外源性一氧化碳释放分子对脓毒症小鼠肺部炎症反应的抑制作用

目的:研究外源性一氧化碳释放分子(carbon monoxide-releasing molecules-2, CORM-2)干预对脓毒症小鼠肺部炎症反应的抑制作用.方法:18只雄性昆明种小鼠随机分为假手术组、CLP模型组和CORM-2干预组.制作标准盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)模型,用CORM-2进行干预,观察干预前后小鼠肺脏炎症反应的变化情况.分别于CLP术后6 h,12 h,24 h收集血浆、取肺组织,酶联免疫吸附(ELISA)法检测血浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)炎症因子的表达;检测肺组织中髓过氧化物酶(MPO)活性,观察中性粒细胞的聚集程度;测定肺组织湿干重比(W/D);苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织病理变化;免疫组织化学法观察细胞间黏附分子(ICAM-1)、肺表面活性蛋白-A(SP-A)的表达.结果:与假手术组比较,CLP模型组主要表现为肺组织微血管通透性增加,肺泡壁增厚,间质水肿,白细胞浸润,MPO活性明显增强;炎症因子TNF-α,IL-1β和IL-6的表达水平升高(P<0.05);与CLP模型组比较,CORM-2干预组肺间质水肿程度减轻,白细胞浸润明显减少,以上炎症因子的表达明显受到抑制(P<0.05).结论:CDRM-2可显著抑制脓毒症机体炎症细胞因子和ICAM-1、SP-A的表达,降低MPO活性,减少中性粒细胞的聚集,减轻组织炎症反应,对脓毒症小鼠肺部炎症反应有显著的抑制作用.     

罗格列酮对去卵巢大鼠学习记忆及脑内TNF-α、IL-6表达的影响

目的 观察罗格列酮对去卵巢大鼠学习记忆功能及海马内肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和白介素-6（IL-6）表达的影响.方法 56只SD雌性大鼠,随机分为4组：假手术对照组、去卵巢组、假手术＋罗格列酮组、去卵巢＋罗格列酮治疗组,第15周进行Morris水迷宫试验.第16周处死大鼠,ELISA法检测大鼠大脑海马区的TNF-α、IL-6的表达.结果 与假手术组比较,去卵巢组大鼠学习记忆能力明显下降（P＜0.01）,大脑海马区TNF-α和IL-6的表达明显升高（均P＜0.01）;与去卵巢组比较,罗格列酮治疗组大鼠学习记忆能力明显改善,大脑海马区TNF-α和IL-6的表达明显降低（均P＜0.01）.结论 罗格列酮能改善去卵巢大鼠的学习记忆障碍,其机制可能与其降低海马TNF-α和IL-6的表达有关.     

罗格列酮对急性胰腺炎大鼠肺组织HMGB1和JAK2/STAT3信号通路调控的研究

目的:探讨罗格列酮对SAP模型大鼠早期炎症介质、晚期炎症因子HMGB1和JAK2/STAT3信号通路表达的调控。方法:72只SD大鼠随机分为3组,假手术组(SO组,n=24)、胰腺炎模型组(SAP组,n=24)和罗格列酮组(ROSI组,n=24)。SAP组在麻醉后两次腹腔内注射左旋精氨酸,ROSI组在SAP建模后30min静脉注射罗格列酮针6mg/kg,SO组在麻醉后腹腔注射等体积生理盐水。3组术后6、12和24h分别采样(每个时间点n=8),测定血清TNF-α、IL-1β、IL-6等早期炎症因子含量,观察大鼠肺组织病理改变,测定肺髓过氧化物酶和肺干/湿重比,检测肺组织HMGB1、JAK2、STAT3蛋白表达情况。结果:ROSI组大鼠的血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量较SAP组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);与SAP组比较,ROSI组的肺组织病理损伤减轻,肺MPO表达降低,干/湿重比下降,HMGB1、JAK2、STAT3蛋白表达明显减低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:罗格列酮能抑制肺组织JAK2、STAT3表达,降低早期、晚期炎症因子表达,减轻SAP导致的肺损伤。     

罗格列酮对糖尿病大鼠肾脏IL-6、IL-8、TNF-α表达的影响

目的 观察罗格列酮对糖尿病大鼠肾脏炎症相关因子IL-6、IL-8和TNF-α表达的影响.方法 雄性SD大鼠被分为正常组、正常+罗格列酮组、糖尿病组、糖尿病+罗格列酮组.所有大鼠均检测生化指标、尿白蛋白排泄率,及肾组织IL-6、IL-8、TNF-α mRNA和蛋白水平.结果 罗格列酮干预的糖尿病大鼠和未干预组相比,肾组织IL-6、IL-8、TNF-α表达显著降低,尿白蛋白排泄减少,但血糖、肌酐无明显变化.结论 罗格列酮可能通过抑制炎症相关因子的表达,从而降低尿白蛋白的排泄以保护肾脏,并且其作用独立于降糖之外.     

