实时荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒DNA的临床应用

目的:探讨实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测HBV-DNA在乙型肝炎病毒(HBV)感染的诊疗中的应用价值。方法:用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)方法定量检测523例患者的血清HBV-DNA含量(临界值为500cop ies/m l),同时用ELISA法测定HBV血清标记物。结果:经FQ-PCR检测,116份HbsAg,HbeAg,HbcAb,ProS1-Ag都阳性的标本,HBV-DNA阳性率为98.7%,平均拷贝数为1.87×108copy/m l,显著高于其他组(P<0.05)。HbsAg,HbeAg,ProS1-Ag一项或多项阳性者的HBV-DNA阳性率和平均拷贝数显高于三项抗原全阴者。结论:FQ-PCR可以快速而准确地检测HBV-DNA拷贝数。HBV-DNA可准确、灵敏地反映HBV复制。与HBV血清标记物联合应用可使诊断更准确,治疗更合理。     

实时跟踪荧光PCR定量检测乙型肝炎病毒DNA的临床意义

目的探讨实时跟踪荧光PCR定量检测乙型肝炎病毒DNA临床价值。方法对2367例临床血清标本用FQ-PCR方法进行HBV—DNA定量测定，并和ELISA两对半以及ALT结果进行比较。结果HBV—DNA阳性率为60．9％（1442／2367），其中大三阳HBV-DNA检出率为89．04％（845／949）、ALT升高47．84％（454／949）、小三阳HBV—DNA检出率为39．08％（408／1044）、ALT升高33．42％（349／1044）、单HBSAg63．8％（185／290）；单抗HBeHBV—DNA检出率4．54％（1／22）。结论实时跟踪定量检测的荧光定量PCR技术可以检测HBV的真实感染和复制情况是乙型肝炎病毒复制和传染性的直接病原学依据。     

荧光定量PCR在乙型肝炎病毒检测中的应用及临床意义

目的　探讨乙型肝炎病毒 (HBV)感染者不同血清免疫标志物模式与HBVDNA定量的关系。方法　对10 2 5份临床血清标本用荧光定量聚合酶链反应 (FQ PCR)的方法进行HBVDNA定量检测 ,并同时用酶联免疫吸附试验 (ELISA)进行乙肝免疫学指标的对比检测。结果　HBsAg( + )、HBeAg( + )、HBcAb( + )模式HBVDNA阳性率为 99.2 % ( 390 / 393) ,其平均拷贝数为 4 .6 5× 10 8拷贝 /ml;在HBsAg( + )、HBeAb( + )、HBcAb( + )模式中HBVDNA阳性率为 6 2 .5 % ( 2 6 1/ 4 17) ;而 6 8例HBsAg( + )、HBcAb( + )模式中 ,2 6例 (占 38.2 % )检出HBVDNA。结论　单凭血清免疫标志物模式难以准确判断HBV的复制程度及传染性的强弱 ,定量检测HBVDNA能真实反映HBV复制情况 ,为乙型肝炎的诊断及治疗监测提供客观依据     

荧光定量PCR检测HBV DNA与乙型肝炎病毒标志物的关系探讨

目的 用FQ-PCR的方法检测血清中HBV DNA的载量，探讨其与HBV-M的关系及临床意义。方法 采用FQ-PCR技术检测254例患者血清中HBV DNA载量，同时用ELISA法检测乙型肝炎病毒五项标志物。结果 血清HBV DNA载量与HBV-M有关。第1组（HBsAg阳性、HBeAg阳性、HBcAb阳性）与其它各组（HBeAg阴性）比较，阳性率、HBV DNA载量差异均有显著性（P〈0.01）。结论 HBV DNA载量与HBV-M检测相结合，才能准确了解乙型肝炎患者的病情，以指导临床诊治。     

