两种方法建立小鼠抗GBM肾炎模型的比较

目的探讨建立小鼠抗肾小球基底膜（GBM）肾炎模型的方法。方法72只昆明小鼠随机分为3组,肾炎模型A组、B组和正常对照组。肾炎模型A、B组小鼠一次性尾静脉注射兔抗小鼠GBM血清（16ml／kg）,正常对照组小鼠注射等量正常兔血清。肾炎模型A组小鼠尾静脉注射兔抗小鼠GBM血清前1周,背部皮内注射正常兔血清进行预免疫;肾炎模型B组小鼠尾静脉注射兔抗小鼠GBM血清后24h,尾静脉注射脂多糖（1mg／kg）。于实验第7、14、21、28天取尿液和血清标本,分别检测尿蛋白、血肌酐、血尿素氮含量。并于上述时间点分别取。肾组织观察病理变化。结果。肾炎模型组小鼠注射兔抗小鼠GBM血清后,第7天尿蛋白、血肌酐和血尿素氮含量均明显升高,均高于正常对照组,且A组升高更明显（P〈0．05）。肾组织病理表现为：。肾炎模型A组肾小球基底膜明显增厚,系膜区大量电子致密物沉积,足突融合;壁层上皮细胞增生,大量新月体形成,肾小球囊腔变窄,并可见肾小球纤维化形成,其病变程度均高于肾炎模型B组。正常对照组小鼠肾组织无明显病理变化。结论免疫球蛋白预免疫法可以更好地建立小鼠抗GBM肾炎模型。     

小鼠抗GBM肾炎模型的复制与鉴定

目的 为研究人类新月体性肾炎的发病机制,建立小鼠抗肾小球基底膜（GBM）肾炎的动物模型.方法 60只健康昆明小鼠随机分为肾炎模型组和正常对照组.肾炎模型组小鼠一次性尾静脉注射兔抗小鼠GBM血清（16 ml/kg）,正常对照组注射等量正常兔血清.肾炎模型组小鼠尾静脉注射兔抗小鼠GBM血清前1周,背部皮内注射正常兔血清进行预免疫.于兔抗小鼠GBM血清注射后第7、14、21、28天取尿液、血清、肾组织标本,检测尿蛋白、血肌酐、血尿素氮含量,观察肾组织病理变化.结果 肾炎模型组小鼠注射兔抗小鼠GBM血清后,第2天蛋白尿、血肌酐和血尿素氮含量均明显升高,于第14天尿蛋白浓度达到高峰,而血肌酐和血尿素氮含量仍持续上升.肾炎模型组肾组织病理表现为：第7天大量炎症细胞浸润;第21天 GBM增宽增厚,足突融合,大量免疫复合物沉积,内皮细胞及系膜细胞显著增生,新月体形成.结论 成功建立了小鼠抗GBM肾炎模型.     

201A中药合剂对大鼠抗肾小球基底膜肾炎免疫功能的影响

目的 观察201A中药合剂防治大鼠抗肾小球基底膜(GBM)肾炎的疗效。方法 建立大鼠抗GBM肾炎模型。实验分3组：201A处理组、肾炎对照组及正常对照组。201A处理组大鼠一次性尾静脉注射抗GBM抗血清后即刻给予201A合剂(0．42g／kg，灌胃)，肾炎对照组大鼠一次性尾静脉注射抗GBM抗血清后则给予等量的生理盐水，均至第21天。定期于第4、14和21天，检测大鼠尿蛋白，并收集血标本检测T淋巴细胞转化功能、血清中循环免疫复合物及抗GBM自身抗体。结果 肾炎对照组大鼠注射抗血清后第4天即出现异常蛋白尿，T淋巴细胞转化功能明显高于正常，并于第14天血中检测到高滴度的抗GBM自身抗体；而201A处理组鼠上述病变均明显好转。结论 201A中药合剂能够改善大鼠抗GBM肾炎的肾功能。     

