抑制剂增强碳青霉烯类灭活法对革兰阴性杆菌碳青霉烯酶初步分类的评价

目的评价抑制剂增强碳青霉烯类灭活法(ieCIM)对革兰阴性杆菌碳青霉烯酶检测及初步分类的可靠性。方法分别以他唑巴坦和乙二胺四乙酸作为碳青霉烯酶抑制剂,对CIM进行改良。选取临床分离的198株肠杆菌科细菌和35株非发酵菌,采用ieCIM检测碳青霉烯酶并进行初步分类,以PCR方法检测碳青霉烯酶基因作对比。结果 198株肠杆菌科细菌中碳青霉烯酶基因阳性101株,CIM检测阳性99株;碳青霉烯酶基因阴性97株,CIM检测均阴性。35株非发酵菌中碳青霉烯酶基因阳性25株,CIM检测阳性24株;碳青霉烯酶基因阴性10株,CIM检测均阴性。使用ieCIM初步分类碳青霉烯酶,87株产A类酶菌株中检出85株(97.7%),25株产B类酶菌株中检出22株(88.0%),12株产D类酶菌株和2株同时产A、B类酶菌株全部检出,ieCIM检测敏感性为96%,特异性100%。结论 ieCIM与基因检测结果一致性高,适合临床微生物常规工作中对碳青霉烯酶的检测及初步分类。     

MAST D73C组合纸片法检测肠杆菌科细菌碳青霉烯酶

目的使用MAST D73C组合纸片法检测儿童碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌(CRE)菌株中碳青霉烯酶及其分型,为临床提供一种简便快速的碳青霉烯酶检测方法。方法MAST D73C组合纸片法和PCR基因检测确认240株儿童临床分离CRE菌株碳青霉烯酶基因,并用统计学方法分析MAST D73C检测碳青霉烯酶的灵敏度和特异度。结果233株CRE碳青霉烯酶基因表达阳性,blaNDM、blaOXA-232、blaKPC-2和blaIMP检出率分别为40.00%、28.75%、23.33%和4.17%,另有2株同时携带2种碳青霉烯酶基因。MAST D73C组合纸片对MβL酶、OXA-48酶和KPC酶的检出率分别为48.48%(112/231)、27.27%(63/231)和8.66%(20/231),另有36株(15.58%)细菌抑菌圈结果无法解释。与PCR方法相比,MAST D73C检测MβL酶的灵敏度和特异度分别为99.06%和94.40%;检测OXA-48酶的灵敏度和特异度为81.16%和95.68%;检测KPC酶的灵敏度和特异度为33.93%和99.43%,但采用法罗培南耐药判断该菌为产KPC型碳青霉烯酶的补充标准后,灵敏度提高至87.50%,并且检测其他酶型的灵敏度和特异度不变,与PCR结果相比总符合率为90.91%(210/231)。结论儿童分离CRE菌株主要检出NDM-1酶和OXA-232酶,MAST D73C组合纸片法补充解释标准后可以简便、快速、准确地检测碳青霉烯酶,并可将其分型。     

云南地区肿瘤患者CRE菌株的表型筛选与耐药基因相关性研究

目的探讨云南地区肿瘤患者碳青霉烯类耐药肠杆菌科细菌(CRE)菌株的表型筛选与耐药基因的相关性。方法收集2015年1月至2018年12月云南省肿瘤医院临床科室送检标本中分离得到的31株CRE,采用改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)、乙二胺四乙酸碳青霉烯类灭活试验(eCIM)进行碳青霉烯酶表型筛选,PCR特异性扩增CRE耐药基因A、B、D类,比较分析CRE菌株mCIM、eCIM表型筛选与耐药基因扩增的相关性。结果31株CRE中,26株碳青霉烯酶基因阳性菌株,其mCIM检测全部为阳性。以碳青霉烯酶PCR检测结果为“金标准”,mCIM检测碳青霉烯酶的灵敏度和特异度分别为100.0%、80.0%,与PCR检测的一致性程度为“几乎完全一致”(Kappa=0.870,P<0.001);eCIM检测金属酶的灵敏度和特异度分别为100.0%、53.8%,与PCR检测的一致性程度为“中等一致”(Kappa=0.518,P<0.001);mCIM联合eCIM检测碳青霉烯酶总的灵敏度和特异度分别为73.1%、80.0%,检测丝氨酸碳青霉烯酶的灵敏度为50.0%,检测金属酶的灵敏度为100.0%,与PCR检测的一致性程度为“高度一致”(Kappa=0.624,P<0.001)。结论mCIM、eCIM表型筛选试验在云南地区肿瘤患者中与耐药基因有高度的一致性,值得推广使用,但要注意eCIM对于携带blaKPC-2型的碳青霉烯酶存在假阳性。     

