Cr(Ⅵ)化合物引起DNA损伤的机制

六价铬[Cr(Ⅵ)]是一种公认的环境化学毒物,可导致多种类型的DNA损伤.但其本身并不能直接作用于DNA,它以氧阴离子形式通过非专一性的磷酸/硫酸阴离子通道透过细胞膜后经细胞内的还原剂还原形成一系列低价态铬,如五价铬[Cr(Ⅴ)]、四价铬[Cr(Ⅳ)]和三价铬[Cr(Ⅲ)].该文主要对Cr(Ⅵ)化合物进入体内后如何引起DNA损伤及DNA损伤类型作一概述.     

铬盐对培养鼠胚胎的毒性

实验和流行病学的研究已表明六价铬化合物是主要的致癌物和诱变物,而三价铬通常无活性,可能是其很少能透过生物膜的结果。然而,在进入细胞以后,六价铬迅速还原成三价铬,后者可能是细胞内仅有的形式,最终致毒剂。本文报告了两种六价铬盐(K_2Cr_2O_7,CaCrO_4)对培养中胚胎发育的毒作用,并和三价铬盐(Cr(NO_3)_3)的毒作用进行了比较。     

化学发光检测和离子色谱法同时测定水溶液中的铬(Ⅲ)和铬(Ⅵ)

本文探讨了一种化学发光法检测和离子色谱法同时测定流动体系中的铬(Ⅲ)和铬(Ⅵ)的方法。用 Dionex 阳离子交换防护柱分离铬(Ⅲ)和铬(Ⅵ),铬(Ⅵ)用亚硫酸钾还原成铬(Ⅲ),     

环境样品中Cr[Ⅵ]测定方法的探讨

环境中物质的化学形态不仅决定生物的活性和毒性,也影响它们在生物体内、生态环境中的迁移过程。环境中的Cr主要以有机铬和无机铬两种形态存在,其中无机铬的含量远比有机铬大得多。无机铬中常见的形态为Cr(Ⅲ)和Cr(Ⅵ),由于价态的不同,导致二者无论是地球化学性质、生物化学性质还是毒性水平,均有显著差异。Cr(Ⅲ)是人体所必需的微量元素之一,它能促进球蛋白的正常新陈代谢,协助胰岛素、糖和脂肪的代谢,同时它能维护胆固醇正常代谢。人体缺少Cr(Ⅲ)会引起动脉硬化等多种疾病。而Cr(Ⅵ)会影响人体的氧化-还原和水解过程,并可导致蛋白质变…     

柴油车尾气颗粒物提取物对V79细胞的毒性

目的 观察柴油车尾气颗粒物提取物(DEPE)对中国仓鼠肺成纤维细胞(V79)增殖、细胞膜完整性及氧化损伤的毒性。方法 DEPE染毒不同浓度或时间后，通过检测V79细胞的细胞生存率、乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、谷胱甘肽(GSH)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力的变化规律及相互的关系，评价DEPE对细胞的一般毒性和氧化损伤作用。结果 在该实验条件下，DEPE可致细胞生存率降低，半数抑制浓度(IC50)约为6400μ/ml；细胞内LDH漏出率增加，GSH含量下降，并伴随着GSH—Px活力升高。结论 一定剂量下，DEPE可降低细胞生存率，损伤细胞膜，致细胞氧化损伤。     

还原型谷胱甘肽对六价铬诱导的L-02肝细胞毒性的保护作用

目的探讨还原型谷胱甘肽(GSH)对六价铬[Cr(Ⅵ)]诱导的L-02肝细胞毒性的影响。方法分别设Cr(Ⅵ)、GSH单独作用组、联合作用组和空白对照组,采用MTT法检测细胞生存率的变化。结果在2、4、8、16、32和64μmol/LCr(Ⅵ)处理浓度,Cr(Ⅵ)对L-02肝细胞具有明显细胞毒性,细胞存活率与Cr(Ⅵ)处理浓度呈负相关(r=-0·910)。仅浓度为20μmol/L的GSH对Cr(Ⅵ)诱导的细胞毒性具有拮抗作用,Cr(Ⅵ)+GSH联合组的生存率与Cr(Ⅵ)不同浓度单独处理组比较差异均具有显著性(P<0·05)。结论适宜浓度的GSH可能对Cr(Ⅵ)诱导的L-02肝细胞毒性具有保护作用。     