20lA中药合剂对大鼠抗肾小球基底膜肾炎病变的影响

目的 观察201A中药合剂防治大鼠抗肾小球基底膜(GBM)肾炎的疗效。方法 建立大鼠抗GBM肾炎模型。实验分3组：201A处理组、肾炎对照组及正常对照组。201A处理组大鼠一次性尾静脉注射抗GBM抗血清后即刻给予201A合剂(0．42g／kg，灌胃)，至第21天。对照组则给予等量的生理盐水。定期于第4天、第14天和第21天，检测大鼠尿蛋白，观察肾组织病理学改变。结果 肾炎对照组大鼠注射抗血清后于第4天即出现异常蛋白尿，肾小球内可见细胞数增加和新月体形成，肾小管内大量蛋白管型，GBM呈不规则增厚。而201A处理组鼠上述病变均明显好转。结论 201A能够明显改善抗肾小球基底膜肾炎大鼠的肾功能。     

CD4+T细胞免疫应答介导小鼠抗GBM肾小球肾炎

目的 探讨CD4+T细胞免疫应答在小鼠抗GBM肾小球肾炎中的作用.方法 将C57BL/6小鼠随机分为肾炎模型组和正常对照组,两组均给予兔IgG预致敏,10d后肾炎模型组给予兔抗GBM血清(0.2 mL/20 g)尾静脉注射,正常对照组给予正常兔血清,分别于第7、14、21、28天行以下处理:收集尿和血清样本检测血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN)和尿蛋白/尿肌酐(UmAlb/c)的含量;光镜和电镜观察肾组织病理学改变;流式细胞仪检测淋巴器官和肾脏局部免疫细胞分布情况;Real-time PCR检测肾组织中IFN-γ、IL-4、IL-17A、TGF-β1、CCL-2、CCL-4、CCL-5和CXCL-1等细胞因子mRNA的含量;ELISA检测血清中IFN-γ、IL-4、IL-17A、IL-12、IL-10和TGF-β1等细胞因子的表达水平.结果 与正常对照组小鼠相比,肾炎模型组小鼠的Scr、BUN和UmAlb/c均明显升高(P＜0.05);光镜下可见典型新月体肾炎样病理改变,免疫荧光可见兔IgG和鼠IgG沿GBM呈线性沉积;小鼠脾脏中Th1、Th2、Th17和Treg细胞比例明显增加,同时肾脏局部有大量Th1、Th2和Th17细胞浸润;血清及肾脏局部IFN-y、IL-4、IL-17A和TGF-β1等细胞因子表达水平相应上调.结论 CD4+T细胞免疫应答能介导小鼠抗GBM肾小球肾炎并在其病理进程中发挥促进作用.     

低分子肝素对兔抗肾小球基底膜肾炎的疗效观察

目的　观察低分子肝素 (LMWH)对兔抗肾小球基底膜 (GBM)肾炎的疗效。方法　建立兔抗GBM肾炎模型 ;实验分两组 :LMWH治疗组和对照组。LMWH治疗组注射肾毒血清后 6h内开始给药 ,对照组仅给等量的生理盐水。定期观察一般情况 ,并测定尿蛋白、血肌酐水平 ,2周后宰杀兔 ,观察肾组织病理改变。结果　LMWH组尿蛋白、纤维素沉积数、新月体数、肾小球细胞总数、肾小管间质损伤指数、炎细胞浸润数均较对照组显著减少。结论　低分子肝素可显著改善抗GBM肾炎兔的肾脏病变。     

201A中药合剂对大鼠抗肾小球基底膜肾炎病变的影响

目的　观察 2 0 1A中药合剂防治大鼠抗肾小球基底膜 (GBM)肾炎的疗效。方法　建立大鼠抗GBM肾炎模型。实验分 3组 :2 0 1A处理组、肾炎对照组及正常对照组。 2 0 1A处理组大鼠一次性尾静脉注射抗GBM抗血清后即刻给予 2 0 1A合剂 (0 .42g/kg ,灌胃 ) ,至第 2 1天。对照组则给予等量的生理盐水。定期于第 4天、第 14天和第 2 1天 ,检测大鼠尿蛋白 ,观察肾组织病理学改变。结果　肾炎对照组大鼠注射抗血清后于第 4天即出现异常蛋白尿 ,肾小球内可见细胞数增加和新月体形成 ,肾小管内大量蛋白管型 ,GBM呈不规则增厚。而 2 0 1A处理组鼠上述病变均明显好转。结论　 2 0 1A能够明显改善抗肾小球基底膜肾炎大鼠的肾功能     

