两例急性髓系白血病伴t(6;21;8)(p22;q22;q22)复杂易位患者的临床与实验室研究

目的探讨2例急性髓系白血病（AML）伴t（6;21;8）（p22;q22;q22）复杂易位患者的临床及实验室特点.方法骨髓细胞经短期24 h培养后按常规方法制备染色体标本,R显带进行核型分析;双色双融合AML1/ETO探针进行丝裂间期及中期荧光原位杂交（FISH）检测AML1/ETO融合信号;逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测AML1/ETO融合基因转录本;综合分析临床特征.结果2例患者常规细胞遗传学分析显示均存在t（6;21;8）（p22;q22;q22）,间期和中期FISH证实了核型结果;RT-PCR检测到AML1/ETO融合基因转录本;尽管2例患者均诊断为AML-M2,但二者的免疫表型和治疗反应不同.结论t（6;21;8）（p22;q22;q22）是一种少见的t（8;21）（q22;q22）的复杂变异易位,还需要更多的病例以明确其临床特征和预后价值.     

染色体t(8;21)急性髓系白血病cCD79a/cCD22的异常表达

目的报道新发现的4例cCD79a／cCD22异常表达的t（8；21）急性髓系白血病（AML）。方法分析4例患者的细胞形态学、免疫学、细胞遗传学、分子生物学（MICM）分型及临床特征。结果伴cCD79a／cCD22表达的t（8；21）（q22；q22）的AML特点：①无显著的性别差异；②发病年龄较轻；③可有髓外浸润；④外周血白细胞计数不增高；⑤骨髓细胞形态学显示为粒细胞白血病，且原始细胞显著增多；⑥免疫表型均为B淋巴系和髓系共表达，CD34表达阳性，且为高表达；⑦染色体改变除t（8；21）（q22；q22）外，亦常见性染色体缺失及复杂染色体改变；⑧AML1／ETO融合基因检测均阳性；⑨对兼顾髓系和淋巴系的联合治疗方案反应较好。结论t（8；21）AML患者易伴有B细胞表型共表达。     

伴ider（17）（qlO）t（15；17）变异易位的急性早幼粒细胞白血病临床和实验特征

目的报道一例初发的、伴有ider（17）（q10）t（15;17）（q22;q21）的罕见急性早幼粒细胞白血病（acutepromyelocyticleukemia。APLl并探讨其临床和实验特征。方法在常规核型分析的基础上,应用双色双融荧光原位杂交（dual—coloranddual—fusionfluorescenceinsituhybridization,DCDF—FISH）和逆转录一聚合酶链反应fRT—PCRl技术进一步检测该病例的细胞遗传学异常和分子生物学异常．并结合文献分析此类少见变异易位的临床特点。结果G显带染色体分析显示患者核型为46,XX,der（15）t（15;17）（q22;q21）,ider（17）（q10）t（15;17）（q22;q21）／46,XX,t（15;17）（q22;q21）／46,XX,DCDF—FISH结果显不39％的I司期细胞为典型的t（15;17）易位模式-红-绿两融合（101G2F）,16％的间期细胞信号模式为-红-绿三融合（101G3F）,RT—PCR结果显示PML-RARot（L型1阳性。结论ider（17）（q10）t（15;17）异常多发生于男性患者,常伴有外周血白细胞减低,骨髓形态表现为颗粒增粗型APL特征．但是患者对全反式维甲酸（all—trans—retinoicacid,ATRA）联合化疗有效。     

t(8;21)儿童急性髓系白血病伴cCD79a的异常表达

目的报道自2005年来在190例急性髓系白血病(AML)患儿发现的7例t(8;21)(q22;q22)M2亚型中cCD79a异常表达的细胞生物学特征。方法分析7例t(8;21)(q22;q22)M2伴cCD79a异常表达的双表型AML患儿细胞形态学、免疫学、细胞遗传学、分子生物学(MICM)分型及临床特征,取同期诊断的20例t(8;21)的AML-M2患儿作为对照组。结果 83例t(8;21)(q22;q22)AML-M2患儿占同期连续190例AML患儿的43.7%,其中有7例伴有cCD79a异常表达,占8.4%。伴有cCD79a异常表达的t(8;21)(q22;q22)的AML-M2患儿其骨髓细胞形态学均显示为急性粒细胞白血病M2,分类中原始细胞均显著增多;免疫表型均为髓系伴B淋系表达;CD34为高表达阳性;均有t(8;21)(q22;q22)染色体改变,且常伴有染色体复杂易位或缺失等改变;融合基因AML1/ETO检测均为阳性;临床治疗对兼顾髓系和淋系的联合治疗方案效果较好。结论 t(8;21)M2是儿童AML中的最常见类型,易伴有B淋巴细胞表型共表达。     