铜对人类肠道上皮Caco-2细胞的毒性研究

目的　了解铜对人类肠道上皮Caco 2细胞的毒性影响。方法　应用噻唑蓝 (MTT)实验、P 糖蛋白(P gp)活性检测实验、活性氧检测及克隆形成实验研究铜对肠道上皮Caco 2细胞的毒性及可能作用机制 ,同时利用Caco 2细胞和肠炎沙门氏菌为模型 ,研究铜对Caco 2细胞对细菌侵入和存活易感性的影响。结果　在一定的暴露场景下 ,铜可明显地降低细胞的活力 ,抑制细胞膜表面P gp的活性 ,促进细胞内活性氧自由基的产生 ,降低细胞的克隆形成能力。此外 ,细胞经铜暴露后 ,肠炎沙门氏菌侵入细胞的数量增加 ,但细胞内存活的细菌数量却下降。结论　过量的铜可导致Caco 2细胞氧化损伤 ,从而引起更广泛的细胞毒性效应 ,但其对细胞对细菌侵入和存活易感性的影响有待进一步研究。     

维生素C在拮抗Cr(Ⅵ)诱导L-02肝细胞毒性中的时序效应

目的探讨在体外实验系统中维生素C在拮抗六价铬[Cr(Ⅵ)]诱导L-02肝细胞毒性的时序效应。方法实验设对照组、Cr(Ⅵ)组、维生素C组及二者不同时序联合作用组。用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测L-02肝细胞活力,通过回归方程求出各组细胞生长半数抑制浓度(IC50)。结果维生素C组IC50为354.21μmol/L;Cr(Ⅵ)组IC50为35.65μmol/L;维生素C与Cr(Ⅵ)同时加入时,IC50为5 111.79μmol/L;Cr(Ⅵ)染毒后再用维生素C处理时,IC50为1 392.51μmol/L;维生素C处理后再用Cr(Ⅵ)染毒时,IC50为3 247.79μmol/L。维生素C与Cr(Ⅵ)联合作用组IC50均明显高于Cr(Ⅵ)单独染毒组,其差异有非常显著性(P<0.01)。维生素C与Cr(Ⅵ)对L-02肝细胞的IC50值顺序为:两者同时加入试验组>维生素C处理后再用Cr(Ⅵ)染毒组>Cr(Ⅵ)染毒后再用维生素C处理组。结论无论哪一种顺序加入维生素C对Cr(Ⅵ)所致的细胞毒性均具有拮抗作用,如果与Cr(Ⅵ)同时加入,维生素C对Cr(Ⅵ)诱导的细胞毒性的拮抗作用更强。     

牛磺酸对砷中毒小鼠肝脏GSH保护作用

砷可以诱导氧化应激的产生,通过多种机制引起生理和病理反应.氧化应激被认为是砷中毒的一个重要机制,砷中毒可产生过量的活性氧(ROS),发挥其对组织细胞的氧化作用[1].具有平衡细胞渗透压、维持细胞膜稳定性和对抗氧自由基损伤等细胞保护功能[2].本实验通过使小鼠摄入不同浓度As2O2并用牛磺酸拮抗后检测其肝脏中抗氧化物谷胱甘肽(GSH)的含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和谷胱甘肽还原酶(GR)的活力,研究牛磺酸对砷中毒小鼠肝脏中GSH及相关酶类的保护作用,探讨牛磺酸对砷毒性的抗氧化拮抗作用,为砷中毒的有效防治提供基础依据.     

