耐多药肺结核治疗转归的影响因素分析

目的 评估耐多药肺结核(MDR-PTB)标准长疗程方案治疗结果的影响因素。方法 选取2013年1月-2017年12月在我国23个省(市)的22个结核病哨点医院和1个三级综合医院接受标准长疗程方案治疗的332例MDR-PTB患者,对其治疗转归情况进行回顾性调查并分析其影响因素。结果 332例MDR-PTB患者中,治疗成功196例(59.04%),失败76例(22.89%),失访33例(9.94%),死亡12例(3.61%),转诊15例(4.52%)。多因素logistic回归分析结果显示,年龄≥50岁(OR=0.342,95%CI 0.169～0.690)、MDR-PTB病程≥1年(OR=0.297,95%CI 0.108～0.815)、不规则治疗(OR=0.429,95%CI 0.197～0.934)、治疗前有空洞(OR=0.073,95%CI 0.026～0.207)、第3个月末痰培养阳性(OR=0.161,95%CI 0.072～0.358)是治疗失败的预测因素,第6个月末空洞闭合(OR=15.723,95%CI 5.690～43.444)是治疗成功的预测因素。结论 年龄、MDR-...     

355例耐多药结核病患者的护理

耐多药结核病(multi-clrug resistant tuberculosis,MDR-TB)是由对两种一线抗结核药物异烟肼和利福平耐药的菌株感染引起的疾病。广泛耐药结核病(extensively resistant tuberculosis,XDR-TB)指对任意一种氟喹诺酮类药物及三种二线注射剂中的至少一种(丁胺卡那霉素、卷曲霉素或卡那霉素)耐药的     

艾滋病合并药物敏感性及耐多药和广泛耐药性结核影像诊断进展

HIV是造成结核（tuberculosis,TB）流行的重要因素,两者的合并感染对当今世界造成严重威胁,且诊断困难,一方面,因为HIV通常合并其他病原体的混合感染,使结核病的诊断难度加大;另一方面,HIV-TB的联合感染使结核病失去了其原有的典型表现,易产生对结核的延误诊断,延误诊断必然会造成抗结核治疗的不充分又会产生耐药结核杆菌进一步加剧治疗的不充分性,     

检测耐利福平结核分枝杆菌寡核苷酸芯片的研制及应用

目的：探讨用寡核苷酸芯片检测结核分枝杆菌耐利福平株的rpoB基因突变的可行性。方法：制备了检测耐利福平结核分枝杆菌寡核苷酸芯片，并且通过优化引物比例和杂交温度以获得最佳结果。应用该寡核苷酸芯片检测6例结核分枝杆菌的rpoB基因突变，并与测序结果比较。结果：不同引物比例PCR产物经热变性后杂交，杂交结果无明显差异。杂交温度可以影响杂交结果的特异性和杂交信号的强度。引物比例1：1，杂交温度50℃为最佳条件。6例标本的芯片检测结果显示其中有1例野生型标本，5例突变标本：516位GAC→AAC，GTC，TAC，GAG，531位TCG→TTG。其结果与测序结果完全相符。结论：寡核苷酸芯片可以推广应用到临床作为耐药结核病快速诊断的一种有效方法。     

耐多药肺结核的影像特点

目的　搜集经药物敏感试验证实的耐多药肺结核 ,探讨耐药肺结核的影像学特点。方法　选取耐多药肺结核 51例为观察组 ,同期不耐药的肺结核病人 46例为对照组。全部病人均有正、侧位胸片 ,部分病人有同期体层或CT片。结果　 (1)观察组与对照组相比 ,病变分布差异无显著性意义 (P值均 >0 .0 5)。 (2 )比较病变形态 ,观察组肺内多发结节 (10例 )、播散病灶 (2 3例 )、空腔(9例 )及合并肺毁损 (10例 )多于对照组 ,二者差异有显著性意义 (P <0 0 5)。 (3 )病变的动态变化 ,病变进展观察组多于对照组 ,好转病例观察组少于对照组 ,二者差异有显著性意义 (P <0 0 5)。结论　分析耐多药肺结核的影像表现提示 ,耐多药肺结核具有病变严重 ,活动性明显 ,治疗效果差的特点     

中西医结合治疗耐多药肺结核疗效观察

目的：观察中西医结合治疗耐多药肺结核的疗效。方法：对耐多药肺结核61例随机分为观察组30例及对照组31例。对照组采用全身抗结核方案治疗,观察组在全身抗结核方案治疗的同时,加用局部介入用药并配合中药进行综合治疗。结果：观察组痰菌阴转率96．7％,对照组痰菌阴转率64．5％,两组比较,差异非常显著（P〈0．01）;观察组病灶总显效率96．7％,对照组病灶总显效率54．7％,两组比较,差异非常显著（P〈O．01）。不良反应两组比较,差异不显著（P〉O．05）。结论：采用中西医结合治疗耐多药肺结核疗效更为显著。     