过氧化物酶增殖物激活受体激动剂(罗格列酮)在大鼠急性坏死性胰腺炎中的防治作用

目的:研究PPAR-γ增殖物激动剂(罗格Yqm)对ANP及合并肺损伤大鼠是否有保护作用.方法:50只健康雄性SD大鼠随机分为5组,正常对照组、假手术组、ANP组、罗格列酮预防组,罗格列酮治疗组.正常对照组,未做任何处理;假手术组,腹腔内注射同等剂量生理盐水;采用大剂量精氨酸腹腔注射诱导ANP模型,预防组于造模前60 min给予罗格列酮10ms/kg,2次,每次间隔30 min,治疗组于造模后60 min给予罗格列酮10 ms/kg,2次,每次间隔30 min.各组于造模后24 h处死大鼠,观察大鼠血清AMY、TNF-α和IL-1β水平变化,同时检测胰腺和肺的组织病理变化和肺组织髓过氧化物酶(MPO)的变化.结果:ANP组AMY、TNF-α、IL-1β和MPO均较对照组和假手术组明显升高(P<0.001);罗格列酮预防和治疗组血清AMY、TNF-α、IL-1β、肺组织中MPO水平较ANP组明显下降,且胰腺和肺的病理损伤也明显减轻(P<0.001)结论:罗格列酮能明显降低ANP的炎症,能明显减少TNF-α、IL-1β的产生,能降低肺组织中MPO含量,对ANP及合并的肺损伤具有保护和治疗作用.     

过氧化物酶体增殖物激活受体γ配体对大鼠肺炎症的影响

[摘要] 目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）配体罗格列酮对内毒素致大鼠肺炎症的作用及其分子机制。方法 36只SD大鼠随机分为：（1）生理盐水对照组（6只）;（2）罗格列酮对照组（6只）;（3）内毒素组（6只）;（4）罗格列酮干预组（18只）：根据罗格列酮不同灌胃剂量分为低、中、高剂量组,每组各6只。HE染色观察肺炎症情况;计数BALF中细胞总数、中性粒细胞数、巨噬细胞数;采用ELISA法检测BALF中TNF-α、IL-1β和IL-8含量;Western blot检测肺组织NF-kB、I kB-α表达。结果 内毒素气管内注入后,大鼠肺炎症积分,BALF中细胞总数、中性粒细胞数、巨噬细胞数、TNF-α、IL-1β和IL-8水平及NF-kB表达较生理盐水对照组明显增加（P均<0.05）,低、中、高剂量罗格列酮干预后,除IL-1β外上述观察指标逐渐降低,组间比较差异有统计学意义（F分别为60.82,25.14,25.78,26.13,38.94,38.04,31.92,均P＜0.01）。内毒素组I kB-α表达较生理盐水对照组明显降低（P＜0.05）;低、中、高剂量罗格列酮干预后,其表达逐渐增加,组间比较差异有统计学意义（F＝47.61,P＜0.01）。相关性分析示内毒素组NF-κB表达与肺炎症积分,BALF中细胞总数、中性粒细胞数、巨噬细胞数、TNF-α、IL-1β和IL-8水平呈正相关（r分别为0.839、0.860、0.905、0.933、0.746、0.916、0.872,均P＜0.05）。 结论 过氧化物酶体增殖物激活受体γ配体罗格列酮能够减轻内毒素诱导的肺炎症损伤反应,其具体机制可能是通过抑制NF-κB表达,抑制炎性细胞因子释放而发挥作用。     

不同海拔脓毒症大鼠细胞因子表达和肺损伤的实验研究

目的分析海拔因素对脓毒症大鼠血清中细胞因子表达和肺损伤的影响,探讨细胞因子网络与脓毒症及某些高原疾病的相关性。方法将果洛州玛多组（4268m）、西宁组（2276m）和郑州组（112m）各54只雄性SD大鼠随机分为正常对照组（n=6）、假手术组（n=24）和模型组（n=24）。采用盲肠结扎穿孔术（CLP）制备脓毒症模型,于造模后2、6、12、24h处死大鼠,假手术组在相同时间点处死大鼠,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清TNF-α、IL-6、IL-10水平;留取各时间点完整左肺组织做病理切片,右肺组织测定湿干（W/D）比重;记录模型组各时间点脓毒症大鼠死亡例数,统计其死亡率。结果模型组各时间点TNF-α、IL-6、IL-10水平均高于假手术组（P〈0.01）;各组间相比较,随着海拔升高,炎症细胞因子各时间点表达水平均明显升高（P〈0.01）;肺组织损伤情况呈递进性加重;模型组于造模6h以后肺湿干比重差异显著（P〈0.01）;模型组脓毒症大鼠死亡率明显增加（P〈0.05）。结论模型组各时间点细胞因子表达水平均高于假手术组;海拔越高,炎症细胞因子表达水平越高,肺组织损伤越严重,脓毒症症状较低海拔者越重,脓毒症大鼠死亡率越高。     