急性髓系白血病伴t（8;21）的临床特点及预后

目的探讨t（8;21）急性髓系白血病（acute myeloid leukemia,AML）的临床特点及预后,提高对t（8;21）AML的认识。方法 2010年5月收治1例t（8;21）AML患者,对其临床资料并复习相关文献进行分析。患者因乏力、皮下瘀斑入院,查体发现患者有胸骨压痛,脾肋下3cm触及,血常规：白细胞80.37×10^9/L,异常细胞23%,取患者骨髓液行形态学、流式细胞术检测及染色体核型检测。结果患者诊断为急性粒细胞白血病部分分化型（AML-M2b）,AML1/ETO融合基因阳性,染色体核型分析t（8;21）（q22;q22）。结论 t（8;21）AML是一类较为特殊的急性髓系白血病,在诊断时需寻找疾病的预后因素并进行分层,实施个体化治疗。     

慢性粒细胞白血病急变伴t(3;21)(q26;q22)染色体易位受累基因的研究

目的探讨慢性粒细胞白血病（CML）急性髓系白血病（AML）变伴t（3;21）（q26;q22）的受累基因.方法对1例CML AML变伴t（3;21）（q26;q22）患者细胞间期和中期分裂相细胞采用荧光原位杂交技术（FISH）检测AML1和bcr/abl基因重排,RT-PCR联合序列分析检测t（3;21）（q26;q22）受累基因.结果der（3）和der（21）染色体上均检测到AML1基因杂交信号,AML1-MDS1-Evi1、AML1-MDS1、AML1-EAP及Evi1基因均表达,未见AML1-Evi1融合基因表达,AML1-MDS1-Evi1基因表达水平是AML1-MDS1、AML1-EAP表达水平的1.58和1.54倍,患者Evi1基因表达水平是HEL细胞系Evi1表达水平的2.71倍.结论t（3;21）（q26;q22）导致形成AML1-MDS1-Evi1、AML1-MDS1融合基因及Evi1基因激活,这些继发的分子遗传学异常是CML急性变伴t（3;21）（q26;q22）患者急变发生的分子基础.     

t(8;21)染色体易位的37例实验室分析

t(8;21)易位是和M2b 型急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML) 相关的一种特异性染色体重排.世界卫生组织提出的造血和淋巴系统疾病最新分型,建议只要检出t(8;21)(q22;q22)以及AML1/ETO 融合基因的AML,就可纳入急性髓系白血病伴重现性遗传学异常[1].本次研究发现t(8;21)的病例37 例,现将这些病例的细胞形态学、染色体核型分析报道如下.     

二例伴有dic(9;20)(p11-13;q11)急性淋巴细胞白血病患者的临床和实验研究

目的探讨伴有dic（9;20）（p11-13;q11）的急性淋巴细胞白血病（ALL）的细胞形态学、免疫学、细胞遗传学特征和临床特点.方法骨髓细胞经直接法和24h短期培养后按常规方法制备染色体,采用R显带技术进行细胞遗传学分析.分别以9号和20号染色体着丝粒探针进行双色荧光原位杂交（FISH）检测.结果2例患者的临床和血液学改变符合ALL诊断,免疫表型分析B淋系标志阳性（CD10＋、HLA-DR＋）;染色体核型分析显示2例患者均为dic（9;20）：例1为45,XY,der（9）t（9;20）（p11;q11）,-20[20],例2为45,XX,der（9）t（9;20）（p13;q11）,t（9;22）（q34;q11）,-20[10]/46,idem,＋8[16]/47,idem,＋8,＋21[14];其中1例经双色FISH检测证实9号和20号染色体之间发生了相互易位,且形成双着丝粒染色体.结论dic（9;20）（p11-13;q11）是一种少见的重现性核型异常,可能和ALL有特殊的联系.FISH技术是检测该易位的可靠手段.     

