、TNF-α浓度。结果喂食替米沙坦的观察组血清脂联素水平明显高于未药物干预的对照组,而TNF-α、病理积分均低于对照组,差异有统计学意义（ P ＜0．05）。与空白组相比,观察组血清脂联素、TNF-α、病理积分水平明显升高,差异有统计学意义（ P ＜0．05）。与空白组相比,对照组血清脂联素降低,而TNF-α、病理积分水平明显升高,差异有统计学意义（ P ＜0．05）。对照组小鼠接种病毒后第7天,可见心肌水肿、炎性细胞浸润、心肌细胞变性坏死等,观察组心肌炎症细胞较对照组明显减少。结论替米沙坦能够增加对心脏有保护作用的脂联素表达,减少TNF-α的分泌,减少心肌炎症损伤。     

还原型谷胱甘肽对小鼠急性肝损伤的保护作用

目的：观察还原型谷胱甘肽对急性肝损伤的保护作用。方法：用D－氨基半乳糖及四氯化碳致小鼠急性肝损伤，还原型谷胱甘肽分别采用灌胃及腹腔注射给药，观察指标为：ALT、AST、ALP及肝脏病理形态。结果：还原型谷胱甘肽组小鼠肝细胞肿胀、胞浆疏松、炎症细胞浸润程度明显较D－氨基半乳糖组轻。结论：还原型谷胱甘肽对急性肝损伤有保护作用。     

生脉注射液联合二磷酸果糖治疗病毒性心肌炎临床观察

目的临床观察生脉注射液联合二磷酸果糖治疗病毒性心肌炎（VMC）的疗效及不良反应。方法随机将住院患儿中诊断为VMC的55例分成观察组和对照组,其中观察组28例,对照组27例;对照组给予二磷酸果糖等常规基础治疗,观察组在常规治疗基础上按疗程加用生脉注射液治疗,疗程结束后比较两组治疗结果。结果两组患儿临床症状、血清心肌酶、心电图等比较,差异有统计学意义（P〈O．05）;观察组未发现不良反应,综合疗效明显优于对照组（P〈0．05）。结论生脉注射液联合二磷酸果糖治疗VMC疗效确切,无明显不良反应。     

1例急性病毒性心肌炎患者的药学监护

一例24岁女性患者,因急性病毒性心肌炎入院,经营养心肌、抗病毒、抗心律失常等治疗后,患者胸闷、心悸症状逐渐缓解,但心电图出现Ⅲ度房室传导阻滞、交界性心律.遂给予激素冲击治疗2周,之后患者症状好转,但传导阻滞持续存在.临床药师对治疗方案进行评估并协助医师优化治疗方案,建议停用丹参注射液、果糖二磷酸等药物,改用黄芪注射液.考虑到利巴韦林的致畸作用确切,建议育龄男女慎用利巴韦林,并加强患者避孕教育.密切监测美托洛尔不良反应,在出现传导阻滞时,建议及时停用美托洛尔并加用大剂量糖皮质激素,期间密切关注失眠、水钠潴留等糖皮质激素的不良反应.     

参麦注射液佐治小儿病毒性心肌炎临床观察

目的:观察参麦注射液佐治小儿病毒性心肌炎的临床疗效.方法:将49例病毒性心肌炎住院患儿随机分为治疗组25例,对照组24例,对照组采用常规治疗,治疗组加用参麦注射液静脉滴注,观察两组患儿的临床症状、心电图、心肌酶谱等指标变化.结果:治疗组总有效率92.0%,对照组总有效率75.0%,治疗组疗效优于对照组(P＜0.05).结论:参麦注射液佐治小儿病毒性心肌炎可提高临床疗效,无明显不良反应.     

黄芪总皂甙对病毒性心肌炎小鼠慢性期SERCA活性的影响

目的　探讨黄芪提取物 -黄芪总皂甙对柯萨奇病毒B3(CVB3)感染的病毒性心肌炎(VMC)小鼠慢性期心肌肌浆网钙泵 (SERCA)活性变化的影响。方法　将BALB/C小鼠分为正常组(31只 )、模型组 (36只 )及黄芪组 (2 6只 ) ,模型组及黄芪组每只小鼠以 2× 10 4 TCID50 CVB3(TCID50 为10 -5 83)腹腔注射感染。黄芪组每鼠每天腹腔注射 0 15ml黄芪总皂甙注射液 ,正常及模型组予同体积的生理盐水。 3个月后 ,观察各组小鼠死亡率及心肌病理改变 ,检测血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)含量及心肌组织中SERCA活性。结果　 (1)和正常组、黄芪组相比 ,模型组小鼠死亡率显著增高 (P <0 0 5～ 0 0 0 1)。 (2 )感染 3个月后模型组、黄芪组心肌肌钙蛋白I(cTnI)及心肌病理改变与正常组无显著性差异 (P >0 0 5 )。 (3)模型组心肌SERCA活性显著低于正常组及黄芪组 (P <0 0 1)。结论　黄芪总皂甙可以降低VMC小鼠的死亡率 ,对慢性期病毒感染所致心肌组织SERCA功能下调有逆转作用