imCIM检测B类碳青霉烯酶的效果评价

目的评价抑制剂增强改良碳青霉烯失活法(im CIM)在B类碳青霉烯酶检测中的应用价值,并与EDTA纸片增效试验(EDPT)进行比较分析。方法收集碳青霉烯类抗生素不敏感菌株181株,其中肺炎克雷伯菌44株、大肠埃希菌44株、鲍曼不动杆菌43株、铜绿假单胞菌50株;碳青霉烯类抗生素敏感菌株83株,其中肺炎克雷伯菌25株、大肠埃希菌16株、鲍曼不动杆菌25株、铜绿假单胞菌17株。采用im CIM和EDPT对上述264株菌株进行B类碳青霉烯酶的筛查,以PCR结果作为金标准。应用一致性检验、Wilcoxon符号秩和检验、独立样本Kruskal-Wallis H检验及ROC曲线进行统计学分析。结果 181株碳青霉烯类抗生素不敏感菌株中144株PCR扩增耐药基因阳性,A、B、D类碳青霉烯酶分别为39株、77株、28株;im CIM检测70株阳性,111株阴性,其中166株与PCR结果一致;EDPT检测72株阳性,109株阴性,其中134株与PCR结果一致。碳青霉烯类抗生素敏感菌株83株,PCR扩增耐药基因、im CIM及EDPT检测结果均为阴性。im CIM敏感性和特异性分别为85.71%(66/77)和97.86%(183/187),与PCR结果一致性Kappa值为0.859;EDPT敏感性和特异性分别为66.23%(51/77)和88.77%(166/187),Kappa值为0.561。im CIM抑菌圈差值(Δdim CIM)与EDPT抑菌圈差值(ΔdEDPT)有差别,差异有统计学意义(Z=-6.941,P0.05)。采用im CIM检测B类碳青霉烯酶的Δdim CIM水平与A、D类酶Δdim CIM总体分布位置不同,差异有统计学意义(χ2=108.887,P0.05)。im CIM与EDPT的ROC曲线下面积分别为0.988(95%CI:0.977~0.999)和0.936(95%CI:0.909~0.963)。结论 im CIM是一种准确、高效、便捷的碳青霉烯酶表型筛选方法,敏感性、特异性较高,适合用于流行病学监测。     

6种B族链球菌检测方法的经济学分析

目的分析临床上应用产品检测B族链球菌的6种方法(普通细菌培养法、显色培养法、金标免疫层析法、乳胶凝集法、环介导等温扩增法、实时荧光PCR法)的经济学价值,从而选出性价比最佳的检测方法。方法根据文献报道的各检测方法的效果和效用及经询问厂家得到的成本,以成本-效果分析(CEA,以C/E表示,越小越好)、成本-效用分析(CUA,以C/U表示,越小越好)和增量成本分析3种评价方法分别对各检测方法进行评估,从3种不同的角度选择出最佳检测方法。结果普通细菌培养法、显色培养法、金标免疫层析法、乳胶凝集法、环介导等温扩增法、实时荧光PCR法6种方法的成本分别是80.00、35.00、35.00、75.00、50.00、30.00元/次,C/E分别为100.00、35.00、36.46、85.23、51.55、30.61,C/U分别为166.67、55.56、32.71、72.81、75.76、60.00。实时荧光PCR法的C/E最低,金标免疫层析法的C/U最低,根据增量成本-效果比可知,细菌培养法性价比最低,显色培养法仅次于性价比最高的金标免疫层析法。结论从成本-效果分析的角度看,实时荧光PCR法的性价比最高;从成本-效用分析的角度看,金标免疫层析法的性价比最高;从增量成本分析的角度看,金标免疫层析法的性价比最高。     

mCIM 和碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测CRE 和CRPA 产酶表型的方法学评价