伴有t(8;21)的急性髓细胞白血病M2b型病人的临床特征(附67例报告)

分析67例急性髓细胞白血病（AML）M2b型病人的临床特征。方法：以细胞形态学为基础，结合细胞遗传学、分子生物学等方法检查AML M2b型病人的骨髓标本。结果：在67例病人骨髓片中，异常中幼粒细胞的特征性形态变化主要表现为核浆发育不平衡，占6％－66％，其中有5例＜10％。57例作染色体检查均发现t(8;21)（q22;q22)。34例进行融合基因检测，均发现急性髓细胞白血病21号染色体的1基因和8号染色体的Eight Twenty-One基因交互易位形成融合基因（AML1－ETO）。结论：（1）染色体t(8;21)与M2b密切相关，且常伴性染色体的选择，尤以Y染色体丢失常见。（2）AML1－ETO融合基因可作为M2b亚型的分子标志物，同时对判断预后和监测残留白血病等方面也有一定价值。（3）异常中幼粒的特征性形态改变是细胞形态学分类的关键，而其数量不一定＞30％。     

1例伴有t（9；22）和ins（3；8）的慢性粒细胞白血病的临床和实验研究

目的报道1例伴有ins（3；8）的慢性粒细胞白血病（CML）病例及其3号、8号全染色体涂染、双色间期荧光原位杂交（FISH）、实时荧光定量PCR研究结果。方法骨髓细胞经直接法或24h短期培养法制备染色体标本，R显带技术进行核型分析；3号、8号全染色体涂染探针进行染色体涂染；bcr／abl双色双融合探针进行FISH分析；实时荧光定量PCR检测bcr／abl融合基因转录本及其拷贝数。结果骨髓细胞R显带核型分析提示，除t（9；22）外，所有细胞伴ins（3；8）；全染色体涂染证实3号染色体上插入一段8号来源的染色体片段；双色FISH检测到bcr／abl基因重排；实时荧光定量PCR检测到bcr／abl融合基因（b3a2）转录本。结论ins（3；8）是CML患者罕见的附加染色体异常；全染色体涂染是明确染色体插入易位的可靠手段。     

二例M2型急性髓系白血病染色体t(8;19)(q22;q13)

目的　首次报道 2例M2 型急性髓系白血病 (AML M2 )有染色体t(8;1 9) (q2 2 ;q1 3 )。方法　应用骨髓细胞短期培养法制备染色体标本 ,并应用R和G显带技术进行核型分析 ;例 2 ,应用流式细胞仪和一组单克隆抗体检测其白血病细胞的免疫表型 ,应用筑巢式逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术检测其AML1/ETO融合基因转录本。结果　例 1的核型为 4 6,XX ,t(8;1 9) (q2 2 ;q1 3 ) [2 8] / 4 6,XX[2 ] ,例 2的核型为t(8;1 9) (q2 2 ;q1 3 ) ,del(9) (q1 2q2 2 ) [2 3 ] / 4 6,XY[2 ] ;例 2的白血病细胞表达CD13(3 8 8% )、CD33(3 1 8% )、CD34 (80 .9% )和CD19(63 .9% ) ,其AML1/ETO融合基因转录本为阴性。结论　t(8;1 9) (q2 2 ;q1 3 )是t(8;2 1 )的简单变异型 ,其分子学本质有待于进一步研究阐明。     

t(8;21)急性髓系白血病的免疫表型特点

目的研究用流式细胞术免疫表型分析t(8;21)(q22;q22)急性髓系白血病(AML)的免疫表型特点.方法采用常规细胞形态学/细胞化学、流式细胞术间接免疫荧光标记技术和R显带核型分析(MIC)进行分型,部分加用RT-PCR检测AML1/ETO融合基因.结果①294例初治AML患者中,64例t(8;21)AML,占21.8%,在M2中高达54.7%.64例t(8;21)AML中M2占81.3%;②与对照组比较,t(8;21)AML高表达CD19和CD34,低表达CD33(P＜0.001);③以20%阳性细胞作为阳性标准,CD19阳性率在AML为13.6%(294例中40例),t(8;21)AML为50%(64例中32例),显著高于无t(8;21)AML组的3.5%(230例中8例)(P＜0.001);④在t(8;21)AML患者中,CD19+和(或)CD34+58例(90.6%)、CD19-和(或)CD34-6例(9.4%).结论t(8;21)AML特别是M2/t(8;21)高表达CD19与CD34,CD19与t(8;21)密切相关,CD19是预测t(8;21)的指标之一.     