大鼠抗GBM肾炎模型的建立及不同病期的生化指标和肾组织病理学观察

目的：为研究人类新月体抗肾炎的发病机制，建立大鼠抗肾小球基底膜（BGM）肾炎的动物模型，方法：提取S－D大鼠GBM抗原，将此抗原免疫新西兰白兔获得抗血清，再将此抗血清从尾静脉一次性注射给S－D大鼠。实验分2组：肾炎模型组及正常对照组。定期于第4天、第14天第第21天检测大鼠24h尿蛋白，血肌酐及血尿素的含量和肾组织病理学改变。结果：大鼠肾炎模型组：大鼠注射抗血清后于第4天出现大量蛋白尿，第14天血肌酐，血尿素显著升高，并持续上升，肾组织病理表现为肾小球内细胞数明显增加，大量新月体形成及蛋白管型，GBM呈不规则增厚，足突融合，内皮细胞脱落，坏死，免疫荧光检查见IgG、鼠IgG沿GBM线形分布，大鼠正常对照组以上指标均无明显改变。结论：通过动态观察大鼠抗GBM肾炎的病变变化，证实该模型病变与人类新月体性肾炎的病变较为一致，该模型可用于探讨人类新月体体肾炎的实验研究。     

吗替麦考酚酯对SD大鼠抗肾小球基底膜肾炎模型的治疗效果

目的：探讨吗替麦考酚酯（MMF）对SD大鼠抗肾小球基底膜（GBM）肾炎模型的治疗作用。方法将实验动物分为空白对照组、模型对照组和M M F治疗组,利用兔抗SD大鼠GBM抗体血清制备SD大鼠抗GBM 肾炎模型。检测各组动物在给药后第0、1、2、3和4周的24 h尿蛋白、血肌酐和尿素氮等生化指标;采用酶联免疫吸附法检测在给药后第0、4周各组动物外周血中IL‐1、TGF‐β1的水平;HE染色和碘酸雪夫氏（PAS）染色分析各组动物肾脏组织病理形态学变化。结果 MMF治疗1周后,24 h尿蛋白的排泄量开始下降;MMF治疗4周后,相较于同期的模型对照组,MMF治疗组SD大鼠的24 h尿蛋白的排泄量显著性下降,外周血尿素氮、血肌酐以及与免疫相关的细胞因子IL‐1和 TGF‐β1的水平也远远低于模型对照组（P＜0．05）。 HE和PAS染色结果表明,M M F治疗组大鼠的肾小球及其周围间质区炎性细胞浸润较模型对照组减少,新月体数量明显下降。结论 MMF可提高抗GBM肾炎SD大鼠的肾功能,抑制IL‐1和TGF‐β1的产生,阻止模型大鼠的肾脏病变。     

建立一种伴有肾小球和肾小管间质损伤的大鼠慢性肾衰竭动物模型

目的 建立一种伴有肾小球和肾小管间质损伤的慢性肾衰竭动物模型.方法 SD大鼠分为6组:正常组,阿霉素15 mg/kg组(A组),腺嘌呤200 mg·kg-1·d-1组(B组),阿霉素15 mg/kg+腺嘌呤200 mg·kg-1·d-1组(C组),阿霉素10mg/kg+腺嘌呤200mg·kg-1· d-1组(D组),阿霉素5 mg/kg+腺嘌呤200mg·kg-1·d-1组(E组).进行尾静脉注射阿霉素和灌胃腺嘌呤,分别于14、28 d处死大鼠,并收集尿液、血液及肾脏.结果 正常组和B、E组大鼠存活过14、28 d;E组24 h尿蛋白较B组和正常组明显增加;E组大鼠血清中血尿素氮(BUN),血肌酐(Scr)等水平明显升高;病理切片示B、E组大鼠有不同程度的肾小管间质纤维化和肾小球减少,其病变较余组典型.结论 该方法能够成功建立伴有肾小球和肾小管间质损伤的慢性肾衰竭动物模型,但药物剂量需要进一步的研究.     

