汉黄芩素对肺腺癌A549细胞黏附和迁移能力的影响及其可能机制

目的:观察汉黄芩素对人肺腺癌A549细胞黏附、迁移和侵袭能力的影响,并初步探讨其分子作用机制。方法:采用MTT法检测汉黄芩素对A549细胞增殖和黏附能力的影响;细胞划痕实验和侵袭小室法检测其对A549细胞迁移和侵袭能力的影响;RT-PCR和Western印迹法检测汉黄芩素对A549细胞中与转移相关的基因,如细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)、内皮细胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1,VCAM-1)和c-Met表达的影响。结果:汉黄芩素能抑制A549细胞的生长,其细胞增殖抑制率与药物浓度及作用时间呈依赖关系。低浓度的汉黄芩素处理A549细胞后,可明显降低肺癌细胞的黏附、迁移和侵袭能力。汉黄芩素能有效抑制ICAM-1、VCAM-1基因和蛋白的表达,但对c-Met基因及其蛋白并没有影响。结论:汉黄芩素具有抑制肿瘤细胞转移的作用,其分子机制可能与下调ICAM-1和VCAM-1的表达有关,但与c-Met表达无关。     

低氧对人肺腺癌A549细胞迁移和黏附的影响

目的：探讨低氧对人肺腺癌A549细胞迁移以及与血管内皮细胞黏附的影响。方法：细胞划痕实验和Transwell实验检测低氧对A549细胞迁移和浸润的影响；细胞黏附实验检测低氧对A549细胞与血管内皮细胞黏附的影响；免疫荧光法观察低氧对A549细胞中E-cadherin、β-catenin、纤维状肌动蛋白（F-actin）分布的影响；荧光素酶报告基因检测低氧对A549细胞中依赖于缺氧诱导因子-1（hypoxia-inducible factor-1，HIF-1）的转录活性的影响。结果：低氧可以促进A549细胞的迁移、浸润和与血管内皮细胞的黏附，影响A549细胞中E-cadherin和β-catenin的分布及F-actin细胞骨架的重排，上调A549细胞中依赖于HIF-1的报告基因的表达。结论：低氧促进A549细胞的迁移、浸润和与血管内皮细胞的黏附可能是通过调控A549细胞中依赖于HIF-1基因的表达，进而影响细胞中E-cadherin和β-catenin分布和F-actin细胞骨架的重排。     

低氧条件下三氧化二砷对人肺腺癌A549细胞增殖的影响

目的:对比研究常氧和低氧条件下三氧化二砷（arsenic trioxide,As2O3）对人肺腺癌A549细胞增殖的抑制作用。方法:分别在常氧（21％ O2）和低氧（5％ O2）条件下以1、2、4 μmol/L As2O3处理人肺腺癌A549细胞，12、24、48 h后收集细胞，以MTT法检测细胞增殖抑制率，以Annexin VPI双染色流式细胞术检测细胞凋亡，分析两种条件下As2O3对细胞增殖抑制率及凋亡率的影响。结果: 常氧及低氧条件下，细胞增殖抑制率、细胞早期凋亡率及总凋亡率均随As2O3浓度的增加及作用时间的延长而增加（均P<0.05），晚期凋亡率变化不显著。在As2O3相同浓度、相同处理时间，低氧条件下细胞增殖抑制率及凋亡率较常氧条件下无明显降低。结论: As2O3可促进细胞凋亡，显著抑制A549细胞增殖，且在低氧条件下的上述作用未见减弱。     

血根碱对人肺腺癌细胞迁移、侵袭和Wnt/β-catenin信号通路的影响

目的 探讨血根碱对人肺腺癌细胞迁移、侵袭的影响及其初步分子机制。方法 MTT法检测血根碱对肺腺癌细胞活性的影响;利用划痕和Transwell小室实验分析血根碱对细胞迁移、侵袭的影响;RT-qPCR和免疫印迹法检测不同浓度血根碱对Wnt/β-catenin通路相关基因和核心蛋白的影响。结果 与空白对照组比,血根碱（1~10 μmol/L）呈浓度-时间依赖性地抑制人肺腺癌细胞的活力（P<0.05）;低浓度1 μmol/L作用48 h后,A549和H1975细胞的迁移和侵袭能力明显减弱（P<0.01）;血根碱（1、2.5、5 μmol/L）可显著下调Wnt/β-catenin通路中核心分子β-catenin及上游磷酸化GSK3β、DVL2蛋白表达,进而抑制下游靶基因TCF/LEF,CyclinD1的mRNA水平（P<0.05）,并呈一定的浓度依赖性。结论 血根碱可能通过下调Wnt/β-catenin信号通路起到抑制人肺腺癌细胞迁移、侵袭的作用。     

rAd-p53联合顺铂体外抑制肺腺癌细胞增殖的最佳作用时序研究

目的:研究rAd-p53(商品名:今又生)与顺铂以不同序贯方式联合应用对肺腺癌细胞的增殖抑制作用,明确rAd-p53与顺铂联合的协同效应关系和最佳作用时序.方法:采用MTT法测定不同感染强度rAd-p53联合顺铂以及rAd-p53不同时序联合顺铂对人肺腺癌细胞A549的生长抑制率;采用流式细胞术检测细胞周期.结果:rAd-p53具有明显的肿瘤抑制作用,随着感染强度增加抑制作用增强;在较低感染强度下联合顺铂,即有显著的相加或协同作用(Q>0.85或Q>1.15),与单药组比较差异显著(P＜0.05);两药不同序贯方式联合抑制作用均大于各时间点单药作用(P＜0.01),尤以rAd-053后48h加入顺铂Q值最高(Q=1.38),该时间细胞被更多的阻滞在G0/G1期,而S期细胞比例减少.结论:rAd-p53与顺铂联合对肺腺癌细胞具有显著的协同抑制作用,并随剂量增加协同作用增强;联合应用时顺铂在rAd-p53作用48h时加入可最大发挥两者的协同抑制作用,其机制与细胞周期阻滞有关.     

黏蛋白13在肺腺癌组织中的表达及其对A549细胞恶性生物学行为的影响与可能的机制

目的：探讨黏蛋白13(MUC13)在肺腺癌组织中的表达及其对A549细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭及EMT的影响与可能的机制。方法：通过癌症基因组图谱（TCGA）和高通量基因表达（GEO）数据库分析MUC13在肺腺癌组织与正常肺组织、癌旁组织中的差异表达。qPCR法和WB法检测人肺腺癌细胞NCI-H1395、NCI-H1975、H1299、A549和人正常肺上皮细胞BEAS-2B中MUC13 mRNA和蛋白的表达水平。利用si RNA技术敲低A549细胞中MUC13表达,实验分为si-MUC13组、NC组和si-MUC13+IGF-1组。通过克隆形成实验、流式细胞术和Transwell实验分别检测敲低MUC13对A549细胞增殖、细胞周期、凋亡、迁移和侵袭的影响,WB法检测敲低MUC13对A549细胞上皮钙黏素（E-cadherin）、神经钙黏素（N-cadherin）、波形蛋白（vimentin）、EGFR、p-EGFR、PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT等蛋白表达的影响。结果：MUC13 mRNA和蛋白在肺腺癌组织和细胞中均呈高表达（均P<0.01）,选取表达水平较高的A...