原发性难治性耐多药肺结核1例

病人，男，19岁，因“咳嗽、咳痰半年，痰中带血2d”，入院。入院前胸片显示双上肺可见斑片状高密度影伴多发圆形薄壁空洞。入院查体：体温37．6℃，脉搏80次／min，呼吸22次／min，血压120／60mmHg（1mmHg=0．133kPa）。精神差，消瘦，全身未见皮疹、黄染及出血点，各浅表淋巴结无肿大。心脏及腹部未见异常。     

卷曲霉素联合左氧氟沙星治疗耐多药肺结核的疗效分析

目的：分析研究耐多药肺结核采取卷曲霉素结合左氧氟沙星共同治疗的临床效果。方法对收治的患有耐多药肺结核的病人70例,随机分为观察组、对照组。观察组对病人采取卷曲霉素结合左氧氟沙星共同治疗,对照组对病人采取阿米卡星合结合左氧氟沙星共同治疗,对两组痰菌转阴率、病灶吸收率以及空洞闭合率给予对比分析。结果观察组在三个月、六个月以及治疗过程结束的时候痰菌阴转率显著高于对照组（ P＜0.05）;观察组病灶吸收率显著高于对照组（P＜0.05）;观察组空洞闭合情况显著高于对照组（P＜0.05）。结论耐多药肺结核采取卷曲霉素结合左氧氟沙星共同治疗,可以获得令人满意的治疗效果,不良反应发生率极低,使病人健康生活质量得到保障。     

耐多药肺结核患者T淋巴细胞亚群测定的临床意义

目的探讨肺结核-耐多药(MDR-TB)患者外周血中活化T细胞的水平,对治疗的意义。方法对2006年11月—2011年11月的MDR-TB患者72例,初治菌阳性患者102例临床资料进行回顾性分析。结果在治疗前A组患者的外周血中,其CD3+值与CD4+值,以及其CD4+/CD8+比值,同B组比较,差异有统计学意义(P<0.05),但两组CD8+比较,无统计学差异(P>0.05);A组予以2个月的抗结核强化治疗后,有66例患者病情好转,并且症状显著改善,有56例患者痰菌阴转,并且其中50例患者复查后显示,其CD3+以及CD4+/CD8+比值同治疗前比较,上升明显(P<0.01),CD4+/CD8+治疗前后比较,无统计学差异(P>0.05),其余6例患者出现病灶增多,并且CD3+、CD4+、CD8+值,包括CD4+/CD8+比值,均较前降低。结论掌握MDR-TB患者外周血中其活化T细胞的水平,有助于依据患者具体情况实施个性化的治疗方案,具有非常重要的临床意义。     

结核杆菌单药敏感试验与多药联合敏感试验比较研究

通过对单药敏感试验（即常规药敏试验）和多药联合敏感试验结果的比较分析，证明这两种敏感试验的符合率在95％以上。结果显示，由抗性药物组成的化疗方案在体外对40％的菌株存在不同程度的效果，在2种药物高度耐药，1种药物敏感时，病原菌在3种药物联合敏感试验中是敏感的。研究表明，根据多药联合敏感试验时受试株初生长时间，菌落数和菌落大小，可以比较准确的预测由抗性药物组成的化疗方案的敏感程度。在结核菌药敏试验中应采用匡氏琼脂培养基，耐多药结核菌应加做联合药敏试验。     

实时荧光定量PCR检测痰中结核分枝杆菌临床评价

目的评价实时荧光定量聚合酶链反应（FQ-PCR）检测临床痰标本中结核分枝杆菌诊断肺结核的意义。方法收集我院2011年9月-2013年8月期间收治的126例确诊为肺结核的患者和80例非结核性呼吸道疾病患者的痰液标本,分别采用漂浮集菌涂片镜检、BACT／ALERT3D快速培养法和FQ-PCR法检测痰中结核杆菌,分析检出结果。结果126例确诊为肺结核患者的痰标本中对结核分枝菌杆的检验以FQ-PCR检出率最高达到53．2％,高于快速培养法的46．8％（P〈0．05）和痰漂浮集菌涂片镜检法的32．5％（P〈0．01）。FQ-PCR与痰培养法总体一致性为95．1％,K=0．88。对痰涂片阳性标本,两者敏感性差异无统计学意义（P〉0．05）;对痰涂片阴性标本,FQ-PCR敏感性明显高于快速培养法（P〈0．01）。结论FQ-PCR具有快速、敏感、特异、可定量和自动化的优点,值得应用于痰中结核杆菌的检测及肺结核的诊断。     

