人工角膜支架材料在动物体内应用的生物学反应

目的 探讨3种人工角膜支架材料经氩等离子体（Argon plasma)处理后植入兔角膜对角膜组织的生物学反应的影响。方法 选用3种支架材料：由80％的聚丙烯和20％聚丁烯化合而成的多孔材料；Polyester多孔材料；Expended polytetrafluoroethylene。处理组材料经Argon plasma处理。将盘状支架材料植入兔角膜囊袋内。结果 材料经处理后角膜水肿较未处理明显减轻，8周后3种材料中角膜水肿均消失。材料1，2植入时新生血管出现延迟，范围小，炎细胞浸润明显减少。术后6周纤维细胞迁徙入材料内。当材料植入角膜后角化蛋白（KS）含量降低，Dermatan(DS)含量增高，并有大分子葡萄糖聚糖（GAG）出现。结论 Argon-plasma处理可明显减轻兔角膜炎症反应，增加材料的组织相容性。     

人工角膜在兔角膜内的生物学反应

目的评价3种不同直径人工角膜在动物体内应用的生物学反应.方法将35只兔随机分为Ⅰ组(11只)、Ⅱ组(12只)、Ⅲ组(12只),分别植入3种不同直径人工角膜(4.5～7.0 mm、 7.0～9.0 mm、4.5～6.0 mm),术前将人工角膜进行纤维细胞组织培养,光学中心前表面经rf-argon plasma处理后植入兔眼,观察术后人工角膜在兔角膜中的存留,观察时间＞6个月;并分别于术后2、3、4及6周摘取兔植入人工角膜行组织及病理学检查.结果术后2周成纤维细胞可沉积在人工角膜周边多孔支架内;3周时Ⅲ组角膜上皮细胞位于人工角膜光学中心,Ⅰ、Ⅱ组未见细胞生长.4周时人工角膜内可检测出胶原蛋白沉积.前房稳定,未见房水渗漏.术后6周时人工角膜的周边支架中检测出heparan sulfate(HS)及碱性成纤维细胞生长因子,后者存在于周边支架和宿主角膜的交接处.结论体外人工角膜组织培养可增加人工角膜周边支架的纤维化,稳定光学中心;人工角膜经 rf-argon plasma处理可增加材料的组织相容性;兔角膜缘上皮细胞可迁徙至人工角膜光学中心的前表面.     

HA表面改性人工角膜钛支架生物相容性动物实验研究

目的 经羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)表面改性的三襻式人工角膜钛支架植入兔角膜板层探讨其与角膜组织的生物相容性及组织愈合情况.方法 24只新西兰白兔随机分为A、B、 C 3组,A组(9只)及B组(9只)分别于右眼角膜板层植入HA表面改性后的三襻式人工角膜钛支架(HA-Ti)及人工角膜钛支架(Ti);C组(6只)为手术对照组,仅制备囊袋不植入支架.观察人工角膜支架的生物相容性及新生血管生长情况,并分别于术后2周、4周、16周取材,行组织病理学及支架表面组织扫描电镜观察.结果 观察期间A、B组均未见角膜感染、溶解、支架排出.早期实验组角膜有水肿及新生血管长入,A组新生血管明显多于B组.组织学观察术后2周,A组炎症细胞浸润重于对照C组及B组(P<0.05);4周和16周时A、B和C组各组间炎症反应无明显差别(P>0.05).A组支架周围基质成纤维细胞增生显著,术后2周、4周A组和B组成纤维细胞增生均多于对照C组(P<0.05),且A组增生明显多于B组(P<0.05);术后16周时各组间差异无统计学意义(P>0.05).扫描电镜HA-Ti支架表面角膜组织黏附好,胶原纤维与支架连接紧密.结论 HA表面改性三襻式钛支架促进角膜血管化,有利于人工角膜的稳定,使人工角膜支架具有良好生物相容性及促进组织界面愈合能力.     

聚酯纤维网的角膜生物相容性实验研究

目的探讨聚酯纤维网植入兔角膜板层后与角膜组织的生物相容性及其与角膜的生物愈合特性。方法选择20只健康新西兰兔,体重2.0～2.5 kg,右眼均行手术作为实验组,左眼作为正常对照组。实验组中15只右眼角膜板层植入聚酯纤维网,并分为术后2周、1个月、3个月、5个月、8个月亚组,作为不同时段的取材期,每亚组3只右眼;其余5只右眼角膜仅制备囊带而不植入材料,作为手术对照亚组;术后定期观察角膜水肿和新生血管生长情况,并取角膜行光镜检查。结果术后早期实验组兔眼不同程度地出现角膜水肿和新生毛细血管的长入,经术后恢复或拆线后均呈自行性消退和闭锁。在最长为8个月的观察期中,植入物在角膜组织中稳定。与植入材料相贴的角膜板层上下界面,成纤维细胞数量明显增加,网孔部位尤其明显,并最终形成胶原纤维紧密的连接。所有植入材料的兔眼均未见角膜坏死、溃疡及植入物脱出。结论聚酯纤维网在兔角膜组织中具有良好的生物相容性。     