Fas/FasL诱导细胞凋亡在大鼠抗GBM肾炎中的作用

目的 探讨Fas/FasL诱导细胞凋亡在大鼠抗肾小球基底膜(CBM)肾炎中的作用.方法 复制大鼠抗GBM肾炎模型,在实验室的2、7、14、21和28 d,行以下处理:收集24 h尿、血清样本检测大鼠24 h尿蛋白、血肌酐及血尿素氮含量;取肾组织经光镜、电镜观察肾组织病理变化;采用KT-PCR法和Western blot法检测肾组织中Fas、FasL和Caspase-3的表达情况;采用分光光度法检测肾组织中Caspase-3活性;采用TUNEL法检测大鼠肾组织细胞凋亡情况.结果 与正常对照组大鼠相比,肾炎模型组大鼠24h尿蛋白、血肌酐及血尿素氮含量均明显升高(P<0.01);肾组织中Fas、FasLmRNA及其蛋白和Caspase-3mRNA及其蛋白活性均明显增加(P<0.01);肾组织中凋亡细胞数明显增多(P<0.01),且与Fas、FasL及Caspase-3表达呈正相关(P<0.01).结论 Fas/FasL诱导的细胞凋亡在大鼠抗GBM肾炎中发挥重要作用.     

抗肾小球基底膜抗体肾炎动物模型的建立及应用研究

目的:建立稳定的抗小鼠肾小球基底膜(GBM)抗体诱导的小鼠肾炎模型,用于相关药物药效学及机制的研究。方法:1制备含抗小鼠GBM抗体的兔血清。分离获得小鼠GBM组分,制备成冻干粉免疫家兔,得到含抗小鼠GBM抗体的兔血清。2建立抗小鼠GBM抗体诱导的小鼠肾炎模型。将兔Ig G与弗氏完全佐剂(CFA)充分乳化,于C57BL/6小鼠右脚脚掌注射进行致敏,3 d后尾静脉注射兔血清进行再次免疫。3肾炎小鼠口服肾上腺皮质激素类药物醋酸泼尼松龙(PNS)进行干预治疗,口服给药14 d,2 mg·kg-1·d-1,观察小鼠蛋白尿、蛋白肌酐比、血生化的变化。结果:注射含抗小鼠GBM抗体的兔血清(200μl,300μl,500μl),成功建立小鼠肾炎模型,模型小鼠蛋白尿及血清尿素氮(BUN)水平显著升高,血清白蛋白(ALB)水平明显降低,具有统计学意义(P0.05,P0.01);PNS治疗后,能明显降低肾炎小鼠蛋白尿水平、蛋白肌酐比及BUN水平(P0.05,P0.01),缓解小鼠肾炎症状。结论:含抗小鼠GBM抗体的兔血清能够成功诱导小鼠肾炎模型,醋酸泼尼松龙能够有效发挥治疗作用,证实该模型可用于相关药物药效学及机制的研究。     

建立大白兔抗肾小球基底膜肾炎模型的实验研究

目的：建立大白兔抗肾小球基底膜(GBM)肾炎模型，探讨抗GBM肾炎的发病机理。方法：动物随机分实验组和对照组。实验组大白兔注射羊抗免肾毒血清，对照组仅注射等量的生理盐水。定期观察一般情况，并测定尿蛋白、血肌酐的水平，2周后宰杀大白兔，观察肾组织病理改变。结果：大白兔注射肾毒血清后48h内即出现大量的尿蛋白，2周后仍维持在较高的水平。肾组织病理改变表现为肾小球中细胞浸润增多，纤维素沉积与纤维素样坏死，新月体数明显增加；间质中可见炎细胞浸润，小管中可见较多的蛋白管型，而无明显间质纤维化或小管萎缩。免疫荧光检查见羊抗兔IgG沿肾小球基底膜线状分布。观察期间大白兔血肌酐水平有明显升高。结论：羊抗兔肾毒血清注射能引起大白兔抗GBM肾炎的肾脏病变，其主要病理变化为新月体的形成。     

