未成熟卵体外成熟培养在多囊卵巢综合征中的应用

多囊卵巢综合征 (ＰＣＯＳ)患者的表现特点为 :由于内分泌异常导致卵巢内有多个窦卵泡发育 ,但无优势卵泡产生 ,故无排卵 ,导致不孕 ,此类患者在进行常规体外受精 (ＩＶＦ)时 ,对促排卵药物反应呈现特殊性———低反应或一旦反应则呈“爆发式” ,即多个卵泡同时发育 ,极易造成卵巢过度刺激综合征 (ＯＨＳＳ)。未成熟卵体外成熟培养 (ＩＶＭ )即将卵巢中不成熟卵母细胞取出体外培养成熟后用于辅助生殖技术(ＡＲＴ)中 ,进行ＩＶＭ -ＩＶＦ较常规ＣＯＨ(控制下的超诱发排卵 ) -ＩＶＦ病人复诊次数少 ,治疗周期短 ,而且大大降低了药品花费 ,减轻…     

卵泡发育迟缓者在体外受精中延长使用促性腺激素的临床疗效观察

目的探讨体外受精（IVF）周期中,卵泡发育迟缓者延长使用促性腺激素（Gn）的临床效果。方法将552个IVF周期按Gn用药时间、剂量和获卵数分组,观察组（69个取卵周期,66个移植周期）：Gn起始用量为75IU／d-300IU／d,用药时间≥16d,用至卵泡达到取卵标准为止,获卵数≥4个;对照组（483个取卵周期,464个移植周期）：Gn起始用量为150IU／d～300IU／d,用药时间≤15d,且总Gn用量≤3300IU,获卵数≥4个。比较两组患者的Gn用量及用药时间、获卵数、临床妊娠率、胚胎着床率及治疗结局。结果观察组和对照组的临床妊娠率分别为45．5％（30／66）和51．7％（240／464）;胚胎着床率分别为28．0％（46／164）和30．5％（385／1262）;分娩率分别为37．9％（25／66）和39．4％（183／464）;两组患者的临床妊娠率、胚胎着床率、分娩率等比较,差异均无统计学意义（P〉0．05）。观察组和对照组的多囊卵巢（PCO）和（或）多囊卵巢综合征（PCOS）患者的比例分别为55．1％（38／69）和20．1％（97／483）;基础窦卵泡数分别为（20±11）个和（15±6）个;Gn用药时间分别为（20．8±4．2）d和（10．3±1．8）d;Gn用药总量分别为（3090±1140）IU和（2302±862）IU;血清雌二醇峰值分别为（4595±5181）pmol／L和（7272±6320）pmol／L;获卵数分别为（10±6）个和（14±7）个;移植胚胎数分别为（2．5±0．6）个和（2．7±0．5）个;两组上述各指标比较,差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论对IVF周期中卵泡发育迟缓的患者,延长使用Gn有效、方便,能获得满意的临床结局。     

卵母细胞体外培养成熟技术在人类生殖中的应用

辅助生殖技术中未成熟卵母细胞体外成熟培养 ( IVM)研究已有二十余年 ,从 GV期卵母细胞到窦前卵泡的体外培养已获得一定成功 ,目前 IVM应用范围已从纯粹的基础研究扩展到治疗PCOS、供卵、生殖保险等领域。IVM仍处于实验阶段 ,其完全应用于临床仍有一些问题有待解决     

体外受精联合未成熟卵母细胞体外培养技术在辅助生殖中的应用价值

近年来卵母细胞体外培养成熟(IVM)技术的应用得到迅速拓展。IVM技术可用于治疗难治 性多囊卵巢综合征(PCOS)的不孕;在常规COH中可以预防卵巢过度刺激综合征(OHSS),拯救在 控制促排卵周期中卵巢的反应不良;自然周期下联合IVM技术可以进一步提高IVF的妊娠率。人 卵母细胞IVM的培养体系的改善提高了IVM的妊娠率。IVM技术因本身价廉、避免药物副作用 以及防止发生OHSS的优点,将会在临床上得到日益广泛的应用。     