壳聚糖胶原复合膜在兔角膜基质层间的组织相容性

目的探讨壳聚糖胶原复合膜植入兔角膜基质层的组织相容性,以评价其作为人组织工程角膜修复支架材料的可行性。方法选用8只新西兰白兔,根据角膜基质层间植入膜片材料的不同平均分为A、B两组,A组植入壳聚糖胶原复合膜（实验组）、B组植入壳聚糖膜（对照组）。术后观察并记录术眼球结膜充血、角膜水肿、前房闪辉、角膜新生血管、材料的变化等情况,术后第8周取术眼角膜组织制作病理学切片进行HE染色观察,比较两组材料对角膜组织的不同影响。结果术后8周内,实验组炎症反应轻于对照组,且无角膜新生血管发生,对照组有2例发生角膜新生血管,两组膜片均于术后第2周开始降解,但在相同观察时间点,实验组膜片降解程度小于对照组。HE染色显示实验组膜片周围炎性细胞浸润轻于对照组,膜片降解程度小于对照组,降解物与角膜基质纤维融合。结论壳聚糖胶原复合膜与活体兔角膜基质组织的相容性比壳聚糖膜更优,其作为角膜损伤修复材料具有广阔前景。     

羟基磷灰石表面改性人工角膜支架植入兔角膜后基质金属蛋白酶-2及胶原纤维的表达

目的 探讨经羟基磷灰石(HA)表面改性的三襻式人工角膜钛支架植入兔角膜板层后基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及胶原纤维的表达,评价其生物相容性.方法 实验研究.24只新西兰白兔采用单纯随机抽样方法随机分为3个组,HA-Ti支架组(9只)及Ti支架组(9只)分别于右眼角膜板层植入HA表面改性后的三襻式人工角膜钛支架(HA-Ti)及人工角膜钛支架(Ti),6只仅制备囊袋不植入支架作为对照组.观察人工角膜支架的生物相容性及新生血管生长情况,并分别于术后2周、4周、16周取材,角膜组织行苏木素-伊红染色、并用免疫组织化学方法检测各组角膜基质中MMP-2的表达并进行半定量分析;用苦味酸天狼猩红苏木素染色的方法观察支架植入后对胶原的影响.多组间比较应用单因素方差分析,组间两两比较应用SNK-q检验.结果 观察期间Ti-HA支架组及Ti支架组均未见角膜感染、溶解、支架排出.早期实验组角膜有水肿及新生血管长入,HA-Ti支架组新生血管明显多于Ti支架组.组织学观察术后2周,植入HA-Ti支架组角膜基质内2周可见少量炎性细胞(中性粒细胞及噬酸细胞为主),此后逐渐减少.支架周围2周时可看到较多成纤维细胞,16周时成纤维细胞减少,粉染的胶原纤维增多.术后2周,HA-Ti支架组、Ti支架组及对照组MMP-2阳性细胞IOD值分别为103.729±15.112、84.439±13.699、69.310±13.078,组间比较差异有统计学意义(F =6.083,P＜0.05),但Ti支架组和对照组差异无统计学意义(F=3.209,P＞0.05);4周时3个组MMP-2阳性细胞IOD值逐渐降低,分别为88.963±9.017、53.005±4.605、49.326±4.443,组间比较差异有统计学意义(F=47.074,P＜0.01);16周时3个组MMP-2阳性细胞IOD值分别为72.176±12.815、50.014±8.813、46.734±11.670,组间比较差异有统计学意义(F=6.079,P＜0.05).偏光镜下观察见角膜组织内4周有大量绿色的Ⅲ型胶原纤维及黄红色Ⅰ型胶原纤维,16周时角膜内主要为鲜红色的Ⅰ型胶原纤维,仍有少量的Ⅲ型胶原纤维.结论 兔角膜植入HA-Ti支架引起MMP-2活化,持续高表达并未造成对角膜的溶解;其影响周围角膜细胞外基质中Ⅲ型胶原纤维向Ⅰ型胶原纤维的转化,利于支架稳定,HA-Ti支架具有较好的生物相容性.     

