大孔吸附树脂分离纯化三七总皂苷工艺研究

目的:研究大孔吸附树脂法纯化三七总皂苷的工艺条件及参数.方法:以三七总皂苷的量为考察指标,研究树脂吸附容量、洗脱溶媒及其用量,并用正交实验法优选最佳洗脱条件.结果:通过大孔吸附树脂纯化后,70%乙醇洗脱液干燥后总固物中三七总皂苷纯度可达83.3%.结论:采用此法能较好的纯化三七总皂苷.     

大孔吸附树脂富集纯化三七总皂苷工艺研究

以三七总皂苷的洗脱率和精确制度为考察指标,研究大也树脂吸附法富集,纯化三七总皂苷的工艺条件及参数,结果表明：通过大孔树脂富集与纯化后三七总皂苷洗脱率达80％以上,50％乙醇洗脱液干燥后总固物中三七总皂苷纯度可达71．1％,采用此法可较好的纯化三七总皂苷。     

大孔吸附树脂分离纯化三七花蕾总皂苷的研究

目的:研究大孔吸附树脂分离纯化三七花蕾中总皂苷的工艺条件及参数.方法:以三七花蕾总皂苷的吸附量和洗脱率为指标,筛选大孔吸附树脂,并研究所选树脂分离纯化三七花蕾总皂苷的吸附和洗脱条件.结果:AB-8树脂对三七花蕾总皂苷有较好的吸附分离性能.最佳工艺条件为:上样浓度为0.2 g生药/ml,以3BV 70%乙醇溶液洗脱,吸附及洗脱流速均为2BV/h,洗脱液蒸干,即得纯化的三七花蕾总皂苷提取物.纯化后三七花蕾总皂苷含量为87.60%.结论:AB-8大孔吸附树脂分离纯化三七花蕾中总皂苷是可行的.     

大孔吸附树脂纯化山药总皂苷的工艺研究

目的大孔吸附树脂纯化山药总皂苷的工艺优化。方法通过对山药总皂苷在5种大孔吸附树脂上的吸附与解吸特性比较,筛选最佳树脂类型,并对该树脂的吸附特性和各影响因素进行研究,采用单因素轮换方法对纯化工艺条件进行优化。结果 AB-8型大孔吸附树脂对山药总皂苷吸附、解吸能力较强,上样pH为7,上样质量浓度为4 mg/mL,上样吸附时间为4 h,洗脱体积流量为1.5 BV/h,50%乙醇洗脱5 BV。结论该方法稳定可行,总皂苷质量分数可为52.1%。     

大孔吸附树脂富集纯化茅莓总皂苷工艺研究

目的 :研究大孔吸附树脂富集、纯化茅霉总皂苷的工艺条件及参数。方法 :以茅莓总皂苷的洗脱率和纯度为考察指标 ,研究大孔吸附树脂富集、纯化茅莓总皂苷的吸附性能和洗脱参数。结果 :茅莓提取液 1 9.3mL(0 .77mg·mL- 1 )上大孔吸附树脂柱 (干重 2 .68g ,1cm× 2 0cm) ,用蒸馏水 1 0 0mL、50 %乙醇 1 0 0mL依次洗脱 ,茅莓总皂苷富集于 50 %乙醇洗脱液部分 ,且除杂质效果好。结论 :通过大孔吸附树脂富集、纯化后 ,茅莓总皂苷的洗脱率在 79.2 %以上 ,总固物中茅莓总皂苷含量可达 55 .3 %。说明采用本法富集、纯化茅莓总皂苷是可行的     

大孔吸附树脂纯化远志总皂苷工艺研究

目的 :研究大孔吸附树脂纯化远志总皂苷的工艺条件及参数。方法 :以远志总皂苷的洗脱率、精制度为指标 ,考察大孔吸附树脂对远志总皂苷的吸附性能和洗脱参数。结果 :12mL远志总皂苷样品液 (生药 0 2 5g/mL)上大孔吸附树脂柱 (Φ15mm×H90mm ,干重 2 5g) ,用蒸馏水、30 %乙醇、70 %乙醇各 3BV依次洗脱 ,远志总皂苷富集于 70 %乙醇洗脱液部位。结论 :通过大孔吸附树脂富集与纯化 ,远志总皂苷洗脱率为 89 8% ,精制度为 2 39 6 %。该法可较好地纯化远志总皂苷     

