HPLC—MS／MS法测定人体血浆中格列美脲及其活性代谢物

目的：建立同时测定格列美脲（Glimepiride,G）及其活性代谢物羟基格列美脲（Hydroxyl—glimepiride,M1）血浆浓度的高效液相色谱一串联质谱（HPLC—MS／MS）法。方法：血浆样品酸化后,经乙酸乙酯萃取后浓集进样,色谱柱为PhenomenexGeminiC18（50mill×3．0mm,5μm）,甲醇：水：甲酸（80：20：0．1）为流动相,流速为0．2mL／min,柱温为室温,采用电喷雾（ESI）离子源,多反应离子检测模式,以格列齐特（Gliclazide,IS）为内标。G、M1和IS的检测离子对分别为质荷比（仇／z）491．4—352．4、507．4—352．4、324．4—127．2。结果：G和M1的线性范围分别为1．25～400ng／mL和0．313～100ng／mL,最低定量限分别为1．25和0．313ng／mL;批内批间精密度均小于10％,方法回收率均在96．4％～102．5％之间。结论：该方法简便快速、特异性高,可用于同时测定G和M．血药浓度及其人体药代动力学的研究。     

LC-MS／MS测定甲磺酸伊马替尼中的伊马胺

目的建立高效液相色谱一质谱联用测定甲磺酸伊马替尼中基因毒性杂质伊马胺的方法。方法选用C18色谱柱（3．5μm,150mm×3．0μm）,以0．05％甲酸的乙腈-20mmol／L甲酸铵为流动相,采用梯度洗脱进行分离,流速：0．5mL／min;柱温为40％;进样量10μL。对照品溶液选用TSQ Quantum Ultra质谱仪的选择离子检测（SIM）扫描方式进行检测。结果该方法在2．5～100．0ng／ml范围内线性良好（0．998）,定量限和检出限分别为2．5ng／mL和1．Ong／mL,方法回收率97．1％,稳定性较好。结论本研究所建立的方法快速、灵敏、专属性强,适用于甲磺酸伊马替尼中基因毒性杂质伊马胺的测定。     

UFLC-MS／MS法快速测定酚酞片中的酚酞

目的建立超快速液相色谱-质谱／质谱联用（UFLC—MS／MS）法测定酚酞片中酚酞的量。方法样品以乙醇提取、微孔滤膜滤过、离心后,通过电喷雾离子化（ESI）,采用多反应检测（MRM）方式进行正离子检测,用于定量分析的检测离子为m／z319．0→225-2。采用Shim-packXR-ODS色谱柱（75mm~3．0mm,2．0μm）分离,以乙腈-水．甲酸（55：45：0．1）为流动相,体积流量为0．40mL／min,在3min内完成酚酞定量分析。结果线性范围为2．5～1000．0ng／mL,最低检测限为2．5ng／mL;日内RSD小于1．85％,日问RSD小于2．56％。结论本方法灵敏度高,分析速度快,操作简单,可作为酚酞片中酚酞质量控制方法。     

高效液相色谱法测定复方氨酚烷胺胶囊中胆红素含量

目的建立复方氨酚烷胺胶囊中胆红素含量测定的高效液相谱（HPLC）法。方法色谱柱为EclipseXDB-C18（250mm×4．6mm,5μm）,以甲醇-乙腈-2％冰醋酸溶液（62：35：3）为流动相,检测波长452nm,流速1．5mL／min,进样量10μL,柱温35℃。结果胆红素质量浓度在1～30μg／mL范围内与峰面积线性关系良好,r=0．9999（n=5）。平均回收率为98．71％,RSD为0．35％（n=6）。结论HPLC法操作简便、快速,结果准确,可用于产品的质量控制。     