未成熟卵体外成熟培养技术应用于多囊卵巢综合征不孕的治疗

近年来，未成熟卵体外成熟培养技术（in vitro maturation．IVM）的兴起为多囊卵巢综合征（PCOS）引起的不孕提供了新的治疗途径。IVM是指在不经超促排卵，或少量应用促性腺激素（Gn）后，从卵巢中获取未成熟卵，在体外经过适宜的条件进行体外成熟培养，使卵母细胞成熟并具备受精能力。其意义主要在于：免除患者超促排卵造成过度刺激的危险，这对于PCOS患者尤为重要；[第一段]     

多囊卵巢综合征患者卵丘形态与未成熟卵母细胞发育潜能关系

目的 研究多囊卵巢综合征患者无刺激周期取出的不同形态未成熟卵母细胞的发育潜能。方法 43例PCOS不孕患者进行了47个未成熟卵母细胞体外成熟培养（IVM）周期。所有患者均未经促卵泡素刺激,予以HCG36h后取卵。根据取出的卵-冠-丘复合物形态将其分为3组：卵丘紧密组、卵丘松散组、无卵丘组。比较3组的体外成熟率、受精率和优质胚胎率。结果 47个IVM周期共收集未成熟卵母细胞874枚,体外成熟率61.19%,受精率71.07%,着床率13.13%。卵丘松散组的体外成熟率明显高于卵丘紧密组（72.26%vs49.54%,P〈0.05）,受精率、优质胚胎率三组间无差异。结论 PCOS患者无刺激周期取出的未成熟卵母细胞中,卵丘松散、扩张的卵母细胞具有更好的体外成熟潜力。     

未刺激的未成熟卵体外培养治疗多囊卵巢综合征不孕的研究

目的 探讨未刺激的未成熟卵体外培养成熟(IVM)治疗难治性多囊卵巢综合征(PCOS)不孕的疗效.方法 2004-08-2005-08温州医学院附属第一医院生殖中心对56例难治性PCOS不孕患者进行78个周期的IVM治疗.结果 9个周期取消,取消率为11.5%;69个移植周期共获卵1338个,平均每周期19.4个,培养48h后总成熟率为68.5%.正常受精率为70.2%,卵裂率为91.1%.移植目的子宫内膜厚度平均8.7mm,平均移植3.7个胚胎.1例异位妊娠,2例生化妊娠,28例获临床妊娠.每穿刺周期和移植周期的临床妊娠率分别为37.3%(28/75)和40.6%(28/69).28例临床妊娠中,3例孕8～12周流产,1例孕22周因胎膜早破流产,15例已分娩,2例双胎和7例单胎在妊娠中.多胎妊娠率为39.3%(11/28).结论 未经刺激的IVM技术用于治疗难治性PCOS不孕是一种有效的方法,具有简单、经济、最低损伤且可获得与常规体外受精-胚胎移植(ⅣF-ET)相近的临床妊娠率,但多胎妊娠的发生率仍较高.     

未成熟卵母细胞评分系统对人类未成熟卵体外成熟及发育潜能的评价

目的:建立未成熟卵母细胞评分系统,并评价其对人类未成熟卵体外成熟及发育潜能的预测作用。方法:将未成熟卵母细胞取出体外,根据卵母细胞形态及其周围颗粒细胞形态、分布进行评分,然后分别进行成熟培养和体外受精,再将卵母细胞评分与其成熟率、受精率、优质胚胎率,以及相应卵母细胞的颗粒细胞凋亡情况进行比较。结果:随着卵母细胞评分的降低,卵子的成熟率、受精率、卵裂率及优质胚胎率均下降,而颗粒细胞的凋亡率升高。结论:本研究所设计的未成熟卵母细胞评分系统能够较准确地反映卵母细胞的发育潜能,具有一定的应用价值。     