远志总皂苷大孔吸附树脂纯化工艺研究

目的:优选远志总皂苷大孔树脂纯化工艺。方法:在以细叶远志皂苷的纯度为指标,考察多种型号大孔树脂纯化远志总皂苷的吸附及洗脱条件。结果:HPD-100型大孔吸附树脂为最佳纯化远志总皂苷的大孔树脂。最佳纯化工艺为上样液细叶远志皂苷的质量浓度为0.5 g/ml,以蒸馏水3 BV、30%乙醇、70%乙醇各4 BV以1 BV/h速度依次洗脱,收集70%乙醇洗脱部位。结论:该法工艺可较好地纯化远志总皂苷且稳定可行,为新药研发提供了一定的依据。     

藤三七总皂苷的大孔树脂纯化工艺优选

目的： 优选藤三七总皂苷的大孔树脂分离纯化工艺。 方法： 采用UV测定总皂苷含量。通过静态吸附-洗脱试验筛选大孔树脂型号;以总皂苷动态吸附量和洗脱率为指标,利用正交试验优选藤三七总皂苷的大孔吸附树脂纯化工艺条件。 结果： 选用D101型大孔吸附树脂分离纯化藤三七总皂苷,最佳工艺条件为上样液质量浓度0.1 g·mL^-1,上样流速1 BV·h^-1,径高比1：10,上样量（药材量-树脂）0.2 g·mL^-1,乙醇体积分数40%,乙醇用量8 BV,洗脱流速2 BV·h^-1;藤三七总皂苷纯度>50%。 结论： 优选的纯化工艺合理可行,可较好地分离纯化藤三七总皂苷。     

大孔吸附树脂纯化楤木总皂苷的工艺研究

目的筛选分离楤木总皂苷的最佳树脂,并对影响分离的各种因素进行系统研究,使分离工艺达到最优化。方法采用静态与动态的吸附-解吸两种方法,以高效液相色谱法测定楤木皂苷A的量为评价指标,进行工艺筛选。结果 AB-8分离效果最好,其最佳工艺为药液质量浓度0.1 g/mL(相当于原生药)、上样量为6 BV(树脂床体积),以2.5 BV/h的吸附速率进行吸附,50%乙醇4 BV、2 BV/h进行洗脱效果最佳。经AB-8处理后的楤木皂苷A收率达30%,楤木总皂苷可达80%以上。结论该方法简单可行,分离效果好,能满足于大生产的要求。     

大孔吸附树脂纯化黄芪总皂苷的工艺优化研究

目的研究黄芪总皂苷的大孔吸附树脂分离纯化工艺,为黄芪总皂苷的工业化生产提供参考。方法以黄芪总皂苷的收率、质量分数为考察指标,用静态及动态吸附实验筛选3种大孔吸附树脂;从样品溶液的上柱浓度、吸附速率、洗脱液浓度、洗脱速率及洗脱终点5个方面对纯化工艺进行优化;同时考察了碱液及稀醇液对黄芪总皂苷收得率的影响。结果以D101大孔吸附树脂吸附黄芪总皂苷,以0.05 g/mL的样品溶液上柱,以3 BV/h为吸附速率进行吸附,以0.1%NaOH溶液及20%乙醇溶液洗脱杂质,以80%乙醇、2 BV/h洗脱黄芪总皂苷部位,黄芪总皂苷的收率和质量分数达到较满意效果。     

强极性大孔吸附树脂对三七皂苷的分离纯化研究

目的 探索-种高效、实用的分离纯化三七皂苷的技术。方法根据三七皂苷的结构特征，选用强极性吸附树脂ADS-2，并对ADS-2树脂的吸附性能进行了系统研究。采用HPLC法对产品中人参皂苷Rg1，Re，Rb1和三七皂苷R-进行了测定。结果 ADS-2树脂对三七皂苷具有较高的吸附选择性，50％乙醇作为脱附剂，产品中有效成分含量为：人参皂苷Rg1 31．7％，Re 5．40％，Rb1 5．79％，三七皂苷R1 29．7％，产率为7．75％。结论大孔ADS-2吸附树脂对三七皂苷的分离纯化简单、高效，易于工业化生产。     

三七中皂苷成分及其药理作用的研究进展

三七是我国传统中药材,具有抗炎、止血、抗衰老、抗肿瘤等药理活性。三七主要活性成分为皂苷,目前已获取70多种皂苷成分。将从三七的不同部位角度,对三七中皂苷成分进行综述。由于大部分皂苷成分均从三七根中获取,而固液分离法和液液分离法是获取皂苷的传统方法,故将进一步根据获取方法的不同,对三七根中的皂苷成分进行概述。同时将对三七中皂苷成分药理活性进行简单概述,为三七研究与开发提供有价值的参考。     