目的 综合评估改良碳青霉烯酶灭活试验（mCIM）和碳青霉烯酶抑制剂增强试验对碳青霉烯酶检测和分型能力。方法 采用mCIM 和碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测中山大学肿瘤防治中心2019 ～ 2022 年临床分离并保存的47 株耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌（carbapenem-resistant Enterobacterales, CRE）和42 株耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌（carbapenem-resistant Pseudomonas aeruginosa, CRPA）的产酶表型,胶体金法对检测结果进行验证比对,通过卡方检验进行统计分析,并从多角度综合评价。结果 mCIM 检测CRE 和CRPA 的阳性率分别为70.2% 和35.7%,碳青霉烯酶不确定占比为25.5% 和11.9%。增强试验检测47 株CRE:44.7% 产B 类金属β 内酰胺酶,17.0% 产A 类碳青霉烯酶,不产A 或B 类碳青霉烯酶的菌株占38.3%;增强试验检测42 株CRPA:2.4% 产B 类金属β 内酰胺酶,90.4% 产A 类碳青霉烯酶,同时产A 类碳青霉烯酶和B 类金属β- 内酰胺酶的菌株占4.8%,不产A 或B 类碳青霉烯酶的菌株占2.4%。两种方法检测CRE 差异有统计学意义（χ2=17.803,P =0.01）,检测CRPA 差异无统计学意义（χ2=4.632,P=0.592）。胶体金法验证:产碳青霉烯酶的阳性符合率为84.6%,产丝氨酸酶的阳性符合率为80%,产金属酶的阳性符合率为100%。结论 检测CRE两种方法均适用且差异不大, CRPA更推荐碳青霉烯酶抑制剂增强试验,胶体金值得推广,临床实验室应根据实际条件选择检测方法。     

碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌流行病学及碳青霉烯酶类型的研究

目的 了解碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌的耐药性、同源性及碳青霉烯酶类型。方法 收集本院碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌45株，浓度梯度法(Etest)测定最低抑菌浓度(MIC)；采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析同源性；通过等电点聚焦电泳(IEF)、三维试验、2-巯基丙酸抑制试验、聚合酶链反应(PCR)、克隆测序等方法分析碳青霉烯酶类型。结果 45株细菌均为多重耐药株，仅对头孢哌酮/舒巴坦、氨苄西林/舒巴坦耐药率较低分别为2．2％和6．5％，敏感率分别为63．0％和43．5％。45株菌株PFGE图谱分为A、B两型，A型是主要流行株(44株)，主要集中在重症监护病房(ICU)。B型1株来自血液科病房。45株菌中有43株产碳青霉烯酶，其中16号株(PFGE为B型)等电点有6．6、7．2两个条带，pI6．6为OXA-23，其余42株(A1～A4亚型)pIs均有6．4、7．0两个条带，均不被克拉维酸、氯唑西林及2-巯基丙酸抑制，PCR方法也未能检出OXA-23、OXA-24系列的基因。结论 本院碳青霉烯类耐药鲍曼不动杆菌流行主要为医院感染所致，该流行株呈多重耐药，未发现金属酶，仅1株产OXA型碳青霉烯酶，为OXA-23。     

胶体金免疫层析法在产碳青霉烯酶肠杆菌目细菌检测中的应用评价

目的 评估胶体金免疫层析法在产碳青霉烯酶肠杆菌目细菌(CPE)中的应用价值。方法 收集福建医科大学附属第一医院分离的65株肠杆菌目细菌，包括41株碳青霉烯类耐药肠杆菌目细菌(CRE)和24株非CRE菌株。采用PCR法检测5种碳青霉烯类耐药基因(bla_KPC、bla_IMP、bla_VIM、bla_OXA-48-like、bla_NDM),改良碳青霉烯类失活法(mCIM)与EDTA碳青霉烯类失活法(eCIM)以及胶体金免疫层析法检测碳青霉烯酶并分型，以PCR结果为参考，评估各方法的检测性能；挑取其中29株CRE与24株非CRE构建模拟阳性血培养瓶，报阳后以胶体金免疫层析法进行分型检测并评估其性能。结果 PCR结果发现25株菌携带bla_KPC基因、7株携带bla_NDM基因、4株携带bla_IMP基因、4株同时携带bla_KPC+NDM基因、1株同时携带bla_KPC+NDM+IMP基因，...     