东菱迪芙治疗大白兔抗肾小球基底膜肾炎的实验研究

目的：观察应用东菱迪芙(DF—521）治疗大白兔抗肾小球基底膜(GBM)肾炎的疗效。方法：建立大白兔自相期抗GBM肾炎模型；实验分两组：DF—521治疗组和末治疗组(对照组)。大白兔注射肾毒血清后6h内开始静脉给药，对照组仅给等量的生理盐水。定期观察一般情况，并测定尿蛋白、血肌酐、血纤维蛋白原的水平，2周后宰杀大白兔，观察肾组织病理改变。结果：药物治疗后大白兔尿蛋白水平，纤维家沉积数、新月体数及肾小球细胞总数较肾炎对照组显著减少6肾质量和血肌酐水平无显著差别。结论：东菱迪芙能够改善抗GBM肾炎大白兔的肾脏病变，疗效显著。     

瘦素在儿童肾小球疾病中的变化

目的:探讨儿童肾小球疾病(肾病综合征、急性肾小球肾炎、紫癜性肾炎)血清瘦素(leptin)的变化。方法:对93例肾小球疾病患儿(排除肥胖患儿)清晨空腹测血清leptin,其中肾病综合征33例、急性肾小球肾炎31例、紫癜性肾炎29例;并测24小时尿蛋白定量、血胆固醇、血尿素氮及肌酐、尿N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶(NAG)。设正常对照组26例均为健康体检儿童,清晨空腹测血清leptin。分别比较3组疾病与正常对照组之间的血leptin差异,3组疾病之间血清leptin的差异;分析血清leptin与尿蛋白定量、血胆固醇、血尿素氮及肌酐、尿NAG酶之间的关系。结果:3种疾病患儿的血清leptin都较正常对照组明显升高,有统计学意义(P<0.05),且以肾病综合征和急性肾小球肾炎组升高最明显(P<0.01);血清leptin与尿蛋白定量、血胆固醇呈正相关(P<0.05),与血尿素氮及肌酐、尿NAG酶无相关性(P>0.05)。结论:儿童肾病综合征、急性肾小球肾炎、紫癜性肾炎的血清leptin均有不同程度的升高,说明血清leptin水平可作为临床判断肾脏滤过吸收功能状态的一个间接指标,对临床治疗具有一定指导价值。     

渗透泵阳离子化小牛血清白蛋白肾小球肾炎大鼠模型研究

[目的]应用渗透压缓释泵技术建立新型阳离子化小牛血清白蛋白(C-BSA)慢性肾小球肾炎大鼠模型.[方法]将C-BSA装入渗透泵,植入右肾旁,制备新型C-BSA渗透泵肾小球肾炎模型,并用醋酸泼尼松(8 mg/kg)干预治疗,观察大鼠存活情况,并检测尿蛋白,血清尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)及肾组织病理形态学改变.通过与尾静脉注射C-BSA的传统肾小球肾炎模型比较,评价新动物模型的可行性和优越性.[结果]与空白对照组比较,渗透泵C-BSA肾小球肾炎模型组大鼠24h尿蛋白,血清BUN、SCr含量均显著升高,差异具有统计学意义(P＜0.01),且24 h尿蛋白,血清BUN、SCr含量均高于传统C-BSA肾小球肾炎模型组,但差异无统计学意义.与空白对照组比较,渗透泵C-BSA肾小球肾炎模型与传统C-BSA肾小球肾炎模型均出现严重的肾小球病理改变.与渗透泵C-BSA肾小球肾炎模型组比较,醋酸泼尼松组大鼠24h尿蛋白、血清BUN含量均显著降低(P＜0.05或P＜0.01),肾小球病理改变较轻.[结论]应用渗透压缓释泵恒释C-BSA能够成功制备稳定可靠的肾小球肾炎模型.     

两种造模方法致大鼠慢性肾病模型的肾功能及病理变化比较

目的 探究两种造模方法对大鼠慢性肾病模型的肾功能影响及病理改变。方法 采用单侧肾切除+尾静脉重复注射阿霉素(ADR)法(A组)和二次尾静脉注射ADR法(B组)测定各组大鼠肾功能(血尿素氮、血肌酐)、血清白蛋白。光镜下观察各组大鼠肾脏的病理变化,并分别与正常对照组(N组)进行比较。结果 在4、8、12周末,A、B组血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)值均有显著上升(P<0.05),白蛋白降低(P<0.05),表现为低蛋白血症,部分大鼠合并腹腔积液。光镜下,A、B两组肾小球均有不同程度萎缩、硬化,肾小管受损不均,肾间质均出现炎性改变。单侧肾切除+重复尾静脉注射ADR诱导的肾脏损伤更为严重。结论 单侧肾切除+重复尾静脉注射ADR诱导的慢性肾病模型与二次尾静脉注射ADR法,均可使大鼠成模,两种方法比较,单侧肾切除+重复尾静脉注射ADR诱导的病理改变相对较为典型。     