LC-MS／MS法测定全血中他克莫司浓度的方法学研究

目的：建立测定人全血中他克莫司液相色谱-串联质谱联用（LC-MS／MS）方法,并与微粒子免疫分析（MEIA）方法测定的结果进行了比较。方法：运用LC-MS／MS方法,血样经乙腈沉淀蛋白,上清液氮气吹干流动相复溶进样。色谱柱：Zorbax Extend—C18柱（150mm×4．6mm,5μm）;流动相：甲醇-乙腈-20mmol·L^-1醋酸胺溶液（80：15：5）;流速：0．4ml·min^-1。采用电喷雾离子化四极杆串联质谱,多反应检测方式测定样品的浓度。检测离子对分别为m／z821．7→m／z 768．4和m／z 821．7→m／z 786．5。结果：他克莫司在0．5～128ng·ml^-1浓度范围内,峰面积与浓度线性关系良好（r=0．9991,／2=5）,最低定量限为0．5ng·ml^-1,平均回收率为99．0％,日内精密度、日间精密度的RSD分别为3．38％和4．16％。MEIA分析采用标准IMX测定方法。两种方法比较,其标准差小于3．0,表明相关性好。结论：本方法具有良好的灵敏度、准确度、精确度及专属性,可用于他克莫司血药浓度监测和人体药药动力学研究。     

超高效液相色谱串联质谱法测定人血浆中阿托伐他汀浓度

目的建立测定人血浆中阿托伐他汀浓度的超高效液相色谱串联质谱（UPLC—MS／MS）法。方法色谱柱为Acquity UPLC BEH C18柱（50mm×2．1mm。1．7μm）,柱温40℃,流动相为乙腈-含0．01％甲酸的水溶液（70：30）,流速为0．3mL／min,进样量10μL,电喷雾离子化（ESI^＋）正离子MRM扫描。检测离子为m／z 559．2[M＋H]^＋→440．5[M＋H]^＋（阿托伐他汀）,m／z315．5[M＋H]^＋→109．3[M＋H]^＋（黄体酮）,血浆样品采用乙酸乙酯提取,50℃水浴氮气挥干,用黄体酮作为内标定量分析。结果阿托伐他汀血药浓度在0．01。50ng／mL线性关系良好（r=0．9989）。回收率在95％-106％之间,萃取回收率在72％-79％之间（RSD〈4％,n=5）,日内、日间精密度的RSD均小于5％（n=5）,最低检测质量浓度为0．002ng／mL。结论该方法准确、灵敏、简便,适用于阿托伐他汀的血药浓度测定。     

HPLC法测定三子降酶胶囊中五味子醇甲的含量

目的建立三子降酶胶囊中五味子醇甲含量的高效液相色谱测定方法。方法采用Agilent Eclipse XDB C18（4．6mm×250mm,5μm）色谱柱,流动相：甲醇-水（63：37）,流速：1．0mL·min-1检测波长：250nm,柱温：35℃。结果五味子醇甲在0．10～1．97μg内呈良好的线性关系（r=0．9999）,平均回收率为98．4％（n=6）,RSD=0．8％。结论本方法简便、准确、重复性好,可用于三子降酶胶囊的质量控制。     

LC-MS／MS法测定心脑欣丸中甜菜碱的含量

目的建立心脑欣丸中甜菜碱的含量测定方法。方法采用LC—MS／MS法测定甜菜碱的含量,以电喷雾离子源（ESI）正离子模式将样品离子化,多反应监测（MRM）模式下对甜菜碱（m／z 118．20→57．92和118．20→59．00）进行测定。色谱柱为Venusil HILIC（100mm×2．1mm×3μm）,流动相为乙腈-水（80：20）,流速0.3mL·min^-1。结果甜菜碱浓度在4．44～177．6ng·mL^-1线性关系良好（r=0．9999）,平均回收率为99．4％,RSD为1．5％（n=6）。结论该方法简便、可靠、准确,可作为心脑欣丸中甜菜碱的含量测定方法。     