耐碳青霉烯类抗菌药物革兰阴性杆菌临床分布及耐药基因调查

目的分析甘肃省人民医院2018—2020年碳青霉烯耐药革兰阴性杆菌(CRO)的临床分布、耐药基因携带情况,为医院CRO的防控提供依据。方法采用飞行质谱仪进行细菌鉴定;K-B纸片扩散法和Phoenix~(TM)-100革兰阴性杆菌药敏板进行药敏试验。从临床标本中共分离出CRO菌株60株,用WHONET 5.6软件统计CRO菌株的耐药情况及临床分布。采用改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)联合EDTA改良碳青霉烯灭活试验(eCIM)和碳青霉烯酶抑制剂增强试验进行耐药表型检测,荧光定量PCR进行耐药基因型检测。结果 60株CRO菌株经鉴定为肺炎克雷伯菌20株、大肠埃希菌11株、阴沟肠杆菌13株、雷极普罗威登菌5株、弗劳地枸橼酸杆菌2株和铜绿假单胞菌9株;主要来源于重症监护病房(ICU)、神经内科、泌尿科和烧伤科等临床科室。经耐药表型检测检出:A类丝氨酸碳青霉烯酶17株(肺炎克雷伯菌16株、弗劳地枸橼酸杆菌1株),B类金属β-内酰胺酶38株(阴沟肠杆菌12株、大肠埃希菌11株、雷极普罗威登菌5株、铜绿假单胞菌6株、肺炎克雷伯菌4株),4株(铜绿假单胞菌3株和阴沟肠杆菌1株)为阴性;另外1株弗劳地枸橼酸杆菌采用mCIM联合eCIM试验检测为B类金属β-内酰胺酶,而用碳青霉烯酶抑制剂增强试验检测为混合型(A+B类酶)。经PCR检测检出KPC酶17株、NDM型32株,IMP1型酶6株,KPC+NDM混合基因型1株。结论甘肃省人民医院CRO菌株的表型耐药机制是产A类丝氨酸碳青霉烯酶和B类金属β-内酰胺酶,主要携带KPC、NDM和IMP1基因型。     

改良Carba Np试验和mCIM/eCIM快速鉴定产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌表型的临床应用

目的 评估改良Carba Np试验与碳青霉烯灭活试验(mCIM)/乙二胺四乙酸碳青霉烯灭活试验(eCIM)在检测肠杆菌科细菌碳青霉烯酶表型中的应用价值。方法 收集136株肠杆菌科细菌临床分离株,其中耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)86株,碳青霉烯敏感株50株。分别采用改良Carba Np试验、mCIM/eCIM进行检测,并进行表型分析和分类,以聚合酶链反应(PCR)碳青霉烯酶基因鉴定结果为标准,评价2种改良方法检测结果的差异。结果 86株CER中,耐药基因阳性81株;50株敏感菌株均未检出耐药基因。改良Carba NP试验阳性82株,mCIM/eCIM阳性78株。以PCR结果为标准,改良Carba NP试验和mCIM/eCIM检测肠杆菌科细菌碳青霉烯酶的敏感性、特异性分别为96.3%、92.7%和92.6%、94.5%,Kappa值分别为0.935和0.917。改良Carba NP试验丝氨酸碳青霉烯酶检出率为97.7%,金属碳青霉烯酶检出率为100.0%。mCIM/eCIM检测金属碳青霉烯酶的敏感性为91.2%、特异性为90.4%。改良Carba NP试验与mCIM/eCIM碳青霉烯...     