海参脑苷脂对H_2O_2致PC12细胞氧化损伤的保护作用

目的研究海参脑苷脂(SCC)对H2O2诱导PC12细胞氧化损伤的保护作用。方法建立H2O2致PC12细胞氧化损伤模型,MTT法检测细胞存活率;测定细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)漏出量,评价细胞的损伤程度;利用荧光探针DCFH-DA对细胞内活性氧(ROS)进行荧光染色,检测荧光强度;化学比色法测定细胞内总抗氧化能力(T-AOC),黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果海参脑苷脂能明显改善H2O2诱导的PC12细胞的氧化损伤,与模型组相比,SCC处理组可使细胞存活率升高,细胞培养液中LDH的漏出量明显减少(P<0.01),细胞内ROS的积累量明显降低(P<0.01),同时细胞内T-AOC和SOD活性明显增加(P<0.01)。结论 SCC对H2O2诱导的PC12细胞的氧化损伤具有一定的保护作用。     

不同剂量维生素C对DNA氧化损伤影响的研究

目的 :　探讨补充不同剂量维生素 C(VC)对细胞 DNA损伤和诱导氧化损伤的影响。方法 :　在细胞培养液中分别加入 0 .1、0 .2 5及 0 .5mmol/L VC,观察 Hela (human trans-formed epithelial)细胞生长情况 ,给予低剂量 H2 O2 (0、5、1 0、2 5μmol/L)诱导 DNA氧化损伤 ,采用“彗星”电泳技术分析 DNA损伤。结果 :　VC为 0 .1、0 .2 5及 0 .5mmol/L三个剂量组的 Hela细胞经过 41 h培养后自发性 DNA损伤与对照组相比没有明显增加。当给予低剂量 5、1 0、2 5μmol/LH2 O2 诱导 DNA氧化损伤时 ,则在 0 .1 mmol/L和 0 .2 5mmol/L两组的 Hela细胞 DNA损伤率明显低于对照组 (无 VC培养 ) ;相反在浓度为 0 .5mmol/L VC培养的 Hela细胞 H2 O2 诱导的 DNA损伤率明显高于对照组。结论 :　在 0 .1和 0 .2 5mmol/L VC剂量下 ,能明显降低 Hela细胞氧化损伤 ,而过高剂量 VC对 H2 O2 诱导的 DNA损伤具有明显的增强作用。因此 ,VC的营养作用、抗氧化作用及毒性作用与其剂量有着密切的关系 ,适量摄入 VC有利于健康     

探讨六价铬对人体健康的影响及防治措施

[目的]探讨六价铬Cr(Ⅵ)对人体健康的影响及有效的防治措施. [方法]分析人体受Cr(Ⅵ)影响的途径、Cr(Ⅵ)在体内代谢方式及对人体健康的影响和有效的防治措施. [结果]通过严格执行有效的管理、防护及治疗措施,可明显降低铬中毒发生率和致残率. [结论]有效的防护及治疗措施对控制铬中毒发生率和致残率具有非常重要的作用.     

6价铬对人胚肺细胞P53和Bcl-2蛋白表达影响

6价铬[Cr（Ⅵ）]是我国一种常见的生产性毒物，广泛用于机械、化工、汽车、冶金、纺织等领域。流行病学调查发现，长期暴露于铬，特别是生产铬酸盐的工人肺癌高发。1990年国际癌症研究所（IARc）认定铬为人类致癌物。研究证明，六价铬化合物是最强有力的具基因毒性的铬化合物，对体外培养的细胞具有明显的毒性作用，但有关Cr（Ⅵ）对细胞内癌基因及抑癌基因表达产物的影响报道较少。为此，本实验采用免疫组织化学方法检测不同浓度重铬酸钾染毒对人胚肺细胞P53和Bcl-2蛋白表达的影响，为深入研究六价铬致癌的分子机制提供基础数据。     