链霉素对结核分枝杆菌sRNA表达影响的研究

目的：研究链霉素对结核分枝杆菌非编码sRNA表达量的影响,探讨sRNA是否参与细菌与药物的相互作用。方法基于结核分枝杆菌标准菌株H37Rv的高通量测序结果,选出表达量估计值较高的4个sRNA作为研究对象,根据链霉素的最小抑菌浓度（MIC）对标准菌株H37Rv进行不同浓度和不同时间的链霉素诱导,提取各组菌液的总RNA,通过实时定量逆转录聚合酶链反应（ qRT－PCR）检测4种sRNA在各组中的表达量,比较不同抑菌浓度和不同时间的链霉素作用下sRNA的表达量差异。结果当链霉素浓度在1／2MIC时对结核分枝杆菌的生长产生明显抑制作用;在4种sRNA中,MTS2823表达量最高,F6表达量相对较低;MTS1338在4MIC浓度的链霉素处理18 h即出现表达上调;在4MIC浓度链霉素作用6 d后,MTS1338和mcr11表达量分别出现（4．80±1．14）倍和（2．91±0．86）倍上调,而MTS2823表达下调。在各组药物处理组中F6表达量的变化均不明显。结论链霉素对结核分枝杆菌sRNA的表达可产生促进或抑制作用,提示sRNA可对某些基因进行转录后调控,促进或拮抗链霉素对结核分枝杆菌的作用。     

重组结核杆菌rCFP10-ESAT6融合抗原基因在HIV感染者中的特异性T细胞反应

目的检测人类免疫缺陷病毒(HIV)感染患者的结核(TB)特异性T细胞反应,为艾滋病合并结核杆菌感染诊断方法的建立提供理论依据。方法应用融合PCR和基因重组技术,重组并表达结核杆菌蛋白rCFP10-ESAT6抗原蛋白,按照HIV感染和是否伴发结核病将实验对象分为健康对照组(14例)、TB组(7例)、HIV(+)/TB组(14例)及HIV(+)组(72例),以合成的rCFP10-ESAT6蛋白作为抗原,通过酶联免疫斑点技术(ELISPOT)分别检测四组患者外周血的特异性T细胞反应,并对HIV(+)患者相关检测结果及其CD4+计数进行相关性分析。结果重组合成28kD的rCFP10-ESAT6融合蛋白,以此蛋白作为抗原通过ELIS-POT方法检测,在TB组和HIV(+)/TB组中阳性率达到100%,在健康对照组中为7.1%(1/14),在HIV(+)组为20.8%(15/72)。TB组阳性率明显高于HIV(+)组以及健康对照组(P<0.05),HIV(+)组阳性率亦明显高于健康对照组(P<0.05)。HIV感染者可能存在较高比例的潜在结核杆菌感染。相关性分析结果表明ELISPOT检测结果与HIV感染者的CD4+计数之...     

结核分枝杆菌特异PE/PPE蛋白家族研究进展

结核分枝杆菌（Mycobacterium. tuberculosis,MTB）是结核病的病原菌。富含甘氨酸的独特蛋白质家族——PE/PPE蛋白家族编码基因约占整个MTB菌基因组的10%,该蛋白家族可能是细菌毒力和抗原变异的主要来源,对其结构和生物学功能的研究将对结核感染的血清学诊断和结核菌苗的开发具有重要意义。     

结核分枝杆菌Rv3873抗原表位预测及其蛋白片段抗原性研究

目的对结核分枝杆菌Rv3873进行生物信息学分析及抗原表位预测,原核表达Rv3873基因21～235位氨基酸蛋白片段,命名为Rv387321～235重组蛋白,初步分析其抗原性。方法 PCR扩增结核分枝杆菌Rv3873 21～235位氨基酸的基因片段,构建其原核表达载体,转化大肠杆菌BL21（DE3）,获得重组蛋白并纯化;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）对Rv387321～235重组蛋白进行抗原性检测。结果具有优势抗原表位的Rv3873蛋白片段在大肠杆菌中高效表达;ELISA结果显示,Rv387321～235重组蛋白在结核病检测中的敏感性为28%,特异性94.6%。结论生物信息学预测Rv3873基因抗原表位,为寻找有价值的抗原靶点提供了参考;具有优势抗原表位的重组蛋白片段在结核病诊断中具有潜在应用价值,可作为联合诊断的备选抗原之一。     