Rapid detection method of carbapenemase-producing Enterobacteriaceae by MALDI-TOF MS with imipenem/cilastatin (KB) disc and zinc sulfate solution

IntroductionCarbapenemase-producing Enterobacteriaceae (CPE) is a major global health threat, and development of rapid detection methods is desired. Here, we established a cost-effective and relatively rapid CPE detection method using matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry (MALDI-TOF MS).MethodsWe examined 134 CPE strains (IMP-type, NDM-type, VIM-type, KPC-type, OXA-48-like-type, and GES-type) and 107 non-CPE strains, previously confirmed by genetic tests. The proposed MALDI-TOF MS method involves mixing of a carbapenem drug [here, the commercially available imipenem (IPM) KB disc] and the bacterial strains to be tested, and the consequent drug hydrolysis owing to bacterial carbapenemase activity is confirmed by a waveform spectrum before and after 2 h of the mixing. As metallo-beta-lactamases require zinc in their active site, the false-negatives obtained from our method were cultured in presence of zinc sulfate solution and tested again.ResultsBased on the presence or absence of the IPM (+cyano-4-hydroxy-cinnamic acid)-specific waveform peak near 489.45 m/z (±500 ppm), the detection sensitivity and specificity of our method for CPE were determined to be 94.8% and 91.6%, respectively. Seven false-negatives of IMP-type (4), VIM-type (2), and GES-type (1) were found, of which the IMP- and VIM-types tested positive as CPE after culture with zinc sulfate solution. Thus, the overall detection sensitivity improved to 99.3%.ConclusionOur study proposes a new approach for CPE detection using MALDI-TOF MS. Moreover, we propose cultivation of test strains with zinc sulfate solution for efficient detection of IMP-type CPE, not only for MALDI-TOF MS, but also for other detection methods.     

腹腔镜治疗先天性脐尿管畸形的应用价值 (附10例报告)

目的探讨应用腹腔镜技术治疗先天性脐尿管异常疾病的方法及注意事项。方法回顾分析总结已实施腹腔镜下切除先天性脐尿管10例临床资料。结果该组患者术后效果满意，全部治愈出院。结论应用腹腔镜技术治疗先天性脐尿管病，创伤小，痛苦轻，住院时间短，费用低，安全可靠，效果好，值得推广。     

磺脲类药物用于2型糖尿病的成本-效果评价

目的:探讨磺脲类药物用于2型糖尿病的成本-效果,为临床医师选择合理用药方案提供参考.方法:选择康平县人民医院2017年8月到2019年12月诊治的180例2型糖尿病患者为研究对象,依据随机数字表法,将研究对象分为三组—A、B、C组(每组60例),A组采用二甲双胍缓释片联合格列美脲,B组采用阿卡波糖联合格列美脲,C组采用...     

静脉输液实际消耗成本核算研究

目的:准确核算滨州市公立医疗机构静脉输液实际消耗成本,为制定合理的护理项目收费标准提供数据支持。方法:采用便利抽样方法,分别选取滨州市一、二、三级公立医疗机构各一家,收集其2010年的相关资料;运用项目成本核算法测算样本公立医疗机构不同途径静脉输液的实际消耗成本,分析成本构成并比较与政府定价的差异。结果:样本公立医疗机构静脉输液实际消耗成本为:三级普通钢针途径为25.46元、留置针途径为24.54元、PICC途径为36.87元、CVC途径为35.88元;二级普通钢针途径为19.80元、留置针途径为19.39元;一级普通钢针途径为15.55元。与政府定价之间的差距为12.60～30.87元,成本补偿率为11.78%～30.94%;分析其成本构成,占总成本比例最高的是护理人力成本,为39.05%～53.25%。结论:静脉输液实际消耗成本与现行收费标准差距悬殊,建议相关部门在项目成本科学核算的基础上,合理调整静脉输液收费标准。     