霉酚酸酯对大鼠肾毒血清肾炎肾小球肝细胞生长因子与转化生长因子-β1 表达的影响

目的 探讨霉酚酸酯对大鼠肾毒血清肾炎肾小球肝细胞生长因子(HGF)与转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响.方法 大鼠分为正常对照组、模型组、霉酚酸酯治疗组,每组各10只.治疗组给予霉酚酸酯20 mg/(kg·d)灌胃,2周后测定各组24 h尿蛋白、血肌酐、尿素氮水平,应用免疫组化方法观察肾小球HGF与TGF-β1表达.结果 与模型组相比,霉酚酸酯治疗组能明显减少24 h尿蛋白、血肌酐、尿素氮水平(P＜0.01),显著增加肾毒血清肾炎大鼠肾小球HGF表达(P＜0.01),减少TGF-β1表达(P＜0.01).结论 该研究提示促进肾小球内HGF表达、抑制TGF-β1生成可能是霉酚酸酯减轻肾毒血清肾炎肾组织损伤程度,抑制新月体形成的机制之一.     

中药芪红合剂对肾间质纤维化模型大鼠肾组织中CTGF表达的影响

目的 观察中药芪红合剂在肾间质纤维化过程中对致纤维化因子结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响,探讨其可能的肾保护作用机制.方法 采用单侧输尿管结扎(UUO)致肾间质纤维化的动物模型,40只雄性Wistar大鼠随机分为4组:假手术组(A组)、手术模型组(B组)、芪红合剂组(C组)、依那普利组(D组).术后14d处死各组大鼠,收集血清测定血肌酐(Scr)、尿素氮(Bun)水平,取结扎侧肾组织分别用HE、Masson染色,采用免疫组化方法检测肾组织中结缔组织生长因子(CTGF)的表达,并用计算机图像分析系统进行分析. 结果 模型组大鼠肾组织中CTGF的表达较假手术组显著升高,两治疗组较模型组明显降低.模型组大鼠血肌酐、尿素氮水平较假手术组明显增高,两治疗组较模型组显著下降.结论 中药芪红合剂可降低大鼠血尿素氮、血肌酐水平,并可通过抑制CTGF的表达,而起到减轻肾间质纤维化病变程度的作用,推测其抑制CTGF表达上调的作用可能是其抗肾小管间质纤维化的作用机制之一.     

肾间质纤维化实验动物模型的多角度筛选

目的:比较腺嘌呤灌胃和单侧输尿管结扎建立大鼠肾间质纤维化模型,从而得到生化、免疫组化及病理指标更符合肾间质纤维化的动物模型,以备后续实验使用。方法:实验大鼠分为正常组、腺嘌呤组和单侧输尿管结扎手术(UUO)组3组,后两组分别运用腺嘌呤灌胃和单侧输尿管结扎建立大鼠肾间质纤维化。观察各组大鼠尿蛋白定量、血肌酐和尿素氮;HE、Masson染色,观察病理变化;免疫组化法检测肾组织E-cadherin、β-catenin及α-SMA的表达。结果:与正常组比较,腺嘌呤组24h尿蛋白、血清尿素氮和血清肌酐均有较为显著升高(P0.01);UUO组24h尿蛋白有显著性升高(P0.05)、血清尿素氮和血清肌酐均有较为显著升高(P0.01)。与腺嘌呤组比较,UUO组24h尿蛋白显著性升高(P0.05)。与正常组比较,腺嘌呤组、UUO组的E-cadherin平均光密度值有显著性降低(P0.05),α-SMA和β-catenin平均光密度值有显著性升高(P0.01、P0.05);与腺嘌呤组比较,UUO组β-catenin有显著性降低(P0.05)。病理显示,腺嘌呤组肾小管损伤较UUO组严重。结论:UUO建立的大鼠肾间质纤维化模型在生化、免疫组化及病理指标优于腺嘌呤组。