γ-干扰素研制现状

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大鼠肾移植移植物中γ-干扰素和γ-干扰素诱导基因表达研究

目的评价γ-干扰素和γ-干扰素诱导基因在肾移植急性排斥反应中的地位,以及其诊断价值。方法以LEW(RT11)大鼠为受体,LEW(RT11)和F344(RT11v1)大鼠为供体,建立大鼠原位肾移植急性排斥反应动物模型,移植后第3、7及14天获取大鼠移植肾,对移植物进行病理检查并应用半定量RT-PCR技术,观察γ-干扰素和γ-干扰素诱导基因在急性排斥反应中衍变。结果γ-干扰素和γ-干扰素诱导基因在异基因移植物中显著表达,且γ-干扰素诱导基因的表达水平高于γ-干扰素,在同基因移植物中2个基因表达水平很低,甚至难以检测出。结论γ-干扰素和γ-干扰素诱导基因在同种异体移植免疫调节中起了重要作用,类似γ-干扰素诱导基因衍变规律的基因可以用来作为肾移植急性排斥反应早期诊断的候选基因。     

ELISA法检测γ-干扰素

提要用高纯度重组人IFN-Y免疫家兔,制成抗IFN-Y多克隆抗体,建立了双抗体夹心ELISA法。本法最小检出量为1.56IU/ml,特异性好,不精密度批内CV4.6％～7.2％,批间CV6.9％～10.1％,回收率96.7％～105.3％。30名健康成人外周血细胞经PHA诱导后上清中IFN-Y活性为7.1士4.2IU/ml。     

免疫核糖核酸诱生γ-干扰素及γ-干扰素激活NK细胞的研究

用L_(929)细胞免疫家兔,用肝脾RNA,致敏BALB/C小鼠。其腹腔渗出细胞(PEC)在体外与特异抗原孵育后能产生γ-干扰素。γ-干扰素处理大颗粒淋巴细胞(LGL)能显著增强其NK细胞活性。本文还对免疫核糖核酸诱生γ-干扰素以及γ-干扰素激活NK细胞的动态进行了探讨。     

γ-干扰素治疗尖锐湿疣64例

尖锐湿疣(CA)是一种由人乳头瘤病毒(HPV)引起的以乳头瘤样增生为主要临床表现的性传播疾病(STD)。其常用治疗方法有电灼、二氧化碳激光、冷冻、药物涂抹腐蚀等，但易复发。笔者于2004年7月～2004年12月应用电灼加γ-干扰素治疗CA患者64例，疗效显著，现报道如下。     

γ-干扰素与结核病关系研究进展

γ-干扰素（Interferon-gamma,IFN-γ）是一种具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节作用的细胞因子,它与结核的发生、发展、转归、诊断及治疗都有着密切的关系。近年来IFN-γ在结核免疫发病中的作用受到重视,它是控制结核分枝杆菌感染的关键性Th1型细胞因子,基于其在结核病免疫中的特殊作用,IFN-γ目前已被用于结核病的诊断及免疫治疗等方面。现对IFN-γ在抗结核免疫中的作用,IFN-γ基因与结核易感性,利用IFN-γ诊断结核病的体外IFN-γ释放试验及IFN-γ对结核病的辅助治疗作用的研究进展做一综述,以期为结核病的预防、诊断和治疗提供参考。     

γ-干扰素诱导因子的研究进展

近来,7一干扰素(IFN一7)产生的调控机制已成为研究T辅助细胞和NK细胞产生和分化的热点领域。IFN一1,是由激活的T细胞和NK细胞产生的,人IFN一了基因位于第12号染色体,编码一个143个氨基酸的碱性蛋白和一个23个氨基酸的信号肽。鼠。[FN一7基因定位于第lO号染色体。人与小鼠IFN一7编码序列核苷酸的同源性为65％,氨基酸的同源性仅为40％。     

γ-干扰素治疗毛细支气管炎疗效观察

我院儿科2004年10月至2005年4月应用γ-干扰素雾化吸入治疗毛细支气管炎36例，临床疗效显著，现报告如下。     

沙眼衣原体的细胞培养与γ-干扰素

为了探讨γ-干扰素（IFN-γ）对沙眼衣原体感染的细胞培养的影响，采用不同浓度IFN-γ作用于沙眼衣原体感染的子宫颈癌细胞（Hel-a)用透射电镜观察HeLa细胞内原体（EB）和网状体（RB），同时用反相高效液相色谱法（HPLC）测定细胞内色氨酸的浓度，结果显示，不同浓度IFN-γ作用下细胞内沙眼衣原体的EB和RB形态及数量不同，中浓度的IFN-γ作用下胞内EB和RB轻度减少，高浓度的IFN-γ作用下明显减少，沙眼衣原体生长受到抑制，且随IFN-γ浓度升高，细胞色氨酸浓度降低。二者呈负相关，提示：IFN-γ是抑制细胞内沙眼衣原全生长的一个重要因素。     