未成熟卵母细胞体外成熟技术在多囊卵巢综合征不孕症治疗中的应用

目的 探讨未成熟卵母细胞体外成熟技术(IVM)在多囊卵巢综合征(PCOS)不孕症治疗中的价值.方法 2003年1月至2009年12月,安徽医科大学第一附属医院生殖医学中心采用IVM技术治疗PCOS不孕症患者157例,共162个周期(IVM组);选取同期常规体外受精(IVF)或单精子卵细胞胞质内注射(ICSI)治疗PCOS不孕症患者109例,共114个周期(对照组1),以及非PCOS不孕症患者106例,共106个周期(对照组2)作为对照.比较3组患者治疗、妊娠结局及新生儿情况.结果 IVM组、对照组1、对照组2患者尿hCG阳性率分别为35.7％(56/157)、42.2％(46/109)、44.3％(47/106),妊娠率分别为29.3％(46/157)、37.6％(41/109)、41.5％(44/106),异位妊娠率分别为1.9％(3/157)、1.8％(2/109)、0.9％(1/106),流产率分别为18.6％(8/43)、12.8％(5/39)、20.9％(9/43),活产率分别为22.3％(35/157)、31.2％(34/109)、32.1％(34/106),各指标IVM组分别与对照组1、2比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);3组新生儿中,早产率、低出生体质量儿率、新生儿体质量、男女性别比例分别比较,差异均无统计学意义(P＞0.05);IVM组中位促排卵天数6d、中位促性腺激素用量675 IU、治疗总费用(8392±1328)元,均少于对照组1、2,差异均有统计学意义(P均＜0.01);IVM组多胎率4.7％(2/43)和卵巢过度刺激综合征(OHSS)发生率(0)均低于对照组1、2,差异均有统计学意义(P均＜0.01).结论 IVM适用于PCOS不孕症患者,能获得与常规IVF或ICSI相似的妊娠结局,并能减少治疗费用、降低多胎妊娠和OHSS发生率.     

未成熟卵体外培养成熟技术治疗后妊娠情况及结局分析

目的通过比较接受人类未成熟卵体外培养成熟（IVM）技术、常规体外受精技术（IVF）及单精子卵胞浆内注射技术（ICSI）治疗后妊娠的病例，分析妊娠和产科结局，从而评估IVM技术的安全性。方法回顾性分析安徽医科大学第一附属医院生殖医学中心2004年1月～2007年12月接受IVM35例、IVF369例和ICSI298例治疗后妊娠的702例患者的临床资料。结果3组的多胎妊娠发生率、流产率、异位妊娠率比较，差异无显著性（P〉0.05）。除外流产和继续妊娠外，IVM、IVF和ICSI治疗后出生婴儿数分别为34、321和243例，比较3组单胎妊娠和双胎妊娠的妊娠结局，差异无显著性（P〉0．05）。结论与常规IVF、ICSI比较。IVM并不增加妊娠风险、产科并发症和新生儿异常的比例。     

PCOS patients can benefit from in vitro maturation (IVM) of oocytes

Objective

Our aim was to compare treatment outcome following in vitro maturation (IVM) compared with IVF in patients with polycystic ovarian syndrome (PCOS).

Study design

Retrospective evaluation of treatment in women with PCOS who underwent IVM (108) and IVF (108).

Results

We found a significant difference in outcome between IVM and IVF, with an increase in the number of mature oocytes derived (10.5 ± 6.5 vs. 15.3 ± 8.8, p < 0.0001) and the cleavage rate (92.4 ± 13.0 vs. 95.2 ± 11.7, p = 0.03) in IVM cycles. Due to the lower implantation rate (16.1% vs. 21.6%, p = 0.07) we tend to transfer more embryos in the IVM group (3.4 ± 0.8 vs. 2.8 ± 1.0, p < 0.0001), but the multiple pregnancy rate in that group was not higher. Importantly, the delivery rate was similar in both groups (26.8% vs. 25%). We also report a yearly change in the success rate of IVM during this period.

Conclusions

IVM treatment for PCOS patients may be a valid alternative treatment to IVF with the advantage of eliminating the risk of OHSS and reducing the cost of medication, whilst maintaining high clinical pregnancy rate.     

In vitro maturation of oocytes via the pre-fabricated self-assembled artificial human ovary

Purpose  

Create a 3-Dimensional artificial human ovary to mature human oocytes.     

人未成熟卵母细胞体外培养成熟、受精及胚胎移植

目的 应用卵母细胞体外成熟(IVM)技术帮助卵泡成熟障碍的不孕症患者获得妊娠及分娩。方法 接受未成熟卵IVM技术治疗者30例35个周期,其中多囊卵巢综合征14例,有卵巢过度刺激综合征病史6例,体外受精和胚胎移植(IVF-ET)周期中卵巢反应不良患者10例。设计卵巢刺激方案,采用含人成熟卵泡液的IVM培养液,建立未成熟卵母细胞的体外培养方法。结果 35个周期共取得未成熟卵母细胞203个,平均每个周期5．8个。培养后有156个卵母细胞排出第一极体,IVM率76．8％(156／203);在卵胞浆单精子显微注射(ICSI)12～18h后观察原核,正常受精率为76．9％(120／156);共有移植周期33个,获8例临床妊娠,妊娠率24％(8／33);有5例共7个婴儿出生。结论 IVM对一些卵泡发育和成熟障碍,特别是顽固性多囊卵巢综合征患者,是一种有效的辅助生育措施。人成熟卵泡液含有理想的自然促卵母细胞成熟的成分。     