原花青素交联的支架材料的生物相容性研究

目的 探讨原花青素作为交联剂的壳聚糖、胶原蛋白、硫酸软骨素、透明质酸钠合成的支架材料植入兔角膜的生物相容性.方法 将壳聚糖、胶原蛋白、硫酸软骨素、透明质酸钠等溶液按照一定的比例混合,加入原花青素和戊二醛溶液作为交联剂,制成2种支架材料分别植入2组新西兰大白兔角膜的囊袋内.在不同的时间点进行裂隙灯显微镜观察照相,并进行组织病理学检查,比较不同的支架材料对角膜的影响.结果 原花青素交联组术后1周有结膜睫状充血,角膜水肿;2周后充血水肿逐渐消失.兔眼角膜情况稳定,术后4个月基本透明;材料与角膜的生物相容性好,5个月后材料大部分吸收溶解,角膜透明.组织病理学检查可见兔角膜标本中材料内有角膜基质细胞长入.原花青素交联的支架材料比戊二醛交联的支架材料刺激性小.结论 原花青素交联的壳聚糖、胶原蛋白、硫酸软骨素、透明质酸钠组成的支架材料与角膜组织具有良好的生物相容性,原花青素可能比戊二醛更适合作为支架材料的交联剂.     

纳米HA/PVA多孔复合水凝胶人工角膜在兔角膜的生物学反应

目的观察纳米HA/PVA多孔复合水凝胶人工角膜在兔角膜内的生物学反应,了解其组织相容性。设计动物实验研究对象三组人工角膜材料:材料1为大孔纳米HA/PVA多孔复合水凝胶人工角膜;材料2为小孔纳米HA/PVA多孔复合水凝胶人工角膜;材料3为单纯PVA水凝胶人工角膜。方法选用健康新西兰大白兔21只,随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组(每组7只,每只兔随机选一眼)分别板层植入材料1、2、3。于术后3、8、24周通过裂隙灯、组织切片HE染色观察人工角膜在兔角膜内的生物学反应。主要指标术眼炎性反应评分,角膜新生血管出现时间及其生长面积分级评分,术后人工角膜脱出率,组织切片HE染色观察。结果术后3周时Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组炎性反应评分分别为1.29±0.488、1.43±0.535和2.14±0.690(P=0.027);术后8周时Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组新生血管平均生长面积分级评分分别为2.67±0.516、2.33±0.816和1.57±0.535(P=0.018);三组术后角膜新生血管出现时间分别为(23.17±1.72)天、(24.50±1.05)天和(29.71±1.60)天(P=0.000);三组术后因角膜溶解引起的人工角膜脱出率分别为14.29%、28.57%和42.86%(χ2=1.449,P=0.485);组织切片观察8周后大量成纤维细胞长入材料1的人工角膜支架孔隙里。结论纳米HA/PVA多孔复合水凝胶人工角膜具有良好的组织相容性,在宿主兔的角膜内较稳定存在,是一种具有良好临床应用前景的新型人工角膜。     

襻状支架人工角膜植入术的动物实验研究

目的：观察兔角膜碱烧伤后新生血管性角膜白斑在应用分子定向重排PMMA襻状支架人工角膜植入后的改变情况。方法：14只新西兰白兔，建立碱性角膜化学伤后偏中心新生血管性角膜白斑模型。将上述烧伤后1个月的新生血管性角膜白斑实验兔随机分为2组，每组7只，分别植入分子定向重排PMMA襻状支架人工角膜(实验组)和Fydorov-Zyev人工角膜(对照组)。结果：实验组：术后术眼均见刺激症状和角膜水肿，植床角膜水肿5—7d逐渐浅轻，2w后术眼刺激症状消失。术后人工角膜在位透明，1眼于术后7d出现人工角膜后膜，3眼于术后4—5w出现人工角膜前膜，钻除后有复发。对照组：人工角膜支架及自体耳软骨植入(第一期手术)后，术眼充血明显，植床角膜水肿，7—10d后逐渐消失，术后3w眼部刺激症状基本消失。人工角膜镜柱植入(第二期手术)后，术眼混合充血，近创缘处植床角膜水肿，2w后刺激症状基本消失，2眼于镜柱植入后5—10d出现人工角膜后膜，清除后1w又复发，3眼于术后4—6w出现人工角膜前膜，钻除后均有复发。结论：①襻状支架人工角膜与角膜植床之间的界面比Fydorov-Zyev型人工角膜的面积小，能减少支架对组织的损伤。②分子定向重排PMMA具有良好的生物相容性。③动物实验证实，襻状支架人工角膜植入后能稳定存留，无严重并发症，为应用于临床奠定了实验基础。     