干扰素-γ对皮肤创伤愈合的影响

目的：探讨干扰素-γ（IFN-γ）对皮肤伤口愈合的影响。方法：选取40只雄性小鼠,制备机械性创伤小鼠模型,随机分为实验组和对照组。实验组给予肌肉注射IFN-γ100万IU/支,隔日1次,每次1支,连续治疗14 d,对照组不做处理。观察两组小鼠的愈合情况。结果：实验组20只小鼠,伤口愈合时间为14～20 d,平均（16.08±1.73）d,对照组为10～15 d,平均（12.75±1.54）d,差异有统计学意义（P〈0.05）。第14天时,实验组动物伤口愈合1只,对照组18只,后者明显多于前者（P〈0.05）。结论：IFN-γ可减慢皮肤创面愈合时间,从而影响创面愈合。     

γ-干扰素在NRK细胞中的表达

以pＢＳ－ＫＳ为中间载体,通过一步亚克隆,获得了两端结构为ＨindⅢ/Ｘba Ⅰ的γ－ＩＦＮ片段,将该片段与真核表达载体ＲＣ/ＣＭＶ进行定向重组,制备出γ－ＩＦＮ真核表 达质粒ＲＣ/ＣＭＶ－ＩＦＮγ,转染ＮＲＫ细胞后,经标准ＡＢＣ法检测表明：γ－ＩＦＮ在ＮＲＫ细胞中获得稳定表达。这一体系的建立为γ－ＩＦＮ真核基因工程提供了稳定表达的工程细胞株,并为利用γ－ＩＦＮ进行基因治疗提供重要的实验依据。     

γ-干扰素治疗轮状病毒肠炎疗效观察

轮状病毒肠炎是秋冬季小儿腹泻最常见的病原,潜伏期(1～3d),多发生在(6～24)个月婴幼儿[1].我科2004年9月～2005年12月应用γ-干扰素治疗轮状病毒肠炎取得了良好效果.     

α-γ-干扰素诱导基因的差异表达

目的为分离转移相关基因,对两种干扰素诱导出现的差异表达ｃＤＮＡ片段进行序列测定。方法以α－和γ－干扰素分别处理ＭＡ８９１细胞,提取其ＲＮＡ,用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ进一步确定用差异显示法所获得的基因片段的差异性。选择表达差异明显的片段进行ＤＮＡ测序。结果Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ结果表明,差异显示法得到的１０个ｃＤＮＡ片段中,４个确属差异表达片段。测序结果显示,Ｇ１５γ属尚无同源性报道的新基因;Ｃ４α与小鼠一种次要组织相容性复合体基因高度同源;Ｔ２γ与小鼠β－ａｃｔｉｎ基因高度同源;Ｔ１１γ与褐鼠高血压相关基因高度同源。结论确定了α－、γ－干扰素处理ＭＡ８９１细胞出现４条ｃＤＮＡ差异显示片段的核苷酸序列,为研究其与肿瘤转移的联系打下了基础。     

哮喘小鼠肺组织中趋化因子干扰素-γ诱导蛋白-10、干扰素-γ诱导单核细胞因子表达及其意义

目的:探讨趋化因子干扰素-γ诱导蛋白-10(IP-10)、干扰素-γ诱导单核细胞因子(Mig)在哮喘小鼠肺组织中的表达及其意义,观察地塞米松(DX)、卡介苗(BCG)干预对哮喘小鼠表达IP-10、Mig的影响。方法:健康雄性昆明小鼠40只,分为哮喘组、DX组、BCG组和对照组,每组10只。哮喘组分别于实验第1、3、5、7、9、11、13天腹腔注射卵清蛋白(OVA)10μg致敏,第21天起予1% OVA 5 ml雾化吸入30 min,每天1次,连续7天,激发哮喘。DX组在雾化吸入前30 min,按2 mg/kg腹腔注射DX溶液。BCG组在致敏前7、3、1天分别皮内注射BCG 0.025 mg。对照组用生理盐水代替OVA。各组小鼠于末次雾化吸入24 h后,制备肺组织标本,免疫组化法检测肺组织中IP-10、Mig表达。结果:哮喘组IP-10表达较对照组明显增加(P<0.01),DX组明显降低(P<0.05),BCG组IP-10表达有下降,但差异均无统计学意义(P>0.05)。哮喘组Mig表达较对照组明显降低(P<0.01),DX组和BCG组增加(P<0.05)。结论:在哮喘小鼠肺组织中,IP-10表达增加,Mig表达降低;DX可以下调IP-10、上调Mig的表达;BCG上调Mig的表达,但对IP-10作用不明显。趋化因子IP-10、Mig参与哮喘发病过程,DX与BCG可不同程度干预IP-10、Mig的表达。     