用RP—HPLC法测定人体内辛伐他汀血药浓度

目的：建立RP-HPLC法测定人血浆中辛伐他汀的含量。方法：采用Kromasil C18色谱柱（250mm×4．6mm，5μm）；流动相为甲醇-乙腈-水（80：5：15）；流速为1．0mL／min；检测波长238nm；柱温为30℃。结果：辛伐他汀的血药浓度在2．0～150．0ng／mL范围内线性良好，定量下限为2．0ng／mL。回归方程为A=1．589×10^8c-218．0，r=0．9999（n=7），低、中、高浓度（6．5、23．0、65．0ng／mL）的相对回收率分别为（100．28±3．35）％、（97．57±3．21）％和（100．25±2．82）％，日内和日间RSD为2．40％～4．32％（n=5）。结论：本法快速、高效、灵敏，适用于辛伐他汀的血药浓度测定。     

高效液相色谱法测定人血浆中恩曲他滨

目的：建立高效液相色谱测定人血浆中恩曲他滨浓度的方法。方法：血浆样品0．4mL，加入0．5mL水混匀后上柱抽干，先后用1mL水洗去杂质，用0．5mL甲醇洗脱样品，洗脱液吹干后用0．2mL流动相溶解，10μL进样检测。分析柱：Inertisil C8（150mm×4．6mm，5μm）；保护柱：EXT-C18（12．5mm×4．6mm，5μm）；流动相：0．02mol·L^-1磷酸二氢钾溶液（含0．002％四丁基氢氧化铵）-乙腈（88：12），流速：1mL·min^-1柱温：30℃；紫光检测波长：280nm。结果：血浆中恩曲他滨浓度在0．05～8μg·mL^-1范围内，A与C呈良好的线性关系，典型的回归方程为：A=37．98C＋0．0284（r=0．9993），最低检测浓度为0．05μg·mL^-1，平均提取回收率为91．4％，日内RSD〈6．6％，日间RSD〈5．9％。结论：方法简便、快速，灵敏度高，可用于恩曲他滨的药动学研究。     

高效液相色谱-质谱法测定伪麻黄碱血药浓度

目的建立高效液相色谱-质谱（HPLC-MS）法测定伪麻黄酸碱的血药浓度。方法将血浆样品采用甲醇沉淀后，以格列吡嗪为内标进行测定。色谱柱为Agitent Zorbax SB-C18柱（150mm×4．6mm，5μm），流动相为5mmol／L醋酸铵-甲醇（10：90，V／V），流速为1．0mL／min，离子检测方式设为选择性离子检测（SIM），检测离子极性为正离子，采用气动辅助电喷雾离子化（ESI）方式．检测对象为伪麻黄碱（M＋H离子，m／z148．4），内标格列吡嗪（M＋Na离子，m／z468．1）。结果线性范围为5．01～1002μg／L（r=0．9997），最低检测限为5／μg／L。方法回收率为89．6％～95.1％，日内、日间精密度RSD分别小于5.2％和7.1％。结论该方法选择性好，灵敏度高．简便易行，适用于伪麻黄碱药代动力学和生物等效性研究。     

高效液相色谱串联质谱法测定人血浆中吲达帕胺浓度及生物等效性研究

目的:建立一种简单、有效且灵敏的液质联用法(LC-MS/MS)检测人血浆中吲达帕胺浓度。方法:血浆样品经叔丁基甲基醚(tert-ButylMethyl Ether,MTBE)萃取后,选安定作内标。色谱柱为Luna C18柱(150mm×2.0mm,5μm);流动相为10mmol/L甲酸铵(含0.1%甲酸):甲醇=(20∶80,V/V);流速为0.30mL/min;采用ESI+MRM方式监测;源电压:3.5kV;源温度:100℃;吲达帕胺和安定的离子选择通道分别为:m/z 366.2→132.1,285.2→154.1。结果:吲达帕胺线性范围为0.536～45.733ng/mL,最低检测浓度为0.536ng/mL,提取回收率在69%～81%,日内、日间RSD均<15%。由湖南协力药业有限公司生产生产的吲达帕胺缓释片(1.5mg/片)与施维雅(天津)制药有限公司生产的吲达帕胺缓释片(商品名:纳催离,1.5mg/片)经单次及多次给药试验研究,具有生物等效性。结论:本方法简单、灵敏,可准确检测人体血浆中吲达帕胺的浓度。     