荧光PCR定量检测乙型肝炎病毒的临床意义

目的 :对荧光定量 PCR(FQ- PCR)测定的 10 2例 HBV- DNA结果进行分析 ,以探讨其临床价值。方法 :对 10 2份临床血清标本用 FQ- PCR方法进行 HBV- DNA定量测定 ,并和 EL ISA两对半结果以及 AL T结果进行比较分析。结果 :2 5份 HBs Ag(+)、HBe Ag(+)、HBc Ab(+)的标本 HBV- DNA均为阳性 ,L og DNA平均值± 2 sd为 7.45± 2 .5 4;34份 HBs Ag(+)、HBe Ab(+)、HBc Ab(+)的标本 HBV- DNA阳性 15份 ,L og DNA平均值± 2 sd为 6 .33± 1.86 ;9份HBs Ag(+)、HBc Ab(+)的标本 HBV- DNA阳性 4例 ,L og DNA平均值± 2 sd为 5 .2 3± 4.6 0 ;14份 HBs Ab(+)的标本 HBV- DNA阳性 1例 ,18份全阴性的标本 HBV- DNA无阳性。以上五种两对半结果其相对应的 HBV- DNA值基本呈下降趋势 ,而且前二者之间有显著性差异 (P<0 .0 1)。急性乙型病毒性肝炎、慢性乙型病毒性肝炎、肝癌、肝硬化患者之间的 HVB- DNA定量结果无显著性差异。HBV- DNA和 AL T之间无相关性 (r=0 .17)。结论 :FQ- PCR定量测定HBV- DNA可以真实反应 HBV的感染和复制情况 ,可以用于临床治疗和疗效观察 ,但它在急性乙型病毒性肝炎、慢性乙型病毒性肝炎、肝癌、肝硬化的鉴别诊断上无帮助 ,和病情的轻重也无相关性。     

乙型肝炎病毒DNA荧光定量PCR检测的临床应用

乙型肝炎病毒 (HBV)DNA是反应HBV复制的最直接、最可靠指标。在评价治疗乙型肝炎药物的疗效与预后判定方面 ,HBVDNA的检测具有至关重要的作用[1] 。目前定量核酸检测方法可以对病毒核酸进行相对的定量检测 ,但检测方法有很多。近年来发展起来的荧光定量聚合酶链反应 (Fluo rescencequantitativePCR ,FQ -PCR) [2 ] 不仅可以避免常规PCR扩增产物易污染而导致的假阳性 ,简化操作 ,还可以给出HBVDNA体内复制的定量结果 ,为临床正确诊断和及时采取恰当的治疗措施提供依据[3 ] 。为此我们采用FQ -PCR对 337例肝炎患者进行HBVDN…     

荧光定量检测在乙型肝炎中的应用

聚合酶链反应 ( ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ ,ＰＣＲ)技术已广泛用于核酸分析 ,它可使极微量单拷贝的特定核苷酸片段在短时间内扩增上百万倍[1] 而有利于检测。荧光定量ＰＣＲ (ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅＰＣＲ ,ＦＱ -ＰＣＲ) ,采用荧光技术和闭管检测 ,克服了常规ＰＣＲ方法的主要缺点 ,具有更高的临床应用价值。我室使用广州中山医科大学达安基因诊断中心的乙型肝炎病毒荧光定量ＰＣＲ诊断试剂盒 ,测试了 4 0 6份临床血清标本 ,并同时采用酶联免疫吸附(ＥＬＩＳＡ)测定进行对照检测 ,报告…     

荧光定量PCR技术测定HBV—DNA中的临床应用

2007年1月～2008年12月门诊与住院病人及外单位送来的血清4384份。其中门诊病人血清2255份，住院病人血清1968份，外单位送来的血清161份。     

实时荧光PCR检测乙型肝炎病毒的临床价值

目的:探讨实时荧光PCR技术在乙型肝炎病毒的临床检测价值.方法:选择1025例确认及疑似慢性乙型肝炎患者血清样本进行实时荧光PCR检测.结果:大三阳患者组的HBV-DNA拷贝数平均值和阳性率明显高于其他各组,有极显著性差异(P<0.01);小三阳组的数据与其他患者组无显著性差异(P>0.05),但阳性率有极显著性差异(P<0.01).结论:定量检测HBV-DNA能真实反映HBV复制情况,为乙型肝炎的诊断及治疗监测提供客观依据.     