基于颜色判定的环介导恒温扩增法快速检测结核分枝杆菌

目的建立快速检测结核分枝杆菌环介导的恒温扩增法。方法针对结核分枝杆菌特异性保守靶序列IS6110,采用环介导的恒温扩增法（LAMP）引物设计原则设计6条引物,特异性识别靶基因序列上8个独立区域。LAMP反应过程中会产生焦磷酸镁白色沉淀,可以通过实时监测反应液浊度来判断反应结果。结果试验表明,在60～65℃恒温条件下,LAMP反应60 min内即可完成;如果在反应前添加钙黄绿素,可通过反应液颜色的变化来判断反应结果;LAMP方法的最低检出核酸浓度为101 pg/μl,其灵敏度是PCR方法最低检出浓度1.01 ng/μl的10倍,且具有良好的特异性。结论 LAMP方法检测结核分枝杆菌具有简单、快速、价廉、特异性强、灵敏度高等特点,适用于疾控工作及临床筛查或快速检测结核杆菌。     

结核分枝杆菌Ag85A DNA疫苗的免疫原性和治疗作用

目的 研究结核分枝杆菌Ag85A DNA 疫苗的免疫原性和治疗作用.方法 40只BALB/c小鼠随机分为4组,分别用生理盐水、pVAX1载体、微卡菌苗、Ag85A DNA 疫苗免疫,每2周肌内注射1次,共3次.研究 Ag85A DNA 疫苗的免疫原性.用结核分枝杆菌H37Rv通过尾静脉注射40只BALB/c小鼠,分别用生理盐水、pVAX1载体、利福平、Ag 85A DNA 疫苗治疗.治疗结束后2周杀鼠,观察肺和脾病理改变,称取重量、做菌落计数,用ELISPOT方法检测小鼠分泌γ干扰素(IFN-γ)的T淋巴细胞斑点数.结果 与其他组比较,Ag 85A DNA疫苗能诱导产生大量Ag85A特异的分泌IFN-γ 的T淋巴细胞(S=11.832,P=0.0080).肺组织病理显示:生理盐水组肺组织病变严重、广泛;载体组比生理盐水组病变略轻,但病变仍较重、广泛;Ag 85A DNA 疫苗组肺组织病变减轻、局限,3/5区域肺泡结构完整,清晰;利福平组肺组织无病变.与生理盐水组比较,Ag85A DNA 疫苗组和利福平组肺脏菌落数分别减少0.73 log和2.11 log;肝脏菌落数分别减少0.88 log和2.11 log(P<0.01).结论 Ag85A DNA 疫苗对小鼠结核病具有较好的治疗效果.     

结核疫苗研究进展

卡介苗(BCG)的免疫保护作用存在争议,多重耐药结核杆菌(MDR-TB)的出现,以及艾滋病(AIDS)的流行,导致结核病(TB)的发病率呈现回升趋势,给TB防治提出了新的挑战.因此,发展新的TB疫苗成为TB防治的迫切需要.本文综述结核疫苗研究的最新进展.     

应用亲合层析结合液相色谱串联质谱法发现结核分枝杆菌H37Rv的新的糖蛋白

目的:应用刀豆素A(ConA)亲合层析结合液相色谱串联质谱法(HPLC-MS)发现结核分枝杆菌H37Rv的新的糖蛋白.方法:收集生长2周的结核菌培养液,经过滤浓缩得到培养滤液蛋白(culture filtrate protein, CFP).应用ConA亲合层析法纯化CFP中的糖蛋白,经SDS-PAGE电泳结合考马斯亮蓝染色后,对蛋白条带进行胰蛋白酶消化.应用HPLC-MS检测消化后的糖肽结构并与结核菌H37Rv蛋白质数据库进行比对,寻找新的糖蛋白.结果:CFP经ConA亲合层析纯化后的电泳结果显示有数条蛋白条带出现,经筛选相对分子质量26×103蛋白最可能为糖蛋白.酶切消化该蛋白得到的多肽在HPLC-MS上保留时间26.24 min处显示有多肽色谱峰,其对应的一级MS图提示该多肽总质量为1 467原子质量单位(AMU),二级MS图显示为多个质荷比(m/z)逐级减少为54(一个己糖的分子质量单位为162 AMU)的多肽,提示有己糖丢失.同时,MS分析肽链氨基酸序列并证实蛋白的糖基化存在.与结核菌H37Rv蛋白质数据库比对结果提示,结核菌分泌的26×103蛋白为一新的糖蛋白,即铜-锌超氧化物歧化酶.结论:应用ConA亲合层析结合HPLC-MS发现了一个新的结核分枝杆菌糖蛋白.