三七化学成分的研究历程和概况

三七Panax notoginseng为五加科人参属植物,在我国已有400多年的栽培历史,其作为一种名贵中药,具有化瘀止血、消肿止痛等功效。三七复杂的化学成分是其良好功效的基础。目前已从三七中发现了百余种化合物,其中有效成分以皂苷类成分和三七素为主。对三七中皂苷类和非皂苷类成分的研究历程和概况进行了综述,并根据不同化合物的特点,探讨了各类化合物今后的研究方向,以期为三七的进一步研究提供有益参考。     

三七法呢基焦磷酸合酶的基因克隆及序列分析

目的对三七法呢基焦磷酸合酶(FPS)进行基因克隆及序列分析。方法采用cDNA末端快速扩增法,以三七根总RNA为模板扩增出三七FPS基因。结果序列分析表明,所克隆的cDNA序列全长1 409 bp,开放阅读框共编码343个氨基酸残基,推测的氨基酸序列与积雪草、灰白银胶菊、黄花蒿的FPS的氨基酸序列同源性最高,分别达95%、87%、86%。结论首次分离并报道了三七FPS cDNA克隆,为进一步研究三萜皂苷生物合成机制及其在提高植物药用价值方面的应用奠定基础。     

竹节参总皂苷的大孔吸附树脂纯化与离子交换树脂脱色工艺研究

目的优化竹节参总皂苷大孔吸附树脂纯化和离子交换树脂脱色的工艺方法。方法以竹节参皂苷IVa为对照品,采用香草醛-高氯酸显色后用分光光度法测定竹节参总皂苷的量;以动态吸附和静态解吸附实验方法筛选适宜型号的大孔吸附树脂并优化分离纯化工艺参数;以竹节参总皂苷保留率、脱色率为指标筛选合适类型的离子脱色树脂并优化其脱色效果。结果 X-5型大孔吸附树脂对竹节参总皂苷有较好的纯化效果,其最佳纯化条件为上样质量浓度为生药0.2 mg/m L,上样量为每克树脂10 g生药,洗脱剂为70%乙醇,洗脱剂用量为每克树脂5 m L;脱色工艺研究表明,732型阳离子交换树脂对大孔吸附树脂法得到的竹节参皂苷粗品具有良好的脱色效果,优化后的脱色工艺的操作方法是大孔吸附树脂醇洗脱液经回收溶剂至无醇味后,调整浓缩液p H值为10,上样于732型阳离子交换树脂,收集流出液脱色率大于50%的馏份,此时每克树脂脱色竹节参总皂苷量为290.5 mg。经减压干燥后,最终获得的精制竹节参总皂苷外观呈类白色至黄白色,其质量分数大于85.0%,总转移率超过70.0%。结论建立的方法能较好地分离纯化竹节参总皂苷,适用于工业化生产。     

三七的组织培养研究进展

三七是中国传统名贵中药材,在药品、食品和化妆品领域具有广泛的商业应用。从三七愈伤组织诱导、体细胞胚胎诱导及再培养、细胞悬浮培养和不定根诱导4个方面综述了三七组织培养的研究进展,以期为快速获得三七优质苗、提高三七次生代谢产物的含量提供参考,促进三七资源的开发和可持续利用。     

不同入药方式下三七的药效成分与砷含量测定

目的:通过对不同入药方式下三七中有效成分三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和类金属砷的含量进行测定,研究不同入药方式对三七安全有效利用的影响.方法:三七生粉试样按照直接入药、水提取和乙醇提取3种方式进行前处理,经湿法消解后,采用氢化物发生原子荧光法(AFS)测定砷含量;采用高效液相色谱法(HPLC)测定有效成分含量,色谱柱为Agilent TC-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-0.05％磷酸(B)进行梯度洗脱,检测波长为203 nm,流速1.0 mL·min-1,柱温30℃.结果:乙醇提取液的砷含量最少,人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1含量最多.结论:乙醇回流的提取方法与水煎煮的提取方法相比,其砷含量较低(平均值分别为0.023 5,0.1108 mg·kg-)且保留更多药效成分含量(总皂苷含量平均值分别为9.098％,7.738％),可能可代替水煎煮的提取方法.     