荧光定量PCR检测慢性乙型肝炎患者血清HBV-DNA及其意义

随着医学分子生物学的发展,荧光定量(FQ)-PCR技术已逐渐应用于临床实验诊断,应用FQ-PCR检测慢性乙型肝炎患者血清中的HBV-DNA,从方法学上提高了检测的灵敏度,通过观察HBV-DNA动态变化对乙型肝炎的临床诊断、治疗方案的选择以及抗病毒疗效观察均有很重要的临床指导意义。     

FQ-PCR两种定量检测乙型肝炎病毒DNA方法分析比较

目的:观察荧光定量聚合酶链反应(FQ- PCR)两种定量检测乙型肝炎病毒DNA方法的重复性、准确性。方法:采用终点法与实时荧光分析法分别定量检测2 4份阳性标本,其中6份为经10倍稀释的阳性标本,连续3d测定,另18份为弱阳性临床标本,9份阴性标本,共33份。两种方法对同一扩增管中反应体系的荧光值进行测定,终点法只检测扩增管扩增前后的荧光值,实时荧光分析法则检测扩增管每一次循环的荧光值,然后分别由相应的软件自动计算结果,再对结果进行比较分析。结果:终点法的批内变异系数较实时荧光分析法稍大,在中、低浓度区两种方法测定值基本在同一指数水平,在高浓度区前者低于后者2个对数倍,在较低浓度区则不及后者敏感。结论:实时荧光分析法较终点法敏感、结果的重复性更好,检测范围宽,更能反映体内病原体的真实浓度     

乙型肝炎患者血清HBV DNA定量检测

近年来 ,定量ＰＣＲ检测技术不仅用于科研领域 ,也成为临床检验重要的检测手段。现将 16 9例乙型肝炎(以下简称乙肝 )患者的血清ＨＢＶＤＮＡＰＣＲ定量检测结果 ,结合临床资料 ,报告如下。1　材料和方法1.1　检测对象　 2 0 0 0年 10月至2 0 0 1年 2月 ,在我院住院治疗的各型乙肝患者共 16 9例 ,其中男 118例 ,女5 1例 ,平均年龄 37.3岁。按 2 0 0 0年全国病毒性肝炎治疗方案的诊断标准分型 ,急性肝炎 14例 ,慢性肝炎轻度47例 ,慢性肝炎中度 6 4例 ,慢性肝炎重度 16例 ,重型肝炎 8例 ,肝硬化 2 0例。1.2　检测方法　 16 9例乙肝患者均作Ｈ…     

用PCR检测乙型肝炎患者血清巨细胞病毒活动性感染

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测１２５例乙型肝炎患者血清中巨细胞病毒脱氧核糖核酸（ＣＭＶ－ＤＮＡ）诊断ＣＭＶ活动性感染、同时与酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）检测血清中ＣＭＶ－ＩｇＭ的结果相比较。结果显示：ＣＶＭ－ＤＮＡ阳性率为３２．８０％，同于ＣＭＶ－ＩｇＭ阳性率１５．０２％，各型肝炎中，急性肝炎、慢性肝炎、肝硬化血清ＣＭＶ－ＤＮＡ阳性率分别为１９．０５％，３５．２９％。血清ＣＭＶ－ＤＮＡ阴性的乙     

荧光定量PCR法检测乙肝病毒的临床意义

目的 探讨荧光定量PCR法检测乙肝病毒的临床意义。方法 荧光定量PCR法检测154例患者的乙肝病毒量,研究其与乙肝病毒抗体,谷丙转氨酶（ALT）及反映肝纤维化指标的透明质酸酶（HA）与层粘蛋白（LN）的关系。结果 免疫荧光定量PCR方法直接测定病毒量,明确反映病毒感染程度,其测定值与ALT呈一定程度正相关,与肝炎轻、中、重程度及肝纤维化程度成反比。结论 定量检测病毒可估计肝脏炎症程度并适时进行抗病毒及抗纤维化治疗。     

乙型肝炎病毒感染者DNA检测分析

①目的 了解HBV感染体内病毒复制情况。②方法 用PCR法检测HBV—DNA。③结果 共发现7种感染标志物组合模式，选用其中6种进行PCR扩增检测分析，以临床上的乙肝“大三阳”(HBsAg、HBeAg、抗-HBc)组HBV—DNA阳性率最高为100％；其次为“小三阳”(HBsAg、抗-HBe、抗-HBc)组HBV—DNA阳性率为30％。④结论 “大三阳”组人群体内乙肝病毒复制性强，具有高度传染性；在抗-HBe阳性携带中，也有相当一部分人具有传染性；单纯抗-HBc阳性中也存在一定的传染性。