阿托伐他汀对脓毒症大鼠肺组织病理及血清TNF-α、HMGB-1的影响

目的探讨阿托伐他汀对脓毒症大鼠肺组织病理及血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、高迁移率族蛋白1(H4MGB-1)表达的影响。方法将75只健康SD大鼠随机分为假手术组、脓毒症组及干预组各25只。每组在术后12、24、36、48、72 h各取大鼠5只处死并取心脏血及肺组织,常规行HE染色观察肺组织病理变化,ELISA法检测血清TNF-α水平,Western Blot法检测HMGB-1表达水平。结果假手术组大鼠肺组织可见少量炎性细胞;脓毒症组肺组织及肺泡内可见水肿,大量炎性细胞浸润及红细胞;干预组大鼠肺组织炎性细胞较脓毒症组明显减轻,肺泡结构尚完整,病理改变明显减轻。脓毒症组、干预组肺组织W/D较假手术组明显升高(P<0.01),其中干预组在36 h后明显降低,且低于脓毒症组(P<0.05)。各时间点干预组和脓毒症组TNF-α及HMGB-1表达水平均较假手术组明显升高(P<0.05),且干预组表达水平较脓毒症组明显降低(P<0.05),36 h后干预组和脓毒症组TNF-α及HMGB-1表达水平有所降低(P<0.05)。结论阿托伐他汀可改善脓毒症大鼠肺组织病理炎性损伤,降低血清TNF-α及HMGB-1表达水平。     

芍药苷通过激活Nrf2/Keap1信号通路改善脓毒症急性肺损伤的研究

  目的  探讨芍药苷（paeoniflorin, PF）对脓毒症所致急性肺损伤的影响及其与转录因子NF-E2相关因子2（nuclear factor erythyroid 2-related factor 2, Nrf2）/Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1（Keap1）信号通路的关系。  方法  采用盲肠结扎穿孔（CLP）术诱导建立脓毒症大鼠模型。将大鼠随机分成假手术组（Sham）、模型组（Model）、低剂量PF组（L-PF,50 mg/kg）、高剂量PF组（H-PF,150 mg/kg）及高剂量PF+Nrf2抑制剂组（H-PF+ML385,150 mg/kg PF+30 mg/kg ML385）,每组10只。采用改良的脓毒症严重程度评分标准对大鼠脓毒症严重程度进行评分;HE染色观察大鼠肺组织病理变化;黄嘌呤氧化酶法测定大鼠肺组织超氧化物歧化酶（SOD）活性;硫代巴比妥酸法测定大鼠肺组织丙二醛（MDA）含量;ELISA法检测肺组织中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）,白介素（IL）-1β和IL-6水平;Western blot和qRT-PCR分别检测肺组织中Nrf2、Keap1、血红素氧合酶1（HO-1）蛋白和mRNA的表达水平。  结果  与Sham组比较,Model组大鼠出现严重的脓毒症;肺组织出现严重炎症浸润,出现大量巨噬细胞,肺间质肿大;肺组织中促炎因子IL-1β、TNF-α、IL-6及氧化指标MDA含量均上升（P<0.05）,而抗氧化指标SOD含量下降（P<0.05）;Nrf2及HO-1蛋白和mRNA表达均降低（P<0.05）,Keap1蛋白和mRNA表达增加（P<0.05）。与Model组比较,PF给药组大鼠脓毒症程度均降低,肺组织损伤均得到改善,肺组织中IL-1β、TNF-α、IL-6及MDA含量均下降（P<0.05）,SOD活性均增加（P<0.05）;Nrf2及HO-1蛋白和mRNA表达均增加（P<0.05）,Keap1蛋白和mRNA表达降低（P<0.05）。与H-PF组比较,Nrf2抑制剂ML385干预后可抑制PF对脓毒症大鼠上述指标的改善。  结论  PF通过激活Nrf2/Keap1信号通路,降低组织氧化应激与炎症水平,改善脓毒症所致的急性肺损伤。     

LXRα激活剂T0901317对急性肺损伤大鼠肺组织MPO、TNF-α表达的影响

目的观察LXRα（liver X receptorα）激活剂T0901317对急性肺损伤大鼠肺组织中髓过氧化物酶（MPO）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达的影响。方法 72只雄性Wistar大鼠,按随机数字表法分为对照组、脂多糖致伤组、T0901317干预组,在1h、2h、4h、8h时相点采集大鼠肺组织测定肺组织中MPO活性、TNF-α含量,并观察肺组织病理学变化。结果与对照组比较,脂多糖致伤组各时间点MPO活性均显著升高（P〈0.05）,组织病理显示肺组织受损;肺组织匀浆和动脉血清中TNF-α亦显著升高。T0901317干预组MPO活性及TNF-α表达下降,肺部炎症明显减轻。结论 T0901317能够显著降低急性肺损伤大鼠肺组织MPO活性、TNF-α水平,对急性肺损伤大鼠具有保护作用。