LC-MS/MS法测定人血浆中法罗培南的浓度

目的:建立以高效液相色谱串联质谱电喷雾检测(LC-MS/MS)法测定人血浆中法罗培南浓度的方法。方法:采用API3200型四极杆串联质谱仪进行检测,色谱柱为Zorbax Eclipse C18,流动相为乙腈-水(70∶30),流速为0.4mL·min-1,离子源为电喷雾离子化源,检测方式为负离子方式,扫描方式为多重反应监测。结果:法罗培南血药浓度在50～2000ng·mL-1范围内线性关系良好(r=0.9991),最低检测浓度为1ng·mL-1(S/N>3);日内RSD<10%,日间RSD<12%,平均回收率为86.96%。结论:本方法简便、快速、精密度好,可用于法罗培南血药浓度的监测及药动学研究。     

高效液相色谱-质谱联用法同时测定盐酸金刚烷胺和马来酸氯苯那敏的血药浓度

目的 建立灵敏、快速的高效液相色谱-质谱联用法同时测定盐酸金刚烷胺和马来酸氯苯那敏的血药浓度.方法 以非那雄胺为内标物,采用C18柱,水(舍0.5‰甲酸)-乙腈-甲醇(18:32:50)为流动相,1 mL血浆样品经液液萃取后,电喷雾离子化源,选择性正离子反应监测.结果 盐酸金刚烷胺和马来酸氯苯那敏分别在3.9~375.0 ng/mL和0.2~19.2 ng/mL时线性关系良好.盐酸金刚烷胺低、中、高浓度测定的相对回收率分别为106.4%,94.9%和93.1%;日内RSD分别为2.6%,3.2%和4.1%;日间RSD分别为4.3%,5.4%和5.6%;最低定量限为3.9 ng/mL,RSD为3.1%.马来酸氯苯那敏低、中、高浓度测定的相对回收率分别为98.9%,97.9%和101.8%;日内RSD分别为8.5%,8.0%和4.1%;日间RSD分别为6.9%,5.5%和5.6%;最低定量限为0.2 ng/mL,RSD为1.7%.结论 所建方法简便、准确、灵敏度高,适合测定盐酸金刚烷胺和马来酸氯苯那敏的血药浓度,可用于临床药物代谢动力学研究.     

大鼠体内槲皮素的血药浓度测定及其药代动力学研究

目的建立测定大鼠血浆中槲皮素浓度的高效液相色谱法,并应用于药代动力学研究。方法10只大鼠(雌雄各半)灌胃给予槲皮素50 mg/kg。采用高效液相色谱法测定槲皮素的血药浓度,以山柰酚为内标,流动相为甲醇-缓冲液(0.1 mol/L NH4AC+0.3 mmol/LEDTA-Na2)-乙酸=(60∶40∶1,V/V),色谱柱为迪马ODS C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),测定波长为370 nm,进样量为20μL,流速为1 mL/min,柱温为35℃。结果槲皮素血药浓度线性范围是0.01～50μg/mL(r=0.999 9),定量下限为0.01μg/mL。低、中、高(0.05,5,25μg/mL)3个质量浓度的回收率为97.2%～103.4%,日内、日间精密度的RSD均小于10%。大鼠灌胃给予槲皮素50 mg/kg后的最大血药浓度为(2.033±0.41)μg/mL,达峰时间为0.5 h,t1/2ke为(4.17±0.64)h,0-∞药时曲线下面积为(6.77±0.80)μg/(h.mL)。结论方法专属性高,准确、灵敏,可为今后槲皮素的药代动力学研究提供方法学依据。     