γ-干扰素佐治小儿毛细支气管炎疗效观察

目的观察γ-干扰素佐治小儿毛细支气管炎的疗效。方法将54例毛细支气管炎患儿随机分为两组,两组均采用综合治疗,观察组加用γ-干扰素,对治疗前后症状、体征持续时间及疗效进行比较。结果观察组在治愈率、缓解喘憋、缩短哮鸣音及咳嗽时间作用均明显优于对照组(P<0.05)。治疗组治愈率明显优于对照组(P<0.05)。结论γ-干扰素治疗小儿毛细支气管炎可缩短病程,疗效显著,提高临床治愈率。     

干扰素-γ对肾小管上皮细胞转分化的作用

目的 应用转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导肾小管上皮细胞肌纤维母细胞转分化(TEMT),研究干扰素-γ(IFN-γ)对肾小管上皮细胞的表型重塑的作用和机制.方法 将正常大鼠肾小管上皮细胞(NRK52E)分为空白组、诱导组(TGF-β13 ng/mL)、药物组(IFN-γ1000 IU/mL)及阻断组(TGF-β13 ng/mL IFN-γ200、400、600、1000、2000、3000 U/mL),培养72 h后,观察α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)以及结缔组织生长因子(CTGF)的表达;测量α-SMA阳性细胞百分数和平均荧光强度(MCF),α-SMA mRNA,CTGF mRNA的表达;并测定上清液中胶原Ⅲ的含量.结果 ①诱导组细胞转分化为肌成纤维细胞样细胞,α-SMA阳性细胞百分数及MCF均明显增加(P<0.05);α-SMA mRNA和CTGF mRNA表达也明显增加(P<0.05);胶原Ⅲ含量升高(P<0.05).②药物组的细胞形态、α-SMA mRNA、CTGF mRNA表达及胶原Ⅲ含量等与空白组的差异无统计学意义(P>0.05);⑨阻断组IFN-Υ明显抑制了TGF-β1诱导的转分化,且呈剂量依赖;并抑制胶原Ⅲ合成P<0.05.结论 IFN-Υ能够负性调控TGF-β1诱导的TEMT,减少胶原Ⅲ分泌;IFN-Υ对TEMT的负性词节作用可能是通过减少CTGF表达来实现的.     

干扰素γ联合α-2b干扰素凝胶治疗扁平疣32例

<正>扁平疣是一种常见的、由人乳头瘤病毒感染引起的皮肤病,好发于青少年的颜面、手背和前臂等处,影响美容。我院2011年1～9月应用干扰素γ联合α-2b干扰素凝胶治疗扁平疣32例,取得满意疗效,现报道如下。资料与方法1一般资料扁平疣患者63例,男19例,女44例,年龄     

哮喘与白细胞介素-4和γ-干扰素的关系

支气管哮喘是以嗜酸性粒细胞为主的炎性细胞在气道内浸润,伴有气道上皮细胞脱落以及气道高反应为特征的慢性炎症疾病。细胞因子在慢性炎症的发展以及迟发型超敏反应过程中起重要作用。细胞因子（CK）网络失衡可能是哮喘发病的分子生物学基础之一。最近资料表明,哮喘发病时IL－4、IL－5、IL－8、IFN－α、IL－10、与可溶性粘分子均升高,而γ干扰素（IFN－γ）,IL－2等均有降低,IL－4,IFN－γ和IgE的水平升高有直接关系。而哮喘发病的一个重要特征是血清中IgE增高,而IL－4、IFN－γ是哮喘患者血清中IgE浓度的一对重要调节因子,对B细胞合成IgE有上调与下调两方面的作用,并且IL－4、IFN－γ与TH1与TH2的分化及其细胞因子网络中居重要地位。     

有机锗诱导正常小鼠产生γ-干扰素的作用

经抗原性和理化性质检测证实有机锗(Ge-132)诱导正常小鼠产生的干扰素是γ-干扰素(IFN-γ)。3种不同剂量的Ge-132的诱导作用,以100mg/kg为最佳,1000mg/kg诱生的IFN-γ滴度与100mg/kg无明显差异。正常小鼠口服Ge-132(100mg/kg)后24h血清中IFN-γ含量达最高水平,48h基本消失。连续14d服用Ge-132血清中IFN-r滴度可维持在较高水平(80-320u/ml)。增效剂与Ge-132合用可提高IFN-γ滴度。