hOGG1基因在Cr(Ⅵ)诱导线粒体DNA氧化损伤中的作用

目的探讨hOGG1基因在Cr(Ⅵ)诱导线粒体DNA氧化损伤中的修复作用。方法取不同浓度的Cr(Ⅵ)(0、2、8和32μmol/L)处理L-02肝细胞24h,分别测定细胞内活性氧簇(ROS)与hOGG1 mRNA表达水平和线粒体内8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)与hOGG1基因表达的人类8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶蛋白(hOGG1蛋白)水平。结果 8μmol/L和32μmol/L剂量组与对照组比较,细胞内ROS平均水平及线粒体内8-OhdG平均水平均明显增加(P<0.05),而hOGG1基因mRNA水平和线粒体内hOGG1蛋白水平,与对照组比较,2μmol/L剂量组两者水平均上升(P<0.05),32μmol/L剂量组两者水平均降低(P<0.05)。结论 Cr(Ⅵ)可诱导细胞内ROS水平增加,引起线粒体DNA氧化损伤,而hOGG1基因表达水平的改变,影响了线粒体DNA的修复能力。hOGG1基因在Cr(Ⅵ)诱导线粒体DNA氧化损伤中起到了重要的作用。     

N-乙酰半胱氨酸在有或无caspase抑制条件下对Cr(Ⅵ)诱导的肝细胞凋亡的拮抗作用

目的探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)在有或无caspase抑制条件下,对Cr(Ⅵ)诱导的肝细胞线粒体依赖性凋亡的拮抗作用。方法将L-02肝细胞随机分成对照组、Cr(Ⅵ)处理组、Z-VAD-fmk预处理组[Z-VAD-fmk预处理细胞1h,加入Cr(Ⅵ)]、NAC预处理组[NAC预处理细胞1h,加入Cr(Ⅵ)]、联合预处理组[Z-VAD-fmk和NAC分别预处理细胞1h,加入Cr(Ⅵ)],Cr(Ⅵ)终浓度为20μmol/L,处理6h。流式细胞仪检测细胞凋亡率,荧光分光光度法检测线粒体膜电位(△ψm)和通透性转运孔(PTP)的改变,单细胞凝胶电泳法观察细胞凋亡形态及细胞DNA损伤情况。结果终浓度20μmol/L的Cr(Ⅵ),处理6h,可诱导细胞凋亡,在有或无caspase抑制条件下,NAC均明显减轻了Cr(Ⅵ)引起的肝细胞线粒体膜电位下降及PTP孔开放(P<0.05),使细胞DNA损伤程度减轻(P<0.05),从而对细胞凋亡有明显拮抗作用(P<0.05),但与非caspase抑制条件下相比,caspase抑制条件下NAC的保护效果有明显降低(P<0.05)。结论在有或无caspase抑制条件下,NAC对Cr(Ⅵ)诱导的L-02肝细胞凋亡具有重要拮抗作用,caspase在该凋亡过程中不起决定性作用。     

番茄红素对人肝L02细胞氧化损伤的保护作用及其机制

目的探索番茄红素(Lyc)对过氧化氢(H_2O_2)诱导的人肝L02细胞氧化损伤的保护作用及其机制。方法以H_2O_2诱导的L02细胞氧化损伤为模型,通过测定不同浓度番茄红素预处理后L02细胞的生存率以确定最佳处理浓度;通过测定细胞活性氧(ROS)水平、细胞内超氧化物歧化酶(SOD)与谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、细胞内丙二醛(MDA)水平,培养液上清中的丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)及乳酸脱氢酶(LDH)活性等指标观察番茄红素对细胞氧化损伤的保护作用;通过检测细胞核蛋白中的核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白表达量及其靶基因血红素加氧酶1(HO-1)和辅酶Ⅰ醌类氧化还原酶1(NQO1)的mRNA表达水平等指标,观察番茄红素对Nrf2的核转位及其下游靶基因的激活作用。结果 10μmol/L番茄红素可显著提高H_2O_2培养条件下L02细胞的生存率,提高细胞内SOD、GSH-Px酶活性,降低胞内MDA含量及培养液中的ALT、AST、LDH酶活性(P0.05),并能提高细胞核蛋白的Nrf2含量及Nrf2靶基因HO-1和NQO1表达水平(P0.05)。结论番茄红素可通过促进Nrf2的核转位、增强其下游抗氧化基因的表达从而对H_2O_2诱导的L02细胞氧化损伤起保护作用。     