间期荧光原位杂交技术对诊断核心结合因子急性髓系白血病的价值

本研究主要探讨间期荧光原位杂交技术在核心结合因子急性髓系白血病(CBF AML)诊断中的价值。采用间期荧光原位杂交技术(I-FISH),分别应用AML1-ETO双色双融合探针和荧光素直接标记的双色断裂点分离基因探针CBFβ-MYH11检测82例AML-M2及43例AML-M4/M5患者白血病细胞的细胞遗传学异常,并与R显带常规细胞遗传学(CC)检测结果进行比较分析。结果表明:82例AML-M2患者中FISH检测AML1-ETO融合基因阳性患者为25例(30.5%),CC检测存在t(8;21)(q22;q22)染色体异常为23例(28.0%),所有FISH检测AML1-ETO阳性患者中典型的阳性信号模式1R1G2F为22例(88.0%);不典型的信号模式包括1R2G1F和2R1G2F共3例(12.0%)。在所有43例AML-M4/M5患者中,FISH检出inv(16)(p13;q22)/t(16;16)(p13;q22)信号模式(1R1G1F)为10例(23.3%),CC检测出存在inv(16)(p13;q22)/t(16;16)(p13;q22)为2例(4.6%),FISH检测灵敏度显著高于CC(p<0.05)。结论:FISH作为新型细胞遗传学分析技术可以弥补CC技术灵敏度较低、检测周期长等不足,两者结合可以成为CBF AML诊断乃至微小残留病监测的有力工具。     

双色荧光原位杂交技术在检测t(8;21)白血病中的应用

目的 探讨双色荧光原位杂交（FISH）技术在t（8；21）白血病诊断和治疗监测中的应用。方法 将2001年以来应用双色双融合AML1／ETO基因探针进行FISH检测的70例白血病患者，分为未治疗组和治疗组，回顾性分析核型、FISH及部分RT-PCR结果，对核型结果有疑问的患者再应用显带后连续进行中期FISH方法予以确定。结果 未治疗组共42例，经FISH补充检测确诊30例为t（8；21）患者，其中2例患者核型分析未检出t（8；21）和1例RT-PCR结果阴性患者FISH检测结果均为阳性；6例复杂易位患者通过显带后连续中期FISH检测不仅确定AML1／ETO融合基因的存在，同时精确定位。治疗组共28例，为已确诊的t（8；21）白血病患者。3例患者核型分析结果正常或非t（8；21），FISH检测结果阳性。2例通过FISH监测到复发。结论 双色FISH技术是一种敏感、精确的t（8；21）白血病的诊断和治疗监测工具，可精确定位复杂核型，因而是常规细胞遗传学检测的必要补充。     

荧光原位杂交技术在儿童急性髓系白血病诊断中的作用

本研究探讨荧光原位杂交技术(FISH)在儿童急性髓系白血病(AML)临床诊断中的作用。对2005年4月至2010年4月于我院就诊的179例儿童AML的临床实验室检查资料进行回顾性分析,分析FISH法与染色体核型分析(CA)、聚合酶链反应(PCR)检测手段对融合基因检测结果的差异性和互补性。结果表明:FISH对细胞遗传学异常的检出率较高,27例AML-M3应用探针检测PML/RARα融合基因,22例为阳性;24例AML-M2b应用探针检测AML1/ETO融合基因,24例均为阳性;3例AML-M4Eo应用探针检测CBFβ/MYH11融合基因,3例均阳性。结论:FISH法检测儿童AML中融合基因阳性率较高,并且与常规染色体核型分析和PCR检测具有较好的一致性。FISH与传统的细胞遗传学和分子生物学技术相结合,能够使遗传学异常的检测更准确,在儿童AML的诊断和分型中具有值得推广的临床价值。     

Prognosis and treatment outcome in patients with acute myeloid Leukemia with t(8;21)(q22;q22)

Patients with acute myeloid leukemia (AML) with the t(8;21) karyotype generally have a favorable clinical course, but key prognostic factors remain poorly defined. This study was conducted to determine the prognoses and treatment outcomes of patients with AML with this unique cytogenetic change. A total of 22 patients with AML with t(8;21)(q22;q22) were studied. Various parameters were tested for their impact on disease-free survival (DFS) and overall survival (OS). Another 55 patients with AML with a normal karyotype were included for comparison of clinical outcomes. Between patients with t(8;21) and those with a normal karyotype, no significant differences were noted in DFS (median survival, 15.23 vs 12.03 mo;P=.7626) and OS (median survival, 19.17 vs 18.93 mo;P=.7543). Among t(8;21)(q22;q22) patients, no clinical parameters showed a significant impact on DFS. Univariate analysis revealed that a higher platelet count (> 15·10⁹/L) at diagnosis, a low white blood cell count (index ≤20), and hematopoietic stem cell transplantation (HSCT) as postremission therapy were associated with improved OS. On multivariate analysis, HSCT as postremission therapy and white blood cell count index < 20 remained good independent prognostic factors for OS. The data presented here suggest that t(8;21)(q22;q22) cytogenetic changes in patients with AML had prognostic significance similar to that in patients with a normal karyotype; patients who harbored either karyotype had parallel clinical outcomes. It is concluded that patients with AML with t(8;21)(q22;q22) would be compromised by treatment approaches that do not include HSCT as postremission therapy.