Cysteamine supplementation during in vitro maturation (IVM) of rabbit oocyte improves the developmental capacity after intracytoplasmic sperm injection

Purpose

Current approaches to in vitro maturation (IVM) may result in low efficiency and inadequate quality of the oocytes due to insufficient cytoplasmic maturation. Although positive effects of the cysteamine supplementation in IVM medium for oocyte nuclear maturation or male pronuclear formation have been confirmed, it is still controversial whether the cysteamine addition affects embryo development after IVM. We aimed here to confirm the effect of cysteamine addition into IVM medium for subsequent embryo development in vitro.

Methods

We administered the cysteamine to the IVM culture of rabbit immature oocytes at various concentrations and observed the developmental rate, speed to reach blastocyst stage and cell numbers at the blastocyst stage.

Results

Cysteamine supplementation improved developmental rate to blastocyst stage of the IVM oocytes. On the other hand, addition of glutathione (GSH) inhibitor buthionine sulfoximine inhibited GSH accumulation in the oocytes and subsequent embryo development to the blastocyst stage.

Conclusions

Controlling the GSH quantity of IVM oocytes may be an important factor for success of embryo development, and it is quite probable that a cysteamine supplementation can contribute to an increase of GSH content in oocyte.     

In vitro DNA fluorescence after in vitro fertilization (IVF) failure

Purpose A pilot study was performed to test the diagnostic value of in vitro DNA fluorescence in oocytes that failed to fertilize after IVF. Ten patients with a cleavage rate less than 20% after IVF were included.Results Uncleaved oocytes were observed by fluorescence microscopy after incubation with the DNA fluorescent dye Hoechst 33342. Four main causes which may have contributed to the low cleavage rate were found: (1) sperm incapacity to penetrate the oocyte despite the absence of the usual criteria for male infertility, (2) oocyte immaturity, (3) delayed fertilization, and (4) oocyte abnormalities revealed by aberrations in the morphology of the female chromatin.Conclusions The possibility of a rapid and detailed analysis of the maturational status of unfertilized oocytes, the morphology of the female chromatin, the presence and quantity of spermatozoa tightly bound to the zona pellucida, and sperm penetration into the oocyte without subsequent pronucleus formation, using DNA fluorescence, allows us to clarify further the cause of fertilization failure and to orient infertility treatment toward the male, the female, or both partners.     

无刺激周期未成熟卵母细胞体外培养用于多囊卵巢综合征不孕患者治疗的临床观察

目的探讨无刺激周期未成熟卵母细胞体外培养在治疗多囊卵巢综合征(PCOS)不孕患者的应用价值。方法对70例PCOS患者,在人工周期或自然周期第10～12天行阴道B超监测,如双侧卵巢中无直径>8mm的卵泡,即肌内注射人绒毛膜促性腺激素10000IU,36h后经阴道穿刺取卵,将取出的未成熟卵母细胞进行体外成熟及体外受精胚胎移植。结果共进行体外成熟周期94个,移植周期75个。共获得卵母细胞1283个,获得成熟838个(65.3%,838/1283),其中受精553个(66.0%,553/838),获得胚胎402个(48.0%,402/838),获得优质胚胎199个(23.7%,199/838)。生发泡期卵母细胞的成熟率、受精率、获得胚胎率及优质胚胎率,分别为67.7%、66.4%、47.6%及24.1%;第1次减数分裂中期的卵母细胞,分别为69.7%、71.7%、52.2%及26.1%,生发泡期与第1次减数分裂中期比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。无法评价的卵母细胞的成熟率、受精率、获得胚胎率及优质胚胎率,分别为44.8%、53.8%、46.2%及16.9%,与生发泡期及第1次减数分裂中期比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。75个移植周期中,18例获得临床妊娠,妊娠率为24%(18/75)。结论无刺激周期未成熟卵母细胞体外成熟及体外受精胚胎移植可用于PCOS不孕患者的治疗,并能取得一定的妊娠成功率。