葡萄糖介质中铬(V)化合物诱导DNA损伤的机理探讨

目的初步探索铬[Cr(V)]中间化合物在葡萄糖介质中对DNA损伤的反应机理。方法共研究了在4种糖类及3种不同pH值条件下DNA损伤的情况。DNA的损伤通过凝胶电泳测定;反应体系中各物种的寿命及新物种的测定用顺次共振波谱仪检测。结果Cr(V)在葡萄糖介质中具有毒性并可能导致癌症,但不同糖类对DNA的损伤不同,同时随着pH值的增高,DNA的损伤相对较小,这是由于反应体系的酸性增加,Cr(V)化合物发生歧化反应的速度加快以及还原剂氢原子浓度的增加所造成的,同时Cr(V)化合物与葡萄糖产生配位体交换使反应体系产生新的物种,而新物种对DNA也产生损伤。结论根据实验结果初步推断葡萄糖介质中铬(V)化合物诱导DNA损伤的机理。     

维生素C对镍诱导的肺泡巨噬细胞氧化损伤的保护作用

目的:研究维生素C(VC)拮抗Ni2O3的细胞氧化损伤的作用及对大鼠肺泡巨噬细胞iNOS诱导表达的影响。方法:采用体外细胞培养法测定在VC(25,50,100μmol/L)作用下,体外染镍肺泡巨噬细胞的死亡率及活力。同时观察细胞内丙二醛(MDA)、一氧化氮(nitricoxide,NO)和活性氧(ROS)的产生;超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)、诱导型一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,iNOS)活力的变化以及应用RT-PCR法测定iNOSmRNA的表达。结果:在体外染镍肺泡巨噬细胞中加入不同浓度的VC后可降低该细胞的死亡率并提高细胞的活力,可减少MDA、NO和活性氧的产生,降低NOS的活性,提高SOD、GSH-Px、CAT的活性,iNOSmRNA表达也较镍组降低。结论:镍可致细胞脂质过氧化,VC可通过提高抗氧化酶的活性,抑制iNOSmRNA的表达,减少活性氧及NO的产生,拮抗镍对肺泡巨噬细胞的氧化损伤。     

铬化合物肾脏毒性研究进展

不同价态的铬具有不同的毒性。三价铬[Cr(Ⅲ)]是人体内不可缺少的一种微量元素,但过量摄入也可能引起健康损害。一般认为六价铬[Cr(Ⅲ)]的毒性比三价铬大1000倍。人体通过各种途径接触或摄入过量含铬化合物均可能引起肾脏损伤,引起肾功能及尿中酶和蛋白含量的改变,严重的可能导致肾脏坏死。本文对含铬化合物在人体内的吸收与代谢及其对肾脏的损害方面的研究进展进行了综述。     

PVC尼龙6树脂-石墨炉原子吸收法测定生活饮用水中铬(Ⅵ)

生活饮用水中铬(Ⅵ)的含量是我国<生活饮用水卫生标准>中规定的卫生指标之一,而铬是一种多价金属离子,水中的铬常以三价和六价状态存在[1].<生活饮用水标准检验方法>GB5750-85测生活饮用水中铬(Ⅵ)的方法只有二苯碳酰二肼分光光度法,此法抗干扰能力较差.而一般石墨炉原子吸收法无法区分所测得铬的价态.本文根据有关资料[2,3],研究发现PVC尼龙6树脂不仅能对铬(Ⅲ)与铬(Ⅵ)进行分离,而且还能排除其它金属离子对测定的干扰,从而建立了PVC尼龙6树脂-石墨炉子原子吸收法测定生活饮用水中的铬(Ⅵ),并获得满意结果.