LC-ESI-MS/MS同时检测人血浆氯沙坦和E3174的浓度及其在药代动力学研究中的应用

目的：建立LC-ESI-MS/MS法测定服药后人体血浆氯沙坦及E3174的浓度。方法：MI-CROMASS Quattro Micro API型液质联用仪,色谱柱为Inertsil ODS-3C18柱（2.1mm×150mm,5μm,Ja-pan）,流动相为0.1%甲酸-乙腈（3070,V/V）,流速为0.2mL/min,进样体积为5μL,柱温为40℃,样品室温度为15℃。结果：氯沙坦线性范围为2.2~1085.0ng/mL,E3174线性范围为2~1000.0ng/mL,氯沙坦及E3174最低检测限低于0.5ng/mL,方法灵敏、稳定、特异性高,并成功地应用到人体氯沙坦及E3174药代动力学研究。结论：该方法简便、准确、重复性好,可以准确定量服药后人体血浆氯沙坦及E3174的浓度。     

不同血浆样品制备方法对芍药苷血液药物浓度测定的影响

目的比较乙腈法、高氯酸法和磷酸二氢钠酸化法三种不同的血浆样品处理方法对芍药苷血液药物浓度测定的影响,优选最佳的血浆样品处理方法。方法高效液相色谱法测定血浆样品中不同浓度的芍药苷,比较三种方法对样品中芍药苷的回收率、检测的灵敏度以及实验结果可重复性等方面的影响。结果用乙腈和高氯酸处理芍药苷浓度>50μg/ml的血浆样品时,均能得到较高的回收率;但对于芍药苷浓度<50μg/ml的血浆样品,仅高氯酸处理的样品才能得到较高的回收率;并且高氯酸处理血浆能检测的最低芍药苷血液药物浓度为0.5μg/ml,具有较好的灵敏度。结论对于检测芍药苷的血液药物浓度,用高氯酸处理血浆样品最为适合。     

液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯的含量（英文）

目的建立了测定大鼠血浆中脱水穿心莲内酯琥珀酸半酯（DAS）的液相色谱-串联质谱法。方法血浆样品经液-液萃取后,以甲醇-水（70∶30,V/V）为流动相,通过Restek PinnacleⅡC18柱分离,格列吡嗪为内标,选择负离子扫描方式,以多反应监测（MRM）方式进行检测。用于定量分析的离子反应分别为m/z 531→m/z 431（DAS）和m/z 444→m/z319（格列吡嗪,内标）。结果DAS血浆浓度测定方法的线性范围为5～2500 ng/ml,定量下限为5 ng/ml。日内、日间精密度（RSD）均小于9.51%,准确度（RE）在-0.18%~1.93%。样品提取回收率为79.73%~85.99%,每个样品的测试时间为3 min。应用此法测试了大鼠口服或静注穿琥宁（DAS的单钾盐）后DAS的血药浓度,计算出其绝对生物利用度为3.69%。结论本方法灵敏度高、专属性强,适合于DAS的临床前药动学研究。     

LC-MS/MS法测定人血浆中白藜芦醇的浓度

目的:建立液相色谱-串联质谱法测定人血浆中白藜芦醇浓度的方法。方法:血浆样品经四硼酸钠溶液碱化后,经甲基叔丁基醚提取处理。分析柱为RestekC1(82.1mm×150mm,5.0μm),保护柱为GminiC1(84mm×3.0mm,10.0μm),流动相为乙腈-水(85∶15,V/V,其中含0.2mmol·L-1乙酸铵),流速为0.3mL·min-1,进样量为5μL,内标为3,5-二羟基-4-异丙基二苯乙烯,使用电喷雾离子源,以负离子多重反应监测(MRM)方式进行检测。用于定量白藜芦醇和内标的MRM扫描离子通道分别为m/z227.0→143.0、253.2→211.0。每个样品的分析时间为5min。结果:白藜芦醇和内标的保留时间分别为1.43、2.55min。血浆中内源性物质对测定无干扰,白藜芦醇检测浓度在0.1～50.0ng·mL-1范围内同其与峰面积之比呈良好线性关系(r=0.9969),定量下限为0.1ng·mL-1。日内、日间RSD均低于11.25%,方法回收率为(91.70±3.81)%～(99.00±3.29)%。结论:本方法特异性强,灵敏度高,测定结果可靠,适用于白藜芦醇的血药浓度测定。