改良聚羟乙基丙烯酸甲酯-聚甲基丙烯酸甲酯一体化人工角膜植入兔与猴角膜的研究

目的 探讨聚羟乙基丙烯酸甲酯（PHEMA）海绵支架材料与角膜组织的生物相容性,评价改良PHEMA-聚甲基丙烯酸甲酯（PMMA）一体化人工角膜植入兔与猴角膜的初步临床效果。方法通过两个阶段化学聚合结合车床机械切削合成改良的一体化人工角膜。实验分为两个部分完成。第1部分（A组）：将PHEMA海绵边裙材料植入10只正常兔角膜板层间,术后2、4周及2、3、4个月分别行组织病理、免疫组织化学及电镜检查,观察海绵边裙与角膜组织的生物学愈合情况。第2部分（B组）：8只兔眼和2只猴眼角膜囊袋内Ⅰ期植入一体化人工角膜,术后临床观察材料与组织的愈合情况;术后3个月时行Ⅱ期手术切除术眼角膜中央前板层角膜组织,暴露人工角膜中央镜柱,术后随访时间3—6个月,初步观察临床治疗效果。结果（1）A组：10只兔眼随访期间未见并发症。组织病理学显示,PHEMA海绵边裙材料植入术后2周始有成纤维细胞长入,术后2—3个月时多量成纤维细胞长入并伴有新生血管生长;免疫组织化学显示,海绵孔隙中长入的细胞和角膜基质细胞均对波形蛋白免疫反应呈阳性;电镜下可见,成纤维细胞在海绵材料间隙中生长,细胞生长状态良好,并分泌胶原和细胞外基质。（2）B组：6只兔眼的一体化人工角膜均在位,另2只兔眼Ⅰ期术后有前板层角膜基质融解。2只猴眼于Ⅰ期和Ⅱ期术后均未见明显并发症。结论PHEMA海绵能与角膜组织良好的生物学愈合;改良PHEMA—PMMA一体化人工角膜植入术后能获得相对稳定的治疗效果。（中华眼科杂志．2007,43：602-607）     

Strabisme Alternant - Etude clinique - traitement

The author defines motor and sensory alternation: the term alternation should not be used in isolation, it should always be accompanied by the name of the parameter concerned. Sensory alternation is always found together with motor alternation but the reverse is not true.The examining criteria for a diagnosis of sensory alternation are given, sensory alternation must not be confused with alternating inhibition. Working from clinical observations of cases of motor alternating strabismus, the author selects 2 types of binocular sensory relations which allow one to differentiate between:- cases of primary alternating strabismus- cases of secondary alternating strabismusThese forms will develop in different ways; in both cases a cure is possible providing that the right treatment is prescribed and once prescribed carefully followed, etc. It is always a case of serious forms of strabismus whose developmental period is spread over several years.According to the authors, the frequency of cases of true primary strabismus is from 1–3%, the frequency of cases of secondary alternating strabismus varies according to the type of therapy practised on cases of monocular strabismus with amblyopia. These latter will become cases of alternating strabismus under the influence of certain types of therapy carried out over several years (penalization, rocking, alternated occlusion, etc...).Experimental data on kittens confirm clinical data; kittens placed in abnormal environments during the sensitive period will show modification in the distribution of cortical cells and the absence of binocular cells (either because the excitation of the two eyes was not simultaneous, or not identical: artificial strabismus, occlusion, opaque glasses). This disturbances become irreversible after a certain period of exposure (a function of age, length of exposure, etc...).It is thus necessary to bear in mind: 1) the iatrogenic risks of certain orthoptic treatments, 2) the necessity for a binocular form of treatment as soon as possible, as once a certain stage is passed, cortical plasticity diminishes and the elaboration of normal binocular relations becomes impossible.

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Effects of Adenosine Agonists on Intraocular Pressure and Aqueous Humor Dynamics in Cynomolgus Monkeys

The effects of single or multiple topical doses of the relatively selective A₁adenosine receptor agonists (R)-phenylisopropyladenosine (R-PIA) and N⁶-cyclohexyladenosine (CHA) on intraocular pressure (IOP), aqueous humor flow (AHF) and outflow facility were investigated in ocular normotensive cynomolgus monkeys. IOP and AHF were determined, under ketamine anesthesia, by Goldmann applanation tonometry and fluorophotometry, respectively. Total outflow facility was determined by anterior chamber perfusion under pentobarbital anesthesia. A single unilateral topical application of R-PIA (20–250 μg) or CHA (20–500 μg) produced ocular hypertension (maximum rise=4.9 or 3.5 mmHg) within 30 min, followed by ocular hypotension (maximum fall=2.1 or 3.6 mmHg) from 2–6 hr. The relatively selective adenosine A₂antagonist 3,7-dimethyl-1-propargylxanthine (DMPX, 320 μg) inhibited the early hypertension, without influencing the hypotension. Neither 100 μg R-PIA nor 500 μg CHA clearly altered AHF. Total outflow facility was increased by 71% 3 hr after 100 μg R-PIA. In conclusion, the early ocular hypertension produced by topical adenosine agonists in cynomolgus monkeys is associated with the activation of adenosine A₂receptors, while the subsequent hypotension appears to be mediated by adenosine A₁receptors and results primarily from increased outflow facility.