抗-HCV-IgG抗体以及血清HCV-RNA在丙型肝炎诊断中的应用价值

目的研究抗-HCV-IgG抗体和血清HCV-RNA在丙型肝炎诊断中的应用价值。方法抽选2015年12月至2016年12月76例丙型肝炎患者展开研究,所有患者均进行血清抗-HCV-IgG抗体检测和血清HCV-RNA检测,对比分析两种方法单独检测及联合检测对丙型肝炎的阳性检出率。结果 76份标本抗-HCV-IgG抗体检测阳性率为27.63%,血清HCV-RNA检测阳性率为25.00%,两种联合检测阳性率为22.37%,3种方法阳性率均较接近,但差异无统计学意义(P0.05)。按照HCVRNA病毒不同载量区间划分,抗-HCV-IgG检测阳性率不断升高,5个区间分别为60.00%、83.33%、100.00%、100.00%、100.00%。结论单一检测抗-HCV-IgG抗体、血清HCV-RNA诊断丙型肝炎均具有局限性,联合检测能够有效降低漏诊率,提高阳性率检出,为临床诊断丙型肝炎提供可靠依据。     

肿瘤标志物联合检测在肺癌诊断中的价值

目的 探讨肿瘤标记物CEA、CA-50、CA242、CA125、NSE在肺癌诊断中的价值。方法 应用时间分辨荧光免疫法测定45例肺癌、31例肺良性病变、28例经体检证明是健康人的血清肿瘤标记物水平。结果 肺癌患者五项血清肿瘤标记物浓度均高于肺良性病变及健康组（P〈0．01，P〈0．05）。敏感性分别是CEA42．4％（19／45），CA-50 40．4％（18／45），CA242 33．3％（15／45），CA12．5 28．9％（13/45）、NSE 26．7％（12／45），联合检测敏感性达到91．1％。结论 联合检测CEA、CA-50、CA242、CA12．5、NSE可以显著提高肺癌血清肿瘤标记物的敏感性和特异性，为肺癌诊断提供科学的方法和依据。     

两种定量检测甲胎蛋白与癌胚抗原的方法比较

目的 对两种不同方法检测甲胎蛋白(AFP)与癌胚抗原(CEA)的重复性及检测结果的差异进行方法学对比和偏倚评估,探讨不同分析方法检测结果是否具有可比性及偏倚是否在允许范围内.方法 以可溯源的罗氏电化学发光法检测结果为比较方法,以时间分辨法检测结果为实验方法.结果 经F检验,两种仪器检测甲胎蛋白与癌胚抗原的差异无统计学意...     

Evaluation of the modified carbapenem inactivation method for the detection of carbapenemase-producing Enterobacteriaceae

Carbapenemase-producing Enterobacteriaceae (CPE) are increasing worldwide. Rapid and accurate detection of CPE is necessary for appropriate antimicrobial treatment and hospital infection control. However, CPE contains some strains that are difficult to detect depending on genotype and MIC value of carbapenem, and a detection method has not been established. The recently reported modified carbapenem inactivation method (mCIM) has been developed in CLSI M100-S27 as a phenotypic technique for detecting carbapenemase activity. In the present study, we examined mCIM as a new CPE detection method using 207 Enterobacteriaceae isolates in comparison with the three existing screening methods of modified Hodge test, Carba NP test and carbapenem inactivation method and evaluated its performance. Consequently, both the sensitivity and specificity of mCIM were 100%, indicating better results than the conventional screening methods. The mCIM is a useful tool for microbiology laboratories due to its simplicity, clear criteria, cost-effectiveness and availability at any laboratory.     

血清TSA和CEA联合检测对2型糖尿病合并结直肠癌的诊断价值

目的探讨血清总唾液酸(TSA)和癌胚抗原(CEA)联合检测对2糖尿病合并结直肠癌患者的诊断价值。方法选取结直肠癌合并2型糖尿病患者60例(A组),单纯结直肠癌患者55例(B组),同期的健康者60例(C组),采用化学发光法检测各组血清TSA和CEA水平;对手术切除治疗的患者进行随访半年,检测血清TSA和CEA水平。结果与B组(34.55%)和C组(1.67%)相比较,A组TSA和CEA联合检测敏感率最高(78.33%),差异具有统计学意义(P0.05);且A组患者血清TSA[(791.26±135.90)mg/L]及CEA[(48.45±2.67)ng/mL]水平高于B组和C组,差异有统计学意义(P0.01);A组和B组血清TSA和CEA水平均较手术前降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论联合检测血清TSA和CEA水平,能为2型糖尿病合并结直肠癌的诊断、预后、复发提供更早、更灵敏的检测指标。