三七体细胞胚发生及植株再生过程中主要皂苷成分的累积

目的 分析以栽培三七Panax notoginseng根为外植体诱导体细胞胚发生及植株再生过程中总皂苷及3种人参皂苷（人参皂苷Rg₁、Re、Rb₁）的累积规律。方法 采用分光光度法分析体细胞胚发生发育过程中不同时期的总皂苷累积量;采用高效液相色谱法测定3种人参皂苷（人参皂苷Rg₁、Re、Rb₁）的累积量。结果 体胚苗中的总皂苷质量分数最高,为7.79 %,占栽培三七根（8.61%）的90.48%,质量分数最低的为胚性愈伤组织,为2.47%。因材料的比生长速率存在差异,总皂苷累积效率的顺序为体胚苗＞前期体胚＞后期体胚＞胚性愈伤。对3种人参皂苷单体物质的分析显示：后期体胚中3种人参皂苷的量总和最大,为7.05 mg/g,胚性愈伤组织的最低,为2.78 mg/g;人参皂苷Rg₁在前期体胚时质量分数达到最高,为2.24 mg/g;人参皂苷Rb₁在后期体胚中的质量分数达到最高,为4.03 mg/g;人参皂苷Re在胚性愈伤组织中的量最高,为1.21 mg/g。3种人参皂苷的总累积效率在前期体胚中达到最大,为5.022 5 mg/(g·周),在体胚苗中最低,为1.947 4 mg/(g·周)。结论 总皂苷质量分数及累计效率均在体胚苗中达到最大值;3种人参皂苷总量及总累计效率分别在后期体胚和前期体胚中达到最大值。     

三七抗增殖作用的有效成分筛选及机制研究

目的 筛选三七抗瘢痕成纤维细胞（human hypertrophic scar fibroblasts,HSF）增殖作用的有效成分并研究其作用机制。方法 采用索氏提取法将三七药材按照极性依次提取;以MTS法筛选其中具有较好抗HSF增殖作用的提取物,结合流式细胞仪检测其对细胞周期的影响;进一步采用HPLC对其有效成分进行谱效分析,将其中高活性成分进行UPLC-Q/TOF-MS鉴定及验证,通过反向对接技术预测有效成分的抗增殖作用机制。结果 三七醋酸乙酯提取部位有较高的抗HSF细胞增殖活性（P＜0.01）,能显著增加G₀/G₁期细胞的比例（P＜0.01）,降低增殖指数（proliferation index,PI）（P＜0.01）,其中主要活性成分为皂苷类化合物;以人参皂苷Rh₁和人参皂苷Rg₁为例的验证结果显示,这2种成分均能抑制细胞的增殖且呈剂量依赖性。反向对接预测结果显示,皂苷类化合物可能通过MAP2K1、MAPK14、HRAS等靶点作用于抗HSF细胞增殖相关信号通路。结论 三七醋酸乙酯提取物对瘢痕成纤维细胞增殖有抑制作用,主要成分为其中的皂苷类化合物,其作用机制可能与调节MAPK、黏着斑等信号通路有关。     

三七多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白基因的克隆及表达分析

目的克隆三七Panax notoginseng(Burk)F.H.Chen多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白(polygalacturonase-inhibiting protein,PGIP)基因(Pn PGIP)的全长c DNA序列,分析该基因的表达特性。方法根据三七中编码PGIP的EST(expressed sequence tag)序列设计引物,采用c DNA末端快速扩增技术克隆Pn PGIP基因的全长c DNA序列;用q RT-PCR分析Pn PGIP基因的表达水平。结果 PnPGIP基因的cDNA全长为1 171 bp,含有981 bp的开放阅读框,13 bp的5’-非翻译区以及177 bp的3’-非翻译区,编码含326个氨基酸的蛋白质,PnPGIP蛋白的相对分子质量约为36 770,等电点约为5.83;q RT-PCR分析结果显示,Pn PGIP基因的表达量分别在三七接种茄腐镰刀菌和人参链格孢后4 h和2 h内迅速上升;此外,信号分子茉莉酸甲酯(methyl jasmonate,Me JA)、乙烯利(ethylene,ETH)、H2O2、水杨酸(salicylic acid,SA)处理均能不同程度地诱导Pn PGIP基因的表达水平。结论 PnPGIP基因在转录水平响应茄腐镰刀菌和人参链格孢的侵染,并受几种逆境胁迫相关信号分子的诱导,Pn PGIP基因可能参与三七对茄腐镰刀菌和人参链格孢的防卫反应。